表达人γ-干扰素的重组腺病毒的制备及检测

Ｅ１区缺失的腺病毒载体插入人γ－干扰素ｃＤＮＡ序列,与ｐＪＭ１７质粒通过磷权钙沉淀法共转染２９３细胞,经同源重组,共获得６个病毒噬斑,经ＰＣＲ共扩增检测证实这６个噬斑均为带有人γ－干扰素ｃＤＮＡ的重组腺病毒,受其感染的２９３细胞的上清中,都能测到γ－干扰素的活性,且社种活性可被一定稀释度的兔抗人γ－干扰素多克隆抗体所中和,其中的１号重组病毒纯化后,按不同的ＭＯＩ（Ｍｕｌｔｉｐｌｅｏｆｉｎｆｅｃｉｏ     

第九次全国干扰素及有关细胞因子学术会议简介

第九次全国干扰素及有关细胞因子学术会议简介ＡＢｒｉｅｆＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎｔｏｔｈｅＮｉｎｔｈＮａｔｉｏｎａｌＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅｏｆＩｎｔｅｒｆｅｒｏｎａｎｄＡｓｓｏｃｉａｔｅｄＣｙｔｏｋｉｎｅｓ由中国微生物学会干扰素专业委...     

对维生素C的新认识

维生素Ｃ（Ｖｃ）是一种广泛使用的药物。它具有氧化还原性质。它既可损伤肿瘤细胞ＤＮＡ起到抑癌作用,又可损伤正常细胞ＤＮＡ而致癌。Ｖｃ可激活Ｔ细胞,增加干扰素产量,限制肿瘤发展。Ｖｃ还具有在肿瘤坏死因子存在下损伤甚至杀死ＨＩＶ－１的作用。研究表明Ｖｃ是一种极其复杂的多功能物质。     

小鼠白细胞介素12双顺反子真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

克隆小鼠白细胞介素１２（ＩＬ－１２）ｐ４０及ｐ３５ｃＤＮＡ,并构建同时含ｍＩＬ－１２ｐ４０和ｐ３５ｃＤＮＡ的双顺反子真核表达载体及其在哺乳动物细胞中的表达．白细胞介素１２是由巨噬细胞,树突状细胞等抗原提呈细胞产生的一种异二聚体细胞因子,对机体的细胞免疫功能起着重要的调节作用．利用脂多糖（１００ｐｇ／ｍｌ）和小鼠重组干扰素（ＩＦＮ－γ５００Ｕ／ｍｌ）体外联合刺激小鼠腹腔巨噬细胞,从中提取总ＲＮＡ,经ＲＴ－ＰＣＲ扩增出含信号肽的小鼠白细胞介素１２（ｍＩＬ－１２）ｐ４０及ｐ３５全长ｃＤ－ＮＡ．ＰＣＲ产物经酶切后,分别克隆至ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ载体中,序列测定结果与文献报道序列一致．然后利用脊髓灰质炎（Ｐｏｌｉｏ）病毒内核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）连接ｍＩＬ－１２ｐ４０及ｐ３５ｃＤＮＡ,亚克隆至ｐｃＤＮＡ３载体中,构建成含ｍＩＬ－１２ｐ４０及ｐ３５ｃＤＮＡ双顺反子真核表达载体,即ｐｃＤＮＡ３／ｍＩＬ－１２,ｐ４０及ｐ３５ｃＤＮＡ同时受ｐｃＤＮＡ３中ｈＣＭＶ启动子驱动,将ｐ４０及ｐ３５转录至同一ｍＲ－ＮＡ上．通过ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ将ｐｃＤＮＡ３／ｍＩＬ－１２转染ＣＯＳ－７细胞,７２ｈ收集培养上清,测定ｍ     

人铜锌超氧化物歧化酶的大规模生产工艺

本文以干扰素生产中废弃的人红细胞为原料,采用乙醇－氯份沉淀→磷酸氢二钾盐析→丙酮沉淀手续和ＤＥＡＥ—５２层析步骤,进行了人铜锌超氧化物歧化酶（ＣｕＺｎ－ＳＯＤ）大规模生产工艺的实验研究。结果表明,生产的酶制剂中含量为９０．６％,比活性在２０００ＭｃＣｏｒｄ—Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ单位／ｍｇ蛋白以上,无菌、无热原质、安全性等项指标符合国家卫生部对血液制品的要求。     

β—干扰及其临床应用

本文较全面地综述了β－干扰素国内外的研究现状和临床应用情况。首先介绍了β－干扰纱的来源、理化性质、基因定位、分子结构以及β－干扰素的受体,重点总结了β－干扰素生物学作用及当今国际市场上三种β－干扰素的研发思路和市场情况,同时介绍了几家制造厂家的产品在临床上的应用情况,由此可以看出,β－干扰素是近来开发的广泛用于病毒性感染、恶性肿瘤、多发性硬化症以及神经系统疾病的新型治疗药物。     

干扰素-α和-γ对灌流假孕大鼠卵巢黄体的作用

利用假孕大鼠卵巢体外灌流方法研究干扰素－α和－γ对黄体分泌孕酮和前列腺素Ｆ－２α的作用,并测定灌流后卵巢中３β－羟甾脱氢酶和２０α－羟甾脱氢酶的活性。观察灌流假孕第８天大鼠卵巢结果表明,三种不同剂量（５０、１００、１０００ｕ／ｍｌ）的干扰素－α和－γ均能抑制孕酮的分泌,但干扰素－α的抑制作用仅在短时间内发生,干扰－α和－γ均有抑制ｈＣＧ诱导孕酮分泌的作用,但有剂量和作用时间差异。两种不同类型的干扰素对卵巢分泌前列腺素Ｆ２α无显著作用。干扰－α对灌流８小时后卵巢中３β－羟甾脱氢酶的活性无显著作用,但是干扰素－γ显著抑制３β－羟甾脱氢酶的活性,两种类型的干扰素对２０α－羟甾脱氢酶的活性无显著作用。实验结果提示：两种类型的干扰素都能降低灌流假孕大鼠卵巢黄体孕酮的水平,但是呈现不同的抑制机制。     

肿瘤坏死因子－α（TNF－α）对常见呼吸道病毒的抑制作用

用人重组肿瘤坏死因子－α（Ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α,ＴＮＦ－α）和人天然α干扰素（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－α－,ＩＦＮ－α）在人胚胎肺纤维母细胞（ＨＥＦ）和Ｈｅｐ－２细胞系上对常见呼吸道病毒所致细胞病变抑制进行比较观察。病毒包括不同型别的腺病毒５株,单疱病毒Ⅰ型（ＨＳＶ－Ｉ）１株,鼻病毒１株,仙台病毒１株,ＶＳＶ１株。结果提示ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－α均具有广谱抗病毒活性。ＴＮＦ－α的抑毒作用能被ＴＮＦ－α申抗和ＩＦＮ－β单抗完全去除,被ＩＦＮ－α单抗部分去除ＴＮＦ－α的抗病毒效应。ＴＮＦ－－α中和试验的结果提示：ＴＮＦ抗病毒活性仍为ＩＦＮ－β诱生所介导。     

干扰素—α和—γ对灌流假孕大鼠卵巢黄体的作用

利用假孕大鼠卵巢体外灌流方法研究了干扰素－α和－γ对黄体分泌孕酮和前列腺素Ｆ－２α作用,并测定灌流后卵巢中３β－羟甾脱氢酶和２０α－羟甾脱氢酶的活性。观察灌汉假孕第８天大鼠卵巢结果表明,三种不同剂量的干扰素α－和－γ均能抑制孕酮的分泌,但干扰素－α的抑制作用仅在短时间内发生,干扰素－α和－γ均有抑制ｈＣＧ诱导孕酮分泌的作用,但剂量和作用时间差异。     

国际干扰素及其他细胞素研究协会1994年年会简介

国际干扰素及其他细胞素研究协会１９９４年年会简介侯云德（中国预防医学科学院病毒学研究所,北京１０００５２）国际干扰素及其他细胞素研究协会（ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＳｏｃｉｅｔｙｆｏｒＩｎｔｅｒｆｅｒｏｎａｎｄＣｙｔｏｋｉｎｅＲｅｓｅａｒｃｈ─ＩＢＩ...     

a——干扰素治疗慢性病毒性肝炎的现状和展望

长期以来ａ－干扰素治疗慢性乙型和丙型病毒型肝炎是有效的，临床治疗中已得到承认。但大剂量发现副作用明显，口含天然人ａ－干扰素无副作用，如果能替代ａ－干扰素并联合其它药物治疗，对病毒性疾病和恶性肿瘤将提供新的治疗方法。     

干扰素及其基因工程

1　概述Ｚｓｓａｃｓ和Ｌｉｎｄｅｎｍａｎｎ于 185 7年首先发现受到病毒感染的细胞能产生一种物质 ,可以保护其它细胞抗御多种病毒的感染 ,并命名为干扰素。现定义为 :由干扰素诱导剂作用于活细胞后 ,由活细胞产生的一种蛋白质 ,当它再作用于其他细胞时 ,使其它细胞立即获得抗病毒和抗肿瘤等多方面的免疫力。病毒、细菌、立克次图 1　干扰素的作用机制氏体、真菌以及原虫等都能诱导细胞产生干扰素。细菌的内毒素、外毒素、放线菌素Ｄ(ａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎＤ)等也能诱导产生干扰素。人工合成的物质如聚次黄嘌呤核苷酸 (聚肌苷酸 ) :聚胞…     

α-干扰素治疗慢性病毒性肝炎的现状和展望

长期以来α－干扰素治疗慢性乙型和丙型病毒型肝炎是有效的,临床治疗中已得到承认。但大剂量发现副作用明显,口含天然人α－干扰素无副作用,如果能替代α－干扰素并联合其它药物治疗,对病毒性疾病和恶性肿瘤将提供新的治疗方法．     

c—fos,c—myb和c—erbB—2与大鼠卵巢颗粒细胞生孕酮调？…

目的和方法：用离体细胞体外孵育法,观察肥义ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｂ和ｃ－ｅｒｂＢ－２寡脱氧核苷酸（ｃ－ｆｏｓ ＯＤＮ、ｃ－ｍｙｂ ＯＤＮ和ｃ－ｅｒｂＢ－２ ＯＤＮ）对ｈＣＧ诱导大鼠颗粒细胞孕酮产生的影响。同时观察内皮素－１、γ－氨基丁酸和钙离子通道阻断剂维拉帕米对细胞中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｂ和ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白的影响。结果：反义ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｂ和ｃ－ｅｒｂＢ－２ ＯＤＮ均明显抑制ｈＣＧ诱导颗     

cIts857基因的克隆,修饰及温敏诱导表达载体

从噬菌体λＤＮＡ克隆出９９０ｂｐ的ｃＩｔｓ８５７基因,经缺失,点突变等修饰改造和ＤＮＡ序列测定,获得了带有自身启动子区的修饰型ｃＩｔｓ８５７基因（７７０ｂｐ）。进而利用它大肠杆菌表达载体ｐＢＬＭＶＬ２和一套含３种不同阅读框架Ｉｉｎｋｅｒ区的表达载体ｐＢＬＭＦＶ４、５Ｂ、６。上述表达载体,用于表达人工合成的牛生长激素、人干扰素－γ△Ｃ－１３和酵母ｐｈｏ８５等外源基因,都观察到这些基因产物的温敏表达。     

王不留行环肽研究

从中药王不留行（Ｖａｃａｒｉａｓｅｇｅｔａｌｉｓ）种子中分离并鉴定了４个环肽化合物,分别命名为王不留行环肽Ａ,Ｂ,Ｃ,Ｄ（ｖａｃｃａｒｉｎｓＡ,Ｂ,Ｃ,Ｄ）,其中王不留行环肽Ａ为新环肽化合物。其结构通过光谱和化学方法分别确定为：ｖａｃｃａｒｉｎＡ——ｃｙｃｌｏ－（Ｔｒｐ－Ａｌａ１－Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ａｌａ２）,ｖａｃｃａｒｉｎＢ———ｃｙｃｌｏ－（Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｓｅｒ－Ｐｈｅ１－Ａｌａ－Ｐｈｅ２）,ｖａｃｃａｒｉｎＣ———ｃｙｃｌｏ－（Ｐｒｏ１－Ｇｌｙ－Ｔｙｒ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ２－Ｌｅｕ－Ｔｒｐ）,ｖａｃａｒｉｎＤ———ｃｙｃｌｏ－（Ｐｒｏ－Ｖａｌ１－Ｔｒｐ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｖａｌ２）．     

豚鼠气道及肺组织原癌基因表达与哮喘的相关研究

目的：为研究原癌基因在哮喘发病中的作用。方法：以卵白蛋白致敏豚鼠建立哮喘模型,用Ｄｏｔ－ｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ－ｂｌｏｔ分子杂交及免疫组化技术,分别观察正常及哮喘发作后豚鼠气道上皮及肺组织中原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ的表达水平。结果：正常豚鼠气道及肺组织中ｃ－ｆｏｓ及ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ无或很少表达,哮喘发作后豚鼠气道上皮及肺组织中ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达明显增强,３０ｍｉｎ达高峰,发作后４ｈ降至正常水平。地塞米松对ｃ－ｆｏｓ及ｃ－ｍｙｃｍＲ－ＮＡ有部分抑制作用。结论：原癌基因ｃ－ｆｏｓ及ｃ－ｍｙｃ在哮喘发病过程中可能起一定作用。     

云南锡叶藤属一新种

勐腊锡叶藤　新种　图１ＴｅｔｒａｃｅｒａｘｕｉＨ－ＺｈｕｅｔＨ－Ｗａｎｇ,ｓｐ－ｎｏｖ－ｐｌ－ＡｆｆｉｎｉｓＴ－ｓｃａｎｄｅｎｔｉ（Ｌｉｎｎ－）Ｍｅｒｒ－ｓｅｄｉｎｆｌｏｒｅｓｃｅｎｔｉｉｓｍｉｎｏｒｉｂｕｓ,ｐａｕｃｉｆｌｏｒｉｓ,ｓｅｐａｌｉｓｍａｊｏｒｉｂｕｓ１－５ｃｍｌｏｎｇｉｓｉｎｓｔａｔｕｆｒｕｃｔｕｅｘｔｕｓｄｅｎｓｅｖｉｌｌｏｓｉｓ,ｓｔａｍｉｎｉｂｕｓ１ｃｍｌｏｎｇｉｓ,ｃａｐｓｕｌｉｓｍａｊｏｒｉｂｕｓｈｉｒｓｕｔｉｓ,１－５～２ｃｍｌｏｎｇｉｓ,１－２～１－５ｃｍｌａｔｉ…     

云衫针层孔菌化学成分的研究

从云衫针层孔菌Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ ｙａｍａｎｏｉ（Ｔａｍｚ．）ｓｈａｗ分离得到１２个化合物,借助光谱分析鉴定为：８,１１,１３－ａｂｉｅｔａｄｉｅｎ－１８－ｏｉｃ ａｃｉｄ（１）,１,２－ｂｅｎｚｅｎｅｄｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄｂｉｓ（２－ｅｔｈｙｌ－ｈｅｘｙｌ）ｅｓｔｅｒ（２）,ｅｒｇｏｓｔｅｒｏｌ ｐｅｒｏｘｉｄｅ（３）,ｅｒｇｏｓｔａ ７,２２（Ｅ）－ｉｄｅｎ－３－ｏｌ（４）,ｅｒｇｏｓｔａ ７,２２（Ｚ）－ｄｉｅｎ－３－ｏｌ（５）,ｏｃｔａｄｅｃａｎｏｉｃ ａｃｉｄ－１,３－ｐｒｏｐａｎｅｄｉｙｌ ｅｓｔｅｒ（６）,ｏｃｔａｄｅｃａｎｏｉｃ ａｃｉｄ（７）,８（１９）,１４－ｌａｂｄａｄｉｅｎ－１３－ｏｌ（８）,ｅｒｇｏｓｔａ－４,６,８（１４）,２２－ｔｅｔｒａｅｎ－３－ｏｎｅ（９）,化合     

非致病微生物在植物—病原菌协同进化中的作用

非致病微生物在植物－病原菌协同进化中的作用单卫星（西北农业大学植保系,陕西杨陵７１２１００）ＴｈｅＲｏｌｅｏｆＮｏｎ－ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃＭｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓｉｎＰｌａｎｔ－ｐａｔｈｏｇｅｎＣｏｅｖｏｌｕｔｉｏｎ￥ＳｈａｎＷｅｉｘｉｎｇ（Ｄｅｐａｒｔ－ｍｅｎｔｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ,ＮｏｒｔｈｗｅｓｔｅｒｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ,Ｙａｎｇｌｉｎｇ,Ｓｈａａｎｘｉ７１２１００）．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｃｏｌｏｇｙ,１９９３,１２（６）,５４－５９．Ｉｎｖｉｅｗｏｆｐｒｅｓｅｎｔｐｒｏｂｌｅｍｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｐｌａｎｔｄｉｓｅａｓｅｃｏｎｔｒｏｌ,ｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｒｅｃｅｎｔａｄｖａｎｃｅｓｉｎｂｉｏｌｏｇ－ｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌｏｆｐｌａｎｔｄｉｓｅａｓｅｓａｎｄｐｌａｎｔ－ｐａｔｈｏｇｅｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ,ｔｈｅａｕｔｈｏｒｐｏｉｎｔｅｄｏｕｔｔｈｅｉｍｐｏｒｔａｎｃｅｏｆｎｏｎ－ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓｉｎｈａｂｉｔｉｎｇｐｌａｎｔｓｕｒｆａｃｅｓｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｌａｎｔ－ｐａｔｈｏｇｅ