系统性红斑狼疮并发隐球菌性脑膜炎:1例报告并文献复习

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)合并隐球菌性脑膜炎的诊断及鉴别诊断。方法对1例SLE并发隐球菌性脑膜炎患者的临床及实验室检查特点进行分析,并结合文献复习进行讨论。结果患者出现中枢感染前长期使用泼尼松治疗,曾误诊为狼疮脑病应用激素冲击治疗无效;治疗过程中出现狼疮活动,激素加量后症状缓解。结论 SLE并发隐球菌性脑膜炎患者的临床表现缺乏特异性,感染相关症状与SLE表现部分重叠,腰穿脑脊液墨汁染色找隐球菌和隐球菌抗原乳胶凝集试验是诊断的主要手段。及时诊断和有效抗真菌治疗可改善患者的预后。     

系统性红斑狼疮动物模型研究进展

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种慢性多系统复发性自身免疫性疾病,严重危害人类健康。狼疮动物模型对于研究SLE的病因、发病机制和治疗具有重要意义。本文对各种狼疮动物模型进行评述和比较,以期探讨各种模型的优缺点,为研究者在寻找特定的致病机制、开发针对性的干预措施以及更具潜力的治疗药物过程中选择合适的模型提供参考。     

儿童系统性红斑狼疮合并感染86例的临床分析

目的:探讨感染对儿童初发系统性红斑狼疮病情活动度的影响。方法:通过回顾性研究收集儿童系统性红斑狼疮病例86例,通过整理病史、体格检查及统计实验室检查结果等方法统计相关临床及实验室资料。根据以上资料分为感染组和对照组,通过比较分析两组资料探讨感染对初发儿童SLE病情活动度的影响情况。结果:1)SLE患儿感染发生率为52.3%,感染部位以呼吸道多见,占40%,其次为消化道和泌尿道,病原体以细菌多见,占62.2%,其次为支原体、病毒;2)感染组的ds-DNA、CD3~+CD8~+(Ts)细胞、CD3~-CD19~+(B)细胞、SLEDAI评分均明显高于对照组(P0.05);感染组补体数量明显低于对照组(P0.05),感染组抗感染治疗后,ds-DNA、CD3~+CD8~+(Ts)细胞、SLEDAI评分较治疗前明显下降(P0.05),而补体数量及CD3~-CD16~+CD56~+(%)细胞较治疗前明显上升(P0.05)。结论:儿童SLE患者较易合并感染,发病初期及合并感染会加重儿童系统性红斑狼疮的病情,及时有效控制感染有助于改善儿童SLE患者的病情。     

系统性红斑狼疮患者血清中CD83与自身抗体的表达及其相互关系

目的：检测系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者血清中CD83（soluble CD 83,sCD 83）和多种自身抗体的表达水平,并探讨其相互关系。方法：ELISA检测患者可溶性CD 83和AnuA的表达,应用间接免疫荧光的方法检测抗cmDNA抗体,应用乳凝法检测血清中的DNP,采用胶体金标记和快速膜渗滤技术测定血清中的抗dsDNA抗体。结果：对照组患者血清中可溶性CD 83的表达为（0.26±0.10）ng/ml,实验组患者血清中可溶性CD 83的表达为（5.56±0.72）ng/ml。与对照组相比,实验组患者血清中可溶性CD 83的平均浓度明显升高。在抗dsDNA抗体阴性的51例系统性红斑狼疮患者中AnuA的阳性率明显高于抗DNP抗体和抗cmDNA抗体,同样在抗DNP抗体阴性的58例系统性红斑狼疮患者中AnuA的阳性率明显高于dsDNA抗体和抗cmDNA抗体。系统性红斑狼疮患者中可溶性CD83的水平（〈2.68 ng/ml）与各种自身抗体（抗dsDNA抗体、AnuA、抗DNP抗体和抗cmDNA抗体）水平的相关系数分别为（r=0.542,0.613,0.489和0.367）。具有高水平可溶性CD83的系统性红斑狼疮患者（≥2.68 ng/ml）,与各种自身抗体（抗dsDNA抗体,AnuA,抗DNP抗体和抗cmDNA抗体）水平的相关系数分别为（r=0.711,P〈0.05）、（r=0.845,P〈0.01）、（r=0.862,P〈0.01）和（r=0.724,P〈0.051）。结论：可溶性CD83通过活化DC细胞并激活补体系统,参与系统性红斑狼疮的发生发展,联合可溶性CD83和多种自身抗体的检测,能更明确系统性红斑狼疮患者病情的严重程度,有利于SLE的诊断和治疗。     

类风湿性关节炎与系统性红斑狼疮重叠综合征一例报告及文献复习

目的:探讨类风湿关节炎(RA)与系统性红斑狼疮(SLE)重叠综合征(Rhupus综合征)的临床表现及治疗方法,以期提高对本病的认识。方法:对1例类风湿关节炎(RA)与系统性红斑狼疮(SLE)重叠的Rhupus综合征患者的病例资料进行分析。结果:本例患者为中年女性,以RA为首发表现,8年后出现SLE特征性表现。就诊时关节症状较严重,出现多关节变形。本例患者肾脏损害重,糖皮质激素联合甲氨喋呤治疗有效。结论:Rhupus综合征在临床上罕见,加强特异性抗体检查,可减少误诊漏诊,早期正确诊断,积极治疗,对于改善患者预后具有重要意义。     

空肠弯曲杆菌与弗氏完全佐剂诱导系统性红斑狼疮样小鼠模型的建立

目的建立系统性红斑狼疮小鼠模型。方法利用空肠弯曲杆菌（CJ-朝1株）弗氏完全佐剂建立了系统性红斑狼疮模型（SLE）小鼠模型,并检测了淋巴细胞转化指数、dsDNA、器官组织病理切片、血清TNF-α和MMP-9。结果经过初次免疫和再次免疫后模型小鼠体重明显减轻,状态比较差。淋巴细胞转化指数增加,dsDNA水平明显增高,器官组织病理有炎症改变,血清TNF-α和MMP-9的水平明显增高。结论该模型具有系统性红斑狼疮的某些症状,为SLE的研究提供了的实验资料。     

系统性红斑狼疮患者的低密度粒细胞

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者的外周血单核细胞制备物中存在低密度粒细胞(low density granulocyte,LDG)。LDG的核为不成熟状态,根据表面标记物CD15、CD14和CD10能区分单核细胞和LDG。LDG与正常密度粒细胞的表面标记物无明显差异,但其表达水平不同。SLE LDG有许多基因组改变,包括拷贝数变化、杂合性损失和微卫星不稳定。LDG分泌高水平促炎因子和I型干扰素,具有促炎性和内皮细胞毒性,阐明LDG的致病性可为自身免疫性疾病和内皮损伤性疾病设计新的治疗策略。     

CD154在活动期SLE的改变

目的探讨CD154在系统性红斑狼疮(SLE)中的异常表达及其在狼疮发病中的作用机制。方法31例活动期SLE及20例正常健康人,分离外周血CD19阳性B细胞,以流式细胞仪荧光抗体标记检测其CD154的表达,并体外观察抗CD154抗体对外周血B细胞的增生及IgG分泌的影响。结果(1)活动期SLE外周血B淋巴细胞中CD154阳性率(35±14)%及表达强度(312±108)均显著高于正常健康人,后者分别为(9±7)%、(98±41)(P均<0.001);(2)体外单独培养,活动期SLE外周血B淋巴细胞自身即可异常增生并分泌IgG,[3H]-TdR掺入及体外培养上清液IgG浓度与正常人相比,差异有显著性(P值分别<0.0001和0.001)。抗CD154抗体可显著抑制活动期SLE外周血B淋巴细胞的异常增生及IgG的异常分泌,[3H]-TdR掺入及体外培养上清液IgG浓度与对照抗体组相比,差异有显著性(P值分别为0.01和0.05)。结论CD154在活动期SLE的B淋巴细胞中有异常表达,其异常调控可能是导致分泌自身抗体B细胞克隆增生的主要原因。     

脐带间充质干细胞移植治疗50例缺血性下肢血管病的临床研究

目的:观察脐带间充质干细胞移植治疗缺血性下肢血管病的临床疗效并观察近期临床效果.方法:50例自愿接收脐带间充质干细胞移植患者中糖尿病足35例,动脉硬化闭塞症10例,血栓性闭塞性脉管炎5例.全部患者均给予静脉输注及局部种植脐带间充质干细胞.术后第7天至6个月定期观察各项指标的变化.结果:治疗1月后,47例(94％)疼痛有不同程度的缓解,46例(92％)患肢冷感明显缓解,45例(90％)患者行走距离延长.6月后30例糖尿病足患者溃疡或足部坏疽痊愈.结论:脐带间充质干细胞移植治疗缺血性下肢血管病是一种简便、安全、有效的治疗方法,其治疗的近期疗效显著,使很多患者免除截肢或降低截肢平面,明显改善患者生活质量.     

茂丹通脉片含药血清体外诱导 S 分M化C为 内皮细胞的作用

目的：观察芪丹通脉片含药血清体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）向内皮细胞分化的作用。方法：灌胃法制备芪丹通脉片含药血清和对照血清。采用密度梯度离心法分离和培养大鼠MSCs,取第三代MSCs,采用10wg／LVEGF预诱导24h后,分别加入15％芪丹通脉片含药血清与对照血清体外时MSCs诱导分化,至第7天,利用相差显微镜观察细胞形态改变,透射电镜观察细胞超微结构。免疫荧光方法检测内皮细胞特异性表面标志CD31、Ⅷ因子的表达。结果：至第7天,合15％芪丹通脉片合药血清组诱导后的MSCs形态发生明显改变,呈“卵石样”改变,透射电镜下细胞胞浆内可见Weible-Palade小体,共聚焦显微镜下可见CD31、Ⅷ因子阳性细胞。对照血清组MSCs形态仍呈长梭型,电镜下胞浆内无Weible-Palade小体,共聚焦显微镜下无CD31、Ⅷ因子阳性细胞。结论：益气活血复方芪丹通脉片含药血清具有体外诱导大鼠MSCs向内皮细胞定向分化的作用。     

慢病毒介导IL2基因感染MSCs对胰腺癌PANC-1治疗效应

为了评价慢病毒介导IL2基因感染间充质干细胞(MSCs)对胰腺癌PANC-1增殖和迁移体外模型中的效应,本研究在体外分离、培养和鉴定了MSCs后,采用Gateway技术构建IL-2表达载体,采用HEK293细胞产生慢病毒颗粒,感染细胞后采用免疫印迹法进行鉴定。通过Transwll小室实验,采用IL-2/MSCs进行处理后,观察肿瘤的凋亡情况。此外,本研究还采用Caspase抑制剂及IL-2单抗对IL2/MSC促肿瘤凋亡的机制进行明确。研究结果表明,成功分离的间充质干细胞,经流式鉴定后为CD34、CD45不表达,CD29、CD44和CD90高表达。体外实验的结果显示IL-2/MSCs能够显著增加肿瘤的凋亡。IL-2/MSCs能够通过活化Casapase相关的信号发挥抗凋亡效应。研究结论初步表明,IL-2/MSC具有一定的胰腺癌治疗效应,其主要是通过活化Caspase来发挥对肿瘤的杀伤作用。     

系统性红斑狼疮合并消化道损害32例临床分析

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）合并消化道损害者的临床特点。方法：回顾性分析32例SLE合并消化道损害的患者,收集整理其临床资料,分析其临床特点。结果：食道受累者7例（21．9％）,胃肠道受累者25例（78．1％）其中假性肠梗阻10例（31．2％）,且以肠梗阻为首发症状的2例均误诊为急腹症收住外科,肾脏受累14例（43．8％）。治疗后,24例好转。4例死亡。结论：以消化道症状为首发表现的SLE极易误诊,特别是以吞咽障碍,肠梗阻为首发症状者最易误诊。对有消化道受损表现同时伴有其它脏器受损者应排除有无SLE可能。SLE消化道损害发生率高,对此应提高认识和警惕。     

环孢素A治疗系统性红斑狼疮并血小板减少临床分析

入住我院2006年8月至2009年1月确诊为系统性红斑狼疮(SLE)的10例患者,均伴有血小板(PLT)明显减少,维持在(20~50)×109/L至少3月以上。给予泼尼松0.5 mg/(kg.d)及环孢素A150 mg/d治疗,3个月后100 mg/d疗程半年,观察患者临床表现,每个月检测SLE疾病活动指数(SLEDAI)、抗ds-DNA、尿蛋白、补体C3、红细胞沉降率(血沉)、C-反应蛋白(CRP)、肝功能、肾功能、血常规等,比较患者治疗前后各项指标的变化。结果显示治疗半年后患者血小板明显升高(P0.05),抗ds-DNA转阴、补体C3上升,红细胞沉降率(血沉)、C-反应蛋白较治疗前明显下降(P0.05)。提示泼尼松联合环孢素A治疗SLE合并顽固性血小板减少的疗效明显,副作用小。     

脐带间充质干细胞联合UM171对脐血源CD34~+细胞的扩增效果研究

目的研究脐带间充质干细胞联合UM171对脐血来源CD34~+细胞的扩增效果。方法脐血来源CD34~+细胞及脐带来源间充质干细胞分为以下4组进行体外扩增培养10 d:对照组、UM171培养组、间充质干细胞共培养组、UM171联合间充质干细胞共培养组,采用方差分析比较不同组别间细胞扩增倍数及流式表型和集落培养情况。结果脐带间充质干细胞CD105,CD73,CD90,不表达CD14,CD34,CD19,CD45,HLA-DR,经过诱导可以向成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞分化。CD34~+细胞在不同条件下体外培养10 d后,UM171培养组总有核细胞数扩增14倍,CD34~+细胞扩增13.5倍;MSCs共培养组总有核细胞数扩增11倍,CD34~+细胞扩增10倍;联合培养组总有核细胞数扩增达22倍,CD34~+细胞扩增21倍。联合培养组扩增后细胞CD34~+CD38~-比例达(91.49±2.67)﹪,较间充质干细胞培养组(78.11±2.35)﹪及UM171培养组(91.49±2.68)﹪相比差异具有统计学意义(P均0.01)。扩增后细胞集落培养14 d后,各系集落形成良好,UM171扩增组细胞较MSCs扩增组在红系及粒系形成能力方面存在优势。结论脐带血间充质干细胞作为细胞滋养层可提高CD34~+细胞体外扩增效果,UM171在扩增过程中可较好的保持细胞干性,二者联合应用扩增效果最佳,建立的脐带间充质干细胞联合UM171对脐血源CD34~+细胞的扩增方法可用于CD34~+细胞体外扩增培养。     

微小RNA与狼疮性肾炎相关性研究进展

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)是一种由异常免疫反应引起的自身免疫性综合征,肾脏受累时称为狼疮性肾炎。狼疮性肾炎(lupus nephritis, LN)是SLE最严重的并发症,可显著增加死亡率,因此寻找新的诊断方法和治疗靶点至关重要。微小RNA(microRNA, miRNA)是一种非编码RNA,广泛参与不同的生物学和病理学过程,如细胞增殖和凋亡、生长发育、信号传导等。近年来研究发现,狼疮肾炎患者的血液、尿液中存在多种显著变化的miRNA,可调控肾系膜细胞增殖凋亡以及炎性因子,对狼疮肾炎的疾病进展产生重要影响。本文就miRNA在狼疮性肾炎早期诊断及预后判断中的价值进行综述,并展望其未来作为治疗靶点应用于临床的前景。     

系统性红斑狼疮伴发急腹症的诊治思考 一附18 例临床分析

目的：提高对系统性红疯狼疮（SLE）伴发急腹症临床表现的认识,总结诊断和治疗此类病例的经验。方法：对18例SLE伴发急腹症的病例进行回顾性分析。结果：SLE并发急腹症临床表现多样化,可以表现为消化道出血,肠梗阻。肠穿孔,急性胃肠炎,急性胰腺炎,急性腹膜炎等。治疗后16例病情得到控制,2例死亡。结论：SLE伴发急腹症预示病情危重,对此应提高认识,尽早诊断;应用大剂量肾上腺皮质激素和免疫抑制剂有良好的疗效。     

小鼠间充质干细胞诱导分化成脂肪细胞miRNA表达的变化

目的：探讨小鼠间充质干细胞（MSCs）定向诱导分化成脂肪细胞微小RNA（miRNA）表达的变化,为进一步研究miRNA调控MSCs向脂肪细胞分化的分子机制奠定基础。方法：采用全骨髓体外分离结合差速贴壁法纯化扩增C57BL／6小鼠MSCs,形态学观察细胞生长情况,并用免疫组化方法鉴定细胞表面抗原CD29、CIM4和CD34的表达。脂肪细胞分化诱导剂诱导MSCs分化为脂肪细胞,利用油红O染色,判断MSCs成脂分化情况。运用rrfiRNA芯片技术检测MSC8和脂肪细胞中差异表达的miRNA。结果：①倒置显微镜下观察,传5代后可获得均一性较高的MSCs;免疫组化显示90％以上的骨髓间质干细胞CD29、CD44阳性,CD34阴性。MSCs经脂肪诱导剂诱导后,胞内大量脂滴形成,油红O染色阳性;②基因微阵列分析表明,小鼠MSCs分化成脂肪细胞差异表达的miRNA共75个,其中20个表达上调、55个表达下调。结论：MSCs分化成脂肪细胞存在miRNA表达的变化,某些miRNA很可能具有重要的调控MSCs成脂分化的作用。     

ANCA与SLE临床表现的相关性及其意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)患者抗中性粒细胞胞浆抗体(Anti-neutrophil Cytoplasmic Antibodies,ANCA)与肾炎及其他临床表现和实验室检查的相关性及其意义.方法:采用前瞻性研究收集77例系统性红斑狼疮患者,用间接免疫荧光法(IIF)检测患者血清ANCA、ELISA法检测ANCA抗原,检测其他免疫学指标如抗核抗体、抗dsDNA抗体等.结果:77例SLE患者中ANCA阳性28(36.4%)例,ANCA阳性组浆膜炎、肾损害、神经精神症状、皮肤血管炎、抗dsDNA抗体阳性、抗Sm抗体阳性、补体下降以及血清IgG升高的发生率明显高于阴性组(P＜0.05).52例LN患者中,25例(48.1%)ANCA阳性,其中P-ANCA阳性者22例(88%).3例(12%)为a-ANCA均出现在RPGN,无一例出现c-ANCA.非LN组25例患者中,仅3例(12%)p-ANCA阳性,且均为抗-MPO.正常对照组无一例ANCA阳性.77例SLE患者中,14例(18.2%)为抗-MPO;13例(16.9%)为抗LF,且只见于DPGN、FPGN和RPGN伴有新月体形成者;10例(13%)为抗-CG,但在非狼疮肾炎患者未检测到抗-LF及抗-CG.在各种临床表现中,抗-MPO与肾脏和皮肤表现有关;而抗-LF与肾脏、关节炎及浆膜炎有关;抗-CG可见于各种临床表现.结论:ANCA可作为评价SLE疾病及鉴别血管炎和狼疮肾炎的一个重要指标.     

体外传代对版纳微型猪骨髓间充质干细胞绿色荧光蛋白表达的影响

目的通过分离扩增版纳微型猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)观察传代对慢病毒转染的绿色荧光蛋白(GFP)表达的影响。方法采集4月龄版纳微型猪的骨髓,在DMEM/F12培养液中分离间充质干细胞(MSCs),并根据其形态学、抗原标志表达和分化潜能给予鉴定。MSCs与GFP慢病毒载体共培养,荧光显微镜观察GFP的表达,流式细胞仪检测传代后MSCs GFP表达率的变化。标记后传代至1、2、3、4代细胞间比较用非参数检验。结果采用直接培养骨髓,可以分离到高表达CD13、CD29、CD90、CD105的MSCs,并可诱导分化为脂肪、骨和软骨细胞。MSCs与携带GFP的慢病毒载体共培养3天即可观察到GFP的表达,最佳转染复数(MOI)值为50,最佳共培养时间为6 d。传代后MSCs GFP表达率呈下降趋势[1代转染率(42.3±2.25)%、2代转染率(41.6±2.65)%、3代转染率(41.4±3.75)%和4代转染率(38.2±4.75)%],但传至4代GFP表达率的变化差异无统计学意义(P0.05)。结论采用含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养液可以从版纳微型猪骨髓中分离到MSCs,GFP慢病毒转染是标记MSCs的有效方法,连续传代4代不会显著影响GFP的表达。     

间充质干细胞在炎症性疾病治疗中的基础研究和临床应用

间充质干细胞/基质细胞(mesenchymal stem/stromal cells, MSCs),由于其独特的免疫调节能力而备受关注。在治疗克罗恩病、移植物抗宿主病、系统性红斑狼疮以及器官纤维化等炎症性疾病的临床研究和应用中, MSCs均被报道可以抑制炎症,缓解疾病进展,展现出了良好的药用前景。MSCs调控炎症微环境、改善疾病的方式有很多,总体而言,在强烈炎症因子的刺激下, MSCs可以重塑组织微环境,使之向有利于再生和免疫正常化的方向转变。机制上,在炎症因子的刺激下,MSCs通过产生免疫抑制分子、生长因子、趋化因子、补体以及代谢产物等,调控多种免疫细胞的迁移、增殖和活化等生物过程以达到调控炎症微环境的目的。更新的报道甚至提出凋亡的MSCs也能发挥免疫抑制的功能。此外, MSCs的免疫调节能力受炎症因子调控,不是与生俱来又一成不变的,因此,依据微环境中炎症因子的种类、水平, MSCs的免疫调节功能也会发生变化。该文主要总结了近年来人们对MSCs免疫调节机制、MSCs与炎症微环境相互作用的理解以及应用MSCs治疗炎症性疾病的临床现状。