小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化研究

以2个小麦品种成熟胚为外植体进行离体培养,研究了不同预处理、不同2,4-D浓度及与KT组合、不同蔗糖浓度等因素对愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明:4℃低温预处理可提高愈伤组织的出愈率及再生苗率,2个材料的出愈率及再生苗率均达到90%和30%以上;在不同预处理条件下,2,4-D浓度对出愈率及再生苗率的影响与基因型有关,2,4-D浓度为1~2 mg/L更有利于愈伤组织诱导及分化;附加KT能缓解高浓度2,4-D对再生苗率的抑制作用,而对于在1、2 mg/L 2,4-D的培养基中附加KT则不表现这种作用;蔗糖浓度则在30 g/L条件下更有利于愈伤组织诱导。因此通过4℃低温预处理,在MS基本培养基中附加1~2mg/L 2,4-D及30 g/L蔗糖亦可促进小麦成熟胚愈伤组织的诱导和分化。     

中华结缕草(Zoysia sinica Hance)组织培养和再生植株研究

以中华结缕草(Zoysiasinica Hance)成熟种子为外植体在附加2.5mg/L2,4-D、0.25mg/L6-BA和1～2mg/LVB₁的改良MS培养基(MS_m)上愈伤组织的诱导率最高为43.0%。愈伤组织的最佳继代培养基为MSm附加0.1mg/L6-BA和2.0mg/L2,4-D。在无生长调节物质的MS培养基(MS₀)上,外观呈白色到淡黄色、含有密实颗粒的愈伤组织再生率为30%～60%。     

小麦遗传转化受体系统建立的研究

选用‘小偃22’和‘宁春16’小麦品种的成熟胚和幼胚进行培养,研究不同种类的胚和培养因子对愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,幼胚和成熟胚的愈伤组织诱导率无明显差异,但较高浓度的2,4-D有利于成熟胚的诱导,而幼胚培养时2,4-D浓度的影响效果因品种而异;两种外植体分化率的高低与KT/IAA的配比均有密切关系,但高浓度的激素水平不利于成熟胚的分化;诱导培养基中低浓度的2,4-D有利于所诱导的愈伤组织的分化。同时,在诱导培养基中添加低浓度的KT能显著提高两品种成熟胚愈伤组织的分化率;各种培养基处理与品种间都存在显著的互作效应,‘小偃22’成熟胚培养的最佳培养基组合为MSD 3.0 mg/L 2,4-D和MSD 0.5 mg/LIAA 1.0 mg/L KT,幼胚培养为MSD 4.0 mg/L 2,4-D和MSD 0.5 mg/L IAA 1.0 mg/L KT;‘宁春16’成熟胚培养为MSD 4.0 mg/L 2,4-D和MSD 1.0 mg/L IAA 1.0 mg/L KT,幼胚培养时为MSD 1.0 mg/L 2,4-D和MSD 2.0 mg/L IAA 2.0 mg/L KT。     

苦豆子的组织培养及植株再生的研究

用4种诱导培养基P1(MS+2,4-D0.5mg/L)、P2(MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L)、P3(MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L)、P4(MS+NAA1.0mg/L+KT0.5mg/L),3种分化培养基(MS+6-BA1mg/L;MS+6-BA0.5mg/L;MS+6-BA1mg/L+NAA0.2mg/L)和4种生根培养基(MS;MS+IBA1mg/L;MS+IBA1mg/L+IAA0.5mg/L;1/2MS+IAA0.2mg/L)对苦豆子愈伤组织进行诱导和植株再生,研究影响苦豆子组织培养的因素,结果表明愈伤组织的诱导频率主要依靠激素的种类和浓度,培养基中加入0.2～2mg/L的2,4-D有利于苦豆子愈伤组织生长,但使褐化发生时间提前;培养基中加入活性炭对苦豆子愈伤组织褐化有明显的抑制作用;加入IAA对苦豆子根的分化是必需的。     

红叶石楠离体植株再生频率的影响因素研究

以红叶石楠带芽茎段及叶片为外植体,分析激素和培养条件等因子对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,MS+0.10mg/L 2,4-D+0.50mg/L NAA+0.50mg/L 6-BA+0.50mg/L KT为最佳愈伤组织诱导培养基,暗培养的愈伤组织诱导率高于光培养,其愈伤组织诱导率可达100%(带芽茎段)和98%(叶片)。MS+0.50mg/L IBA+2.00mg/L 6-BA+2.00mg/L KT为最佳分化增殖培养基,分化率91%以上,增殖倍数6.8以上,均达到最高。1/2MS+0.50mg/L IBA+0.01mg/L NAA为最佳生根培养基,生根率92%,生根量4.4根/株,均达到最高。     

白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生和萌发

探讨不同因素对白刺花下胚轴、子叶2种外植体胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生和萌发的影响。以B5和MS为基本培养基,研究2,4-D、6-BA和TDZ对白刺花下胚轴和子叶胚性愈伤组织的诱导;在MS培养基上添加不同浓度2,4-D,研究胚性愈伤组织增殖情况;采用ABA,探究对体细胞胚发生的影响。结果表明:下胚轴比子叶更易诱导胚性愈伤组织,筛选出2种外植最佳的胚性愈伤组织诱导培养基均为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L 6-BA,胚性愈伤组织诱导率分别为77.3%和41.0%。15.0 mg/L ABA、0.2 mg/L 2,4-D和2.0 mg/L 6-BA有利于体细胞胚发生,1/3MS+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+2.0 g/L活性炭+25 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基可使体细胞胚萌发率达80%以上,再生植株移栽成活率高达90%。白刺花外植体种类及培养基类型均会影响胚性愈伤组织的诱导,其中下胚轴诱导效果优于子叶;MS培养基较适合启动细胞脱分化形成愈伤组织,2,4-D对胚性愈伤组织的增殖保持有调控作用,ABA有利于体细胞胚的发生。     

野生高乌头组织培养及快速繁殖

以野生高乌头的嫩叶和叶柄为材料进行高乌头的组织培养研究。结果表明:高乌头的愈伤诱导培养基为1)MS+2,4-D4.0mg/L,2)MS+2,4-D3.0mg/L+6-BA0.5mg/L;愈伤分化培养基为MS+2,4-D0.2mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L;不定芽增殖培养基为MS+2,4-D0.2mg/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,平均增殖倍数为5.5;生根培养基为1/2MS+IBA1.5mg/L,生根数10条以上,生根率95%以上。     

绞股蓝组织培养的研究

绞股蓝外植体在不同激素浓度的MS培养基上培养,经过正交试验选择了四种最适培养基配方。形态观察和同工酶测定结果表明,在MS基本培养基中添加NAA(1.0～2.0mg/L)可促进愈伤组织和根的生长;添加6-BA(2.0mg/L)也能诱导愈伤组织,并能分化丛生芽;而在6-BA(1.0mg/L)中加入低浓度的NAA(0.1mg/L)和2,4-D(0.1mg/L),对诱导愈伤组织和丛生芽的分化有增效作用。经染色体观察和试管苗大田试种,未发现遗传性变异。     

新疆雪莲植株再生体系研究初探

以新疆雪莲叶片、叶柄和根为外植体,诱导新疆雪莲植株再生,获得愈伤组织诱导、分化和生根最佳培养基,并初步建立其再生体系.研究结果表明:所用培养基均能诱导出愈伤组织且诱导率最高可达100%,分化率最高可达78%.对不同外植体的愈伤组织诱导结果表明:叶片和叶柄的诱导效果最好,根的诱导效果较差.其中对叶片愈伤组织诱导效果最好的培养基是MS+NAA0.50 mg/L+2,4-D0.10 mg/L+6-BA1.00mg/L,对叶柄的诱导效果最好的培养基是MS+NAA1.00mg/L+2,4-D0.10mg/L+6-BA0.10mg/L;分化培养基以MS+NAA0.20 mg/L+6-BA1.00mg/L较适宜,生根培养基以1/2MS0+NAA1.00mg/L较适宜.     

荞麦组织培养及高频植株再生体系的建立

通过对荞麦(Fagopyrum esculentum Moench)不同外植体、不同激素配比的比较研究,建立了荞麦离体培养高效植株再生体系。荞麦子叶切段在含2．0 mg/L 2,4-D和1．0 mg/L 6-BA的MS培养基上愈伤组织诱导率为89．6％,而下胚轴切段在含2．0 mg/L 2,4-D和1．0-2．0 mg/L 6-BA MS培养基上愈伤组织诱导率高达100％。在2．0 mg／L 6-BA、0．1 mg,L IAA和1 mg／L KT的MS培养基上通过愈伤组织间接分化或外植体直接分化形成不定芽。来自子叶和下胚轴的愈伤组织的分化率分别为42．5％和73．6％,下胚轴的分化率明显高于子叶。将生长状态良好的不定芽转至含1．0 mg/L IBA和0．5mg/L NAA的1/2 MS培养基上生根,生根率达到100％。再生植株移栽到盆土中,成活率达91．6％,并且生长状态和特征均表现正常。     

枇杷叶片愈伤组织的诱导与保存

在不同成熟度的枇杷叶片中,最适宜诱导愈伤组织的是中度成熟叶;最适合的愈伤组织诱导培养基是MS+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.5mg/L,诱导出的愈伤组织为黄绿色、颗粒状、硬度适中;适合愈伤组织继代保存的培养基为MS+6-BA 0.5~1.0mg/L+2,4-D 0.1~0.2mg/L。     

小桐子愈伤组织的诱导

本文以小桐子的叶片、叶柄、茎段及下胚轴和子叶作为外植体,研究不同外植体类型对愈伤组织诱导的影响,结果表明叶柄的诱导率最高,其次为茎段的诱导率。同时以小桐子的下胚轴作为外植体,研究植物生长调节剂种类及浓度配比对愈伤组织诱导的影响,结果显示6-BA与2,4-D的组合更适宜小桐子愈伤组织的诱导,MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D0.1mg/L为小桐子愈伤组织诱导的最佳培养基,其愈伤组织诱导率高达96.7%。本研究为小桐子愈伤组织的分化、植株再生及相关的遗传转化研究提供了参考。     

‘SK4—316’胡萝卜体胚的诱导和培养

以'SK4-316'胡萝卜无菌苗的下胚轴为外植体,研究不同培养基配方和培养条件对愈伤组织诱导、体细胞胚间接发生及其同步化培养的影响,以及不同脱分化时间、脱分化培养基及外植体续存时间对体细胞胚直接发生的诱导及其培养的影响.结果表明:含3%蔗糖、0.8%琼脂的1/2MS + 2,4-D 2.5 mg/L + 6-BA(或KT)0.5 mg/L + CH 300 mg/L是诱导愈伤组织的良好培养基;1/2MS + 2,4-D 1.25 mg/L + KT 0.25 mg/L + 6-BA 0.25 mg/L(含3%蔗糖)适于愈伤组织分化并诱导体胚发生,0.02% ABA对体胚的诱导有促进作用,0.06% ABA或15% PEG能促进体胚成熟;外植体在MS + 2,4-D 1.0 mg/L固体培养基上脱分化培养48 h,再转入MS + CH 300 g/L液体培养基中可诱导体胚直接发生,但随着外植体续存于诱导培养基中时间的延长,体胚发生变异的几率也渐增.     

甘蓝型油菜子叶和下胚轴再生植株无性系建立

以甘蓝型油菜(Brassica napus L.)豫油2号和6257的子叶和下胚轴为材料,在不同激素配比的MS培养基上诱导出了愈伤组织。将经过继代的部分愈伤转入分化培养基,分化结果表明:除基因型、外植体和分化培养基的激素配比对分化率有影响外,诱导愈伤培养基的激素配比对分化率也至关重要。豫油2号的子叶和下胚轴在最适诱导培养基(ZT 1+NAA0.5+2,4-D 0.2 mg/L)和最适分化培养基(ZT4+IAA 0.2 mg/L)组合中的愈伤分化率分别为12.5%和75%;6257的子叶和下胚轴在其最适诱导培养基(KT 2+NAA1+2,4-D 0.2 mg/L)和最适分化培养基(6-BA 4+IAA 0.02 mg/L)组合中的愈伤分化率分别为50%和37.5%。将其最适诱导培养基中的愈伤组织继代达8个月以上,建立了不同继代愈伤的再生植株无性系。     

狗牙根颖果胚性愈伤组织的诱导和胚性细胞的超微结构及植株再生

以普通狗牙根[Cynodon dacylon(L.)Pers.cv.'Suncitv']颖果为外植体,以MS为基本培养基,外加浓度在2.0～6.0mg/L的2,4-D,能高频率地诱导出高质量的胚性愈伤组织,其中以4.0 mg/L为最佳.胚性愈伤组织最佳继代及分化的培养方法为:用MS 2,4-D 4.0mg/L继代1～2次,然后转入1/2 MS 2,4-D 2.0 mg/L中继代1～2次,再在无激素的1/2MS中光照培养10 d,最后在MS 6-BA 3.0 mg/L中诱导分化,分化成苗率达31.7%.经电镜观察发现,胚性愈伤组织结构紧密,细胞较小,内容物丰富,而非胚性愈伤组织结构疏松,细胞巨大,内含一大液泡,几无细胞器.     

甜菊(Stevia rebaudiana Bertoni)的组组培养

用本所栽培的甜菊的幼嫩茎叶,或由种子形成的无菌幼苗作为材料。诱发愈伤组织培养基为MS培养基(2,4-D0.8～1.0;KT或6-BA0.2～0.5;或KT及6-BA各加0.2毫克/升)和kT培养基(KT1.0;2,4-D1～3;NAA0.2毫克/升)。10天左右,渐形成生长旺盛的、淡黄或淡绿色的愈伤组织(图1,2),诱导率60％以上。愈伤组织可长期继代培养而不失其旺盛的生长能力。分化培养基成     

KT和2,4-D对知母愈伤组织再分化的影响

本文探讨KT和2,4-D组合对知母愈伤组织再分化的影响。结果表明：知母愈伤组织再生芽和促进再生苗长高以及愈伤组织增殖的最佳培养基均为MS + KT 4.0 mg/L。单独使用KT或KT与2,4-D组合均可抑制知母愈伤组织生根。     

荞麦高频离体再生及发根农杆菌转化体系的建立

荞麦无菌苗下胚轴切段在不同激素配比的MS培养基上诱导愈伤组织,出愈率均为100％。在2．0mg/L2,4-D和1．5mg/L 6-BA组合下诱导产生的愈伤组织;转入2．0mg/L 6-BA和1．0mg/L KT的MS培养基,再生苗分化率在80％以上。根尖色体分析表明再生植株具一定的遗传稳定性。发根农杆菌A4转化荞麦下胚轴和子叶获得发状根,纸电泳检测所有随机取样测定的发状根均有相应冠瘿碱的存在。     

蝴蝶兰愈伤组织诱导研究

对蝴蝶兰愈伤组织诱导试验结果表明,授粉后30d的蝴蝶兰子房适宜诱导愈伤组织,在1/4MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA 0.1mg/L+蔗糖3.0%培养基上,蝴蝶兰子房切段愈伤组织的诱导率达到90.0%。     

早熟棉体细胞胚胎发生和植株再生体系的建立

以8个早熟或特早熟棉花为材料,通过不同激素组合(1.0 mg/L IBA+0.5 mg/L KT;0.1 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L KT)诱导其愈伤组织,为早熟棉花的遗传转化以及基因功能研究奠定基础.结果表明,2种激素组合均能诱导产生4种主要类型的愈伤组织:淡黄色颗粒状愈伤组织,褐化的愈伤组织,翠绿致密的愈伤组织,疯长型愈伤组织.4种愈伤组织转入增殖培养基中前2种愈伤组织能够分化出胚性愈伤组织,胚性愈伤组织再转到分化培养基上培养能够产生胚状体,即体细胞胚;体细胞胚进一步发育成为再生小苗.用该组织培养再生系统,成功地使晋棉5号、中棉27号和辽棉10号等3个早熟棉品种在5～7个月内通过体细胞胚胎分化获得再生小苗.