简讯

用尼龙布条法筛选病原微生物目前国外已用尼龙布条法筛选病原微生物,现以筛选茄丝核菌(Rhizoctonia solani)为例:首先选取一块网眼大小为1mm~2的防水尼龙布,并裁成10mm~2大小的小条。将小条放入盛有10ml蒸馏水的培养     

鸡胚细胞的微载体培养

国外有许多利用微载体培养各种贴壁细胞的报道。鸡胚细胞(CEF cells)是最早用于体外培养的细胞之一,用它可生产多种鸡的疫苗,如法氏囊、新城疫、马立克疫苗等。我国生产上多采用滚瓶法,近年来才有微载体法培养的探索。要进行细胞的大规模培养,转瓶是有效的模拟,可以模拟生物反应器培养的一些条件,为放大作准备。本文模拟生物反应器的培养条件,用500ml转瓶（装液200ml）研究了鸡胚细胞在徽栽体上巾壁和生长的规律,为放大培养作了准备。     

草履虫的长期饲养

将草履虫培养在罐头瓶或奶粉瓶等广口容器中。罐头瓶每天滴牛奶1滴;奶粉瓶每天滴牛奶2—3滴。如果没有牛奶,用豆浆也行。将容器放在温度适宜的地方,草履虫就可以长期生活和繁殖下去,随用随取,十分方便。培养液取用后,可以加注清水补足。加水时也滴入     

细胞工厂在轮状病毒基因重配株LD9培养中的应用初探

为了探索用细胞工厂代替转瓶培养轮状病毒基因重配株LD9及收获高滴度的LD9病毒原液和提高产量的可行性,分别在2层4、层细胞工厂和3L1、5L转瓶培养Vero细胞,比较两种容器内细胞的生长状态。结果显示,以相同活细胞数2.5×104/ml同时接种两种不同培养容器时,细胞工厂培养3d已长成单层,而转瓶培养需5d;对两种容器长满单层时的细胞经胰酶消化后通过细胞仪计数、分析,结果显示,两种容器培养细胞长成单层时的单位面积细胞密度相当;对长成致密单层细胞的两种容器以相同的MOI(MOI=0.1)接种LD9病毒,转瓶培养的病毒于第8d病毒滴度达到高峰,为6.0～6.5 lgCCID50/ml;细胞工厂第5d病毒滴度达高峰,为6.5 lgCCID50/ml,并于第9d病毒滴度再次达到峰值,为6.0～6.5 lgCCID50/ml,实现二次收获病毒。     

常规石蜡制片的几点改进

常规石蜡切片质量对病理诊断和科研教学有直接影响,尽快制出优质切片能提高病理诊断水平,为临床治疗争取时间,为科研教学提供理想的材料。下面介绍几点我科经多年摸索出的能提高切片质量和速度方面的方法改进。１　载玻片、盖玻片的快速清洁法１１　两者经铬酸、９５％乙醇处理后充分水洗,用蒸馏水洗两次,可将载玻片置于内有蒸馏水的广口容器内备用;将盖玻片在内有蒸馏水的广口容器内对齐盖片四边并挤紧排列整齐,用纱布包好,放烤箱内烘干备用;１２　载玻片、盖玻片经处理、蒸馏水洗后,捞玻片于ＹＷＹ７８１Ｂ型医用微波仪内,…     

絮凝选择载体的构建及β葡萄糖苷酶基因在酿酒酵母中的表达

从强絮凝酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)ABXL-1D菌株中用PCRA-法扩增到絮凝基因(Flocculation gene,FLO1),构建以絮凝基因作选择标记的酿酒酵母表达栽体：用该栽体表达Bacillus polymyxa的β-葡萄糖苷酶基因,转化子可直接从沉淀中筛选。摇瓶培养细胞得到的β-葡萄糖苷酶比活力为3．91u／mg蛋白。在发酵葡萄糖和纤维二糖混合底物时,转化子的葡萄糖残存量明显低于受体菌。这将有利于利用纤维素发酵生产酒精。     

3—α—（吡啶基）丙醇—2（784—1）对大豆幼苗某些生理过程的影响

材料培养有两类：（1）大豆（Glycinemax）种子萌发后播于蛭石中,长出一个芽时用Hoagland氏营养液水培。单叶充分展开后,选用生长一致的幼苗,置在盛有不同浓度784l溶液上培养．每缸5株,以营养液为对照。每个处理6次重复一sd后改用营养液培养。12d后测定根、茎和叶的干重,并计算报冠比。（2）大豆种子用O,7．29XIO－‘,l．46X10－’．2．92X10－’mol／L784－l溶液浸种（2h）催芽后分为两组,一组长出一个芽时用Hoagland氏营养液水涪。一个月后测定幼苗第四叶片的叶绿素含量（山东农学院,西北农学院．植物生理学实验指导．山东科…     

植物原色浸制标本的保存

不同植物、不同器官其颜色种类各有不同 ,制成标本如采用一般方法想长久保存原先颜色也很困难。笔者通过查资料 ,长期实践、摸索 ,终于找到较满意的制作方法。现介绍如下 :1　保存绿色　将标本浸入 30 % Cu SO4 溶液中 ,5～ 10天取出 ,用清水冲洗 ,再放入 0 .2 %～ 0 .3%的 H2 SO3溶液标本瓶中 ,密闭瓶盖。2　保存红色　用 2 2 0 g硼酸、150 ml福尔马林、10 0 ml75%～ 90 %酒精、2 0 0 ml蒸馏水制成保存溶液 ,将红色标本 ,如红枣、枸杞子或番茄等洗净浸入 ,然后密封容器口。3　保存紫色　将饱和精盐水 50 0 ml,福尔马林 2 50 ml、蒸馏水 …     

动脉平滑肌细胞原代培养贴块法的改良

对传统的动脉平滑肌细胞（ASMCs）的体外培养贴块法进行改良。用改良的贴块法进行ASMCs的原代培养,用传统的贴块培养法作对照。运用改良贴块法细胞长满瓶壁所需平均生长时间为6天,产量为60-60万/瓶;而在同等条件下对照组的传统贴块细胞长满瓶壁所需生长时间约需15天,产量仅为30万/瓶。并且,改良方法比传统方法具有较高的成功率,且无需选用胰岛素。新方法简单易行,结果稳定可靠。     

模拟酸雨处理与四种植物叶,花关系的初步研究

本实验将作物小麦,油菜,蚕豆和野生植物羊蹄的幼苗栽于盆中,分别用ｐＨ值为４５,３．５,３．０,２．０的模拟酸雨处理,测定其对植物的影响。     

种子萌发实验的改进

于课前一周,取4只小瓶(如罐头瓶)分别编号甲、乙、丙、丁。甲瓶中装1/3吸胀的麦种,乙瓶中装麦种后再加过量的水,丙瓶中装干麦种,丁瓶中装煮过的麦种,4瓶均用塑料布封闭瓶口。上课时,让学生观察:甲瓶的中上层麦种已发芽其它则无发芽的。用注射器抽甲瓶中气体注入盛有石灰水上清液的试管中,结果液体变浊。打开甲瓶盖,把燃烧的火柴梗伸入瓶内即灭。用同法,其它瓶则无此现象。最后发给每个学生几粒已发芽的麦种咀嚼品味。此实验证明了:种子的萌发需要有正常的具有生活力的种子;需要水分、空气(和温度);进行呼吸作用并放出二氧化碳;内部物质的转化和分解(即淀粉分解成糖)。     

用废旧塑料袋栽培鸡腿菇

在大规模生产上鸡腿菇常采用畦栽和塑料袋栽法 ,为适应生物课外活动实验教学的需要 ,我指导学生利用废旧塑料袋栽培鸡腿菇 ,收到良好的效果 ,现介绍如下。1　制备菌种1 .1　母种分离　挑选菇形好、生长健壮、八成熟的子实体 ,采用火焰消毒法代替传统的酒精或升汞消毒法 ,即把种菇置于无菌箱中 ,左手用镊子夹住种菇 ,右手用另一把镊子夹一块酒精棉球在酒精灯上点燃 ,将种菇靠近火焰转动 ,对种菇四周进行消毒。然后将种菇纵撕对半 ,用接种勾取菌盖和菌柄交接处一小块菌肉 ,迅速放入含ＰＤＡ培养基的试管斜面上 ,适温培养。经多次转管提纯 ,选…     

壳聚糖对NaCl胁迫下菜用大豆叶绿体蛋白的影响

壳聚糖(CTS)能有效增强植物对盐胁迫的耐受性,但CTS在蛋白质组水平上对菜用大豆幼苗响应盐胁迫的影响尚不清楚.本研究用200 mmol·L-1 CTS和蒸馏水分别喷洒菜用大豆'绿领特早'幼苗叶片,诱导5d后进行NaCl胁迫和无NaCl胁迫营养液处理,在NaCl处理第3天取样提取幼苗叶片叶绿体蛋白,进行同位素标记相对和...     

4种黑曲霉基因组DNA提取方法的比较

目的:筛选适合提取曲霉DNA的方法.方法:比较2个菌落培养时间段(3d内和10d左右)提取DNA质量的差异;运用氯化苄法、石英砂+CTAB法、Biospin法和微波法分别提取黑曲霉基因组DNA,然后用直接电泳、浓度测定、PCR扩增等方法比较所提DNA的浓度和质量.结果:培养3d内的菌落提取的DNA纯度较高,无需纯化即可用于后续实验;4种方法制备的DNA均可用于PCR等后续实验,其中以石英砂+CTAB法提取的DNA纯度好,产率最高.结论石英砂+CTAB法是一种适用于曲霉DNA提取的简便方法.     

轮状病毒LH9株在Vero细胞中的培养条件优化研究

为优化轮状病毒株在Vero细胞上的培养条件,将轮状病毒基因重配株LH9按0.1MOI分别接种于不同规格的细胞培养瓶(100ml、2000ml、3L、15L)。病毒接种采用吸附与未吸附两种方式、病毒收获采取低温冻融后离心与直接离心两种方法,观察分析对病毒滴度的影响。实验中,用CASY细胞计数仪分析活细胞率,病毒接种后逐日观察细胞病变(CPE)并取样,采用细胞半数感染量测定病毒滴度。结果表明,使用不同规格细胞培养瓶经吸附法培养接种、低温破碎法收获的LH9株病毒滴度高,其中以15L立瓶培养滴度最高(6.0～7.0 logCCID50/ml)。     

N-(1-萘乙酰基)-N′-(4-氨替吡啉基)硫脲(NAT)对玉米幼苗的生理效应

NAT为我们通过酰基异硫氰酸酯与胺类化合物的加成反应合成的一种未见报道的酸基硫脲化合物。玉米（Zeamays）品种新黄单904（由新乡市农科所提供）的种子经粒选后,分别用蒸馏水（对照）和浓度为0.1mg/L的NAT浸种24h,种子萌发后,迅速移植在培养缸上的尼龙网上,于人工光照箱中进行水培（温度为25～28C;每天照光11’h,光照度工300lx人采用Hoagland完全营养液,每7d更换一次。玉米幼苗长出1片叶后,测定各种生理指标。呼吸速率用小篮子法;叶绿素含量按Arnon的方法（Plantphysiol,1949,24：l）;NR活性用磺胺比色法（华东师范大学…     

谈"根对矿质元素离子的交换吸附实验"的对比实验

在观察根对矿质元素离子的交换吸附现象的实验中,将染色、冲洗后的根等分投入盛有等量蒸馏水和CaCI。溶液的烧杯中进行对比实验,其结果是：除正常结果外,还常出现两种不同的结果：一种是CaCI。溶液和蒸馏水对比实验后均不变蓝;另一种是CaCI。溶液和蒸馏水对比实验后均变蓝。对此,学生并不知道其原因何在,也不懂得做好该实验的关键在哪里。通过分别用NaCI溶液、KNO;溶液、自来水等进行对比实验,可知;＊。"、＊"以及自来水中含有的某些离子都可与亚甲基蓝的阳离子发生交换吸附而使溶液或自来水变蓝。即使将CaCI。溶液稀释到1…     

干花标本的简易制作

将硅胶磨碎,筛取1毫米以下的细小颗粒烘干备用。取鲜花标本放入稍大的容器(如杯、碗等)内,用硅胶掩埋固定(注意保持花的自然姿态),立即用塑料膜封密杯口用绳扎紧。6—7天后,小心地移去硅胶,取出干花并置于盛有干燥剂的标本瓶中,或将干花柄穿上铅丝插在木     

高效液相色谱测定车间空气中的甲醛

将盛有 DNPH 液的气泡吸收瓶,吸收车间空气中甲醛.2,4-二硝基苯肼和醛定量反应形成二硝基苯腙.Shimadu ODS(φ4.6×150mm)柱上分离,紫外检测器(360nm)测定.以保留时间定性、峰面积定量.本法线性回归方程相关系数大于0.999,变异系数0.48%,最低检出浓度为0.17mg/m~3.     

保鲜剂对香石竹切花衰老的影响

大红色香石竹(Dianthus caryophyllus)从云南空运到货后,即选含苞待放、花色和大小一致的单头花蕾,花枝从基部剪留25 cm长,用于试验.采用的保鲜剂有两种:(1)5%蔗糖 100 mg·L-1柠檬酸 100 mg·L-1硝酸银;(2)50 mg·L-1 KT 100 mg·L-1柠檬酸 100 mg·L-1硝酸银(KT为上海试剂厂生产).以蒸馏水为对照.鲜花切取后分别插入盛有100 mL保鲜剂的150 mL三角瓶中,瓶口用脱脂棉塞紧.每瓶插1枝,各处理重复5次,供测定水分平衡、瓶插寿命等指标使用;另取花枝同样分别插入各保鲜剂中,每瓶插5枝,各处理重复3次,供测定呼吸速率和花瓣相对电导率使用.