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乙型肝炎病毒核心抗原及e抗原均为乙型肝炎病毒核衣壳的重要组成部分。自从发现病毒核心颗粒中存在着e抗原之后,它们之间的关系一直是人们研究的课题。有些报道认为,e抗原是核心抗原的组成成份。有人通过实验发现核心抗原和e抗原的氨基酸序列极其 相似文献
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乙型肝炎病毒前S2抗原决定簇与乙型肝炎病毒核心抗原的基因融合与表达 总被引:1,自引:0,他引:1
乙肝前S2(HBV PreS2)肽段由55个氨基酸组成,其N端肽段含Th和B细胞抗原决定簇。我们将化学合成的PreS2 epitope(120-145)基因不同位点进行融合,融合基因在大肠杆菌中获得表达,并对融合蛋白进行了纯化。经ELISA和Western-blot实验表明,融合蛋白具有PreS2和HBcAg两者的抗原性。此外,研究还表明,强启动子能使表达水平有一定的提高。 相似文献
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将核心抗原基因起始码下游的序列,构建两个CAT报告基因表达质粒,即pCATN I和pCATNⅡ,转染HepG2与CV-1细胞后,均可使CAT报告基因表达,表现出启动子活性。 相似文献
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通过乙型肝炎病毒核心基因5''''端的修饰使核心抗原在大肠杆菌中高效表达 总被引:4,自引:0,他引:4
为了使乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)在大肠杆菌中获得高效表达,本文首次采用一种新方法对核心基因前区进行改造与修饰,即用限制性内切酶Taq I从核心基因内部5′端切开,去除核心基因起始信号ATG及ATG 5′端上游的全部前核心区(Precore),再化学合成一段既包含核心基因起始信号又具有多种功能的DNA片段。将两者拼接重组到表达载体pUC9上,转化受体菌,成功地获得高效表达HBcAg的菌株。用ELISA法检测,表达滴度为1:80000。表达产量占菌体总蛋白的16%。其菌体裂解液经免疫电镜观察,可见到成堆聚集的典型HBcAg颗粒。抗原单体分子量约为22000道尔顿,双体为44000。与目前国内外所普遍采用的方法比较,本文的方法有许多明显的优点,可用于其它基因改造。 相似文献
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目的:探讨乙型肝炎病毒e抗原基因在大肠杆菌中进行高效融合表达,并对表达条件进行优化和影响因素的分析.方法:从乙肝患者阳性血清中提取DNA,设计引物扩增目的基因,按常规方法克隆入pET-GST载体谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因的下游,获得的重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导目的基因片段的表达,经超声处理后SDS-PAGE电泳.对表达条件进行正交试验优化,并分析其影响因素的大小.结果:HBeAg以包涵体形式表达出来,其表达的GST融合蛋白的分子质量大约为44KD.最佳的表达条件为温度为30℃,IPTG浓度为0.6mmol/L,诱导时间为2h.其影响因素大小依次为诱导温度>诱导时闻>IPTG浓度.结论:乙肝e抗原基因在大肠杆茵中获得了高效表达. 相似文献
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四省观察点人群中血清乙型肝炎病毒表面抗原消长趋势调查 总被引:1,自引:0,他引:1
本文以前瞻性血清流行病学方法调查了人群中血清HBsAg消长趋势。观察了3 096名HBV易感者,其人年总感染率为7.0%;HBsAg人年阳转率为0.68%,两者之比为10.3:1.0。HBsAg阳转者中51.2%发生在0~3岁时期。调查了772例HBsAg携带者,其人年标化阴转率为2.01%,阴转者主要发生在10~29岁和50岁以上年龄组,占总阴转数的66.7%。以人群HBsAg阴转率加上因自然死亡而损失的HBsAg携带率和人群中HBsAg年增长率进行分析计算,得出HBsAg在观察点人群中的消长状况是呈上升趋势,即年增加率为0.370%,年减少率为0.264%。 相似文献
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37℃用1%β-巯基乙醇处理大肠杆菌HBcAg2小时,可使其全部转化成HBeAg。以常规ELISA方法不能检出HBcAg活性。该制品能被抗-HBe阳性血清特异中和。4℃以液体形式存放稳定,-20℃经过冻融活性下降。HBcAg转化成HBeAg后聚丙烯酰胺凝胶电泳行为有所改变。分别用转化的大肠杆菌HBeAg和血浆HBeAg作为酶联反应的诊断试剂,检测35份HBsAg阳性乙肝病人血清标本的抗-HBe,符合率为91.4%。同用Abbott-HBe(RIA)试剂盒测定的17份HBsAg阳性血清标本的试验结果比较,符合率为100%。说明转化的大肠杆菌HBeAg可代替血浆HBeAg作为检测抗-HBe的诊断试剂应用。 相似文献
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