欧石楠体细胞胚发生和植株再生

以欧石楠茎段为外植体,研究其体细胞胚胎发生和植株再生。对影响茎段不定芽分化及胚性愈伤组织诱导的主导因子进行比较分析,并研究其体胚萌发、生根及移栽;同时,采用树脂切片法对茎段脱分化产生胚性愈伤组织及体胚发育过程进行组织细胞学观察。结果表明,接种在1／2WPM基本培养基上的茎段,胚性愈伤组织诱导率为88．7％,显著高于其他处理,不定芽诱导率可达90．6％,平均分化倍数为3．6个,平均分化苗高3．82cm;体细胞经过成熟培养后。在添加1．0mg·L-1 ZT和0．3mg·L-1 IBA的1／2WPM培养基上萌发,萌发的体胚在I／2WPM附加0．2mg·L-1 NAA和0．3mg·L-1 IBA的培养基上形成完整的体胚苗植株,体胚苗生根率达到87．4％,经炼苗后移栽到蛭石：珍珠岩=3：1（V／V）的栽培基质中,成活率可达63．7％。在显微镜下可观察到球形胚、心形胚、鱼雷形胚和子叶形胚;体细胞胚以间接方式发生,表现为愈伤组织外层细胞直接发生和愈伤组织组织内部细胞发生。     

甘薯体细胞胚的发生和植株再生

本文概述了甘薯体细胞胚发生和植株再生的研究现状及存在的问题。     

小麦幼胚培养中体细胞胚发生和植株再生

小麦组织培养中的植株再生,早期认为主要是通过器官发生途径,但近年来的研究表明:大量植株再生是通过体细胞胚发生途径。我们以小麦幼胚作为外植体,在附加6mg/12,4-D,0.5mg/1 KT,300mg/1 LH 和3%蔗糖的 MS 培养基上可形成大量愈伤组织。该愈伤组织经过5个月继代培养仍保持较高的分化频率。将2,4-D 浓度从6mg/1降至2mg/1继续培养后,继代中以60%的频率产生胚性愈伤组织,如再进一步降低2,4-D 浓度至0.5mg/1时,     

木薯体细胞胚发生及植株再生研究

本研究以木薯品种新选048诱导膨大的茎尖分生组织为外植体,研究了不同浓度植物生长调节剂、不同碳源、不同成熟时间的体细胞胚及其子叶切片对木薯体细胞胚发生及植株再生的影响。结果表明,与2,4-D相比,12 mg/L的Picloram诱导木薯体细胞胚发生率最高,为36.2%,其产胚量为5.87;不同碳源对木薯体细胞胚继代增殖无显著性差异;随着体细胞胚成熟时间的增加,其植株的再生率也随之升高,但后期差异不显著;不同成熟时间的体细胞胚子叶器官发生率差异显著,诱导成熟14 d左右的子叶切片植株再生率较高,诱导率达54.3%。     

木薯体细胞胚状体发生及植株再生

1 植物名称木薯(Manihot esculenta)。 2 材料类别幼嫩叶片、茎及节。 3 培养条件以MS为基本培养基。材料培养基:Ms+维生素B_11 mg/L(单位下同)+肌醇100+NAA 0.01+2％蔗糖+0.6％琼脂,培养温度28C,光照1 500 lx,照光12 h/d。胚状体诱导培养基:MS+2.4-D 4+0.3％蔗糖+0.4％琼脂,培养温度28C。不照光。植株再生培养基:MS+BA 0.1+GA_31+2.4-D     

鱼腥草体细胞胚胎发生和植株再生

目的:利用鱼腥草的叶片和叶柄为材料,进行体细胞胚胎诱导及植株再生研究。方法:运用正交设计试验,考察在改良的MS固体培养基上添加不同种类、不同浓度的植物生长物质组合及其配比对鱼腥草愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响。结果:鱼腥草无菌苗叶片在含有2,4-D 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L的改良MS培养基上能诱导出胚性愈伤组织;胚性愈伤组织在含有6-BA 1.0 mg/L的改良的MS培养基上诱导体细胞胚的发生;叶柄在含有6-BA 1.0 mg/L改良MS培养基上直接产生体细胞胚。体细胞胚在改良的MS NAA0.1 mg/L 6-BA 1.0 mg/L的培养基上能够快速繁殖,形成大量不定芽,在不加任何激素的MS培养基上就可以萌发出不定根,发育为成完整植株,在MS IBA 1.0 mg/L的固体培养基上能够形成大量的根。结论:建立了鱼腥草体细胞胚胎发生及植株再生的体系。     

百合体细胞胚胎发生和植株再生

以切花百合(Lilium)品种‘黄天霸’(‘Manissa’)花器官为外植体诱导体细胞胚胎发生与植株再生。结果表明,不同花器官、不同激素配比对愈伤组织形成均具有显著影响。花丝为最佳外植体,激素对愈伤组织诱导的影响效应为NAA>6-BA>2,4-D,最适培养基为MS+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-16-BA;激素诱导体细胞胚胎发生的影响效应为2,4-D>KT>6-BA,最佳培养基配方为MS+1.0 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1KT+1.0 mg.L-16-BA;MS培养基添加IBA可促进体细胞胚萌发成苗,体细胞胚芽成苗的最佳培养基为MS+0.2 mg.L-16-BA+1.0 mg.L-1IBA。     

湿地松体细胞胚胎发生和植株再生

以湿地松的未成熟合子胚为外植体,在附加８ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ和４ｍｇ／Ｌ ＢＡ的ＬＰ培养基上诱导出胚性愈伤组织。在含１ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ的培养基上保持并增殖。提高培养基的渗透压后,愈伤组织内大量的胚性胚柄细胞团和早期原胚。     

马尾松成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生

采用马尾松（Ｐｉｎｕｓｍ ａｓｓｏｎｉａｎａ Ｌａｍ ｂ．）成熟合子胚为起始外植体,在含２,４－Ｄ １０ ｍ ｇ／Ｌ,ＫＴ和ＢＡ 各４ ｍ ｇ／Ｌ的ＤＣＲ培养基上得到胚发生培养物。将白色半透明的愈伤组织（含早期原胚）在含２,４－Ｄ１．０ ｍ ｇ／Ｌ,ＫＴ和ＢＡ 各０．４ ｍ ｇ／Ｌ的ＤＣＲ培养基上保持并增殖。在附加９０００ ｍ ｇ／Ｌ肌醇的ＤＣＲ高渗培养基上得到粗壮的后期原胚。ＡＢＡ 和活性炭同时使用能促进子叶胚的形成,最高频率为３５．１％ 。在无激素培养基上,成熟体细胞胚萌发并进一步形成完整小植株     

人参杂种胚培养体细胞胚胎发生及高频率植株再生

在植物组织培养中,高频率植株再生培养体系的建立,是生物技术应用的基础。珍贵药用植物人参的组织培养,目前由于没有建立一套高频分化成株的培养体系,而使生物技术在人参工厂化育苗、有益突变体筛选及育种上的应用研究,受到了严重的阻碍,为此,我们进行了高频率分化成株的研究。材料为沙藏处理的,胚发育到子叶期的人参、西洋参正、反交杂种裂口种子,剥去种壳、洗净泥沙、常规灭菌后,在超净台上,剥取胚,接种到附加 NAA3-16μm、KT2-14μm,琼脂0.     

峨参原生质体的体细胞胚同步化发生及植株再生

用峨参茎节来源的胚性愈伤组织,在含1.5%纤维素酶Onozuka R-10+0.5%果胶酶Macerozyme R-10+0.5%蜗牛酶+5mmol/L CaCl_2+0.6mol/L甘露醇+0.3%葡聚糖硫酸钾,pH5.8的酶液中游离原生质体,培养在改良MS培养基中,内含激素1mg/L2,4-D+0.5mg/L玉米素,并附加0.3%琼脂糖。第10天分裂频率达40—50%。此后振荡培养1个月,细胞团移至含0.5mg/L 2,4-D及渗透压降低的MS培养基中大量繁殖,然后再移至无激素或含0.1mg/L玉米素的MS培养基中进行分化,得到大量的球形胚,并且同步化达90%,70%的球形胚在10—15天后同步发育为心形胚,以后继续发育为鱼雷胚及子叶胚,最后形成完整植株。并讨论了获得大量同步化发生的体细胞胚的原因。     

几种生长素对木薯体细胞胚发生和植株再生的作用

木薯（ＭａｎｉｈｏｔｅｓｃｕｌｅｎｔａＣｒａｎｔｚ）嫩叶外植体在含２,４－Ｄ（１－１６ｍｇＬ－１）或ＮＡＡ（４０ｍｇＬ－１）的诱导培养基上能直接诱导初生体细胞胚胎发生,而低活性的生长素ＩＢＡ或ＩＡＡ（４０ｍｇＬ－１）或低浓度的２,４－Ｄ（０．１ｍｇＬ－１）则不能。而以木薯初生体细胞胚切段为外植体时,次生体细胞胚的诱导对生长素的活性或浓度的要求降低。降低生长素浓度或活性能缩短体细胞胚诱导时间并促进根的形成,有利于提高体细胞胚的再生频率。体细胞胚外植体在诱导培养基上的培养时间对下一步体细胞胚胎发生的诱导产生影响。通过石腊切片观察,在含２,４－Ｄ诱导培养基上,木薯体细胞胚不能形成芽分生组织。结果表明,２,４－Ｄ等生长素类物质对诱导木薯体细胞胚胎发生是关键因子,但对体细胞胚的进一步发育和植株再生起抑制作用。     

野黍体细胞胚胎发生和植株再生

植物名称:野黍Eriochloa villosa。材料类别:雌雄蕊分化期的幼穗。培养条件:从校园中采集雌雄蕊分化期的野黍幼穗,接种在N_6培养基中,附加成份有2,4-D2mg/L(单位下同),CH500,蔗糖浓度为3％,分化培养基为无激素的N_6培养基,附加Ade40,CH500,并加适量活性炭。常规高压灭菌,培养室温度为25～27℃,光照度为800—1000lx,每日光照10—12小时。     

花生体细胞的器官发生和植株再生

以已萌发的花生种子不同部位为材料,比较了完整的胚芽、主芽,侧芽,胚轴及子叶等培养力的差异,得出了如下结果: 1.在外植体培养过程中,花生的胚轴具有强烈的再生能力;其它部位培养力大小的顺序依次是:完整的胚芽>主芽>侧芽>子叶>叶片。2.通过试验证明,花生外植体培养的最佳激素组合是NAA 0.6毫克/升+BA 0.9毫克/升。     

茶梅体细胞胚胎发生和植株的再生

在山茶属植物中,我们曾报道过金花茶和云南山茶组织培养形成胚状体和再生植株。茶梅(Camellia sasanqua)也是山茶属的一种重要的观赏植物,其植株矮小,花色鲜艳且具香味,除供观花外,还可做成不同造型的盆景供观赏,在园艺上也可用作茶花嫁接的砧木。茶梅组织培养通过体细胞胚状体产生植株,至今尚未见报道。现把部份实验结果报道如下。     

花生体细胞胚的诱导及其植株再生

采用不同成熟度的花生胚轴为外植体进行体细胞胚诱导及植株再生研究,结果表明,成熟胚轴在高浓度2,4－D的MS培养基中,经过30d左右的培养,可直接诱导产生出大量的体细胞胚,含40mgL~－12,4－D的培养基中体细胞胚的诱导率达100％,平均每个外植体产生11．58个体细胞胚．体细胞胚的继代培养需降低2,4－D的浓度（1－20mgL~－1）．未成熟胚轴的体细胞胚诱导及继代培养的2,4－D浓度宜为10mgL~－1．将诱导的体细胞胚转接到合5－10mgL~－1BA的MS培养基中,体细胞胚能够萌发再生成无根小植株,将其转接到生根培养基中可获得完整小植株．     

油茶优良无性系子叶体细胞胚植株再生

以油茶优良无性系‘湘林4号’子叶为外植体,采用附加不同种类激素的MS培养基对其进行组织培养实验。研究结果表明:子叶形成胚性愈伤组织的最适合培养基为MS+2.0mg.L-12,4-D+1.0mg.L-1KT;经胚状体诱导产生不定芽分化的最适合培养基为MS+2.5mg.L-16-BA+1.5mg.L-1IAA;油茶优良无性系的生根培养基以MS+7.0mg.L-1NAA最适;通过对植株再生过程中各阶段的组培材料进行RAPD鉴定分析表明,DNA水平上未发现变异,说明通过组织培养建立的油茶优良无性系再生植株同原无性系无明显差别,最终获得的组培苗木能够保持原无性系的优良特性,其遗传是稳定的。