微型双向电泳对血清蛋白遗传型的研究

血清蛋白中一些蛋白质的特性,往往因人而异,即其遗传表型不同。如结合珠蛋白(Haptoglobin,Hp)可分为Hp1-1型、Hp2-1型、Hp2-2型及一些稀有类型;Gc球蛋白有Gc1-1型、Gc2-1型及Gc2-2型等;转铁蛋白(Transferrin,Tf)中C型以压倒多数的频率出现,但亦有少见的10种B型变种和11种D型变种;极少数人的白蛋白(Albumin,A1b)表现     

小麦遗传型与生理型雄性不育花药蛋白质双向电泳分析

为了研究小麦雄性不育蛋白表达机制, 以具有异质同核的3个亲本: 即遗传型不育系ms(S)-西农1376、对应的保持系(A)-西农1376和生理型(化学杀雄剂SQ-1诱导)雄性不育系ms(A)-西农1376为材料, 利用IEF/SDS-PAGE凝胶电泳技术, 对发育到单核后期的花药全蛋白特异性进行了比较分析, 得到320~350个清晰的蛋白点。结果表明: 遗传型和SQ-1诱导的生理型不育系蛋白质图谱与正常保持系在蛋白质(多肽)表达量上存在一定的差异, 同时发现有几种蛋白质的表达有明显的特异性, 两个不育材料2D胶上共有几个明显的特异蛋白点, 而在保持系中未发现; 两个不育材料又分别具有自己的特异蛋白表达, 不育机理不同; 比较分析可知, 不育系中某些蛋白的表达受到了抑制, 并开启了与花药败育有关的特定蛋白的表达, 可能使物质能量代谢受阻,导致雄性不育的发生。     

蛋白质组学研究中的双向电泳技术

蛋白质组学研究已经成为后基因组时代的研究热点,其两大支柱是双向凝胶电泳技术和生物质谱技术。尽管双向电泳技术近几年已经取得了突破性进展,是当前蛋白质分离的最常用技术,但其本身还有一些难以克服的问题。随着质谱技术的快速发展,双向电泳逐渐成为蛋白质组学研究的瓶颈。本综述双向电泳主要技术步骤的现状、存在问题及其改进方向。     

左炔诺孕酮对XX遗传型黄颡鱼雄性化的影响

为高效诱导功能性XX黄颡鱼(Tachysurus fulvidraco)伪雄鱼,研究以XX遗传型黄颡鱼为实验对象,以12日龄为左炔诺孕酮(Levonorgestrel, LNG)浸泡处理的起始点,设计高(1μg/L)、中(0.1μg/L)和低(0.01μg/L)浓度的LNG处理组,及对照(0)组,于60日龄处理结束。高、中、低浓度LNG处理组和对照组诱导雄性化比例分别为4.0%、25.0%、62.5%和0。观察性腺结构发现, 1和0.1μg/L处理组雄性化的精巢中只有全精巢型,0.01μg/L处理组则包括全精巢型(20.8%)和部分精巢型(41.7%)。幼鱼122日龄精巢组织学观察到大量精子和生精小管互通现象,推测诱导的XX伪雄鱼具有正常繁殖能力。未雄性化的卵巢发育受到LNG抑制, 62日龄卵母细胞数量和122日龄性腺指数分析结果表明,卵巢发育抑制程度与LNG处理浓度呈正相关。与对照组相比, LNG处理对黄颡鱼生长和死亡率都无显著影响。研究表明,在LNG诱导黄颡鱼雄性化研究中,具有雄性化诱导效率较高、使用剂量小和产生的伪雄鱼精巢发育易成熟的优势。研究为优化制备功能性伪雄鱼技术提供了新的...     

金鱼肌浆蛋白和血清蛋白的研究

本文采用pH不连续系统聚丙烯酰胺垂直平板电泳方法,对鲫鱼和五花珍珠、透明珍珠和青珍珠的肌浆蛋白、血清聋白进行了比较研究。结果表明:鲫鱼和三种珍珠金鱼的肌浆蛋白和血清蛋白是有差异的。肌浆蛋白谱带中MI_(-3,-12,-13)带和血清蛋白带中的MA_(-6,-9)带为珍珠金鱼所特有,且三种珍珠金鱼的肌浆蛋白带还可以进一步分型。鲫鱼和金鱼品种间这种蛋白的差异为金鱼的分类和探讨它们之间的亲缘关系提供了有意义的资料。     

金鱼肌浆蛋白和血清蛋白的研究

本文采用pH不连续系统聚丙烯酞胺垂直平板电泳方法,对螂鱼和五花珍珠、透明珍珠和青珍珠的肌浆蛋白、血清蛋白进行了比较研究。结果表明：鱼即鱼和三种珍珠金鱼的肌浆蛋白和血清蛋白是有差异的。肌浆蛋白谱带中MI^-3,-12,-13带和血清蛋白带中的MA^_6,_9。带为珍珠金鱼所特有,且三种珍珠金鱼的肌浆蛋白带还可以进一步分型。鱼即鱼和金鱼品种间这种蛋白的差异为金鱼的分类和探讨它们之间的亲缘关系提供了有意义的资料。     

微波辐射对家兔血清蛋白的影响

本文报道微波辐射对家兔血清蛋白及血沉的影响。使用微波理疗机对家兔睾丸局部照射１５分钟，温度４２℃。在照射前４天和照射后７天、１４天、５７天从心脏取血，进行血沉、总蛋白、白蛋白、球蛋白的测定。结果表明，照后７天，总蛋白、白蛋白、球蛋白均有显著下降，１４天后有所回升，５７天后基本恢复照前水平。照后７天的血沉只有少许改变，可见微波辐射的组织和器官扔直接作用外，还对机体血浆蛋白质代谢产生一定影响。     

口腔链球菌遗传型和表型的研究进展

口腔链球菌包括许多菌种，许多菌种包括广泛的遗传型克隆株。丰富的遗传型和表型对菌种的定植、生存有着独特的意义，既是形成正常口腔生态系统的基础，也是导致疾病的根本原因。本文就目前遗传型和表型的研究状况作一概述。     

懒猴血红蛋白血清蛋白及同功酶的研究

对高等灵长类同功酶的研究已较广泛,而对低等灵长类——懒猴的同功酶研究则尚未见报道。     

乙型肝炎患者血清蛋白电泳谱变化规律的研究

研究乙型肝炎病毒患者血清蛋白的变化特点,探讨其与疾病进程的关系。从临床收集正常体检者血清和乙型肝炎病毒不同感染阶段的患者血清,按疾病类型进行分组。选用血清蛋白电泳技术检测白蛋白(ALB)、α1球蛋白、α2球蛋白,γ球蛋白百分含量及A/G。与正常对照组相比,重度慢性肝炎组、肝炎肝硬化组和原发性肝癌组中ALB、α1球蛋白、α2球蛋白明显降低,而γ球蛋白明显升高;重度慢性肝炎、肝炎肝硬化、原发性肝癌三组中A/G比值依次明显降低。急性乙型肝炎组和轻度慢性肝炎组的蛋白电泳各项指标均无明显变化。前白蛋白含量在急性乙型肝炎、轻度慢性肝炎、重度慢性肝炎、肝炎肝硬化和原发性肝癌组均明显降低。结果提示,蛋白电泳图谱随着乙型肝炎病毒感染的不同阶段会发生相应变化。A/G能够反应乙型肝炎病毒感染的中晚期进展,对乙型肝炎的诊断,治疗以及病情转归具有重要意义。     

用于双向电泳的组合式电泳槽

蛋白质分析中常用的双向电泳存在不能同时进行多个样品比较的局限性。1978年Anderson发明的ISO-DALT系统同时可以进行12块板分析,大大提高了功效,只是目前进口仪器价格昂贵。为此我们参考国外产品和资料制作了一种简易的组合式电泳槽,其结构见图1。     

黑叶猴正常血清蛋白的电泳分析

国内外有关灵长类研究的报道甚多,但是黑叶猴(Presbytis francoisi) 正常血清蛋白各组分的测定数据尚未见报道。本文采用醋酸薄膜电泳对P.francoisi的正常血清进行分离分析,现将正常测定值报告如下。 方法:醋酸薄膜电泳,pH8.6 Barbitone-Barbitone Sodium Beffer,离子强度0.05,电压200V;电泳时间1小时,氨基黑10B染色。样品为正常P.francoisi血清,血样27个。用0.4NNaOH于37℃水浴洗脱;721型分光光度计     

结肠癌蛋白质双向电泳技术的建立

目的:建立结肠癌13cm和24cm非线性分离系统的2-D图谱,分析比较两者的分辨率.方法:提取结肠癌总蛋白,用pH3-10非线性干胶条对样品进行等电聚焦分离,并分别使用13cm和24cm电泳系统进行双向电泳,考马斯亮蓝G250染色,图像分析,比较对比两组2-D图谱,量化分析两种系统的分辨率差异.结果:在等点电3-10,分子量20-170 kD范围内分别分离得到蛋白质斑点873个(13 cm电泳系统)和1349个(24cm电泳系统).对于24cm电泳系统,1 mg蛋白质上样量的电泳图谱清晰,分辨率较好.结论:成功建立了高分辨率、简便易控的结肠癌蛋白质组双向电泳技术平台.     

植物叶片蛋白质的双向电泳分析

本文介绍一种提取植物叶片蛋白质的方法及电泳分析条件,可以很好地用来分析绿色组织中的全蛋白质组分。     

牛血清蛋白与纳米金颗粒相互作用的研究

为了研究纳米颗粒与蛋白质的相互作用原理,我们选取纳米金颗粒及牛血清蛋白为材料,通过牛血清蛋白与纳米金颗粒的物理吸附作用,结合蛋白酶K酶切、SDS洗脱以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测的方法,我们了解到,纳米颗粒与蛋白质的结合主要是由蛋白质中的某一段特定的序列结合在纳米颗粒的表面所导致的,该结果的发现不仅对纳米颗粒在生物体内广泛的应用奠定了理论基础,对功能性纳米颗粒在生物体内功能的发挥也是至关重要的。     

粘度法研究牛血清蛋白蛋白的溶液行为

经粘度法测量证明牛血清白蛋白在ＮａＣｌ,ＫＳＣＮ和ＫＩ３种盐溶中的流体力学行为有较大差别,并按经验公式由粘度数据计算了表观分子轴比较和分子体积,它们也随盐的种类不同而相应变化,     

适用于双向电泳的米曲霉孢子破壁方法研究

为探究米曲霉(Aspergillus oryzae)孢子适用于双向电泳的最佳破壁方法,采用5种不同的破壁方法对米曲霉孢子进行破壁,用血球计数板进行破壁率计算,Bradford方法测定释出的可溶性蛋白含量,并进行双向电泳可行性验证。结果表明,在普通光学显微镜下,破壁后的米曲霉孢子多为碎片,极少数为孢壁内空圆球。5种破壁方法中石英砂研磨+超声、液氮研磨、MP·Fast-prep均质器法在孢子浓度较低(107个/m L)时破壁效果较佳,但是随着孢子浓度的不断提升(109个/m L),只有均质器法能保证较高的破壁率,破壁率高达90%,且适用于双向电泳的蛋白质提取。     

牛血清蛋白对胰蛋白酶消化叶绿体膜的修补作用

1.牛血清蛋白对被胰蛋白酶消化过的叶绿体光还原 DCIP 的活性有恢复作用。洗涤对经牛血清蛋白修补的胰蛋白酶消化叶绿体的 DCIP 光还原没有影响。说明胰蛋白酶消化后,DCIP 还原位置的蛋白质受损,牛血清蛋白有修补作用。2.CCCP 对胰蛋白酶诱导产生的抑制特性变化可以被牛血清蛋白所逆转。3.牛血清蛋白对胰蛋白酶诱导的叶绿体基粒片层松散现象有部分恢复作用。4.牛血清蛋白对胰蛋白酶诱导的叶绿体光谱在500—640毫微米处吸收下降没有恢复作用。本文提出两个假设:(1)叶绿体膜上的蛋白质存在有微区域性的差异;(2)在类囊体膜上存在有由蛋白质构成的“门”和“通道”的组织。     

拟南芥蛋白质组研究中双向电泳技术条件的优化

双向电泳技术是蛋白质组学研究中的关键技术,是目前分辨率最高的工具之一.而提高双向电泳图蛋白质点的数目和分辨率,可以提高蛋白质组技术平台的信息完整性.通过对拟南芥双向电泳技术过程中的适当改进,如蛋白质的提取与溶解方法、上样量和聚丙烯酰胺凝胶浓度,加入硫脲,硫代硫酸钠等,对拟南芥双向电泳技术进行了优化,提高了双向电泳图谱的蛋白质点数目与分辨率.