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用猫肾传代细胞从发病虎的病料中分到了一株杯状病毒粒子样病毒。该病毒大小为35~39nm、无囊膜、在胞浆中病毒前体呈晶格状排列,抗乙醚、不能被5-IUDR所抑制,能被来源于标准疫苗的猫传染性鼻-结膜炎病毒(或杯状病毒Feline calicivirus,FCV)抗血清所中和,人工感染猫出现典型的FCV感染症状。RT-PCR能扩增出与设计值相符的电泳带,PCR产物直接测序结果与Genebank发表的F 相似文献
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了解北京地区猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)毒株特点,为猫疱疹病毒Ⅰ型的进一步研究及对猫的感染预防控制奠定基础。经特异性PCR检测为FHV-1阳性临床猫眼鼻拭子,经过处理,接种CRFK细胞,通过细胞培养分离病毒。通过间接免疫荧光试验、电镜形态观察、病毒毒力测定及基因序列分析等对分离株进行鉴定。PCR检测FHV-1阳性的14只猫眼鼻拭子接种CRFK细胞,有6只猫样本能使CRFK细胞发生圆缩、拉网集聚等病变;6个样本接种的CRFK病变细胞滴片进行免疫荧光试验,均产生绿色荧光反应;经传代培养,有5株分离株能够稳定传代,其中有2株弱毒,3株强毒;电镜下5株分离株均可见直径100~160nm的球型病毒粒子;5株分离株与FHV-1标准株C-27及2个不同公司来源疫苗株gB、gD基因核苷酸比较同源性均为99%以上。实验室成功分离保存5株能稳定传代的FHV-1毒株,5株分离株与FHV-1标准株及2个疫苗株亲缘关系很近。 相似文献
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猫致死性全身系统性疾病(Virulent systemic disease, VSD)由猫杯状病毒高致病性毒株(Virulent systemic feline calicivirus, VS-FCV)引起。患猫感染后表现为全身性症状,累及多个器官组织,引起高致死率。由于尚未发现VS-FCV相应的临床和遗传标志物,且疫苗免疫效果有限,给猫杯状病毒的防治带来了新的挑战。本文通过综述VS-FCV引起的流行病学特征、临床特点、病原学特性和生物学特性方面的研究进展,对该毒株的判定方法进行讨论,以期为其临床诊断和相应疫苗的研发提供理论依据。 相似文献
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为构建能表达FPV VP2蛋白的重组犬2型腺病毒(CAV-2)载体.首先用PCR方法从FPV GT-2株细胞培养物中扩增出了VP2蛋白基因,将其克隆到真核表达质粒pVAX1中构建了含有FPV vp2基因的表达盒(CMV-VP2-PolyA),将该表达盒酶切后定向克隆到含有CAV-2 E3区的穿梭质粒pVAX△E3中,构建出pVAX△E3VP2.用Sal I+Nru I双酶切pVAX△E3VP2,回收含有目的基因表达盒部分,将其定向克隆入含有CAV-2全基因组的骨架质粒pPoly2-CAV-2中,构建了重组质粒pCAV-2-FPV-VP2.Cla I+Asc I酶切pCAV-2-FPV-VP2释放出重组基因组,以此转染MDCK细胞,获得了重组病毒CAV-2-VP2.该重组病毒能使MDCK细胞产生腺病毒样细胞病变.Western blot检测证实,该重组病毒能表达具有免疫学活性的VP2蛋白.该重组病毒可以有效地诱导免疫猫产生抗FPV和CAV-2抗体.本实验表明该重组病毒有可能成为一个FPV的疫苗株. 相似文献
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猫肾F81传代细胞中犬细小病毒原位PCR检测方法 总被引:1,自引:0,他引:1
《中国实验动物学报》2001,9(3):146-149
目的建立在猫肾F81细胞中犬细小病毒原位PCR的检测方法.方法在猫肾F81细胞上感染犬细小病毒,设计特异性引物,用直接原位PCR法在染毒12h,24h,48h细胞片上检测出犬细小病毒,并与常规免疫组化的方法进行了比较.结果在染毒48h的细胞片上,用阳性记分法将两种检测方法得到的阳性细胞进行统计比较,差异极显著(P<0.001),用原位PCR法所得出的阳性率高.结论原位PCR法检测犬细小病毒具有敏感性高和组织定位的优点. 相似文献