离子束诱变粟酒裂殖酵母产辅酶Q10的初步研究

辅酶Q10(coenzyme Q10,CoQ)对心脏充血性病人有较好的疗效,是临床常用药物之一.实验研究了离子束诱变粟酒裂殖酵母对提高CoQ10的产量的影响与作用.实验筛选出六株突变菌株,研究了突变株生理生化特性.结果表明:突变菌株的CoQ10产量都有不同程度的提高,其中编号为N1菌株产量达6.9344 mg/L,是对照菌株的10倍多,最低的N2菌株的产量也是对照菌株的1.3倍.     

微波结合紫外诱变选育辅酶Q_(10)高产菌株

以根瘤土壤杆菌LNUB335为出发菌株,以维生素K3和NaN3双抗性为筛选标记,在根瘤土壤杆菌中首次利用紫外线及微波联合诱变处理,获得1株生产性能比LNUB335显著提高的突变株ARN007,其CoQ10产量为12.01mg/L,较出发菌株提高68.67%,每克干细胞含CoQ102.46mg,较出发菌株提高38.20%。通过传代实验证明该突变株的遗传性稳定,可作为进一步研究的实验菌株。     

辅酶Q_(10)产生菌发酵条件的优化

对辅酶Q10生产菌株鞘氨醇单胞菌YZ0803的发酵条件进行优化,确定发酵时间为90 h,250 mL摇瓶装液量为30 mL。培养基组成(质量分数,下同):葡萄糖1.5%,淀粉2.5%,黄豆饼粉2.5%,(NH4)2SO40.5%,NaCl0.03%,K2HPO40.02%,MgSO40.005%。优化后的辅酶Q10产量达到192 mg/L,比采用基础培养基的产量(138mg/L)提高了39.13%。     

羟胺对粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)的诱变效应

羟胺(HA)引起S.pombe的失活作用因菌株而异,实验用两株突变体的失活曲线皆非指数曲线。钠离子对HA所处理的细胞不仅沒有保护作用,反而会引起细胞损伤。HA的两种独立的效应——失活与诱变效应在以S.pombe为材料的实验里沒有观察到。相反,低浓度HA(0.01M)既能引起S.pombe细胞失活,又有诱变作用。 HA对4类19株NA-生化突变体的回复诱变材料证明:有些NA-生化突变体的突变位点之碱基对为GC,另外一些突变体目前则尚难确定,有待进一步确证。HA同样诱发S.pombe野生型菌株产生大量正向突变体。因而它可供作选育生产菌株的诱变剂。     

类球红细菌添加前体物产辅酶Q_(10)的工艺优化

目的:考察摇瓶与发酵罐水平下类球红细菌CU20-9产辅酶Q10添加前体物质的最优配比。方法:通过正交试验优化发酵前体配比,考察摇瓶发酵多种前体物质的添加对辅酶Q10产量的影响,并利用发酵罐进行中试规模实验。结果:优化后发酵前体配比为维生素B1 10 mg/L、乙酸钠100 mg/L、对羟基苯甲酸20 mg/L、花生油0.01%。结论:前体添加及优化配比后,摇瓶及中试发酵水平下辅酶Q10的产量均有显著提高。     

胞外Ca~(2 )促进粟酒裂殖酵母细胞增殖作用的研究

研究了胞外Ca~(2 )对粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomycespombe）细胞增殖的影响。实验结果首次证明胞外Ca~(2 )能明显促进粟酒裂殖酵母的增殖,其作用方式主要是缩短了粟酒裂殖酵母的生长延滞期。当起始的接种细胞密度升高至使粟酒裂殖酵母的生长延滞期消失时,外加Ca~(2 )的作用也消失。EGTA可抑制粟酒裂殖酵母的细胞增殖,而外加Ca~(2 )能够有效消除EGTA的抑制作用,进一步说明胞外Ca~(2 )是粟酒裂殖酵母增殖所必需的。此外,外加EGTA除了可延长细胞增殖的延滞期外,还能显著降低指数期细胞分裂的速率以及达到稳定期时培养液中的细胞总数,提示缺Ca~(2 )还影响粟酒裂殖酵母细胞的分裂。     

利用紫外诱变选育辅酶q10菌种的研究

微生物育种指的是运用遗传学、诱变、杂交等原理,对负有特定作用的微生物菌种开展筛选、改造,从而得到符合某种需要的技术。本文对微生物菌种选育技术中的紫外诱变来选育辅酶q10高产菌株进行了一系列的试验和研究。。     

酿酒酵母和粟酒裂殖酵母细胞增殖对Ca~(2 )依赖性的比较研究

同样实验条件下Ca~(2 )对S.cerevisiae的增殖没有影响,但能明显促进S.pombe的增殖;Ca~(2 )螯合剂EGTA对S.cerevisiae的增殖没有明显抑制作用,但对S.pombe的增殖有显著的抑制作用,回加Ca~(2 )能够有效消除EGTA的抑制作用;而非特异性螯合剂EDTA虽然对两类酵母细胞的增殖都有抑制作用,但Ca~(2 )却不能消除EDTA的抑制作用,这样就直接指明了两类酵母对胞外Ca~(2 )的依赖性是不一样的。由于S.cerevisiae细胞的增殖速率比S.pombe细胞要快近3倍,且与转化细胞或肿瘤细胞具有类似的细胞增殖不依赖于胞外Ca~(2 )的特性,说明研究胞外Ca~(2 )对这两类酵母细胞增殖不同作用效应的机制,对搞清细胞周期失控与细胞转化之间的关系有重要的意义。     

提高辅酶Q_(10)口服生物利用度的方法与思考

难溶性药物口服生物利用度较低一直困扰着该类药物的发展。尽管随着制剂技术及辅料的不断开发与发展,使得此问题有一定的改善,但仍然达不到人们预期的目标。近几年,药物纳米化成为国内外提高生物利用度的热门方法,虽然该方法存在着一定的优势,同时也存在一些问题。另一种提高口服生物利用度的主流方法为使用生物粘附材料,增加制剂在生物体内的粘附性。本文以辅酶Q10为代表药物,阐述了药物纳米化与增加生物粘附性两种方法结合,提高其口服生物利用度,为解决其它相同类型药物的问题提供了新思路。     

光合细菌产辅酶Q10发酵条件的研究

利用均匀设计原理进行实验设计 ,对光合细菌R .capsulatusMT1131产辅酶Q10培养基配方及培养条件进行优化 ,结果当培养基中酵母膏质量浓度为 3 .13g·L- 1 ,硫酸铵 0 .8g·L- 1 ,Mg2 + 0 .6 4g·L- 1 ,Fe2 + 45 .2mg·L- 1 ,Mn2 + 18mg·L- 1 ,Co2 + 16mg·L- 1 ,培养基初始pH值为 7.0时 ,于 30℃ ,光照强度为 2 0 0 0Lx条件下培养 4天后 ,菌体中辅酶Q10质量浓度由 15 .2 13mg·L- 1提高至 2 0 .36 5mg·L- 1 ,产量提高约 33.87%。     

Role of various growth media on shinorine (mycosporine-like amino acid) concentration and photosynthetic yield in <Emphasis Type="Italic">Anabaena variabilis</Emphasis> PCC 7937

The induction of shinorine (mycosporine-like amino acid (MAA)) in Anabaena variabilis PCC 7937 was studied in various culture media (BGA⁻, BGA⁺, BG11 and Allen and Arnon’s). The objective was to select the most appropriate medium that can support the highest induction of MAAs and can be used for industrial production of these UV protective substances from cyanobacteria. Also, in vivo photosynthetic activity was measured under shinorine inducing conditions in all media. The shinorine content and photosynthetic activity (yield) were highest (2948.73 ± 61.13 nmol/g dry wt and 0.47 ± 0.01, respectively) in BG11 medium in comparison to others after 72 h of UV radiation. After the same duration of irradiation shinorine content was 1076.08 ± 21.77, 1320.07 ± 98.19 and 554.64 ± 16.47 nmol/g dry wt in BGA⁻, BGA⁺, and Allen and Arnon’s media, respectively. Thus, BG11 medium can be used for mass production of MAAs from cyanobacteria.     

西洋参不同部位皂苷类成分的指纹图谱研究

以西洋参（Panax quinquefolium L.）为材料,分别取主根、须根、芦头、参皮、参芯、茎、叶、花序、果实和芽孢等不同部位为材料,以高效液相法检测其皂苷类成分。利用系统聚类分析法和中药色谱指纹图谱相似度评价系统对各部位的皂苷种类和含量进行分析,将西洋参的不同部位按照成分组成进行了分类。     

太行菊不同器官中绿原酸和4种黄酮类物质含量研究

为深入研究我国特有植物太行菊,采用高效液相色谱法(HPLC),以ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6×150 mm,5μm)为分析柱,甲醇-0.01%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温25℃;对太行菊和传统药用野菊不同器官的绿原酸、芦丁、槲皮素、木犀草素、芹菜素含量进行测定。此外,以芦丁为对照品,采用硝酸铝络合紫外分光光度法,以没食子酸为对照品,采用福林酚法,分别对太行菊和野菊不同器官中总黄酮和总多酚的含量进行研究。结果表明,基于上述HPLC检测方法,五种化合物的质量浓度在5.94～178.2、4.36～130.8、8.96～268.8、4.08～122.4、2.98～25.33 mg/L范围内与峰面积线性关系良好,相关系数r均大于0.9993,方法的精密度、重复性、稳定性及平均加样回收率试验结果均满足分析要求。太行菊叶中五种化合物的总含量高于其花、茎和野菊对应器官,与太行菊和野菊不同器官中总黄酮和总多酚含量分析结果一致。因此,太行菊整个植株,尤其是叶和花的开发利用潜力显著。     

The First Report on Excellent Cycling Stability and Superior Rate Capability of Na3V2(PO4)3 for Sodium Ion Batteries

Sodium ion batteries are attractive for the rapidly emerging large‐scale energy storage market for intermittent renewable resources. Currently a viable cathode material does not exist for practical non‐aqueous sodium ion battery applications. Here we disclose a high performance, durable electrode material based on the 3D NASICON framework. Porous Na₃V₂(PO₄)₃/C was synthesized using a novel solution‐based approach. This material, as a cathode, is capable of delivering an energy storage capacity of ～400 mWh/g vs. sodium metal. Furthermore, at high current rates (10, 20 and 40 C), it displayed remarkable capacity retention. Equally impressive is the long term cycle life. Nearly 50% of the initial capacity was retained after 30,000 charge/discharge cycles at 40 C (4.7 A/g). Notably, coulombic efficiency was 99.68% (average) over the course of cycling. To the best of our knowledge, the combination of high energy density, high power density and ultra long cycle life demonstrated here has never been reported before for sodium ion batteries. We believe our findings will have profound implications for developing large‐scale energy storage systems for renewable energy sources.     

利用微波辅助萃取技术提取五味子果实中五味子醇甲的研究

采用乙醇和水作为萃取剂,研究了用微波辅助萃取的方法从五味子果实中萃取五味子醇甲。以不同的萃取时间、萃取功率、萃取溶剂/基质比作为参数进行实验,利用高效液相色谱(HPLC)作为五味子醇甲的检测手段。实验结果表明:在萃取产率上,乙醇的萃取效果优于水(乙醇的萃取产率0.72%,水的萃取产率0.47%),但是在萃取选择性方面,水作为萃取剂优于乙醇。以乙醇和水作为溶剂的最优微波辅助萃取条件是:温度接近溶剂的沸点(乙醇设为72℃,水设为95℃),微波功率350 w,萃取时间5~8 min,萃取液固比12:1。萃取时间的延长和微波功率的增加都会导致五味子醇甲的萃取产率下降。     

Augmentation of Antigen-Specific Antibody Production and IL-10 Generation with a Fraction from Rooibos (Aspalathus linearis) Tea

Rooibos tea was extracted with boiling water. The aqueous extract was chromatographed in a Diaion HP20 column eluted stepwise with water, 25%, 50% and 75% (v/v) aqueous methanol, and 100% methanol. The water eluate (fraction A) showed an augmenting effect on anti-ovalbumin (anti-OVA) immunoglobulin M (IgM) production in OVA-stimulated murine splenocytes in vitro. Fraction A also showed a strong augmenting effect on interleukin-10 generation in murine splenocytes. Furthermore, continuous ingestion of fraction A was found to increase the anti-OVA IgM level in the sera of OVA-immunized mice.     

乙醇系统HPLC分析PTC－氨基酸的条件优化

首次报道用乙醇系统分析ＰＴＣ－氨基酸的新方法中各衍生物获得最佳分离的建立过程。ＰＴＣ－氨基酸衍生后溶于Ａ溶液,然后进样于４μｍＮｏｖａＰａｋＣ１８柱（３．９ｍｍ×１５０ｍｍ）。系统的优化步序包括全面调控流动相的ｐＨ值与ＴＥＡ浓度、乙醇梯度程序、柱温等诸多影响ＨＰＬＣ色谱行为的因素。最适条件为：Ａ溶液含０．１４ＭＧ酸钠、０．７５ｍｌ／ＬＴＥＡ、ＰＨ６．３５;Ｂ溶液为１００％乙醇;柱温３０℃。通过优化的乙醇梯度最终在约４４ｍｉｎ内将１５种ＰＴＣ－氨基酸很好地分离。此法可用于替代代表新科技水平的ＰＴＣ－氨基酸乙腈分析系统。     

液相色谱/离子阱质谱法研究何首乌中糖苷类化合物

采用液相色谱／离子阱质谱（HPLC／IT-MS）联用技术研究何首乌中糖苷类化合物,并对大黄素甲醚糖苷和大黄素糖苷的分子离子或准分子离子的离子化机理进行探讨。实验采用反相C18色谱柱,二元线性梯度洗脱,分离出12个主要成分。利用质谱的诱导碰撞解离技术获得碎片裂解信息,结合文献鉴定出9种糖苷的化学结构,其中顺式-2,3,5,4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-毗喃葡萄糖苷、决明酮-8—O-（6＇-O-乙酰基）-β—D-吡喃葡萄糖苷和大黄素甲醚-8-O-（6＇-O-乙酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷为首次鉴定。     

Human cancer-associated gangliosides defined by a monoclonal antibody (IB9) directed to sialosyl alpha 2 leads to 6 galactosyl residue: a preliminary note

A new monoclonal antibody (IB9) was prepared by hybridoma technique directed specifically to sialosyl alpha 2 leads to 6 galactosyl residue. With this reagent, accumulation of two major gangliosides in human colonic and liver adenocarcinoma has been detected, and these gangliosides were isolated and characterized as structures A and B (below). Another ganglioside with a ceramide nonasaccharide structure, which reacted to anti-X-hapten antibody after desialylation, was also isolated and partially characterized. (formula; see text) These gangliosides were absent or present in very small quantity in normal tissue and may represent human cancer-associated markers.