黄瓜子叶节离体培养物花分化Ca^2＋敏感期的研究（简报）

Cotyledonary nodes of cucumber cultured on calcium-free medium for 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6d respectively, were transferred to medium with 6.0 mmol/L CaCl2 for 24h, then returned to calcium-free medium. Cotyledonary nodes cultured on calcium-free or 6.0 mmol/L CaCl2 medium for all time, were taken as controls. Results showed that cotyledonary nodes were transferred to 6.0 mmol/L CaCl2 medium for 24h during 0-3d after the beginning of culture, percentage of floral bud formation at cotyledonary nodes was increased significantly. Transferring cotyledonary nodes on the 3d day after the beginning of culture was achieved best effect, percentage of floral bud formation was up to 34.3%. We deduced that the calcium sensitive period during floral differentiation of cucumber cotyleddonary node cultured in vitro may be 0-4d after the beginning of culture.     

Ca2+对黄瓜子叶离体培养物花芽分化的影响

黄瓜子叶离体培养物分化培养 0～ 8d期间 ,添加Ca2 有利于花芽分化 ,花芽分化率可从Ca2 0mmol/L的 (7.9± 5 .6 ) %上升到Ca2 6mmol/L的(31.7± 4.0 ) % ;0～ 2d和 2～ 4d无钙脉冲处理不利于花芽分化 ,高钙脉冲处理的花芽分化率比对照略高 ;4～ 6d和 6～ 8d高钙脉冲不利花芽分化 ,而无钙脉冲处理使花芽分化率上升很多。尤其是在 4～ 6d ,高钙处理使花芽分化率从 (2 2± 1.5 ) %下降到 (15 .7±3 .5 ) %。而无钙处理使花芽分化率从 (2 2 .4± 1.4) %上升到 (4 3± 3 .5 ) %。表明 0～ 8d期间不同时间段对Ca2 的需求是有差别的。相关性分析表明 :0～ 8d期间外源Ca2 影响花芽分化率与总芽中花芽比例极显著相关 ,提示Ca2 可能影响子叶向花芽或营养芽分化的趋势。本文结合已报道的黄瓜子叶培养物花原基形成的时程 ,分析了Ca2 对花原基形成和分化的影响     

黄瓜离体子叶切块培养直接分化花芽

４８小时龄黄瓜幼苗的子叶切块接种于附加２．０ｍｇ／ＬＢＡ及１．０ｍｇ／ＬＡｇＮＯ３的修改ＭＳ培养基上,培养约６０天后在子叶切块的近轴端可直接形成雄花芽,其频率达７．７％。     

黄瓜离体子叶节花芽和营养芽分化中CFL基因的表达

CFL基因是从黄瓜中克隆到的拟南芥LEAFY(LFY)同源基因.以离体黄瓜子叶培养物成花为实验体系,利用mRNA原位杂交技术对CFL基因在花芽和营养芽分化过程中的时空表达进行了分析.结果如下:在花芽分化过程中,CFL基因在花原基形成、花器官原基分化及各轮花器官形成之初强表达,在花器官形成以后表达减弱或不表达;在营养芽分化过程中,CFL基因在分生组织、叶原基和幼叶中有明显表达,在成熟组织中不表达.结果说明CFL基因的表达在黄瓜子叶节花芽和营养芽分化中原基的分化形成是必需的.结果提示CFL基因可能参与细胞分裂调控和启动、营养性分生组织向花分生组织转变等过程.     

骨骼肌内质网Ca2+泵转运Ca2+的结构基础

Ca2 泵(Ca2 -ATPase)是调节细胞内Ca2 浓度的重要蛋白质之一.Ca2 泵在转运Ca2 的过程中经历一系列构象变化.其中,E1状态为外向的Ca2 高亲和状态,E2状态则为内向的Ca2 低亲和状态.目前,骨骼肌内质网Ca2 泵转运Ca2 过程中的几个中间状态,包括E1-2Ca2 ,E1-ATP,E1-P-ADP,E2-Pi和E2状态的三维晶体结构已经解析.介绍这几种状态的晶体结构,并分析Ca2 泵在执行功能过程中结构与功能的关系.     

Ca2+对黄瓜子叶离体培养物花芽分化的影响

黄瓜子叶离体培养物分化培养0～8d期间,添加Ca2+有利于花芽分化,花芽分化率可从Ca2+0mmol/L的(7.9±5.6)%上升到Ca2+6mmol/L的(31.7±4.0)%;0～2d和2～4d无钙脉冲处理不利于花芽分化,高钙脉冲处理的花芽分化率比对照略高;4～6d和6～8d高钙脉冲不利花芽分化,而无钙脉冲处理使花芽分化率上升很多。尤其是在4～6d,高钙处理使花芽分化率从(22±1.5)%下降到(15.7±3.5)%。而无钙处理使花芽分化率从(22.4±1.4)%上升到(43±3.5)%。表明0～8d期间不同时间段对Ca2+的需求是有差别的。相关性分析表明0～8d期间外源Ca2+影响花芽分化率与总芽中花芽比例极显著相关,提示Ca2+可能影响子叶向花芽或营养芽分化的趋势。本文结合已报道的黄瓜子叶培养物花原基形成的时程,分析了Ca2+对花原基形成和分化的影响。     

Ca2+与CaM对大白菜离体叶圆片Ca2+-ATPase和β-1,3-葡聚糖合成酶活性的影响（简报)

经 Ｃａ~（２＋）与 ＣａＭ促进剂和抑制剂处理的大白菜离休叶圆片,其细胞膜 Ｃａ~(２＋)ＡＴＰａｓｅ活性同时受Ｃａ~（２＋）与ＣａＭ的调节,而β－１,３－葡聚糖合成酶活性仅受 Ｃａ~（２＋）的调节,与 ＣａＭ无关。     

离体培养黄瓜子叶诱导雌花的研究

采用添加Spd和IAA的MS培养基培养离体黄瓜子叶,研究了Spd和IAA对雌花诱导的协同作用,及昼夜温差、培养基中N素和pH值对雌花诱导的影响。结果表明,分别添加Spd、IAA时的雌花诱导率和单株雌花数偏低或为0,12 mg·L^-1 Spd与0.01mg·L^-1 IAA 配合时的诱导效果明显高于单独处理的,而对照组未见雌花,说明Spd和IAA对雌花诱导的协同作用显著。在0、2、6、10℃昼夜温差,60、70、80、90 mmol·L^-1的N素含量和pH 5.4、5.8、6.2、6.6的培养条件下,70 mmol·L^-1 N、6℃温差和pH 6.2时的雌花诱导效果较好,表明适当提高昼夜温差、培养基中N素和pH值有利于黄瓜子叶的雌花诱导。     

心肌细胞核Ca2+库特点及其调节的离体研究

研究核外Ca~(2+)浓度对核Ca~(2+)的影响,及细胞核Ca~(2+)摄取和释放的关系,以探讨核Ca~(2+)转运的调节机制。采用差速离心和密度梯度离心法分离纯化心肌细胞核,以Fluo-4/AM荧光指示剂负载心肌细胞核,应用激光共聚焦扫描显微镜和荧光分光光度计进行观察和测定。结果显示,分离纯化的成年大鼠心肌细胞核内自由[Ca~(2+)]随着核外[Ca~(2+)]的增加而逐渐增加,孵育液[Ca~(2+)]为1000 nmol/L达高峰,但二者增加的程度并不一致,之后随核外[Ca~(2+)]浓度的增加而呈降低趋势。ATP和100—600nmol/L的核外游离Ca~(2+),使心肌细胞核显示核被膜腔Ca~(2+)荧光,ATP和1000nmol/L的核外游离Ca~(2+)则进一步引起核浆内的Ca~(2+)荧光强度升高。荧光染色观察可见IP_3受体染色主要位于核内膜,而钙泵和ryanodine受体染色主要位于核外膜。IP_3和Ryancodine使核Ca~(2+)短暂升高1.68倍和1.93倍(P<0.001),而钙泵抑制剂Thapsigargin和IP_3受体抑制剂Heparin则分别使核Ca~(2+)降低64%和35.6%(p<0.05)。ryanodine使IP_3升高的核Ca~(2+)显著回落至正常水平以下(p<0.001)。Thapsigargin不能阻断IP_3和Ryanodine所致的核Ca~(2+)释放增加(p<0.05),但事先采用钙泵抑制剂Thapsigargin预处理心肌细胞核,则能显著的阻断IP_3和Ryanodine所致的核Ca~(2+)升高作用(Ca~(2+)释放作用)(p<0.05)。结果提示大鼠心肌细胞核可能也是细胞内的钙库之一,心肌细胞核上存在Ca~(2+)-ATPase、ryanodine受体和IP_3受体等Ca~(2+)转运系统,可能参与核Ca~(2+)摄取和释放的调节。     

离体黄瓜子叶节花芽分化与内源激素及多胺的关系

用高效液相色谱法(HPLC)测定了黄瓜子叶节花芽分化期(0-6天)内源激素及多胺的变化。结果显示,子叶培养0-2天生长素(IAA)、赤霉素(GA_3)、玉米素(ZT)、脱落酸(ABA)等4种内源激素均明显下降,4-5天略有上升,表明0-2天IAA、GA_3和ABA的剧降有利于花原基形成,3-5天较高的ZT含量有利于花器官原基的形成。除腐胺(Put)外,精胺(Spm)、亚精胺(Spd)、尸胺(Cad)在0-1天均下降,1-4天上升,4-5天再下降,Put在0-1天急剧上升,而后持续下降,表明高水平的内源多胺总量和Put可能有利于花原基分化,2天后Spm含量上升有利于花器官原基分化,而Cad含量变化可能是区别花芽和营养芽分化的特征之一。     

生长素极性运输抑制剂(TIBA)对烟草离体花柄花芽分化的影响

在只含6-BA(2mg/L)的MS培养基上,烟草花柄外植体形态学基端膨大,上着生再生花芽,而花柄中部大多都形成愈伤组织。添加IAA(2,10,20 mg/L)后,花柄基端膨大的现象依然存在,但再生花芽的分布并不限于基端,在花柄中部、顶端都可见再生花芽。花柄外植体中部愈伤组织的形成也随添加的IAA和IAA浓度升高而受到抑制。在上述培养基中添加生长素极性运输抑制剂TIBA后,无一花柄中部能形成愈伤组织,再生花芽的形态变化也很大,有具锥形花柄的花芽、喇叭叶和一些难于确定由何种器官衍生而来的喇叭状器官。这些异于正常形态的器官发生,显然与花柄外植体中生长素极性运输受抑制有关,本文对它们的形成机理作了一些推测。     

黄瓜去顶苗直接成花的形态学研究

本文对黄瓜0—7天幼苗及去顶后0—8天诱导花芽分化苗与诱导营养芽分化苗的子叶节进行了系统石蜡切片观察,未发现0—7天幼苗的子叶叶腋存在潜伏芽。去顶后1—2天在子叶叶柄基部与切口之间的表皮下细胞分裂形成突起,去顶后6天诱花苗与诱芽苗的突起表现出形态差异,诱花苗突起的上端变钝,而诱芽苗突起的上端成尖锥状。去顶后8天诱花苗在子叶叶柄与切口之间形成完整的花芽。另发现有少量花芽起源于切口处细胞。对去顶后0—6天诱花苗与诱芽苗的子叶节还进行了电镜扫描观察,观察结果与石蜡切片基本一致。     

钙和钙调素在梨花芽分化中的动态研究

花芽分化是果树最重要的生理过程之一,而有关钙离子（Ｃａ２＋）和钙调素（ＣａＭ）的研究是当今生理学研究的热点。许多的研究表明,Ｃａ２＋在植物生理代谢的过程中起着越来越重要的调控作用,而它的这些作用是通过ＣａＭ来实现的。当细胞受到内外因素的刺激之后,细胞的Ｃａ２＋浓度会增加,然后与ＣａＭ结合,使得一系列酶系统活化,将刺激的信息转化为具体的生理生化反应,从而左右着代谢的方向〔１～３〕。已有一些报道表明,Ｃａ２＋和ＣａＭ可能参与了一些植物的花芽分化过程〔４～７〕,但目前直接将Ｃａ与ＣａＭ结合起来研究植物…     

低温逆境中黄瓜幼苗细胞内钙离子水平变化的细胞化学研究

采用改进的焦锑酸钙沉淀的细胞化学方法,探讨了Ca~(2 )在黄瓜幼苗细胞中超微结构定位分布及在低温逆境条件下Ca~(2 )水平的动态。结果表明:在适宜温度下生长的黄瓜幼苗,其细胞中Ca~(2 )主要定位于液泡及细胞间隙内,说明液泡是植物细胞内的主要钙库;并显示质外体中存在大量的Ca~(2 )分布。当黄瓜幼苗在1℃下冷胁迫28h后,质膜内侧钙沉淀颗粒明显增加,同时观察到液泡内Ca~(2 )分布变得比较集中,并趋向于液泡膜内侧。当幼苗在1℃低温下胁迫40h后,胞内Ca~(2 )水平进一步提高,尤其是质膜内侧及细胞核内出现较大的呈同心圆状的钙沉淀颗粒。作者认为,胞内Ca~(2 )水平的提高,尤其是质膜内侧及细胞核内局部区域Ca~(2 )密集分布,势必会引发一系列代谢过程的紊乱,最终导致幼苗的伤害或死亡。     

烟草花柄愈伤组织花芽分化的能力(简报)

来源于开花植株的外植体(如花柄、花序轴等)具有在离体培养条件下直接分化花芽的能力,这一现象已在数十种植物的组织培养中得到证实。但是,这种成花能力能否保留在由这些外植体形成的愈伤组织之中?已有报道在风信子、布罗瓦利亚花、石龙芮、大蒜、矮通泉草等值物的愈伤组织中得到无     

低营养条件下Paclobutrazol(PP333)对黄瓜去顶幼苗直接形成花芽的影响(简报)

植物开花机理是生物学中的一个基本问题,多年来人们进行过许多的研究,积累了大量的事实,然而对开花的机理仍然还不甚清楚。因而在利用原有实验系统的同时,有必要寻找更多简单,又便于分析的实验系统。Jullien等报告离体培养的大豆子叶节能直接产生花芽。我们在建立离体培养黄瓜子叶直接单独形成雄花或雌花的实验系统的过程中,发现黄瓜幼苗去除顶芽后在子叶节处也能直接形成花芽。这一现象有可能用于深入研究各营养器官和花启动间关系等问题,定将     

离体条件下花芽分化研究的概况

本文论述了在离体条件下,外植体生理状态及培养条件对外植体花芽分化的影响,概述了国内外在这方面的工作进展,并对离体条件下花芽分化的研究作了理论上和应用上的评价。     

大岩桐花萼切块离体培养直接再生花芽的形态观察(简报)

前文发现在基本培养基上添加赤霉素和细胞分裂素能促进离体培养的大岩桐花蕾直接再生花芽[1],后又发现细胞分裂素能协同赤霉素促进离体培养大岩桐花萼切块高频率直接再生花芽[2,3],所得结果提示,这可能是一个研究赤霉素和细胞分裂素在花分化发育中作用的良好实验系统。为了完善这一实验系统,明确离体培养的大岩桐花萼切块培养物直接再生花芽的起源以及花分化的形态进程是十分必要的。为此我们对离体培养大岩桐花萼切块的形态变化在体视显微镜下进行了系统观察,并进行了石蜡切片及电镜扫描观察。进行大岩桐(Sinningia speciosa Hiern)花萼切…     

柳叶烟草愈伤组织分化期间抗氰呼吸的改变

继代培养的柳叶烟草愈伤组织有明显的抗氰呼吸。交替途径的相对贡献约占总呼吸的29—38%;但仍以细胞色素途径为主,约占总呼吸的44—51%。接种在分化培养基上的愈伤组织在发生组织分化和芽原基形成期间,交替途径运行量占总呼吸的41—47%,承担呼吸电子传递的主要部分;而细胞色素途径只占总呼吸的29—32%。交替途径运行程度的增高可能与烟草愈伤组织的分化有一定相关性。