氨基酸定性分析技术的一些改进 Ⅱ.高压电泳高温层析双向纸上分离,小型滤纸层析和琼脂电泳

(1)本文以高压电泳和高溫层析分离氨基酸,可在10小时左右完成。甘氨酸与絲氨酸,組氨酸,精氨酸和賴氨酸的分离較双向层析为佳;但谷氨酸、門冬氨酸、谷氨酰胺与門冬酰胺尚需借第二向长时間层析才能分开。(2)以高溫层析溶剂系統作小型滤紙层析,可得高温层析图譜的縮影。小型滤紙层析的特点是样品和溶剂用量少,速度快,設备簡单,适合于大批样品同时并举之用。(3)利用pH8.8,离子強度0.025的巴比土緩冲液在琼脂板上进行DNP-谷氨酸,DNP-門冬氨酸,DNP-谷氨酰胺和DNP-門冬酰胺的电泳分离,效果很好,因此琼脂电泳法可作为末端分析的一种輔助技术,分辨上述4种DNP-氨基酸和驗証紙层析的結果。     

氨基酸定性分析技术的一些改进 Ⅰ.快速水解和高温滤纸层析

(1)提供了一种快速水解液,蛋白貭或多肽完全水解仅需20分鉀至2小时,其配制方法是:12NHCl:85%甲酸:水=2∶1∶1。水解温度160—180度。(2)提供了氨基酸高溫层析法及正丁醇:呲啶系統可在4小时內完成单向层析,10小时內完成双向层析,其溶剂系統各成分的比例如下: 酸性溶剂系統:(1)正丁醇:85%甲酸:水=15∶3∶2。(2)正丁醇:冰醋酸:95%乙醇:水=4∶1∶1∶2。溶剂(1)适用于单向层析和双向层析的第一向,溶剂(2)适用于单向层析。硷性溶剂系統:正丁醇:呲啶:60%乙醇:水=5∶1∶1∶1。此溶剂适用于双向层析的第二向。(3)高溫层析的温度有二种:(1)在40—45度进行(2)60度进行一半移室温完成。前者較易操作,重复性也較強。(4)引用了等的吲(口乃木)醌显色法,对氨基酸的分辨极有帮助,并发現一些氨基酸的衍生物或多肽也均显不同顏色。(5)經选择后的新华定性滤紙层析效果頗佳。     

纤维素板微量氨基酸的分离及几种显色方法的比较

氨基酸分析是研究蛋白质化学的最基本的实验技术之一。现在已经普遍地使用离子交换层析、纸层析、纸电泳、薄层层析等方法分离、分析氨基酸。其中自动化的离子交换层析方法分析具有快速、微量和准确等特点,但需要昂贵的仪器设备,在一般实验室里不易办到。纸层析和薄层层析的方法,设备要求简单,操作方便,操作熟练时也可达到定量的要求。也可以用纤维素薄层层析的方法分离分析氨基酸,并已用于尿和血样品以及其他蛋白质中的氨基酸测定。经我们初步摸索,使用一种小型的纤维素板层析,并将茚三酮试剂直接加入展层溶剂中,蛋白质经酸水解后,可得到完全分开的普通     

从薄层层析到天然产物工业制备层析的理论与实践

基于分离理论的共性,通过薄层层析优化难分离物质对的最佳分离条件并直接放大到植物天然产物的工业制备分离。本文对实际应用中的溶剂组成、溶剂强度、溶剂用量及溶剂再利用等问题作了详细论述。最佳溶剂选择性可通过不同溶剂系统在薄层板上所给难分离物质对的最大Rf比值确定;在正相硅胶层析中,主要极性溶剂决定了物质的洗脱顺序;洗脱剂中极少量强极性溶剂(O．5％)或pH值的改变可显著改善拖尾现象;根据Rf值和容量因子(K)及洗脱体积三者之间的关系,Rf在0．1～0．3为用于柱层析的洗脱溶剂强度的最佳范围。     

精氨酸纸层析鉴定的理想展开剂

本文通过大量筛选,找到一组溶剂系统,其溶剂组成为正丁醇∶醋酸∶乙醇∶水(8∶2∶2∶5)。该溶剂系统在纸层析中能有效地将精氨酸与赖氨酸和组氨酸分开,经多方面考察,我们认为该溶剂系统适宜于作精氮提取工艺中纸层析组份鉴定的展开剂。     

血清苯丙氨酸的纸层析测定法

本文报告一种改进的纸层析法,其原理为先将血清去蛋白质并脱盐,然后进行层析。溶剂系统为正丁醇:甲酸:水(15∶3∶2)。所得结果清晰,斑点也较集中。适用于苯酮尿病的诊断和随访;并可用于筛选,由于先天性代谢缺陷而引起的氨基酸代谢障碍和诊断,由于肾小管功能缺陷(先天性或后天性)所形成的氨基酸尿。     

一种快速、高效分离微生物转化产物5-氟尿苷的方法

使用一种有效的柱色谱方法分离微生物转化产物5-氟尿苷。该方法采用干燥柱真空层析和三种不同的溶剂系统,使获得的5-氟尿苷的纯度达98%,收率为92%。该方法适用于从酶反应混合物中分离核苷类似物。     

用DANS反应-聚酰胺薄膜层析-荧光扫描法测定大白鼠脑中氨基酸

本文介绍采用改进的DANS反应一聚酰胺簿膜层析一荧光扫描方法,分离了22种氨基酸,并对大鼠脑中六种氨基酸进行了超微量测定,此法简便、灵敏。     

逆相紙上层析分离高級脂肪酸

紙上层析也是属于分配层析方法之一,分配层析是根据有机物在两个互不相溶解的液相內的分配系数的不同而其——分开。紙上层析就是以滤紙及在滤紙上吸附的溶剂做固定相,另一种溶剂系統做移动相将試样展谱分离。其中以滤紙的吸附水和极性溶剂做     

油茶籽氨基酸成分分析

油茶籽醇提物经阳离子交换树脂分离;水提物经酸水解,双向纸层析分离;用氨基酸分析仪测定,油茶籽含有十五种游离氨基酸和八种水解蛋白质氨基酸,对动物由入氯化碳引起肝损伤,有促进恢复的作用,无毒性,可利用的药源丰富。     

氨基酸纸层析展层剂的改进

<正> 一、前言在利用离子交换树脂柱分离蛋白质水解液中的氨基酸时,常希望用单向纸上层析手段鉴定洗脱液中氨基酸的种类。然而目前使用的纸层析展开剂对于某些氨基酸的分离效     

HSV-1特异转移因子活性成分的化学本质

亲和色谱法分离TF_(HSV-1)特异活性成分,该成分在高效液相层析(包括离子交换层析和反相层析)产生一个紫外吸收峰,簿层层析后有一个荧光胺显色点而无254nm吸收点。在等电点聚焦分析中该成分为一条考马斯亮蓝染色带。凝胶层析测定特异成分的分子量为12,870 dalton。特异成分不含DNA和游离氨基酸,与Orcinol反应阴性,其水解物含16种氨基酸。实验结果表明,TF_(HSV-1)特异成分是12,870 dalton的多肽。     

纸上径向层析法定量测定氨基酸

<正> 氨基酸纸层析定量测定法包括了纸层析分离和各氨基酸的定量测定。在纸层析分离上,径向展层远比单同或双向展层为优;在氨基酸定量测定上,有结合标准定量的方法和斑点测量法两种,前者较为准确,但手续繁杂;后者简单快速,但影响因素较多。斑点测量法是Fisher首先提出的,以后Beinley从理论上证明其关系式如下:     

聚酰胺薄膜层析及其用于蛋白质化学分析

聚酰胺薄膜层析是1966年后发展起来的一种新层析技术。特别在用于分析氨基酸衍生物——DNS-氨基酸、DNP-氨基酸和PTH-氨基酸时,具有灵敏度高、分辨力强、速度快、操作方便等优点,超过了过去分析这类化合物使用的纸层析、纸电泳、硅胶薄板层析等方法。在蛋白质化学结构分析中,聚酰胺薄膜层析结     

硅胶薄层层析技术在分离纯化鱼类性类固醇激素中的应用

应用硅胶薄层层析技术结合放射照相定位方法,进行鱼类血清和性腺离体培养液中六种性类固醇激素的分离、纯化。文章具体介绍了样品抽提,点样,层析溶剂系统选择,照相定位,洗脱等技术步骤。     

珍冰眼液的氨基酸分析

<正> 珍冰眼液是用珍珠层经酸水解,再加一些其它药份配制而成。据中医传统临床经验。珍珠对治疗眼病有明目去翳之功效。根据现在临床观察珍冰眼液不仅有明目、消炎、止痛的作用对点状角膜炎,青少年假性近视等疾病有一定疗效。而珍珠层之特效成份之一是氨基酸,为了阐明其功效和成份的关系。我们采用微晶纤维素薄板层析和双向纸层析对氨基酸进行鉴定。     

丝瓜籽中一种具有翻译抑制活性和胰蛋白酶抑制剂活性的多肽——Luffin P1的纯化和性质

通过硫酸铵分级沉淀、CM 5 2阳离子交换层析、蓝胶亲和层析和FPLCMonoS阳离子交换层析 ,从丝瓜籽抽提液中分离到一种多肽luffinP1。经MALDI TOFMS测得其分子量为 5 2 2 6 .5。氨基酸序列测定及同源性分析发现 ,luffinP1的N端 11个氨基酸序列与丝瓜籽中的一种 6 .5K富含Arg Glu的多肽AGRP的部分序列相同 ,并与南瓜籽中一种胰蛋白酶抑制剂C2肽具有很高的同源性。体外分析表明 ,luffinP1同时具有两种生物活性 :(1)对兔网织红细胞裂解液系统蛋白质生物合成有较强的抑制作用 ,IC50 为 0 .6nmol L ;(2 )具有明显的胰蛋白酶抑制活性 ,IC50 为 2 2 μmol L。     

叶绿素的研究 Ⅱ.叶绿素和类胡萝卜素的薄层层析

研究了叶綠素和类胡蘿卜素的薄层层析法。层析采用硅藻土-煅石膏(8∶2)湿板,对叶綠素的分离溶剂系统为石油醚-乙醚(3∶1),对类胡蘿卜素的分离为苯-石油醚-乙醚-丙酮(1∶5∶0.5∶0.6)。并且研究了色素     

自然氨基酸的溶剂可及性标准

提出一种新的计算蛋白质溶剂可及面积的方法.利用该方法计算了二十个氨基酸在三肽模型中的可及面积,与他人的结果作了比较.提供了一套在分子模建中很有用的数据.     

多聚核苷酸的合成与研究 Ⅱ.六脱氧核糖核苷酸的化学合成与抽提分离

用均三甲基苯磺酰氯(MS)作缩合剂,合成了二个六脱氧核糖核苷酸(d-_(MMT_r)G~(Bz)_pA~(Bz)_pC~(An)_pG~(Bz)_pA~(Bz)_pG~(Bz)和d-(MMT_r)T_pC~(An)_pG~(Bz)_pA~(Bz)_pA~(Bz)_pC~(An)),脱去保护基后经双向同系层析测定核苷酸排列顺序,完全符合实验设计要求(d-GpApCpGpApG和d.TpCpGpApApC)。上述二个带保护基的六脱氧核糖核苷酸合成的每一步,都是采用溶剂抽提方法分离的,大大简化了分离的步骤和缩短了分离的时间,便于脱氧寡核苷酸的大量制备。此法也适用于其他带保护基寡核苷酸的制备,不论其三苯甲基衍生物基团在5’端或3’端(例如如d-_pG~(Bz)_pA~(Bz)_(-ODMT_r))。