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韭菜叶绿体超氧化物歧化酶纯化及性质研究 总被引:5,自引:0,他引:5
经硫酸铵沉淀、SephadexG-200凝胶过滤和DEAE-Sephacel层析3个步骤将韭菜叶绿体SOD纯化到均一程度。鉴定该酶是Cu.Zn-SOD,测得其分子量约32000D,亚基分子量约为16200D,N-末端氨基酸为Ala。该酶在紫外与可见光区的吸收峰分别在265nm和675nm。实验表明该酶热稳定性良好。 相似文献
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从荞麦生化遗传以及器官衰老机理的研究目的出发,以苦荞叶片为材料,制备出活力较高的铜锌趋氧化物歧化酶。对其理化性质分析表明:该酶在259nm处有一特征吸收峰,分子量约为31kD,含有308个氨基酸残基,同工酶电泳结果显示三条活性带。 相似文献
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橄榄超氧化物歧化酶的分离纯化与性质研究 总被引:2,自引:0,他引:2
采用超声波破碎、硫酸铵分级沉淀、SephadexG-100和DE-52柱层析,从橄榄中分离纯化Cu,Zn-SOD,并对其部分性质进行分析鉴定。结果得到酶的比活力为906.3U/mg。该酶对H2O2和KCN敏感,而T氏液对酶活性没影响。紫外吸收峰在275nm处,PAGE蛋白和活性染色呈现3条相对应的谱带,相对分子质量约为31.63kD,亚基相对分子质量约为15.73kD。此酶对热稳定,在pH7~9范围内稳定。 相似文献
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赤霉菌超氧化物歧化酶的纯化及部分理化性质 总被引:5,自引:0,他引:5
采用加热、Sephadex G—100凝胶过滤及DEAE-Sephadex A-50柱层析的方法,提纯了赤霉菌的超氧化物歧化酶(SOD),纯酶比活力为2640U/mg蛋白,最大紫外吸收峰为276nm,为Mn-SOD,由二个亚基组成,亚基分子量为14.5kD。此外还报道了该酶的氨基酸组成。 相似文献
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本文采用硫酸铵盐析、Sephadex G-100、DEAE-纤维索层析,首次从猕猴桃果实细胞中提纯了超氧化物歧化酶。并从不同角度鉴定了酶制备物的纯度,认为它达到均一程度,酶比活力为每毫克蛋白质1340单位;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳为一条带,氨基酸末端为丙氨酸;酶亚基含氨基酸16种,大约由157种氨基酸残基组成;紫外可见光区最大吸收峰分别为270nm和676nm,同时,用金属Co和Zn对CuZn—SOD中金属离子进行了取代研究。 相似文献
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为探索简便实用纯化SOD的工艺路线,以人或猪血红细胞溶血上清液,经铜胺中空纤维透析器(分子量截留值为15kD)透析和超滤,收集分子量大于15.0kD的物质,再加热60℃10min,离心取上清即得。Cu、ZnSOD和MnSOD分子量分别为32.0kD和80.0kD。人血和猪血纯化的SOD总收率分别为88.2%和89.2%,比活性分别为17429U/mg和18228U/mg。工艺简便实用,适于工业纯化生产。 相似文献
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扬子鳄红细胞超氧物歧化酶的纯化及其性质研究周衍茂(安徽教育学院生物系,合肥230061)尹路明(中国科学技术大学生物系,合肥230026)关键词超氧物歧化酶;纯化;扬子鳄;红细胞超氧物歧化酶(的田广泛存在于各类生物组织中,是生物体内超氧自由基有效的清... 相似文献
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从茶叶酶学研究的特殊性出发,设计了有效的纯化路线,并以茶树鲜叶为材料,首次制备出高比活性茶叶铜锌超氧化物歧化酶。经测该酶的分子量约为31kD。在274nm处,该酶有一吸收峰。在8mol/L尿素溶液中,此酶活性仍不受影响。经胰蛋白酶处理后,未见有活性丧失.纯化的酶经等电聚焦分析,呈现三条蛋白区带,其PI值分别是5.02,5.23和5.46。 相似文献
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人胎肝超氧化物歧化酶的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用离子交换和凝胶过滤层析法,从正常人胎肝提取、纯化铜锌超氧化物歧化酶(Cu.Zn-SOD),并对其性质作了研究,结果测得人胎肝组织Cu·Zn-SOD平均含量为6.44unit/g湿重,并发现随着胎龄的增加人胎肝Cu.Zn-SOD含量上升;纯化后的Cu·Zn-SOD在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈现单一区带;其活性受氰化钾抑制;以原子吸收光谱测得其铜、锌含量分别为0.39%和0.1%,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其亚基分子量为16kD;氨基酸自动分析仪测得其亚基的氨基酸残基数为151.5;在紫外吸收光谱上于265nm和258nm处分别出现两个吸收高峰。本研究结果表明,人胎肝Cu.Zn-SOD与成人肝及其他组织的Cu.Zn-SOD理化性质上基本一致。 相似文献
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等电聚焦表明,北京鸭红细胞铜锌超氧化物歧化酶由等电点分别为5.0,5.3,5.9,6.1和6.5的五个主要的活性组分(电荷异构体)构成,利用分析型聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳进行电荷异构体的制备级分离,采用三氯乙酸沉淀法快速确定蛋白条带的位置,电渗洗脱法回收蛋白,获得其中两个电荷异构体,对比研究结果表明电荷异构体的活性,氨基酸组成,二级结构等性质无明显差异。 相似文献
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蛹虫草超氧化物歧化酶分离纯化及稳定性的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以蛹虫草为材料,经过硫酸铵盐析、Sephedex G-75柱层析和DEAE-52柱层析,得到纯化的超氧化物歧化酶(SOD),经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一区带,此酶比活力为17855.73u/mg,纯化倍数为53.7,回收率为21.8%。同时鉴于SOD在溶液中容易失活,无法长期保存,该文研究了不同浓度的糖类及不同浓度的有机酸类对SOD活力的影响,发现糖类对SOD活力影响不明显,有机酸均使SOD活力下降,但随着酸浓度的增加,SOD活力下降的程度也减轻。 相似文献
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本文介绍了毛细管电泳分析蛋白质酶解产物中含巯基多肽的方法。还原的及天然的牛红细胞超氧化物歧化酶(SOD)经4-乙烯吡啶修饰后,由TPCK-胰蛋白酶水解,在254nm检测到还原的SOD水解物中含3个巯基多肽,天然的SOD为1个疏基多肽且其毛细管电泳行为与上述3个多肽之一相一致。分析它们的氨基酸顺序,证实Cys-6为游离的巯基,Cys-55和Cys~(-144)形成二硫键。 相似文献
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《Bioscience, biotechnology, and biochemistry》2013,77(4):1090-1093
A thermostable superoxide dismutase [(SOD) EC 1.15.1.1] from a Thermoascus aurantiacus var. levisporus was purified to sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis (SDS–PAGE) homogeneity by a series of column chromatographies. The molecular mass of a single band of the enzyme was estimated to be 16.8 kDa by SDS–PAGE. The molecular mass was estimated to be 33.2 kDa by gel filtration on Sephacryl S-100, indicating that the enzyme was composed of two identical subunits of 16.8 kDa each. N-terminal amino acid sequencing (seven residues) yielded VKAVAVL. Using RACE-PCR, a Cu, Zn-SOD gene was cloned from T. aurantiacus var. levisporus. The sequence was 705 bp and contained a 468 bp ORF encoding a Cu, Zn-SOD of 155 amino acid residues. 相似文献