豚鼠膀胱灌注卡介苗后的毒性研究

为观察治疗用BCG对豚鼠膀胱所产生的毒性反应和中毒程度 ,确定中毒靶向器官 ,以BCG12mg/kg .3d和36 0mg/kg .3d两个剂量对雌性豚鼠进行膀胱灌注 ,连续 3个月 ,共计 2 8次。结果显示BCG可明显引起豚鼠膀胱炎症反应 ,血中性粒细胞含量增多和尿素氮值升高。所有异常指标在用药后 1个月内基本恢复正常 ,提示治疗用BCG是一种安全、低毒的生物制品 ,为临床安全用药提供了依据     

TUR-BT术后膀胱灌注A群链球菌联合丝裂霉素治疗高危非肌层浸润性膀胱癌的疗效观察

目的：总结经尿道膀胱肿瘤电切（TUR-BT）术后辅以沙培林（注射用A群链球菌）联合丝裂霉素（MMC）膀胱内灌注治疗高危膀胱癌的疗效。方法：回顾性研究2009年1月~2012年8月我院收治的符合高危非肌层浸润性膀胱癌患64例,观察组：TUR-BT术后行沙培林联合MMC膀胱内灌注化疗32例,对照组;MMC单药灌注32例。结果：观察组患者,平均年龄63.7岁,治疗随访时间为6~54个月,中位时间27.3个月。治疗随访期间有3例患者出现膀胱内肿瘤复发（9.3%）,1例患者疾病进展,发展为肌层浸润性膀胱癌,于术后7个月死亡（3.1%）。与对照组患者相比,疾病复发率及进展率均明显改善。结论：高危非肌层浸润膀胱癌临床复发率、进展率高,TUR-BT术后沙培林联合MMC膀胱内灌注通过局部化疗及免疫治疗联合,可有效控制疾病的复发和进展,降低患者接受膀胱部分切除或膀胱全切手术的机率,值得推广。     

TURis-Bt术前膀胱灌注表柔比星治疗NMIUC的临床疗效观察

目的:探讨TURis-Bt术前膀胱灌注表柔比星治疗非肌层浸润性膀胱癌(NMIUC)的临床疗效。方法:选取2008年9月至2012年1月潍坊市中医院和上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科收治的76例NMIUC患者,并将其随机分为观察组(TURis-Bt术前膀胱灌注表柔比星+术后常规灌注组)41例和对照组(TURis-Bt术后常规表柔比星膀胱灌注组)35例。灌注前将50mg表柔比星溶解于50ml 5%葡萄糖注射液,术前膀胱保留灌注30分钟后膀胱镜观察肿瘤组织及周围膀胱粘膜染色情况,将表柔比星橙染的膀胱粘膜活检并行TURis-Bt;对照组取瘤旁2 cm处及其他部位膀胱粘膜多点活检。比较两组的原位癌(CIS)、非典型性增生及腺性膀胱炎等病变检出率和术后肿瘤的复发率。结果:观察组患者瘤旁膀胱粘膜橙染56处,其中7处病理证实为膀胱原位癌、5处为非典型性增生、11处为腺性膀胱炎;对照组患者膀胱原位癌1处、非典型性增生3处、腺性膀胱炎2处,两组病变阳性率分别为41.1%(23/56)和13.4%(17/127),差异有显著统计学意义(P0.01)。观察组与对照组术后2年内肿瘤复发率分别为10.3%(4/39)和35.3%(12/34),差异有统计学意义(P0.05)。结论:TURis-Bt术前膀胱灌注表柔比星能提高NMIUC病变的早期检出率并降低肿瘤术后复发率。     

非肌层侵润性膀胱癌的治疗

膀胱癌是一种全球性疾病。在我国泌尿外科肿瘤中的发病率和死亡率均占首位,非肌层侵润性膀胱癌占初发膀胱肿瘤的70%。对膀胱癌的研究已成为目前学术界的热点话题。目前学界对于非肌层侵润性膀胱癌主要采用以外科手术为主的综合治疗方案。为探讨该类肿瘤的治疗方法,本文就近年来对非肌层侵润性膀胱癌的各种治疗措施进行了比较系统的阐述。我们希望能尽可能的找到高效低风险并且经济的方法,为膀胱癌的诊断和治疗提供新途径。     

非肌层侵润性膀胱癌的治疗

膀胱癌是一种全球性疾病。在我国泌尿外科肿瘤中的发病率和死亡率均占首位,非肌层侵润性膀胱癌占初发膀胱肿瘤的70%。对膀胱癌的研究已成为目前学术界的热点话题。目前学界对于非肌层侵润性膀胱癌主要采用以外科手术为主的综合治疗方案。为探讨该类肿瘤的治疗方法,本文就近年来对非肌层侵润性膀胱癌的各种治疗措施进行了比较系统的阐述。我们希望能尽可能的找到高效低风险并且经济的方法,为膀胱癌的诊断和治疗提供新途径。     

经尿道绿激光汽化术治疗非肌层浸润性膀胱肿瘤疗效观察

目的:探讨经尿道绿激光气化术治疗非肌层浸润性膀胱肿瘤患者的治疗效果及近期并发症及复发率.方法:采用经尿道绿激光气化术治疗71例非肌层浸润性膀胱肿瘤患者,观察手术时间、手术并发症、手术后留置导尿时间、近期并发症及复发率.结果:全部患者手术成功.手术时间90± 16.5min,术中出血50±15ml.术中未见并发症的发生.术后留置导尿2±0.5天,均未予膀胱冲洗.无尿路感染发生.全部患者随访12-84月,结果有3例复发,复发率4.22％.未见尿道狭窄、挛缩性膀胱等远期并发症的发生.结论:经尿道绿激光汽化术治疗非肌层浸润性膀胱肿瘤患者安全可行、有效,并发症少,复发率低,但手术时间长.     

卡介苗（BCG）膀胱冲洗预防膀胱癌复发的研究

探讨不同方法预防膀胱肿瘤术后复发的效果.将1994～2001年85例膀胱肿瘤术后患者分为2组,BCG(卡介苗)80 mg加生理盐水50 mL、噻替哌50 mg加生理盐水50 mL,行膀胱内冲洗预防膀胱肿瘤复发,评价其疗效.随访2～5 a,BCG组复发率37.1%,噻替哌组复发率50.8%.2组比较有统计学差异.结果显示,BCG和噻替哌均能预防膀胱肿瘤术后复发,但BCG优于噻替哌.     

常规接种卡介苗(BCG)引起免疫应答的非特异效应

<正>BCG是世界范围内最常接种的疫苗之一,它除了对结核病(TB)有预防作用外,研究表明,接种BCG还具有许多额外、有益的非特异性免疫效应,包括在高死亡地区降低由非TB引起的婴儿和儿童的整体死亡率。接种BCG引起的抗体应答,为研究BCG影响非相关抗原引起的免疫应答提供了机会。本研究比较了常规接种对已接种BCG和没有接种BCG的婴儿的抗体应答水平的影响。已接种BCG的婴儿来自于出生后就接种BCG的相关研究组,没接种BCG的婴儿来自于接种门诊。所有婴儿依澳     

hMSCs成骨诱导前后分泌免疫相关细胞因子的实验研究

目的:研究hMSCs、DOC(osteogenic cells differentiated from mesenchymal stem cells,成骨诱导后骨髓间充质干细胞)分泌免疫相关细胞因子的变化,从细胞因子角度探讨hMSCs、DOC形成免疫抑制微环境的可能机理。方法:hMSCs、DOC(成骨诱导18天),采用ELISA技术,分别检测IL-2、IL-4、IL-10和TGF-β1分泌水平的变化。结果:在MSCs、DOC中IL-2、IL-4h低表达或忽略表达,IL-10中度表达,TGF-β1高表达。对IL-2、IL-4、IL-10,hMSCs、DOC的表达水平有统计学差异(P<0.05)。结论:在体外实验中,hMSCs、DOC可能形成免疫抑制微环境并通过其维持免疫调节功能。     

非肌层浸润性膀胱癌患者TURBT术后吉西他滨与表柔比星膀胱灌注化疗的疗效比较及复发的危险因素分析

摘要 目的：对比非肌层浸润性膀胱癌（NMIBC）患者经尿道膀胱肿瘤电切术（TURBT）后吉西他滨与表柔比星膀胱灌注化疗的临床疗效,并分析复发的危险因素。方法：纳入徐州医科大学附属连云港医院2018年1月至2020年1月期间接收的NMIBC患者120例,均接受TURBT治疗。根据化疗用药方式的不同将120例NMIBC患者分为表柔比星组（n=58,表柔比星治疗）和吉西他滨组（n=62,吉西他滨治疗）,对比表柔比星组、吉西他滨组的免疫功能、肿瘤标志物变化,观察不良反应发生率及1年复发情况。采用多因素Logistic回归分析NMIBC患者行TURBT后复发的危险因素。结果：表柔比星组、吉西他滨组治疗后CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺升高,且吉西他滨组高于表柔比星组（P<0.05）;CD8⁺下降,且吉西他滨组低于表柔比星组（P<0.05）。表柔比星组、吉西他滨组治疗后癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19（CK19）和癌抗原199（CA199）均下降,且吉西他滨组低于表柔比星组（P<0.05）。表柔比星组、吉西他滨组不良反应发生率对比未见统计学差异（P>0.05）。表柔比星组、吉西他滨组1年复发率对比未见统计学差异（P>0.05）。将表柔比星组、吉西他滨组1年后复发的患者总和28例纳为复发组,其余未复发的92例纳为未复发组。单因素分析结果显示：NMIBC患者行TURBT后复发与肿瘤数目、最大肿瘤直径、肿瘤分化分级、临床分期有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示：肿瘤数目为多发、最大肿瘤直径≧5 cm、肿瘤分化分级为低分化、临床分期为T1期为NMIBC患者行TURBT后复发的危险因素（P<0.05）。结论：与表柔比星化疗相比,吉西他滨化疗可更好的控制肿瘤疾病进展,有效保护机体免疫功能,两种化疗药物下安全性和复发率相接近。同时研究还观察到,复发受到多种因素影响,包括肿瘤数目、最大肿瘤直径、肿瘤分化分级、临床分期。     

术前预后营养指数联合血清CXCL5、YKL-40对非肌层浸润性膀胱癌患者经尿道膀胱肿瘤电切术后复发的预测价值

摘要 目的：探讨术前预后营养指数（PNI）联合血清C-X-C基序趋化因子配体5（CXCL5）、壳多糖酶3样蛋白1（YKL-40）对非肌层浸润性膀胱癌（NMIBC）患者经尿道膀胱肿瘤电切术（TUR-BT）后复发的预测价值。方法：选取2019年1月～2021年1月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的109例接受TUR-BT治疗的NMIBC患者,根据是否TUR-BT后复发分为复发组（n＝32）和未复发组（n＝77）,比较两组患者临床资料、术前PNI、CXCL5及YKL-40水平。采用单因素和多因素Logistic回归分析NMIBC患者TUR-BT后复发的影响因素。受试者工作特征（ROC）曲线分析术前PNI和血清CXCL5、YKL-40水平对NMIBC患者TUR-BT后复发的预测价值。结果：随访3年,109例NMIBC患者TUR-BT后复发32例,复发率为29.36％。复发组多发肿瘤、肿瘤T1期、低分化比例和血清CXCL5、YKL-40水平高于未复发组,白蛋白、淋巴细胞计数、术前PNI水平低于未复发组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示,多发肿瘤、肿瘤T1期、低分化肿瘤、血清CXCL5升高、YKL-40升高为NMIBC患者TUR-BT后复发的独立危险因素,术前PNI升高为独立保护因素（P＜0.05）。ROC曲线分析显示,术前PNI和血清CXCL5、YKL-40水平单独与联合预测NMIBC患者TUR-BT后复发的曲线下面积（AUC）分别为0.781、0.792、0.780、0.955,灵敏度分别为78.12％、53.13％、84.37％、96.87％,特异度分别为74.03％、97.40％、59.74％、79.22％。术前PNI联合血清CXCL5、YKL-40水平预测NMIBC患者TUR-BT后复发的AUC大于三者单独预测（P＜0.05）。结论：血清CXCL5、YKL-40水平升高是NMIBC患者TUR-BT后复发的独立危险因素,术前PNI升高为独立保护因素,三者联合检测对NMIBC患者TUR-BT后复发的预测价值较高。     

卡介苗溶菌黏膜免疫调理剂对激活荷瘤小鼠免疫功能的研究

观察卡介苗溶菌黏膜免疫调理剂对荷瘤小鼠免疫功能的激活。将SPF小鼠分组后用黑色素瘤B16和肝癌实体瘤H22感染,随后以灌胃途径引入本调理剂,分别发现它能促进荷瘤小鼠血清溶菌酶含量上升和T细胞介导的迟发型变态反应增强。试验结果表明,卡介苗溶菌黏膜免疫调理剂对荷瘤小鼠有升高其血清溶菌酶含量和增强迟发型变态反应的作用。     

肌层浸润性膀胱癌组织KMT2D、MCM6与临床病理特征和预后的关系

摘要 目的：探讨肌层浸润性膀胱癌（MIBC）组织赖氨酸甲基转移酶2D（KMT2D）、微小染色体维持蛋白6（MCM6）与临床病理特征和预后的关系。方法：选择2017年5月至2019年10月长治医学院附属和平医院行手术治疗的MIBC患者96例,应用逆转录-实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测癌组织及癌旁正常组织KMT2D 信使核糖核酸（mRNA）、MCM6 mRNA表达,分析KMT2D mRNA、MCM6 mRNA表达与MIBC患者临床病理特征的关系,应用Pearson相关分析法分析MIBC患者癌组织KMT2D mRNA及MCM6 mRNA表达的相关性。随访3年,比较死亡MIBC患者与存活MIBC患者癌组织KMT2D mRNA、MCM6 mRNA表达,并应用Kaplan-Meier生存曲线分析不同KMT2D mRNA、MCM6 mRNA表达分组MIBC患者预后情况。结果：MIBC癌组织中KMT2D mRNA表达水平显著低于癌旁组织,MCM6 mRNA表达水平显著高于癌旁组织（P<0.05）。MIBC患者癌组织中KMT2D mRNA、MCM6 mRNA表达与侵犯输尿管、淋巴结转移、TNM分期显著相关（P<0.05）,且两者表达呈负相关（P<0.05）。至随访截止,MIBC患者死亡45例,死亡组患者癌组织中KMT2D mRNA表达水平显著低于存活组、MCM6 mRNA表达水平显著高于存活组（P<0.05）。生存曲线结果显示KMT2D mRNA高表达组3年生存率显著高于KMT2D mRNA低表达组;MCM6 mRNA低表达组3年生存率显著高于MCM6 mRNA高表达组（P<0.05）。结论：MIBC癌组织中KMT2D低表达、MCM6高表达,与MIBC侵犯输尿管、淋巴结转移、TNM分期及患者预后不良有关。     

TURBT术后灌注不同剂量丝裂霉素对肿瘤复发的影响

目的:探讨经尿道膀胱肿瘤电切术(Transurethral resection of bladder tumor,TURBT)术后灌注不同剂量丝裂霉素对非肌层浸润性膀胱肿瘤(Non-muscularized invasive bladder tumor,NIMBC)复发率的影响。方法:选择三原县医院2013年1月至2016年12月收治的90例NIMBC患者,根据入院先后顺序分为A、B、C三组,A组TURBT后即刻给予20 mg丝裂霉素,B组给予30 mg丝裂霉素,C组给予40 mg丝裂霉素,对比三组患者术后不同时间点的复发率、平均复发时间、膀胱刺激综合征及其他不良反应。结果:三组术后不同时间点NIMBC复发率为A组B组C组。术后12个月、18个月、24个月时A组的复发率明显高于C组(P0.05),其余时间点组间对比无统计学意义(P0.05)。三组膀胱刺激综合征发生率C组B组A组,但组间对比无统计学意义(P0.05)。三组患者均完成丝裂霉素灌注治疗,未出现因严重膀胱刺激征无法耐受而中断膀胱治疗者。本研究所有患者灌注后未发现骨髓抑制、肝肾功能异常者。结论:TURBT术后即刻应用40 mg丝裂霉素,可显著降低患者的NIMBC复发率,通过术前、术后服用琥珀酸索利那新,可降低患者的膀胱刺激综合征,辅助患者完成TURBT术后丝裂霉素灌注化疗。     

乙型肝炎病毒全S基因疫苗诱导小鼠的特异性免疫应答

乙型肝炎病毒(HBV)感染是我国常见病及多发病.HBV难以清除的原因之一就是机体的免疫功能障碍.目前虽然基因重组HBV表面抗原(HBsAg)疫苗预防HBV感染取得了较好的效果,但基因重组HBsAg疫苗主要能诱导特异性体液免疫,不能刺激机体的细胞免疫应答.近年来发现基因疫苗可诱导机体产生细胞及体液免疫反应,特别是诱导细胞免疫反应的能力优于蛋白、多肽类疫苗,更适应于慢性病毒感染的预防与治疗[1,2].为了探讨应用HBV基因疫苗预防HBV感染的可能性,本文构建了HBV全S基因和HBsAg基因疫苗,观察和比较了这两种疫苗经肌肉注射接种到Balb/C小鼠体内后的细胞及体液免疫功能的变化.     

经尿道电切术与经尿道双极等离子电切术治疗非肌层浸润性膀胱肿瘤的疗效比较研究

目的:探讨并对比经尿道电切术(TURBT)与经尿道双极等离子电切术治疗非肌层浸润性膀胱肿瘤(NMIBC)的疗效。方法:选取2012年1月到2016年1月在我院接受治疗的NMIBC患者76例,按照随机数字表法将患者分为观察组和对照组各38例,观察组采用经尿道双极等离子电切术进行治疗,对照组采用TURBT进行治疗。对比两组患者手术时间、术中出血量、术后导尿管留置时间、住院时间和手术并发症发生率,对比两组患者1年内复发率。结果:观察组的手术时间、术中出血量、术后导尿管留置时间、住院时间均显著少于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组患者膀胱穿孔和尿道内口狭窄发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。观察组闭孔神经反射发生率为7.89%(3/38),显著低于对照组的28.95%(11/38),差异有统计学意义(P0.05)。观察组患者1年内复发率为7.89%(3/38),对照组患者1年内复发率为10.53%(4/38),两者比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:经尿道双极等离子电切术治疗NMIBC能有效减少手术时间、术中出血量、术后导尿管留置时间、住院时间和闭孔神经反射发生率,安全有效,与TURBT相比优势明显,值得临床推广应用。     

HIV病毒包膜蛋白gp120与卡介苗感染人巨噬细胞的实验研究

目的:比较研究HIV病毒包膜蛋白gp120与卡介苗分别及共同感染人巨噬细胞,对人巨噬细胞的破坏能力及诱导巨噬细胞产生一氧化氮(NO)能力的差异性.方法:gp120与卡介苗(BCG)分别及共同感染人巨噬细胞后,于不同时间点采用MTT法检测巨噬细胞存活率,利用硝酸还原酶法检测细胞培养上清液中NO的含量.结果:gp120与BCG分别及共同感染人巨噬细胞,均可降低巨噬细胞的存活率,但gp120与卡介苗共同感染巨噬细胞,其存活率降低更为显著(P＜0.05);gp120与BCG均可激活人巨噬细胞合成和释放NO,而gp120与BCG共同感染组激活人巨噬细胞合成和释放NO的量明显低于BCG感染组(P＜0.05).结论:gp120感染巨噬细胞可影响巨噬细胞抗微生物的活性,可增强卡介苗对巨噬细胞的破坏作用.     

表面表达猪流行性腹泻病毒核蛋白蛋白的重组干酪乳杆菌诱导产生的免疫应答

为探讨表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)核蛋白(N)基因的重组干酪乳杆菌口服免疫小鼠后诱导特异性免疫应答,本研究制备表达流行性腹泻病毒核蛋白的重组干酪乳杆菌,应用Western blotting、间接免疫荧光和全细胞ELISA鉴定目的蛋白的表达。然后用该重组干酪乳杆菌口服免疫BALB/c小鼠,分别测定了免疫后不同时间血清中特异性IgG、粪便中特异性的sIgA水平以及血清的中和活性;并测定免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况和细胞因子水平。结果显示,目的蛋白表达在细胞表面,可被阳性血清所识别。免疫小鼠后,可分别在血清中和粪便中检测到较高水平特异性IgG、sIgA(P<0.01),但血清并没有中和活性;淋巴细胞增殖试验和细胞因子测定结果显示,免疫组可产生明显的细胞免疫应答。结果表明,该重组干酪乳杆菌表达系统可诱导小鼠产生黏膜免疫应答和系统免疫应答,具有作为口服疫苗潜在的应用价值。     

基因枪法和肌内注射法免疫HCV NS3/4A诱导小鼠免疫应答的比较

目的比较肌内注射法和基因枪法对免疫效果的影响。方法将携带HCV NS3/4A基因的质粒pcDNA3.1-NS3/4A,分别肌内注射和基因枪免疫BALB/c小鼠。基因枪免疫采用2μg/只和10μg/只两种剂量,肌内注射免疫的剂量为100μg/只,共免疫3次。分别于第3次免疫后10 d和20 d,收集小鼠血清、分离脾细胞;ELISA法检测小鼠血清中特异性抗体水平;ELIspot检测小鼠IFN-γI、L-2和IL-4;非放射性细胞毒性试验检测其对肿瘤细胞的杀伤作用,从而比较肌内注射和基因枪法激发小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答的影响。结果免疫后第10 d检测结果表明,2μg/只和10μg/只基因枪法免疫产生的抗体效价分别为1∶500和1∶1 000,100μg/只肌内注射免疫产生的抗体效价为1∶1 000。第20 d再次检测,基因枪法产生的抗体效价仍为1∶500和1∶1 000,肌内注射降低为1∶500。2μg/只和10μg/只基因枪免疫产生的IFN-γ和IL-2均高于100μg/只肌内注射免疫。但这两种免疫方法均未激发IL-4的水平。在不同的效靶比情况下,10μg/只和2μg/只基因枪免疫激发的CTL细胞杀伤活性均高于100μg/只肌内注射免疫。结论基因枪法免疫小鼠诱导的体液免疫和细胞免疫应答均显著高于肌内注射免疫。     

体外大量制备新型gp96肿瘤疫苗及其诱导的特异性抗肿瘤免疫应答分析

旨在体外组装酵母菌表达的gp96 (Recombinant gp96,rgp96) 蛋白与B16.F10黑色素瘤抗原,大量制备新型gp96肿瘤疫苗,并研究其诱导的特异性抗肿瘤免疫应答。利用体外组装的rgp96-肿瘤抗原复合物免疫C57BL/6小鼠,并通过酶联免疫斑点实验、细胞因子染色、杀伤实验技术进行分析,结果显示与单纯rgp96或肿瘤抗原免疫组相比,体外组装的rgp96-肿瘤抗原复合物免疫能够显著抑制B16肿瘤的生长,而且能够明显提高肿瘤特异性T细胞活性。rgp96-肿瘤抗原复合物的抗肿瘤免疫活性与从肿瘤组织中提取的gp96接近。研究结果为大量制备新型gp96肿瘤疫苗提供了依据。