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T—2毒素对心肌细胞电生理特性的影响及硒的保护作用 总被引:3,自引:0,他引:3
本实验在培养的Wistar大鼠乳鼠心肌细胞上观察了T-2毒素对膜电位活动的影响及硒的保护作用。结果表明,T-2毒素(0.1,0.5,5.0mg/L)使心肌细胞动作电位幅值(APA)、超射(OS)、阈电位(TP)、最大舒张电位(MDP)及最大除极速率(Vmax)显著降低。使复极化时程(APD10、APD50、APK90)延长;动作电位发放频率(APF)受到明显抑制。提示T-2毒素能抑制Ca^2+、K 相似文献
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Vero毒素—1的纯化及特性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
从含有VT1全基因的基因工程菌中纯化出VT1。纯化的步骤包括(NH4)2SO4盐析,两次DEAE Sepharose Fast Flow柱层析。最终从4L培养物中纯化出1.5mg纯毒素,收率为8.6%,梯度Native-PAGE测定毒素的分子量为70kD,SDS-PAGE电泳表明毒素有两个亚基,分子量分别是32kD和7.7kD。对VT1的多种生物学特性进行了研究;经测定VT1对Vero细胞的半数致死量CD50为1pg,对小鼠的半数致死量LD50为18ng,引起兔肠襻积液的最小毒素量是1.25μg/肠襻。 相似文献
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α—银环蛇毒素基因的合成与表达 总被引:6,自引:1,他引:5
结合国内外的研究现状,以α-银环蛇毒素为例来探讨蛇神经毒素基因在大肠杆菌表达体系中的表达情况及其规模生产的可行性。首先根据文献报道α-银环蛇毒素的氨基酸序列,推导出其DNA序列并设计成部分互补的4条寡核苷酸片段,利用DNA合成仪人工合成,纯化这4条寡核苷酸片段,通过片段退火,切口补平,连接,克隆,测序鉴定获得了α-银环蛇毒素基因,然后将a-银环蛇毒素基因克隆至pGEX-2T质粒中分别转化DH5α和 相似文献
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T—2毒素对心肌细胞三型钙通道的阻滞作用 总被引:2,自引:0,他引:2
用膜片钳连细胞电压钳法,在培养的Wistar大鼠单个心肌细胞上记录了T-2毒素对B,L和T三型Ca^2+通道单通道电活动的影响,结果表明,T-2毒素浓度为10mg/L时,心肌细胞B,L和T三型Ca^2+通道均受到有显的阻滞,其阻滞作用表现为Ca^2+通道的开放概率减小,开放时间缩短,关闭时间延长,而对流过Ca^2|通道的Ba^2+流幅值无影响。 相似文献
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α—吡啶羧酸和致病毒素对水稻离体培养与幼苗生长的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
比较了α-吡啶羧酸和稻瘟病菌粗毒素滤液对水稻种胚离体培养和幼苗生长的影响。结果表明,α-吡啶羧酸处理水稻种胚,其发芽率与愈伤组织诱导率明显降低,随α-吡啶羧酸处理浓度的提高,有逐步下降的趋势,感病品种(系)较抗病品种(系)更为敏感。α-吡啶羧酸处理不同抗病类型水稻的萌动种子,幼苗生长受到明显抑制,受抑制程度与处理浓度和品种感病性呈正相关。α-吡啶羧酸和病原菌粗毒素对水稻种胚离体培养与幼苗生长的影响基本一致。 相似文献
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α-鹅膏毒(环)肽和二羟鬼笔毒(环)肽是剧毒的鹅膏菌和其它几种致死毒菌中由一些修饰氨基酸组成的环肽毒素,由于α-鹅膏毒肽对真核生物的mRNA合成的专一性抑制和二羟鬼笔毒肽对肌动蛋白的专一性束缚,因而它们在分子生物学和细胞学研究中具有重要应用,对其需求逐渐增加,为此,作者使用了一种改良的毒素提取方法,以制备高效液相色谱从灰花纹鹅膏菌中分离制备α-鹅膏毒肽和二羟鬼笔毒肽,并通过紫外吸收光谱和质谱进行鉴定,表明α-鹅膏毒肽和二羟鬼笔毒肽的分离效果好,纯度高,本方法对其它毒菌中的α-鹅膏毒肽和二羟鬼笔毒肽的分离制备具有同样的应用价值。 相似文献
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重组虎纹捕鸟蛛毒素—I在巴氏毕赤酵母中的表达及纯化 总被引:5,自引:0,他引:5
虎纹捕鸟蛛毒素I是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离纯化,具有镇痛活性的肽类神经毒素。对巴氏毕赤酵母生产的重组HWTX-I进行多步纯化,首先将分泌到培养上清的rHWTX-I进行90%饱和度的(NH4)2SO4沉淀,再用截留分子量3kD的滤膜脱盐,再用CM阳离子交换层析分离,最后用C18反相层析脱盐纯化,真空干燥后得到的rHWTX-I经Tricine SDS-PAGE,质谱鉴定,氨基酸组成分析,N-端序列测定后活性鉴定,证明已获得高纯度的重组HWTX-I,摇瓶表达量约为80mg/L,约占总分泌量的23.6%,并对摇瓶发酵条件进行了优化,为利用基因工程方法生产HWTX-I的规模化生产及临床应用提供了证据。 相似文献
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B-E-A毒素的作用机制毛献荣(中国科学院上海生物化学研究所,上海200031)关键词B-E-A毒素,酶活力许多细菌和植物都能产生对哺乳动物有很强细胞毒性的蛋白质,并且它们在结构和作用方式上都很不同。一般根据毒素的主要的破坏位点是在胞液中(通过酶活性... 相似文献
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虎纹捕鸟蛛毒素—I(HWTX—I)对豚鼠回肠的作用机制研究 总被引:8,自引:1,他引:7
虎纹捕鸟蛛毒素HWTX-I(5mg/L)对电刺激豚鼠回肠引起的一过性收缩有非常明显的抑制作用.HWTX-I的抑制作用发生后,乙酰胆碱(ACh)诱发的回肠收缩幅度与使用HWTX-I前无明显差异.在使用酚妥拉明后,HWTX-I仍能抑制豚鼠回肠的一过性收缩.HWTX-I对豚鼠回肠的抑制作用主要是抑制ACh释放或影响ACh释放之前的过程 相似文献
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海南捕鸟蛛毒素-Ⅳ(HNTX-Ⅳ)是从中国捕鸟蛛Seleconosmia hainana粗毒中分离得到的一种肽类神经毒素,在成年大鼠背根神经节(DRG)细胞上观察了该毒素对电压门控钠通道的影响。在全细胞膜片钳条件下,HNTX-Ⅳ能明显抑制哺乳动物神经性河豚毒敏感型(TTX-S)钠电流,但不影响河豚毒不敏感型(TTX-R)钠电流,HNTX-Ⅳ对DRG细胞TTX-S钠电流的抑制作用具有浓度依从性。其有效半抑制浓度(IC50)为44.6nmol/L。该毒素不影响DRG钠电流的激活与失活时间特征,但能导致钠通道的半数稳态失活电压向超极化方向漂移约10.1mV。结果表明HNTX-Ⅳ是一种新型的蜘蛛毒素,其影响电压门控钠通道的机制可能有别于那些结合于通道位点3来延缓钠电流失活时间特征的蜘蛛毒素如δ-澳洲漏斗网蛛毒素,μ-美洲漏斗网蛛毒素I-Ⅵ等。 相似文献
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玉米大斑病菌HT—毒素与玉米细胞的膜脂过氧化研究 总被引:7,自引:0,他引:7
以土培玉米幼苗为材料,通过测定玉米大斑病菌HT-毒素处理后玉米叶片细胞膜透性和细胞内丙二醛(MDA)含量变化及其与细胞内过氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性之间的关系来研究玉米细胞膜脂过氧化的程度。结果表明,HT-毒素胁迫后,亲和组合MDA含量上升,POD活性受到刺激,SOD活性受抑制较强;非亲和组合POD活性受到抑制,SOD活性受抑制较弱。HT-毒素对玉米叶片细胞膜有强烈的破坏作用,而且这种作用与毒素的浓度和毒素处理的时间呈正相关。试验结果初步推测在抗、感玉米的细胞膜上可能都有HT-毒素的结合位点,但毒素作用后幅地它们的活性氧代谢程度不同而导致了对HT-毒素敏感性的差异。 相似文献
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白细胞介素是激活的T细胞分泌的一类细胞因子,它们在免疫调节中发挥重要作用,具有很高的临床应用价值。迄今为止,已有23种人白细胞介素被发现,构成了一个庞大的家族,其中2000-2001年间,就有5种人白细胞介素家族最新成员的序列被阐明,本文简单介绍了它们的结构,诱导表达方式,功能,及其信号相关受体等各个方面的最新研究进展。 相似文献
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雷氏大疣蛛毒素—Ⅱ的纯化与初步毒性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
雷氏大疣蛛是我国最近鉴定的蜘蛛新种。雷氏大疣蛛毒素-Ⅱ就是以其粗毒为材料,利用阴、阳离子交换层析和反相HPLC分离得到并命名的一种新型神经毒素肽,根据质谱分析得知它的相对分子质量为3021.56;通过初步毒性研究,证明它是一个神经毒素。 相似文献
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虎纹捕鸟蛛毒素HWTX—Ⅱ的^1H—NMR信号归属和二级结构分析 总被引:3,自引:0,他引:3
虎纹捕鸟蛛毒素HWTX-Ⅱ是从虎纹捕鸟蛛Selenocosmia huwena的毒液中分离出的一种新型杀虫肽。应用2D-NMR技术研究该毒素分子的溶液结构特点,通过分析水及重水DQF-COSY、COSY、TOCSY和NOESY等^1H-NMR谱,识别出HWTX-Ⅱ全部37个氨基酸残基自旋体系;通过NOESY谱中的dαN、dαδ、dβN和dNN联系完成了序列专一的谱峰归属,确认了所有主链质子和除了Lys侧链εNH2质子外的所有侧链质子的化学位移,为完全解析HWTX-Ⅱ的溶液三维象奠定了基础,并且通过核磁数据分析,确定HWTX-Ⅱ的二级结构特点是含有较多的伸展构象,尤其是C端有一个典型的双股反平行的β折叠(Trp27-Cys29和Cys34-Lys36),分子中缺乏螺旋结构,这些二级结构特点与已探明结构的其他蜘蛛毒素的基本相同。 相似文献