薄层层析法在生物化学实验中的改进

对脂类的薄层层析进行改进,用碘蒸气显色代替磷钼酸显色,脂类层析时间、斑点展开距离及显色结果令人满意。改进后的显色方法简便、快速、效果好,便于学生实验操作。     

植物对锑的吸收和代谢及其毒性的研究进展

锑(Sb)是一种有毒致癌元素, 一些自然和人为因素已造成我国部分地区土壤、水体及农产品受到严重的锑污染。环境中高含量的锑不仅影响农作物生长、降低其产量, 如果通过食物链被人体大量吸收, 还会引起严重的健康问题。研究锑在植物体内的富集特征, 对于保护环境与人体健康具有重要的现实意义。该文对当前锑在环境中的含量、污染状况、植物对锑的吸收、代谢以及锑对植物的毒害作用等方面的研究现状进行了综述。同时建议今后应加强以下3方面的研究: (1) 锑在生物圈迁移与转化特征; (2) 植物对锑的吸收、转运和代谢机制及锑的毒害作用机理; (3) 锑污染土壤及水体的植物修复技术。     

肝素的简易化学测定法

1962年Bitter曾报道,糖醛酸(uronic acid)的硼砂硫酸液与咔唑(carbazol)所产生的显色反应,其效果迅速而稳定,从而改进了著名的Dische反应条件,可作为糖醛酸的定量分析法。     

单一与复合砷锑处理对波士顿蕨富集与转化砷和锑的作用

通过水培试验,研究了单一和复合砷锑处理对波士顿蕨(Nephrolepis exaltata L.)植株各部位及其亚细胞砷锑富集和形态转化的影响,以期查明植物体内砷与锑之间可能的相互作用。结果表明,与对照组相比,单一和复合处理条件下,波士顿蕨各部位砷锑含量均有显著的增加,砷含量表现为根叶柄羽叶,锑含量表现为根羽叶叶柄。与20 mg·L-1单一Sb(III)处理相比,复合处理条件下,随着砷的同时加入(10 mg·L-1As)植株各部位锑含量出现下降,同时根部细胞器中的锑出现向细胞壁与胞液转移、而羽叶与叶柄出现由细胞壁向其他两个亚细胞组分转化的现象;与10 mg·L-1单一As(III)处理相比,复合处理条件下,锑的加入(20 mg·L-1Sb)显著降低了波士顿蕨各部位砷的含量,同时促进了根部细胞壁中的砷向胞液与细胞器转移,以及羽叶与叶柄胞液处砷向细胞壁与细胞器的转移。因此,波士顿蕨体内,砷锑之间具有拮抗作用。单一As(III)处理下,波士顿蕨根部以As(V)为主、羽叶主要以DMA为主,而Sb(III)的同时加入则能够促进As(III)更多地向As(V)和DMA转化;单一Sb(III)处理下,波士顿蕨体内以Sb(III)为主导形态,随着As(III)的同时加入,在波士顿蕨根与叶柄处,As(III)强烈地抑制Sb(III)向Sb(V)转化,相反在羽叶处却会促进Sb(III)向Sb(V)转化。     

鲎试验测定内毒素的一步显色法

<正>本文介绍了使用单一混合试剂的终点法和LAL显色动力学法。该试剂可用缓冲液、鲎试剂和底物(显色鲎试剂)混合冻干或用市售的LAL凝胶试剂、底物和缓冲液(显色法、凝胶法通用)混合后立即使用。这种单一试剂既可用于显色动力学方法,也可用于一步终点法(规定孵育时间)。由于去除了许多步骤和技术误差,因此可极大地减少显色法的差异。本文对动力学法和终点法进行了详细地比较,单一试剂法也与传统的多试剂法进行了对比。     

防治血吸虫病药物的研究 Ⅶ.微量锑的比色测定法

目前广泛应用蓝光碱性蕊香红(rhodamine B,以下简称蕊香红)测定微量锑。Maren 将其应用于生物样品,但灵敏度仅及0.5微克锑,而且铁的干涉很大。过去虽有企图去除铁的干涉,或用其他染料及有机溶剂作锑的测定,但结果仍不能满意。     

硫氧嘧啶對於酒石酸銻鉀急性中毒的保護作用

锑的毒性作用,一般认为和砷及其他重金属相似,系由於它与组织内酶系统的硫氢(-SH)基相结合,而妨礙其机能所致。因此硫氢化物二巯基丙醇(1,3—Dimercaptopropanol简称BAL)和半胱氨酸(cysteine)对三价锑剂酒石酸锑钾(antimony potassium tartrate)有解毒作用。     

显色培养基在几种食源性致病菌快速检测中的应用*

用显色培养基鉴定微生物是一种新的微生物快速检测技术,该技术以生化反应为基础,通过在培养基中加入细菌特异性酶的显色底物直接根据菌落颜色对菌种作出鉴定。常见食源性致病菌检测中,李斯特菌显色培养基(BCM^TMListeriamonocytogenes,Rapid’LMONOagar,CHROMagar^TMListeria)、大肠杆菌显色培养基(CHROMagarTMEcoli)、沙门氏菌显色培养基(Rambachagar)、金黄色葡萄球菌显     

胰蛋白酶消化对菠菜叶绿体萤光影响的分析

用胰蛋白酶消化菠菜叶绿体,叶绿体的F_(684)相对萤光强度下降。在反应液中加入光系统Ⅱ的电子受体(DCIP 或Fecy)和光系统Ⅱ的电子传递抑制剂—DCMU,可以改变叶绿体F_(684)的相对萤光强度,但不影响与胰蛋白酶消化有关的萤光强度下降。用不同波长的光(436nm 和470nm)激发胰蛋白酶消化过的叶绿体,所测得的F_(684)变化、叶绿体中叶绿素含量变化以及吸收光谱变化的实验结果,说明用胰蛋白酶消化叶绿体后,使部分叶绿素从叶绿体上脱落,其中叶绿素b 的脱落量较高。表明胰蛋白酶消化所诱导的萤光强度下降与色素蛋白复合体受损有关。     

多胺氧化酶检测方法的改进及其在低氧水培黄瓜根系中的应用

对多胺氧化酶活性检测方法进行了改进,多胺氧化产物H2O2浓度的最低检测量可从1.25μmol·L-1降低到0.65μmol·L-1,其显色产物具有良好的稳定性与重现性.用改进的方法检测的低氧水培下黄瓜根系多胺氧化酶活性比通气对照提高2.45倍,酶氧化底物以精胺(Spm)为最佳,最适pH值为6.5.     

胰蛋白酶消化对菠菜叶绿体萤光影响的分析

用胰蛋白酶消化菠菜叶绿体,叶绿体的F_(684)相对萤光强度下降。在反应液中加入光系统Ⅱ的电子受体(DCIP或Fecy)和光系统Ⅱ的电子传递抑制剂—DCMU,可以改变叶绿体F_(684)的相对萤光强度,但不影响与胰蛋白酶消化有关的萤光强度下降。用不同波长的光(436nm和470nm)激发胰蛋白酶消化过的叶绿体,所测得的F_(684)变化、叶绿体中叶绿素含量变化以及吸收光谱变化的实验结果,说明用胰蛋白酶消化叶绿体后,使部分叶绿素从叶绿体上脱落,其中叶绿素b的脱落量较高。表明胰蛋白酶消化所诱导的萤光强度下降与色素蛋白复合体受损有关。     

定量测定生物材料中少量蛋白质的一种简便方法

Lowry 等人通常使用定量测定蛋白质的方法需要操作40分钟左右,并且需要三种试剂。经 Miller 改进的这种技术,测定时间缩短约20分钟。通过以下方法可以缩短测定时间:用升高温度(50℃)以缩短显色时间和改用两种试剂,即用较小体积、较浓的碱性铜试剂和较多量、较稀的酚试剂。     

二巯基丁二酸鈉對三價葡萄糖酸銻銨毒性及代謝的影響

皮下注射二巯基丁二酸钠1500毫克/千克,司将小鼠一次腹腔注射锑铵的半数致死量从90—112毫克/千克提高至1300—1460毫克/千克。静脈注身锑~(124)铵予家兔後,如立刻经同一途径注射二巯基丁二酸钠,亦可降低锑铵的急性毒性。二巯基丁二酸钠的解毒机制为阻止血锑进入组织,减少锑在部分组织中的含量及增加锑自尿排泄的速度。锑主要自尿排出,用二巯基丁二酸钠後,72小时内锑由尿排出给药量的96％,而对照组动物在同时间内仅有36％由尿排出。     

牛肾组织及其培养物的不同消化法效果评价

为了比较不同消化液及消化方式对牛肾皮质组织和培养后形成单层细胞的消化分散效果并确定最适消化液和消化方式,分别用0.25%胰蛋白酶和0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA两种消化液,消化牛肾皮质组织及其培养形成的单层牛肾皮质细胞。牛肾皮质组织采用热(37℃)和冷(4℃)两种消化方式;经培养形成单层的牛肾皮质细胞采用室温(25℃)消化。结果显示,用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液热消化牛肾组织时,分散获得牛肾皮质细胞的活细胞数、存活率、贴壁率均优于其他消化方法,差异显著(P0.05)。培养形成的单层牛肾皮质细胞用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液的消化速度明显快于用单一0.25%胰蛋白酶消化液的消化速度,统计学分析显示具有显著性差异(P0.01),两种消化液消化所得细胞的存活率及贴壁率前者要更高,差异显著(P0.05)。     

盐类对二苯胺法脱氧核糖核酸定量测定的干扰作用

(1)DNA二苯胺反应受碱、盐类和高浓度的某些強酸的干扰,干扰作用都随浓度之增大而加強,但不同物貭的浓度-干扰曲綫不同,对显色产物的吸收光譜影响也不同。(2)卤化物中氯化物如NaCl、KCl、NH_4Cl、MgCl_2、MnCl_2以及HCl在最終浓度为0.1N时即可使显色值(600mμ)下降15%左右。NaF在0.25N以下对显色并无干扰。NaBr在0.05N,NaI在0.002N即可使显色值下降50%左右。卤化物对显色产物吸收光譜的影响除600mμ高峯下降之外还有520mμ新吸收高峯的出現。(3)一般鈉盐如Na_2SO_4、NaAc、NaOH、NaH_2PO_4、Na_2HPO_4、Na_3PO_4、柠檬酸鈉、三氯乙酸鈉皆对显色有显著干扰。但磷酸、柠檬酸、三氯乙酸则皆无干扰作用。这些鈉盐对显色产物吸收光譜的影响除600mμ高峯的下降外,还有480mμ新高峯的出現。(4)其它金属盐类如NH_4Ac、Mg(Ac)_2、(NH_4)_2SO_4、MgSO_4、ZnSO_4、MnSO_4也有不同程度的干扰作用。銨盐、鎂盐的作用都稍強于相应的鈉盐,对吸收光譜的影响則与一般鈉盐相类似。(5)強酸如H_2SO_4和HClO_4在高浓度时也有干扰作用,而NaHSO_4、NaClO_4反无干扰作用,它們对吸收光譜的影响都是只有600mμ吸收高峯的下降,并无新的高峯出現。(6)除卤化物以外的一般盐类和碱的干扰作用,在浓度不超过1N的情况下,都可以用适当提高二苯胺試剂中硫酸含量的方法定量的予以消除。反应产物吸收光譜的形状也可完全恢复。用这种改进的試剂对DNA显色值的大小,对显色后的稳定性以及反应的特异性都影响不大,实际可用。上述高浓度強酸的干扰作用則可用先加碱中和的方法予以消除。(7)HClO_4可完全代替二苯胺試剂中的H2SO_4,DNA的显色值不变,HClO_4也同样有消除卤化物以外一般盐类以及碱对显色的干扰作用。(8)上述盐类、碱以及高浓度的强酸的干扰作用是应用二苯胺反应进行有关DNA定量中必須考虑的因素。     

酒石酸锑钾对麻醉兔电致心室颤动的影响

在戊巴比妥钠麻醉兔观察酒石酸锑钾(锑钾)对电致颤阈的影响,锑钾本身所致的心室颤动,以及心脏神经对锑钾作用的影响。结果发现:一定剂量的锑鉮(依次地静脉注射3,6,12毫克/公斤)能显著地降低电致颤阈(9/10兔),并使心率稍有加速(8/10兔),血压缓慢而逐步下降;大剂量(24—36毫克/公斤)使血压迅速而显著下降,6/10兔出现锑致性心室颤动。在切断迷走神经,切除交感神经或利血平化以后,锑钾的降低电致颤阈的作用不仅被防止并且全部翻轉,阿托品(0.2或2毫克/公斤)均不能显著地影响这种致颤阈的降低。锑钾所致的心率加速作用为切除交感神经,利血平化或大剂量阿托品所防止而且翻轉,相反,在切断迷走神经与小剂量阿托品后,心率加速仍然出现。切断迷走神经与小剂量阿托品完全不能防止锑致性心室颤动,分别仍有4/5与5/6兔出现颤动,而切除交感神经,利血平化或大剂量阿托品则能完全防止之。此外,于不麻醉兔小剂量阿托品不影响,而大剂量阿托品能防止去甲腎上腺素的心律紊乱。根据实验结果,可以作出推论如下:在本实验条件下锑钾的降低电致颤阈的作用是与心脏交感神经的完整性或心内儿茶酚胺储存量有关;至于迷走神经的意义尚待阐明,可能为组成此反射弧的传入通路,而以交感神经为其传出通路。锑钾加速心率的作用及大剂量所致的锑致性心室颤动则与迷走神经无关,而是取决于交感神经的完整性或心肌内的儿茶酚胺储存量。大剂量阿托品对锑致性心室颤动与去甲腎上腺素的心律紊乱均有保护作用,这可能是通过对抗迷走神经以外的机制。     

精子介导法生产转基因牦牛杂种胚胎的研究

研究外源DNA转染对牦牛精子体外受精(IVF)、早期胚胎发育以及绿色荧光蛋白(GFP)基因在早期胚胎表达的影响。用构建融合人乳铁蛋白基因绿色荧光蛋白表达载体(pAcGFP1-hLF)转染的牦牛精子IVF黄牛卵母细胞,生产的胚胎在荧光显微镜下观察GFP表达情况。结果显示,用环形质粒、线性质粒pAcGFP1-hLF转染的精子及未转染精子IVF后的卵裂率分别为56.4%、54.8%和61.0%,线性转染的囊胚率显著低于环形转染(17.7%与35.7%)。环形质粒转染的精子用DNaseⅠ消化、不消化及未转染的精子IVF后卵裂率分别为44.8%、55.2%和56.3%,囊胚率分别为33.3%、33.3%和30.2%。未经DNaseⅠ消化洗涤的环形质粒组GFP胚胎阳性率显著高于线性质粒组(99.3%与76.6%);DNaseⅠ消化组GFP胚胎阳性率极显著低于不消化组(25.4%与99.3%)。结果表明,用环形质粒DNA转染牦牛精子不会影响其受精及早期胚胎发育能力,但DNaseⅠ消化洗涤显著降低GFP胚胎阳性率。     

变色酸显色法同时测定核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶活性

提出一个用变色酸-硫酸显色浊同时测定核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)羧化酶/加氧酶活性的方法:RuBP羧化酶/加氧酶与底物作用后,用碱性磷酸酯酶将其产物水解生成乙醇酸和甘油酸,然后与变色酸试剂在1:5的体积比下,沸水浴中显色反应90min,乙醇酸与变色酸反应生成红紫色化合物,甘油酸生成淡棕色化合物,分别在573nm,745nm各有一特征吸收峰。根据A_(573),A_(745)与乙醇酸和甘油酸浓度间的函数关系式,求出RuBP羧化酶/加氧酶活性。     

药物对实验血吸虫病 家兔机体反应的影响

(一)本文报告了药物对于血吸虫病病兔及正常家兔的红血球沉降率,血浆纤维蛋白,丙种球蛋白,凝血酶元时值及体重的影响。(二)酒石酸锑钾的治疗,无论在家兔患病的早期或后期,均可抑制其血沉的加速,而以早期治疗的抑制作用更为显著。同时这个抑制血沉的作用与治疗后的成虫发育率是符合的。因此利用这种方法,可以考虑作为研究一些治疗血吸虫病药物的疗效指标。(三)酒石酸锑钾及士的宁本身对正常家兔的血沉并不引起改变,士的宁对于病兔的血沉也无明显作用,但士的宁可以影响酒石酸锑钾对病兔血沉的抑制作用。 (四)半疗程剂量酒石酸锑钾并用士的宁之疗效较单独应用半疗程剂量酒石酸锑钾者为高(10—20%),而单独应用士的宁并无任何疗效,轻度激动量士的宁也不增加酒石酸锑钾的毒性。(五)酒石酸锑钾的治疗剂量对于正常家兔之血浆纤维蛋白元无明显影响,但能使病兔增高之血浆纤维蛋白元回复正常。(六)酒石酸锑钾的治疗可以使病兔的丙种球蛋白在一定时期内保持在接近正常值范围内,这一抑制作用与感染对照组相比,甚为明显,而氨苯氧烷却无此作用,这一点可能与疗效是有关系的。(七)酒石酸锑钾治疗后的病兔之体重较感染对照组病兔显著增高,而经氨苯氧烷治疗后之病兔,其体重仍日见减轻。(八)氨苯氧烷有较高的毒性,但疗效甚低,它对病兔的血沉及纤维蛋白元所出现的抑制作用,究竟属于对血吸虫或其虫卵的作用,抑系对于病兔机体的毒性作用,目前还不能肯定。     

微生物氧化As(Ⅲ)和Sb(Ⅲ)的研究进展

砷(Arsenic,As)和锑(Antimony,Sb)属于同族元素,具有相似的化学性质,是公认的有毒类金属(Metalloid),广泛存在于自然界中。随着人类的发展,环境中砷和锑的污染日益严重,类金属污染环境的修复已经刻不容缓。现已表明,自然界中的微生物在砷和锑的生物地球化学循环中发挥着重要的作用,尤其是微生物的氧化作用,可以将毒性较强的亚砷酸盐[Arsenite,As(Ⅲ)]和亚锑酸盐[Antimonite,Sb(Ⅲ)]氧化为毒性较低的砷酸盐[Arsenate,As(V)]和锑酸盐[Antimonate,Sb(V)],被认为是一种潜在的类金属污染环境修复方法。本文就国内外对As(Ⅲ)氧化菌和Sb(Ⅲ)氧化菌的多样性、As(Ⅲ)和Sb(Ⅲ)微生物氧化调控机制和应用的研究进展进行总结,旨在为深入了解和探索微生物介导的砷和锑生物地球化学循环及污染环境的微生物修复提供参考。