溶血磷脂酰胆碱对缺血条件下羊浦肯野纤维If电流的影响

本文用双微电极电压箝制术观察“缺血”及毒性代谢产物溶血磷脂酸胆碱（LPC）对绵羊心室浦肯野纤维起搏离子流If的影响。用模拟缺血溶液灌流15,30和60min后,在一60mV～120mV之间的各不同指令电位水平If离子流幅值均降低（n=5,P＜0．05）,激活达稳态时间及半激活时间延长（n=5,P＜0．05）,稳态激活曲线向超极化方向移位。在正常台氏液中加入2×10-5mol/LIPC,灌流后,各个膜电位水平的浦氏纤维起搏离子流If的幅值显著降低（n=10,P＜0.05）,稳态激活曲线向超极化方向移位,但If激活达稳态时间及半激活时间均无明显改变。在模拟缺血溶液灌流30min基础上,再加2×10－5mol／LLPC灌流,15min后测得If幅值进一步减小（n=10,P＜0．05）,加剧了“缺血”对If离子流的抑制作用。上述结果表明：缺血代谢产物溶血磷脂酸胆碱对心室的正常自律活动具有抑制作用,在模拟缺血条件下,它能使已受抑制的自律活动抑制进一步加深。因此它的存在不会异常增强心室自律性活动而发生快速性室性心律失常。     

“缺血”心肌起搏离子流If的观察研究

本文观察“缺血”及肾上腺素能激动剂对绵羊心室浦肯野纤维起搏离子流Ｉｆ的影响。用模拟缺血溶液灌流１５,３０和６０ｍｉｎ后,在Ｅｃ—６０ｍＶ—１２０ｍＶ之间的各不同指令电位水平Ｉｆ离子流幅值均降低（ｎ＝７,Ｐ＜０．０５）,激活达稳态时间及半激活时间延长（ｎ＝７,Ｐ＜Ｏ．０５）,激活曲线向超极化方向移位。１×１０－６ｍｏｌ／Ｌ异丙基肾上腺素能使Ｉｆ离子流幅值增加（ｎ＝１０,Ｐ＞０．０５）,激活达稳态时间及半激活时间缩短（ｎ＝１０,Ｐ＜０．０５）,激活曲线向除极化方向移位,但不能完全逆转“缺血”对Ｉｆ离子流的抑制作用。在５×１０－７ｍｏｌ／Ｌ普萘洛尔存在条件下,５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ新福林对正常绵羊心室浦肯野纤维Ｉｆ离子流影响不一致,但可加剧“缺血”对Ｉｆ离子流的抑制作用。上述结果表明：急性心肌缺血时,心室浦肯野纤维正常起搏活动不是增强,而是减弱。提示急性缺血性室性心律失常不是由于心室正常自律活动异常增强引起。     

心肌缺血时腺苷对绵羊浦肯野纤维If电流的影响

目的和方法：用双微电极电压钳技术,观察腺苷（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ,Ａｄ）对绵羊心室浦肯野纤维起搏离子流Ｉｆ的影响。结果：在正常台氏液中加入１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ Ａｄ灌流１５ｍｉｎ和３０ｍｉｎ后,在－７０￣－１２０ｍＶ所有膜电位,Ｉｆ离子流幅值均降低（ｎ＝１２,Ｐ〈０．０５￣０．０１）,引起激活曲线向超极化方向移位,但Ｉｆ稳态激活时间无明显改变。“缺血”１５ｍｉｎ和３０ｍｉｎ后,在－７０￣－１２０ｍＶ     

LPC对缺血心肌起搏离子流的影响及ISO的效应

目的:观察在缺血条件下,溶血磷脂酰胆碱(LPC)对心肌起搏离子流(If)的影响以及能否被异丙肾上腺素(ISO)逆转.方法:采用双微电极电压钳制术,在各钳制电位测定并比较缺血心肌加入LPC和LPC加ISO的起搏离子流(If)幅值.结果:缺血降低If幅值,在模拟缺血液中加入LPC 2×10-5mol/L,If幅值在Ec -80～-120 mV水平进一步显著降低(n=5,P<0.05),加重了缺血对If离子流的抑制作用.在模拟缺血液中同时加入LPC 2×10-5mol/L和ISO 1×10-6mol/L,If幅值在Ec -90～-120 mV水平比模拟缺血时有显著增加(n=8,P<0.05),但未能达到缺血前基础水平.结论: 急性心肌缺血时,毒性代谢产物 LPC 加重起搏离子流的受抑程度,即使局部儿茶酚胺大量释放和积聚,也不能完全逆转上述抑制效应.     

缺血对心室浦肯野纤维跨膜电位和起搏离子流的影响

采用细胞内微电极和双微电极电压箝制术观察缺血对绵羊心室浦肯野纤维跨膜电位和起搏离子流（Ｉｆ）的影响。结果：模拟缺血液灌流３０ｍｉｎ,浦肯野纤维最大舒张电位（ＭＤＰ）、动作电位幅度（ＡＰＡ）明显减少;动作电位时程ＡＰＤ５０,ＡＰＤ９０明显缩短（ｎ＝１５Ｐ＜０．０１）;起搏离子流（Ｉｆ）,幅度降低,激活曲线向超极化方向移位,最大激活时间及半最大激活时间延长（ｎ＝１３Ｐ＜０．００１）。上述结果表明：心肌缺血时,心室浦肯野细胞跨膜电位及正常起搏活动不是增强,而是减弱。提示缺血性室性心律失常不是由于正常心室自律活动异常增强引起     

去甲肾上腺素引起蟾蜍背根神经节神经细胞膜电位变化的离子机制

本文应用细胞内记录方法,对去甲肾上腺素(NA)引起蟾蜍背根神经节(DRG)神经细胞膜电位去极化或超极化反应时的膜电导及翻转电位值进行了测量,并观察了钾和钙离子通道阻断剂灌流DRG对NA引起膜电位反应的影响。当NA引起去极化反应时,15个细胞的膜电导减小32.6％。少数细胞膜电导开始增加,继而减小(n=4)。NA超极化反应时膜电导增加13.2％(n=8)。NA去极化反应的翻转电位值为-88.5±0.9mV((?)±SE,n=4),NA超极化反应在膜电位处于-89至-92mV时消失。 钾通道阻断剂四乙铵可使NA去极化幅值增加73.7±11.9％((?)±SE,n=7),并使NA超极化幅值减小40.5％(n=4)。细胞内注入氯化铯使苯肾上腺素去极化幅值增加34.5％(n=4)。钙通道阻断剂氯化锰使NA去极化及超极化反应分别减小50.5±9.9％((?)±SE,n=10)和89.5±4.9％((?)±SE,n=7)。结果提示,NA引起DRG神经细胞膜电位的去极化或超极化反应,可能与膜的钾及钙通道活动的改变有关。     

乙酰胆碱对蟾蜍背根神经节神经元膜电位的影响及离子机制

在离体灌流的蟾蜍背根神经节(DRG)标本上,用微电极进行胞内记录。在73个神经元中,依神经纤维的传导速度将神经元分为 A 型及 C 型,其中 A 型细胞67个,C 型6个,静息膜电位为-67.5±1.3mV((?)±SE)。当加4×10~(-4)—6×10~(-4)mol/L 乙酰胆碱(ACh),可观察到如下四种膜电位变化:1.超极化:幅值9.1±3.0mV((?)±SE,n=23);(2)去极化:幅值12.9±2.2mV((?)+SE,n=20);(3)双相反应(n=24):先超极化,后去极化,超极化幅值8.0±2.4mV((?)+SE),去极化幅值10.9±3.1mV((?)±SE);(4)无反应(n=6)。用阿托品(1.3×10~(-5)mol/L,n=23),或同时应用筒箭毒与六甲双铵(浓度均为1.4×10~(-5)mol/L,n=8)灌流,能分别阻断 ACh 引起的膜的超极化或去极化。ACh 引起超极化反应时膜电导平均增加13.8%,翻转电位值大约-96mV。四乙铵(TEA,20mmol/L)能使 ACh 的去极化幅值增加48.2±3.2%((?)±SE,n=6),超极化幅值减小79.4±4.3%((?)±SE,n=8)。MnCl_2(4mmol/L)使 ACh 的去极化及超极化幅值分别减小54.2±7.2%((?)±SE,n=5)及69.2±6.4%((?)±SE,n=14)。以上结果提示:ACh 引起的 DRG 神经细胞膜去极化反应由 N 型乙酰胆碱受体介导,而超极化反应由 Μ 型乙酰胆碱受体介导,前者可能包含了多种离子电导的改变,后者则可能与钾电导增加有关。     

“缺血”引起的绵羊浦肯野纤维跨膜电位与离子流变化

以低氧、高钾、低pH、无能量供应的模拟缺血溶液灌流离体绵羊心脏浦肯野纤维,观察“缺血”对心肌跨膜电位和离子流的影响。实验共24例。跨膜电位的变化过程如下:模拟缺血液灌流后2-3min,首先出现最大舒张电位(MDP)轻度除极,4期舒张除极速率减慢,随后动作电位时程(APD)缩短(n=13)或先缩短、后延长、再缩短的变化(n=11),平台逐渐消失,最后MDP进一步除极,动作电位波幅(APA)减小,兴奋性逐渐降低,以致不能引出动作电位(AP)。其中6例即使MDP高于-60mV时AP已不能引出。以上变化过程历时长短不等,在不同标本为30-160min。跨膜离子流方面,当APD缩短时,在所有膜电位水平即时外向电流都明显增加。稳态电流-电压关系曲线由正常的S形变成直线,内向整流现象消失。慢内向离子流由“缺血”前的6.74±4.48nA减少到0.86±1.39nA,(M±SD,P<0.01,n=8),在多数测试电位水平都有显著减少,其电流-电压关系曲线向较负电位方向移位。以上结果提示:心肌“缺血”时浦肯野细胞起搏功能受抑制,细胞内大量K~+外流,Ca~(2+)内流减少,心肌细胞除极,以上多种变化可能为心肌缺血时心律失常发生的原因。     

去甲肾上腺素对蟾蜍背根神经节细胞α-肾上腺素能受体的作用

在蟾蜍离体灌流背根神经节(DRG)标本上,用微电极进行细胞内记录。在51个细胞中A型神经元为46个,C型5个。此两类细胞的静息膜电位为60.06±1.34mV(x±SE)。当灌流液中滴加10~(-4)-10~(-3)mol/L去甲肾上腺素(NA)引起如下的膜电位改变:(1)超极化:幅值8.38±1.12mV(x±SE)(20/48);(2)去极化:幅值9.39±1.24mV(x±SE)(23/48);(3)无反应(5/48)。上述膜电位改变既不能由灌流液中滴加异丙基肾上腺素所拟似,也不能为心得安所阻断,因而排除了β-肾上腺能受体介导的可能性。加苯肾上腺素及可乐宁于灌流液,分别产生膜的去极化和超极化,而应用哌唑唪及育亨宾灌流,则分别阻断NA引起的膜去极化和超极化。因此认为:NA引起的DRG神经元的去极化和超极化反应分别是由胞体膜上之α_1-及α_2-肾上腺素能受体所介导的。     

银杏苦内酯B对豚鼠模拟缺血心室肌细胞L-型钙电流及胞内游离钙的影响

应用全细胞膜片钳及激光共聚焦技术 ,研究银杏苦内酯B(ginkgolideB ,GB)对豚鼠心室肌细胞L 型钙电流及胞内游离钙的作用 ,并探讨GB心肌保护作用的机制。实验结果显示 ,在指令电压为 0mV时 ,GB对生理状态下豚鼠心室肌细胞L 型钙电流无明显作用。在模拟缺血状态下 ,L 型钙峰值电流减小 3 7 71% ,但加入 1μmol/LGB后 ,可逆转缺血引起的L 型钙电流的降低 ,与缺血对照组比较 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。 1μmol/LGB能使由于模拟缺血而上移的L 型钙电流 电压曲线回复正常。在生理状态下 ,0 1、1、10mol/LGB分别使心肌细胞内游离钙降低 10 5 8%(n =12 )、17 2 7% (n =12 )、16 3 5 % (n =10 ) ,与对照组相比有非常显著性差异。模拟缺血液灌流 12min时 ,细胞内游离钙浓度增加 2 0 15 % ,在模拟缺血液中分别加入 1μmol/Lnifedipine或 5mmol/LNiCl2 ,结果显示 :模拟缺血液灌流 12min ,与正常对照组相比细胞内钙分别增加 18 18% (P >0 0 5 )与 11% (P <0 0 5 )。在模拟缺血液中加入1mol/LGB灌流 12min时细胞内钙仅增加 9 60 % (n =12 ,P <0 0 0 1) ,与缺血对照组相比有显著性差异 (P <0 0 5 )。结果表明 ,GB可逆转模拟缺血造成L 型钙电流的降低 ,同时可部分减轻由于缺血所造成的细胞内钙的超载     

尼氟灭酸通过钙库钙释放引起豚鼠耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞超极化(英文)

本研究旨在观察氯离子通道阻断剂尼氟灭酸（niflumic acid,NFA）引起豚鼠耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞产生超极化的机制。以豚鼠为实验动物,运用细胞内微电极和全细胞膜片钳记录技术,观察NFA和其它药物对急性分离的耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞的作用。结果显示：NFA、indanyloxyacetic acid94（LAh-94）和diSOdium4,4’-diisothiocyanatostilbene-2,2’-disulfonate（DIDS）可使低静息膜电位的细胞产生超极化,但对高静息膜电位的细胞无明显作用。低静息膜电位细胞的平均静息电位为（-42．47&#177;1．38）mV（n=24）,100μmol／LNFA、10μmol／LIAA-94和200μmol／LDIDS分别使细胞超极化至（13．7&#177;4．3）mV=9,P〈0．01）,（11．4&#177;4．2）mV（n=7,P〈0．01）和（12．3&#177;3．7）mV（n=8,P〈0．01）,这种氯离子通道阻断剂引起细胞超极化反应的效应呈浓度依赖性。NFA引起的超极化和外向电流几乎完全被100nmol／L iberiotoxin、100nmol／L charybdotoxin、10mmol／L tetraethylammonium、50μmol／LBAPTA—AM、10μmol／Lryanodine和0．1-10mmol／Lcaffeine阻断,但不能被100μmol／Lnifedipine、100μmol／LCdCI,和无Ca^2＋灌流外液阻断。结果捉示：氯离_了通道的阻断剂NFA可通过平滑肌细胞内钙库的钙释放增加细胞内钙,进而激活钙依赖的钾通道,产生耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞的超极化反应。     

乙酰胆碱不依赖NO的释放引起耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞的超极化

目的：乙酰胆碱（ACh）不仅是神经递质,也是一种有效的血管舒张物质参与许多血管床的调节活动。本实验观察ACh引起耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞超极化的离子机制以及NO在超极化反应中的可能作用。方法：在豚鼠离体耳蜗螺旋动脉标本上,运用细胞内微电极技术记录外源性的ACh引起的反应。结果：在保持灌流液中含有5mmol／L K^＋以及最小纵向张力的情况下,ACh（0．1—10μmol／L）引起低静息膜电位细胞明显的超极化反应,而引起高静息膜电位细胞明显的去极化反应。ACh引起的平滑肌细胞超极化反应是浓度依赖性的（ACh的浓度是1μmol／L和10／μmol／L时,分别引起超极化的幅度是22和30mV,n=7）。ACh引起的超极化反应能被阿托品（atropine,0．1～1μmol／L,n=6）或DAMP（50～100nmol／L,n=6,一种选择性的地受体的拮抗剂）所阻断,同时也可被BAPTA—AM（10μmol／L,n=7,一种可通过细胞膜的Ca^2＋螯合剂）或eharybdotoxin＋apamin（50-100nmol／L,n=4,两种Ca^2＋激活K^＋通道的阻断剂）所阻断,但是Nω-nitro-L-arginine methyl ester（L-NAME,300μmol／L,n=8,一种NO合成酶的完全抑制剂,n≥5）或glipizide（10μmol／L,ATP敏感性的K^＋通道阻断剂,n=4）或indomethacin（10μmol／L,环氧合酶的抑制剂,n=4）不能阻断ACh引起的超极化反应。结论：ACh通过激活内皮细胞的M3受体,开放钙依赖的钾通道．进而引起耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞产生超极化反应,并且这一超极化反应与内皮细胞NO的产生和释放无关。     

海马脑片锥体神经元钙离子通道的盲法膜片钳研究

目的和方法 :采用大鼠海马脑片盲法膜片钳全细胞记录技术研究CA1区锥体神经元电压门控性Ca2 通道的动力学特征。结果 :大鼠海马脑片CA1区锥体神经元电压门控性Ca2 通道电流具有如下特点 :①激活的阈电位偏低 ,为 (- 4 9.3± 8.6 )mV ,范围为 - 6 5～ - 30mV(n =2 3)。②衰减时间常数τ值较大 ,且变化范围大 (10 0～ 70 0ms) (n =12 ) ,并且衰减具有Ca2 电流幅值的依赖性 ,③稳态失活呈现电压依赖性 ,半失活电压为 (- 5 5 .4± 9.7)mV ,斜率因子为 (5 .3± 0 .9)mV(n =10 )。④当细胞外Ca2 浓度为 2 .5mmol/L时 ,Ca2 通道的反转电位为 (5 5±13)mV(n =10 )。⑤尾电流成分较为单一 ,不表现电压依赖性。另外 ,Ca2 电流对戊脉胺及双氢吡啶类化合物硝苯地平均不敏感。结论 :根据上述Ca2 电流特征 ,海马脑片CA1区锥体神经元上的Ca2 通道主要以N型为主     

幼鼠和成年大鼠心室肌细胞起搏电流的改变

目的:运用膜片钳全细胞技术和实时定量聚合酶链式反应(PCR),探讨幼鼠和成年大鼠心室肌细胞起搏电流(If)及超极化激活的环核苷酸门控通道(HCN)亚型的改变。方法:分离3d的幼鼠和成年大鼠的心室肌细胞;测定HCN1、HCN2、HCN3和HCN4 mRNA的表达;记录If并研究其特性。结果:在新生大鼠心室肌细胞记录到If并得到电流密度-电压曲线,其激活电压约为-75mV;实时定量PCR检测HCN1、HCN2、HCN3和HCN4 mRNA在总HCN mRNA的表达中所占比例分别为0.23%±0.01%、83.58%±0.04%、0.79%±0.01%和15.44%±0.01%。在成年大鼠心室肌细胞也记录到超极化激活、并可以被4mmol/LCsCl阻断的If,其激活电压约为-115mV;HCN1、HCN2、HCN3和HCN4 mRNA在总HCN mRNA中所占比例分别为0.72%±0.02%、91.58%±0.08%、0.27%±0.02%和7.12%±0.02%。HCN2∶HCN4为(13.06±0.21)∶1。结论:随着年龄的增长,大鼠心室肌细胞HCN2所占比例增加;If值减小,激活电压变负。     

糖皮质激素引起哺乳类神经元超极化反应的离子机制

在豚鼠腹腔神经节上对383个神经元作细胞内记录,给予1μmol／L半琥珀酸皮质醇灌流,38个神经元膜电位发生超极化反应,幅度变化为2～12mV（6．3±0.1mV）,伴有膜电阻的降低,反应呈剂量效应关系。9个神经元呈去极化反应,其余336个神经元不反应。用单电极间断电压箝方法记录43个神经元在糖皮质激素作用下膜电流的变化,其中5个神经元出现外向电流,膜电导增加;1个神经元为内向电流。用低钙高镁液阻断突触传递和蛋白质合成抑制剂放线菌素D后,超极化反应仍然存在。皮质醇超极化反应的翻转电位为-79.0±4.3mV（n=5）。皮质醇超极化反应和GABA去极化反应可在同一神经元上出现,印防己毒素可拮抗GABA的去极化反应,但不能拮抗皮质醇的超极化反应。钾离子通道阻断剂四乙基铵（TEA）和4-氨基吡啶（4-AP）能拮抗皮质醇的超极化反应。我们推断皮质醇的超极化反应是细胞膜钾离子通道介导的。     

急性低温/再复温对大鼠心室肌膜电位和钾电流的影响

本文旨在研究急性低温/再复温对大鼠心室肌膜电位和钾电流的影响.膜电位和膜电流分别在全细胞膜片钳的电压钳和电流钳模式下记录.当细胞外灌流液从25℃降低到4℃后,一过性外向电流(transient outward current, Ito)完全消失,膜电位为 60mV时的稳态外向K 电流(sustained outward K current, Iss)和膜电位为-120mV时的内向整流K 电流(inward rectifier K current, IK1)分别降低(48.5±14.1)%和(35.7±18.2)%,同时,膜电位绝对值降低.当细胞外灌流液从4℃再升高到36℃后,膜电位出现一过性超级化,然后恢复到静息电位水平;在58个细胞中,有36个细胞伴随复温出现ATP-敏感性K (ATP-sensitive K , KATP)通道的激活.再复温引起的上述变化可以被Na /K -ATP酶抑制剂哇巴因(100μmol/L)所抑制.再复温引起的KATP通道激活也能被蛋白激酶A抑制剂H-89(100μmol/L)所抑制.在细胞膜电位被钳制在0mV时,当细胞外灌流液温度从25℃降低到4℃后,细胞的体积没有发生明显改变,但当再复温引起KATP通道激活后,细胞很快发生皱缩,同时细胞内部出现许多折光较强的斑点.上述结果表明急性低温/再复温对大鼠心室肌膜电位和K 电流有明显影响,并提示KATP通道激活可能与心肌低温/再复温损伤有关.     

应激对大鼠心室肌细胞L-型钙离子通道的影响

目的 :研究应激对心室肌细胞L 型钙离子通道电流及激活、失活门控动力学特性的影响。方法 :制备离体心室肌细胞并用去甲肾上腺素 (NE)诱导建立应激心肌细胞模型 ,应用流式细胞术 (FCM )和Fura 2荧光分光光度法测定应激心室肌细胞的凋亡率和心肌细胞内游离钙浓度变化。利用膜片钳全细胞钳制记录法记录应激心室肌细胞L 型钙离子通道电流I V曲线图及稳态激活、失活曲线图。结果 :FCM检测发现 1 0 - 4mol/L的NE模拟应激可导致心室肌细胞凋亡率明显上升 ,对照组 :0 .36 % ,应激组 :2 .1 7% (P <0 .0 1 )。 1 0 - 4mol/L的NE干预使Ica L峰电流幅值显著性上升 ,激活曲线分析发现应激后曲线明显左移 ,半数最大激活膜电位 (V1 /2 )为 (- 1 4 .59± 0 .2 4 )mV ,较之于对照组 :(- 0 .69± 0 .36)mV ,差异显著 ,而稳态失活曲线特性未发生有意义的改变。实验组心肌细胞内游离钙浓度较对照组升高 1 6 .7%。结论 :应激可导致L 型钙离子通道电流增加 ,通道更易于激活 ,通道的这种异常活动可能导致钙超载 ,从而引起心肌细胞凋亡 ,介导应激性心肌损伤的发生     

三氟氯氰菊酯对棉铃虫神经细胞延迟整流钾电流的抑制作用

用膜片钳技术首次研究了三氟氯氰菊酯对离体培养的棉铃虫中枢神经细胞延迟整流钾通道电流的影响。结果表明,药物作用前有81%和39%的细胞的通道分别在-30 mV 和 -40 mV 激活（n=21）。三氟氯氰菊酯（10^-5 mmol/L）作用15 min后,有63%和38%细胞的通道分别在-40 mV 和 -50 mV 激活（n=8）;作用1 min后电流幅值明显降低,抑制率达到了37.7%（n=19）;加药后激活曲线明显左移且Vh 值变化显著,但k值没有明显变化。实验结果说明,三氟氯氰菊酯作用后,通道更容易激活,但显著抑制电流峰值,导致神经敏感性降低,棉铃虫中枢神经细胞钾通道也是拟除虫菊酯类药物的作用靶标之一。     

血管紧张素Ⅱ对模拟缺血心室肌细胞L-型钙通道的影响

实验研究了血管紧张素II（AngⅡ)对模拟缺血心室肌细胞L－型钙离子通道的作用,用胶原酶酶解法急性分离豚鼠心室肌细胞,以全细胞膜片钳方法记录心室肌细胞的L－型钙电流（ICa L.)。采用低氧,无糖,高乳酸和酸中毒综合方式模拟缺血液灌流,造成心室肌细胞的模拟缺血,并在缺血的基础上继续用含100mmol/A AngⅡ灌流细胞,观察AngⅡ对模拟缺血心室肌细胞钙离子通道的影响,实验结果显示,模拟缺血时ICa.L峰值电流明显减小,最大激活电压为0mV,AngⅡ能抵抗模拟缺血对ICa,L的抑制效应,使ICa,L峰值电流增大,并使最大激活电压左移至－10mV。     

血小板活化因子对豚鼠心室肌细胞动作电位和钾通道的影响

应用全细胞膜片钳技术研究了血小板活化因子(platelet activatingfactor,PAF)对豚鼠心室肌细胞动作电位和钾电流的影响.结果发现,当电极内液ATP浓度为5 mmol/L(模拟正常条件)时,1 μmol/L PAF使APD90由对照的225.8±23.3 ms延长至352.8±29.8ms(n=5,P＜0.05);使IK尾电流在指令电压 30 mV由对照的173.5±16.7 pA降至152.1±11.5 pA(P＜0.05,n=4);使Ikl在指令电压为-120 mV时由对照组的-6.1±1.3 nA降至-5.6±1.1 nA(P＜0.05,n=5);但PAF在生理膜电位范围(-90mV～ 20mV)对IK1没有影响.当电极内液ATP浓度为0mmol/L时,IK·ATP开放(模拟缺血条件),1 μmol/LPAF却显著缩短APD90,由对照的153±24.6 ms缩短至88.2±19.4 ms(n=5,P＜0.01).而用1 μmol/L格列本脲(IK·ATP的特异阻断剂)预处理后,恢复了PAF可显著延长动作电位时程的作用.结果提示,PAF可能扩大缺血心肌和正常心肌细胞动作电位时程的不均一性,是缺血/再灌注性心律失常发生的重要原因.