二苯胺棉酚中棉酚的含量测定

用紫外分光光度法测定二苯胺棉酚中棉酚的含量。方法回收率平均达 93.6 %以上 ,变异系数 ( CV )为1.2 %。该方法准确 ,重现性好 ,可作为二苯胺棉酚质量监控方法。     

棉酚对大鼠前列腺细胞增殖的影响

The effect of gossypol on prostate cells of rat was studied both in vitro and in vivo. For in vivo study, mature male Sprague Dawley rats were given gossypol orally, 5 mg/day, 5 times a week for one month. Then the prostates were examined histologically. By adding gossypol to the culture system directly, NbE-1 cells were used in vitro study. Several parameters, including histological structure, cell growth, DNA synthesis and mitotic cycle of cells were measured by different methods. The prostate size and weight in experimental rats decreased and significant differences between acini in controls and gossypol treated animals were noted. Acini of control prostate were full of protruding folds constituted by columnar epithelial cells, whereas, the most of the acini in treated animals were composing of cubic or square epithelial cells and epithelial folds were rarely seen. Thus, acini with normal appearance were about 14% less than that in controls. In the in vitro experiments, both cell proliferation and DNA synthesis decreased from 0 to 80% and from 0 to 90% respectively, when the concentrations of gossypol were increased from 0 to 20 micrograms/ml. It seems that 10 micrograms/ml of gossypol could cause the most significant inhibition in these two cellular functions. The cell mitotic assay showed that in treated groups, the cell number of S phase was decreased from 43 to 31%, this fact indicated that the inhibition on cell proliferation caused by gossypol might be due to preventing cells to enter S phase. Besides, inhibition effect on the proliferation of prostatic epithelial cells was dosage dependent and related to the duration of treatment.     

醋酸棉酚诱导人粘液表皮样癌MEC-1细胞DNA双链断裂

本文研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对人粘液表皮样癌细胞MEC-1体外增殖的影响,并初步探讨其抑制肿瘤细胞增殖的机制.体外培养人粘液表皮样癌细胞系MEC-1细胞,用MTT法检测GAA对MEC-1细胞增殖的影响;用中性彗星实验检测GAA对MEC-1细胞的DNA双链断裂;用免疫荧光染色法检测...     

棉酚对金鱼生殖机能影响的研究

棉酚对金鱼生殖机能影响的研究富惠光,叶继丹,卢彤岩,张良（中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,哈尔滨１５００７０）关键词棉酚,金鱼,生殖ＥＦＦＥＣＴＯＦＧＯＳＳＹＰＯＬＯＮＲＥＰＲＯＤＵＣＴＩＯＮＯＦＧＯＬＤＦＩＳＨ（ＣＡＲＡＳＳＩＵＳＡＵＲＡＴＵＳ...     

薄荷油对雄性小鼠的抗生育作用研究

目的探讨薄荷油对雄性小鼠的抗生育作用。方法将60只健康的雄性性成熟昆明小鼠随机分成3个试验组和1个对照组,各试验组小鼠灌胃0.135 g/(kg·d),0.27 g/(kg·d)和0.54 g/(kg·d)的薄荷油0.5%羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethylcellulose,CMC)混悬液,对照组灌胃0.5%羧甲基纤维素钠溶液,灌胃1周后按雌雄比2∶1合笼,继续对雄鼠灌胃至19 d,采集雄性小鼠的血液并测定血液生化指标,剖检灌胃雌雄小鼠,统计雌性小鼠的怀孕率,测定雄性小鼠睾丸与附睾的脏器系数及附睾精子活力,并固定睾丸和附睾,研究其组织学变化。结果与对照组相比较,雄性小鼠灌胃薄荷油后,导致雌性小鼠的怀孕率降低,睾丸脏器系数和附睾精子活率极显著降低(P<0.01),精子畸形率极显著升高(P<0.01)。光学显微镜下,试验组小鼠睾丸和附睾均有一定程度的损伤,睾丸间质减少,睾丸各级生精细胞排列疏松,曲细精管内有多核巨噬细胞浸润。附睾具正常的管腔结构,但能明显观察到管腔内精子减少。结论薄荷油对雄性小鼠具有抗生育作用,且主要通过影响精子的生成及破坏生精组织而达到,具有实际应用价值,可进一步开发成环境友好型鼠类抗生育药剂。     

棉酚抗生育作用的研究 Ⅱ.棉酚抗生育作用的形态学分析

利用电子显微镜观察到小剂量棉酚能引起大白鼠精子发生后期精子细胞的中段线粒体肿胀,证明在大白鼠睾丸中对棉酚最敏感的成分是成熟期精子细胞。     

棉酚抗生育新机制——对磷脂酶A_2活力的抑制作用(英文)

 采用微孔比色法及荧光分析法 ,研究抗男性生育化合物棉酚与猪胰腺磷脂酶A2 (phospho lipaseA2 ,PLA2 ,EC3 1 1 4 )温育并透析前后对酶活力及荧光的影响 .结果表明 ,棉酚与PLA2 不可逆地结合明显地降低了PLA2 活力及荧光强度 .棉酚对酶活力抑制作用的IC50 为 35μmol L ;当其浓度达到 80 μmol L时 ,能够完全抑制PLA2 ( 4 11μmol L)对合成底物 2 硫代十六酰乙基磷酸胆碱(HEPC ,0 .2 5mmol L)的水解作用 .PLA2 的最大激发波长与发射波长分别为 2 75nm ,34 3nm ,荧光强度与酶浓度呈良好的线性关系 .棉酚对PLA2 的荧光具有较强的淬灭作用 .由于PLA2 与男性生育密切相关 ,棉酚对PLA2 活力的影响可能是其避孕作用及伴随的副作用的一种新的重要机制     

棉酚甲酸对金鱼精子质膜的影响

利用冷冻断裂-蚀刻制样技术,在超微结构水平上研究了棉酚甲酸对金鱼精子质膜内蛋白颗粒排列图式(包括晶格区)的影响.结果表明,棉酚甲酸能够使金鱼精子质膜内蛋白颗粒分布不匀:或者颗粒聚集成团,或者质膜内出现无颗粒区域;并且还能使质膜内特定部位晶格区的颗粒排列发生混乱.这些变化表明棉酚甲酸能使精子质膜的有序性降低,也即增加了质膜的流动性.     

棉籽中游离棉酚的含量测定

用紫外分光光度法测定棉籽中游离棉酚的含量。脱除棉酚的棉籽乙醚提取物经石油醚和 75 %乙醇分离和纯化后 ,用 0 .5 %对氨基苯磺酸显色来检测棉籽中游离棉酚的含量 ,结果表明 ,该方法具有简便、重现性好、回收率高达 97%以上等优点 ,可作为棉籽中游离棉酚质量控制方法。     

醋酸棉酚对大鼠睾丸HCG反应性及其受体功能的影响

给大鼠灌服醋酸棉酚30 mg/kg/d,每周6次,持续4周。给药2周后,血浆睾酮水平显著下降并持续至第4周,同时间质细胞呈萎缩性改变。醋酸棉酚明显抑制成年大鼠对HCG反应性,使睾丸LH/HCG受体亲和力下降,受体数目略有减少。结果提示,醋酸棉酚抑制大鼠睾丸酮的产生及降低成年大鼠睾丸对HCG的反应性,推测其机制是由于醋酸棉酚干扰了睾丸HCG受体功能而造成的。     

棉酚对大鼠前列腺细胞增殖的影响

我们从体内及体外二个方面研究了棉酚对大鼠前列腺细胞的影响。在体内研究中,给成年SD大鼠口服棉酚对其前列腺作组织学观察;在体外研究中,将棉酚溶液直接加入培养系统中,对包括组织学结构、细胞生长速度、DNA合成状态及细胞分裂周期等多项指标进行分析。实验结果指出,在形态学上,经棉酚处理的大鼠前列腺的体积及重量均下降,与对照组有明显差异;二组前列腺的腺泡在组织学结构上也有明显不同:对照组前列腺的腺泡中充满突出的褶襞,由饱满的立柱形的上皮细胞构成这些褶襞及腺泡壁;而在实验组的腺泡中褶襞较少,构成褶襞及腺泡壁的为方形或扁方形的细胞。而腔内具有褶襞的腺泡总量实验组低于对照组约14%。根据体外实验的结果,可见随着棉酚浓度的增加,细胞增殖水平和DNA合成水平也相应下降,而呈剂量及时间的相关效应,其中10μg/ml的剂量能引起最大的抑制作用。根据对细胞分裂周期的分析,在棉酚组细胞进入S期的比例仅为全部细胞的31%,而对照组则为41%,这进一步说明了由于棉酚阻碍细胞进入S期从而抑制了细胞的增殖。     

棉酚对几种动物精子ATP酶抑制作用的比较研究

本文比较了棉酚对几种动物精子ATP酶的抑制作用。实验所测为精子细胞的总ATP酶活力;采用的棉酚浓度为10μM至80μM。20μM时精子酶的相对活力为海胆7604％,大鼠74％,家兔51.6％;40μM时酶的相对活力百分数下降至海胆52.5,大鼠35和家兔29.7;达80μM时酶的相对活力进一步下降至海胆26.7,而大鼠及家兔仅余13.2。结果表明(1)棉酚对精于ATP酶的抑制作用是依赖浓度的变化;(2)各种动物精子ATP酶活力的下降情况显示,大鼠及家兔(哺乳动物)精子ATP酶对棉酚的敏感性比海胆(无脊椎动物)要高些。这种差异性可能对棉酚在临床上的应用具有一定的参考价值。     

口服醋酸棉酚前后人精子体外受精能力及精核转变的细胞学观察

本文报道口服醋酸棉酚对人精子体外受精能力、原核及染色体形成的影响。结果表明,在口服醋酸棉酚前的9名男性精子对金黄地鼠卵的穿透率平均为62%。每日口服20mg醋酸棉酚15天后,精子对卵的穿透率下降至47%,30天后下降至24%,50天后下降至8%。即口服醋酸棉酚50天后达到了不再具有生殖能力的精子穿透率阈值(10%)以下。原核及染色体形成的观察表明,即使口服醋酸棉酚50天后,仍可见有完整原核的形成,并未见有明显的染色体畸变。综述上列结果,似乎表明口服醋酸棉酚虽可影响人精子对去除透明带金黄地鼠卵的穿透率,而进入卵内的精子仍可形成原核及染色体。因此,仅从成熟精子的生理功能而论,口服醋酸棉酚期间它似乎并不产生可察觉的致畸效应,这与醋酸棉酚对体细胞并无致畸作用的报道相一致。     

野生大家鼠和实验大白鼠血红蛋白和乳酸脱氢酶同工酶的比较研究

本文对野生大家鼠（Ｒａｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）和Ｗｉｓｔａｒ品系实验大白鼠的血红蛋白（Ｈｂ）及组织的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶进行了电泳分析,结果表明,两种鼠均表现了Ｈｂ的多态性,其中ＨｂＩ型都含有８个成分,各成分的泳动率相同。两种鼠的心脏ＬＤＨ同工酶都含有ＬＤＨ１,ＬＤＨ２,ＬＤＨ３和ＬＤＨ５,而且各谱带泳动率相近似,其余组织ＬＤＨ谱带泳动率有明显的差异,表现了组织和种（或品系）的特异性。从电泳图谱上发现Ｗｉｓｔａｒ大鼠ＬＤＨ５（Ａ或Ｍ亚基纯合体）出现亚带,而ＬＤＨ１（Ｂ或Ｈ亚基纯合体）则未发现,可确定变异是由于Ａ或Ｍ亚基位点发生突变,出现等位基因而导致。对褐家鼠的ＬＤＨ４出现亚带也进行了讨论     

棉酚对海胆精子鞭毛轴丝及力蛋白(Dynein)ATP酶的抑制作用

本工作观测了不同浓度棉酚(10—80μmol/L)对海胆精子鞭毛轴丝及力蛋白ATP酶的影响,发现棉酚对之具有剂量依赖方式的抑制作用。 实验对比了几种ATP酶抑制剂对轴丝ATP酶的作用,结果表明它们之间差别很大。使酶活力下降一半所需的各种抑制剂浓度分别为:钒酸钠17μmol/L;棉酚36μmol/L;槲皮酮450μmol/L,DCCD[双环已基碳化二亚胺(Dicyclohexylcarbodiimide)]1,600μmol/L;乌本苷>2,000μmol/L。 本文对棉酚的杀精机理,抑制强度及其控制生育的意义进行了讨论。     

血-附睾屏障的电生理学及超微结构研究

用玻璃微电极记录大鼠跨附睾上皮细胞电位差。附睾头,附睾体和附睾尾的电位差分别为-5.61±0.42,-4.36±0.38和-4.12±0.23毫伏,腔内为负(均值±S.E.)。用接近生理渗透压(360 mOsm/kg·水),含2%硝酸镧示踪物的灌流液分别从大鼠精索内动脉和附睾管腔内灌流,观察到附睾上皮细胞之间的各种结构形式的连接复合体是血一附睾屏障的超微结构位点。证明小分子的硝酸镧可以通过五合式或纤维式的连接结构,但不能通过附睾上皮细胞间的桥粒复合体和间隙连接。并从生理学和形态学上均证明有血-附睾屏障的存在。棉酚处理后(30毫克/公斤体重/日),附皋的跨上皮电位差的绝对值降低。附睾头,附睾体及附睾尾分别为3.58±0.23,4.13±0.27和3.03±0.18毫伏,腔内为负。其中附睾头与附睾尾的电位变化有明显的统计学意义。附睾上皮细胞对硝酸镧的通透性也稍有增加。     

三种鼠科动物血浆超氧化物歧化酶和乳酸脱氢酶以及血浆蛋白成分的比较分析

本文利用SOD和LDH在一块凝胶板上同时显色的优点,电泳分析黑线姬鼠(Apodemus agrarius)、褐家鼠(Rattus norvegicus),黄胸鼠(Rattus flavipectus)血浆SOD和LDH同工酶以及血浆蛋白成分。结果表明,LDH为有色区带,SOD为无色透明区带,而且SOD比LDH泳动快,两类区带互不重迭,以致3种鼠血浆中SOD和LDH的图谱清晰可辨。由于黑线姬鼠的SOD和LDH的泳动度不同于其余2种鼠,周此3种鼠的图谱各具特征。3种鼠血浆蛋白中的前清蛋白和铁传递蛋白区带数和泳动度亦具有明显差异,说明上述酶分子亚基和血浆蛋白分子的化学结构不同,成为种间差异在分子水平上典型的表现。     

用收集睾丸网液方法研究棉酚对大鼠支持细胞分泌功能的影响

有关对支持细胞功能的研究也是有助于棉酚的抗生育原理的研究。本文通过测量支持细胞分泌量和分泌特异蛋白,即雄激素结合蛋白(ABP)的研究,探讨棉酚对支持细胞功能的影响。实验采用成年雄性Wistar大鼠,每日喂服醋酸棉酚30毫克/公斤体重,共喂服8周。通过收液量的测定证明棉酚降低了睾丸分泌液量(0.024±0.006克/克睾丸组织/小时-0.013±0.002克/克睾丸组织/小时,均为平均值±标准误)。本实验又采用平衡态的聚丙烯酰胺凝胶电泳法测得喂棉酚动物雄激素结合蛋白与[~3H]双氢睾丸酮的结合活性较对照组为高,并具有明显统计学差异。另外,实验所用的收液法,即由外睾丸网做插管收集睾丸液略不同于常规所用的收液方法.与Tuck等人(1970)所采用的收液法进行比较,本方法简单,收液量多,收液无血浆和组织间液成分的污染。     

肌肽棉酚对绵羊精子运动及超微结构的影响

肌肽促进绵羊精子运动增强,直线运动精子数目增多;棉酚则强烈抑制精子运动并使精子的运动方式发生改变;肌肽与棉酚混合处理精子,肌肽可不同程度抵消棉酚对精子产生的有害作用。但当棉酚完全抑制精子运动后,再加入肌肽则不能使精子恢复运动。电镜观察,肌肽对绵羊精子超微结构无任何不良影响;棉酚同造成精子严重损伤,导致生物膜系统损害、轴丝崩解、线粒体螺旋鞘紊乱等。本文通过肌肽,棉酚加入的时序不同,探讨两者对绵羊精子