光密度测定法在百日咳杆菌培养菌液浓度测定中的应用

本实验通过抽取百日咳杆菌悬液样品,分别用比浊法和光密度法测量其浓度,并进行各种比较,证明在百日咳杆菌培养中使用分光光度计测量菌悬液光密度值来代替比浊法测定菌悬液浓度的方法是准确可行的,并能建立光密度值与菌悬液浓度的关系,从而提高工作效率、更好的控制培养参数。试验数据表明,利用光密度法测定的百日咳杆菌悬液浓度数据稳定,重复性好,可信度高。证明了光密度法在百日咳杆菌悬液的浓度测定中的可行性,初步建立了光密度值与菌悬液浓度之间的联系。     

母牛分枝杆菌制剂对T淋巴细胞增殖反应影响的研究

以氚标记胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法检测每分钟脉冲数(CPM),比较母牛分枝杆菌活菌悬液、辐射杀死菌悬液及高温杀死菌悬液对健康人外周血T淋巴细胞增殖反应的影响.以此作为评价治疗以细胞介导免疫为主的结核病免疫功能障碍免疫制剂效力的一个重要参数.在加入单一刺激因子实验中,对照组CPM为448±131;加入BCG、母牛分枝杆菌活菌悬液、辐射杀灭菌悬液以及高温杀死菌悬液的CPM分别为1037±194,2299±140,1819±528,994±186.这4种制剂的刺激指数均在2.0以上,尤其是母牛分枝杆菌活菌悬液、辐射杀死菌悬液分别为5.13,4.06.结果表明,母牛分枝杆菌3种制剂与BCG基本相似,在体外对T淋巴细胞增殖反应有明显的促进作用,其中以活菌悬液和辐射杀死菌悬液更为显著.另一试验中,以重组白细胞介素-2(rIL-2)作对照,BCG、母牛分枝杆菌悬液、辐射杀死菌悬液及高温杀死菌悬液分别加入rIL-2,目的在于观察菌体抗原加淋巴因子对T淋巴细胞增殖反应有无协同刺激作用.对照组的CPM为3721±1336,BCG加rIL-2组CPM为6904±1218;母牛分枝杆菌3种制剂的CPM分别为9544±172…     

吸光度法快速确定菌悬液浓度及其适用范围

采用麦氏比浊法,将大肠埃希菌的菌悬液浓度调整到约8×108cfu/g,再将其稀释成多个梯度,在600nm的波长下用紫外分光光度计测定吸光度值,同时将各个梯度的菌悬液分别做菌落总数试验,得到不同吸光度值对应的菌落总数,并制作标准曲线,通过测量菌悬液的吸光度值确定菌悬液浓度及其适用范围。试验证明,用此法确定菌悬液浓度时,其菌落总数宜在105~108cfu/g之间,不适用于在105cfu/g以下的菌悬液,所得结果比麦氏比浊法准确。     

免疫诊断细胞方法(续完)

<正>(二)测定被刺激淋巴细胞上清液中淋巴因子活性的方法 1、白细胞移动抑制因子的鉴定方法。 籍指示细胞移动抑制来测定上清液淋巴因子活性。为此可用第六章的方法。 (1)白细胞移动抑制的间接反应。 指示细胞 使用人白细胞悬液或豚鼠腹腔渗出液巨噬细胞判定上清液白细胞移动抑制因子的活性。制备这些悬液与制备抑制白细胞移动的直接反应相同。可使用精制巨噬细胞或多核白细胞悬液,因为正是这些细胞对MIF起反应。因此,如果不用精制多核白细胞,则必须注意用于指示白细胞悬液的细胞组成。淋巴细胞占多数的悬液不能用于检     

在不稳定和相对稳定培养体系中CFU-S生长的动力学观察

利用 Dexter 培养方法,我们在体外对小鼠胎肝进行了长期液体培养。根据换液后悬液细胞总数的不同,建立了不稳定和相对稳定两个培养体系,并利用12d 脾结节检测和单个脾结节转移技术,观察了体系中悬液细胞总数,CFU-S 数及其自我更新的动态变化。表明在不稳定培养体系中,悬液细胞总数和 CFU-S 数增长较快,但由于每周换液时悬液细胞的丢失,可能使体系长时间处于应激状态,其自我更新力衰减也较快。而在相对稳定体系中,由于换液时其悬液细胞的再次种入,使总数保持相对恒定,CFU-S 数的变化比较平缓,其自我更新力的衰减也相对缓慢。提示在造血细胞体外液体培养体系中存在着一种生理性反馈调节活动,但其机理有待进一步研究。     

球孢白僵菌侵染对管氏肿腿蜂雌成蜂的不利影响

【目的】本研究旨在探究球孢白僵菌Beauveria bassiana对管氏肿腿蜂Scleroderma guani雌成蜂的不利影响,为今后利用管氏肿腿蜂携带球孢白僵菌联合防控松墨天牛Monochamus alternatus等蛀干害虫的技术研发奠定基础。【方法】本实验测定了5种不同浓度的球孢白僵菌孢悬液(1.0×10~4~1.0×10~8孢子/m L)和孢子粉(1.0×107孢子/雌)(以无菌水为对照)对雌成蜂的侵染力和致死力的影响。【结果】球孢白僵菌的孢悬液和孢子粉均会感染雌成蜂,不同浓度孢悬液接种于雌成蜂体表时,孢悬液对雌成蜂的感染率和致死率均与孢悬液浓度呈正相关性。接菌第2和4天,仅最高浓度孢悬液对雌成蜂有致死和感染现象;第5天,1.0×10~8,1.0×10~6和1.0×10~4孢子/m L孢悬液对雌成蜂的感染率分别为56.0%,8.0%和4.0%,致死率分别为88.0%,44.0%和16.0%;第6天,1.0×10~8孢子/m L孢悬液对雌成蜂的致死率高达100%,是最低浓度孢悬液对雌成蜂致死率的6.25倍。同时,孢悬液和孢子粉(含相同孢子数)相比,前者对雌成蜂的致死率更高;接菌第7天,孢悬液(1.0×10~7孢子/m L)对雌成蜂的致死率为100%,是孢子粉的3.12倍。这可能与雌成蜂对孢子粉有一定的清理或抖落行为有关。【结论】今后在利用管氏肿腿蜂携菌防控天牛等蛀干害虫时,可优先选用球孢白僵菌孢悬液,并控制雌成蜂携菌后及时释放,以便在其感染潜伏期4~5 d以内,有效传至天牛蛹室。     

不同组织器官粗提物对小鼠照射后肠腺存活率的影响

我们以前的实验证实,用刮取法刮取正常小鼠的肠腺部分,将其制备成单细胞悬液,注入到经30Gy y线全身照射小鼠的一段空肠内,72h后用光镜和电镜观察到有肠腺再生。以后分别用冻融和超声。及加热处理肠腺细胞悬液,也可得到同样结果。因此证明,在小鼠肠腺细胞悬液中,存在促进肠     

免疫诊断细胞方法(续四)

<正> (四)有受体与无受体的T和B型淋巴细 胞的检查 1.淋巴细胞各受体的联合检查法。 原理。检查一个型淋巴细胞的抗原或受体,通常不妨碍同时检查该细胞或另一个细胞的其他受体。 白细胞悬液之准备。与检查T和B淋巴胞细的方法相同,可使用纯淋巴细胞悬液或白细胞悬液。     

不同蚯蚓采样方法对比研究

蚯蚓种类组成和丰度变化是反映农业管理措施对土壤质量影响的重要指标。为研究利用芥末悬液等方法进行蚯蚓样品采集的有效性和准确性,寻求合理有效的蚯蚓种群特征调查方法,在我国东北玉米连作黑土上分别运用手拣法、福尔马林溶液驱赶法、芥末+水悬液及芥末+乙酸悬液驱赶法,以及驱虫剂与手拣法相结合的方法进行蚯蚓样品采集,将上述7种方法测得的蚯蚓丰度、生物量及年龄组成信息进行了系统分析。结果表明,福尔马林溶液驱赶法不结合手拣法使用时测得的蚯蚓丰度及生物量远远低于其他方法,尤其幼年蚯蚓比例偏低,并不能反映真实的蚯蚓种群特征。使用芥末悬液做驱虫剂有效性明显提高,尤其芥末+乙酸悬液,测得的蚯蚓丰度比手拣法高22.3%。福尔马林溶液结合手拣法后有效性大大提高,测得的蚯蚓丰度和生物量分别是其单独使用时的19.1和9.3倍,但相对其他驱虫剂方法仍高估了成年蚯蚓的比例;芥末+水悬液和芥末+乙酸悬液方法结合手拣法后收集到蚯蚓的数量分别提高了67.8%和89.1%,平均个体重量分别是原来的1.8和1.3倍,说明芥末悬液不会杀死小个体的幼年蚯蚓,但少部分大个体蚯蚓及洞穴不与地表相接的蚯蚓可能并不能被其驱赶至地表,结合手拣法后可以弥补这个缺陷。芥末+乙酸悬液结合手拣法收集到的成年及幼年蚯蚓数量和生物量均显著高于其他方法(P<0.05),既能有效地驱赶小个体和幼年蚯蚓,又可以收集到洞穴不与地表相接的土栖型蚯蚓,因此可以作为真实有效地反映蚯蚓种群特征的采样方法之一。     

微酸性电解水对人员手部和即食蔬菜消毒效果的研究

本实验研究了微酸性电解水对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌菌悬液的杀灭作用,以及微酸性电解水对人员手部冲洗及黄瓜和生菜浸泡法的消毒效果.结果表明,采用有效氯浓度为80 mg/L的微酸性电解水对含有0.3％有机干扰物的大肠杆菌菌悬液,作用1 min,杀灭对数值大于6;对含有0.3％有机干扰物BSA的金黄色葡萄球菌菌悬液,作用2 ...