碱提水溶小皮伞多糖B_3的研究

用ＧＣ,ＩＲ,ＮＭＲ,ＧＣ－ＭＳ及高碘酸氧化,Ｓｍｉｔｈ降解,甲基化分析,部分酸水解等方法确定了一个新的碱提水溶小皮伞多糖的一级结构：分子主链α－Ｄ－（１→２）Ｍａｎ,支链α－（１→４）,α－（ａ→６）Ｇｌｃ,且均连在主链的０─６上。     

山豆根木葡聚糖的研究

研究了山豆根中一种木葡聚糖的结构．用１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ提取,ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５离子交换柱层析,Ｆｅｈｌｉｎｇ试剂分级得到山豆根木葡聚糖组分ＳＳｂ－１ＦＡ,用完全酸水解,甲基化分析,部分酸水解,三氧化铬氧化和１Ｈ,１３ＣＮＭＲ等方法对其结构进行研究．结果表明：ＳＳｂ－１ＦＡ的分子量为２．６×１０４,比旋光度［α］２０Ｄ＝＋１０．９°（ｃ０．２２,Ｈ２Ｏ）,由Ｌ－Ｆｕｃ,Ｄ－Ｘｙｌ,Ｄ－Ｇａｌ和Ｄ－Ｇｌｃ组成,摩尔比为：２．９２９．９７．５５９．８．ＳＳｂ－１ＦＡ由１→４连接的β－Ｄ－Ｇｌｃ残基构成主链,分枝有α－Ｄ－Ｘｙｌ（１→,β－Ｄ－Ｇａｌ（１→２）α－Ｄ－Ｘｙｌ（１→等类型,部分非还原末端由Ｌ－Ｆｕｃ（１→构成．     

化学修饰对金顶侧耳多糖抗病毒（CB_5）活性的影响

从金顶侧耳子实体中分离纯化一半乳甘露聚糖ＰＣ－３,其分子量约为６７ｋＤ,一级结构为α（１→６）糖苷键相连的Ｇａｌ构成分子的主链,部份残基Ｃ_２上带有分支,分支结构为α（１－２）Ｍａｎ－α（１－２）Ｍａｎ。按高碘酸氧化、部份酸水解,甲基化、硫酸化程序对ＰＣ－３的结构进行化学修饰;并分别将ＰＣ－３及其衍生物与柯萨奇病毒Ｂ_５进行体外实验,结果表明,ＰＣ－３经硫酸化后,显著地提高了抗病毒活性;而高碘酸氧化,甲基化,部份酸水解产物则降低了抗ＣＢ_５的活性。     

树舌多糖Fb、Fc的结构研究

从树舌子实体中分离纯化出另两个级分Ｆｂ、Ｆｃ,经超速离心,电泳,ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ柱层析等确定其均为质点、极性均一级分。经ＧＣ、ＩＯ＿４～－氧化,Ｓｍｉｔｈ降解,部分酸水解,甲基化及其产物ＧＣ,ＧＣ－ｍｓ分析,ＩＲ等分析确定Ｆｂ是由１→３甘露糖基构成主链,分枝点率及分枝率均较大;Ｆｃ由１→６和１→４甘露糖基构成主链,分枝点率及分枝率较少。     

人胃癌细胞系中p53抑癌基因变异的检测及其序列分析

ｐ５３抑癌基因由于点突变,缺失或易位等方式而丧失活性是多种肿瘤发生发展的重要机理之一。本文应用聚合酶链式反应─—单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法,对四种人胃癌细胞系ＭＧＣ８０３,ＢＧＣ８２３,ＧＣ７９０１和ＰＡＭＣ－８２中ｐ５３基因的第５、６、７、８四个外显子进行检测,结果发现,ＰＡＭＣ－８２的第５和第８外显子,ＧＣ７９０１的第６外显子存在突变。ＰＣＲ－直接测序证明,它们分别在１７４位、２８０位、２０４位密码子发生缺失Ｇ,ＧＣ→ＣＧ,ＡＴ→ＣＧ转变,因而可使其编码的ｐ５３蛋白分别发生移码突变,Ａｒｇ→Ｔｈｒ,Ｇｌｕ→Ａｌａ,而丧失肿瘤抑制功能。实验结果表明,ｐ５３基因在胃癌发生发展过程中,尤其是较晚阶段具有重要作用。     

眼镜王蛇蛇毒神经毒素CM—11二级结构单元的判定

眼镜王蛇毒液抽提物ＣＭ－１１为含７２个残基的长链神经毒素,对其进行了ＤＱＦ－ＣＯＳＹ,ＴＯＣＳＹ和ＮＯＥＳＹ等一系列２Ｄ－ＮＭＲ谱测定,通过系统地分析各种ＮＯＥ信息,化学位移的分布等数据推测了蛋白质有规律二级结构,最后利用ＭＣＤ主链引导法确定它的二级结构,其中有三段反平行β折叠股（Ｉ２０～Ｗ２６,Ｒ３７～Ａ４３和Ｖ５３～Ｓ５９）,一段α螺旋构象（Ｗ３０～Ｇ３５）和四个可能的转角（Ｐ７～Ｋ１０,Ｃ１     

重组人MCAF／GM－CSF融合蛋白表达及其生物学活性研究

利用ＰＣＲ技术和ＤＮＡ体外重组方法,把作为导向效应细胞到靶部位的单核细胞趋化激活因子（ＭＣＡＦ）和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）进行基因融合,置于ｐＢＶ２２０载体的λＰＲＰＬ串联启动子下游,构建了ＳＤ序列与ＡＴＧ之间含有不同核苷酸组成的重组质粒ｐＭＧ０１、ｐＭＧ０２和ｐＭＧ０３。ｐＭＧ０１、ｐＭＧ０２和ｐＭＧ０３的翻译起始区都不存在稳定的二级结构,但ＤＨ５α（ｐＭＧ０２、ＤＨ５α（ｐＭＧ０３）的表达水平远远高于ＤＨ５α（ｐＭＧ０１）,ＤＨ５α（ＰＭＧ０１）几乎没有表达。表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表明,它能分别与ＭＣＡＦ和ＧＭ－ＣＳＦ抗体发生特异反应。生物学活性测定表明,表达产物具有明显的单核细胞趋化活性和维持ｈＧＭ－ＣＳＦ依赖的ＴＦ１细胞生长的特性,说明ＭＣＡＦ和ＧＭ－ＣＳＦ的生物学功能是相容的．     

金顶侧耳多糖PC—4的结构确定与抗肿瘤活性的研究

３％氯乙酸浸提过的金顶侧耳子实体中分离纯化另一水溶性多糖ＰＣ－４。该多糖分子量经为１８９ｋＤ。纸层析与气相层析分析表明其为单一聚糖。经高磺酸氧化,Ｓｍｉｔｈ降解,甲基化,层析,气质联机分析,核磁其振（Ｈ－ＮＭＲ,１３Ｃ－ＮＭＲ）谱及红外光谱测定等,可确定Ｃ－４的主链结构由β－（１→３）糖苷键相连的葡萄糖构成,部份残基Ｃ６,上带有分支。约每５个糖残基有两个侧链,侧链仅为１个葡萄糖残基。     

树舌多糖Fb、Fc的结构研究

从树舌子实体中分离纯化出另两个级分Ｆｂ、Ｆｃ经超速离心,电泳,ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ柱层析等确定其均为质点、极性均一级分。经ＧＣ、ＩＯ４＾－氧化,Ｓｍｉｔｈ降解,部分酸水解,甲基化及其产物ＧＣ、ＧＣ－ｍｓ分析,ＩＲ等分析确定Ｆｂ是由１→６和１→４甘露糖基构成主链,分枝点率及分枝率较少。     

滇重楼地上部分的配糖体

从滇重楼ＰａｒｉｓｐｏｌｙｐｈｙｌｌａＳｍ．ｖａｒ．ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ（Ｆｒ．）Ｈ－Ｍ,地上部分,分离出４个微量的配糖体,经光谱分析和化学降解证明其化学结构分别为２５Ｓ－异钮替皂甙元－３－Ｏ－α－Ｌ－鼠李吡喃糖基（１→２）［α－Ｌ－鼠李吡喃糖基（１→４）］－β－Ｄ－葡萄吡喃甙（Ａ）,２６－β－Ｄ－葡萄吡喃糖基－纽替皂甙元－３－Ｏ－α－Ｌ－鼠李吡喃糖基（１→２）［α－Ｌ－鼠李吡喃糖基（１→４）－β－Ｄ－葡萄吡喃糖甙（Ｂ）,山奈酚－３－Ｏ－β－Ｄ－葡萄吡喃糖基（１→６）－β－Ｄ－葡萄吡喃甙（Ｃ）,７－Ｏ－α－Ｌ－鼠李吡喃糖基－山奈酚－３－Ｏ－β－Ｄ－葡萄吡喃糖基（１→６）－β－Ｄ－葡萄糖甙（Ｄ）。     

低氧对肺动脉内皮细胞PDGF—B链释放及平滑肌细胞生长的影响

应用蛋白ｄｏｔｂｌｏｔ技术检测了低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）和常氧内皮细胞条件培养液（ＮＥＣＣＭ）内ＰＤＧＦ相对含量,并利用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法和流式细胞术观察了ＨＥＣＣＭ和ＮＥＣＣＭ及加入特异ＰＤＧＦ抗体对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）生长的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ中的ＰＤＧＦ含量明显高于ＮＥＣＣＭ;ＨＥＣＣＭ能明显增强ＰＡＳＭＣ内ＤＮＡ合成,促进ＰＡＳＭＣ从Ｇｏ／Ｇ１期进入Ｓ期;当预先加入ＰＤＧＦ－Ｂ链抗体时,则会明显地抑制ＨＥＣＣＭ对ＰＡＳＭＣ的ＤＮＡ合成,阻止ＰＡＳＭＣ从Ｇｏ／Ｇ１期进入Ｓ期。结果提示,低氧时ＰＡＳＭＣ增殖与肺动脉内皮细胞分泌释放ＰＤＧＦ增加有关     

造血生长因子结构与功能的相关性研究

概述了多系（ｍｕｌｔｉ）－集落刺激因子（ＣＳＦ）中性粒系－巨噬系（ＧＭ）－ＣＳＦ,Ｇ－ＣＳＦ,Ｍ－ＣＳＦ,红细胞生成素,白介素－１、２、５、６等９种造血生长因子结构－功能相关性研究的主要进展。     

人主动脉硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对培养的人血管壁细胞生长的作用

通过培养的人主动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）及脐静脉内皮细胞（ｈＵＶＥＣ）,应用３Ｈ－ＴｄＲ参入、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析、逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（ＨＳＰＧ）对ｈＡＳＭＣ和ｈＵＶＥＣＤＮＡ合成的作用及对血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）、ＰＤＧＦ受体、转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、内皮素－１（ＥＴ－１）或碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达和肾素－血管紧张系统（ＲＡＳ）的影响,结果显示,ＨＳＰＧ明显抑制培养的ｈＡＳＭＣ基础的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：１０３８５±３２６３ｖｓ,２５５４１±６４２１,Ｐ＜０．０１）及外源性ＰＤＧＦ诱导的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：９８７８±１９４７ｖｓ．１３４８１±４４ｌ０,Ｐ＜０．０５）;抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－Ｂｐ和ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,提高ＰＤＧＦａ和β受体ｍＲＮＡ的表达;显著降低ｈＡＳＭＣ培养液中血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的浓度和血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的活性,推测ＨＳＰＧ抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－β及ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,降低ＡＣＥ活性及ＡｎｇⅡ浓度是其抑制ｈＡＳＭＣ增殖的重要机     

鱼类HGPRT缺陷型细胞的诱变和筛选

草鱼卵巢细胞ＧＣＧ经乙基甲磺酸（ＥＭＳ）诱变,稳定表达３代以后,采取逐步提高培养基中６－疏基嘌呤（６－ＭＰ）的方法,获得对６－ＭＰ稳定抗性的细胞,暂定名ＦＭＲ－１．本文比较了ＧＣＧ细胞及ＦＭＲ－１细胞在含６－ＭＰ（２０μｇ／ｍｌ）和不含６－ＭＰ的培养基中生长曲线的特点,并对上述两种细胞的染色体数目和葡萄糖－６－磷酸脱氢酶电泳图谱进行了比较分析。最后对两种细胞在ＨＡＴ培养基中的生长特点进行了平行对照实验,根据实验结果,可以判定ＦＭＲ－１细胞为草鱼ＨＧＰＲＴ缺陷型细胞。本义还讨论了进一步研究草鱼ＨＧＰＲＴ缺陷型细胞的途径及草鱼ＨＧＰＲＴ缺陷型细胞在鱼类细胞遗传学上的应用前景。     

化学修饰对金顶侧耳多糖抗病毒（CB5）活性的影响

从金侧耳子实体中分离纯化一半乳甘露聚糖ＰＣ－３,其分子量约为６７ＫＤ,一级结构ａ（１→６）糖苷键相连的Ｇａｌ构成分子的主链,部份残基Ｃ２上带有分支,分支结构为ａ（１－２）Ｍａｎ－ａ（１－２）Ｍａｎ。按高碘酸氧化、部份酸水解、甲基化、硫酸程序对ＰＣ－３的结构进行化学修饰;并分别将ＰＣ－３及其衍生物与柯萨厅病毒Ｂ５进行体外实验,结果表明,ＰＣ－３经硫酸化后,显著地提高了抗病毒活性;而高碘酸氧化,甲基化     

人胃癌细胞系中P53抑癌基因变异的检测及其序列分析

Ｐ５３抑癌基因由于点突变,缺失或易位等方式而丧失活性是多种瘤发生发展的重要机理之一。本文应用聚合酶链式反应－－单链构锡多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法,对四种人胃癌细胞系ＭＧＣ８０３,ＢＧＣ８２３,ＧＣ７９０１和ＰＡＭＣ－８２中Ｐ５３基因的第５、６、７、８四个外显子进行检测,结果发现,ＰＡＭＣ－８２的第５第第８外显子,ＧＣ７９０１的第６外显子存在突变,ＰＣＲ－直接测序证明,它们分别在１７４位、２     

南海海绵Gellius cymiformis化学成分的研究

从中国南海海绵Ｇｅｌｌｉｕｓ ｃｙｍｉｆｏｒｍｉｓ的乙酸乙酯可溶部分获得２个有机化物,通过ＩＲ,ＨＮＭＲ〈＾１３ＣＮＭＲ,ＤＥＰＴ,ＥＩＭＳ和Ｈ－ＨＣＯＳＹ等实验确定为;△＾４,５（Ｅ）－鞘氨醇－正十五碳酸酰胺（１）,胆甾－６－烯－５α,８α－环二氧－３β－醇（Ⅱ）。化合物（１）为首次从海绵中分离获得;化合物（Ⅱ）目前国内尚水见文献报导。本文也是首次报导化合物（Ⅱ）的红外和碳谱数据。     

甲基单胞菌Methylomonassp.GYJ3中甲烷单加氧酶还原酶组分的…

Ｍｅｙｌｏｍｏｎａｓ ｓｐ．ＧＹＪ３菌的甲烷单加氧酶（ＭＭＯ）粗酶提取液经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ阴离子交换层析,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００凝胶过滤层析和ＤＥＡＥ－ＴＳＫｇｅｌ ＨＰＬＣ分离纯化出ＭＭＯ还原酶组分,经ＨＰＬＣ分析,纯度大于９５％,纯化倍数为４．４,加入至ＭＭＯ羟基化酶和调节蛋白Ｂ的体系中表现比活为２２８ｎｍｏｌ环氧丙烷每分钟毫克蛋白,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳表明的酶由     

分化剂和增殖剂对肝癌细胞N－乙酰基葡萄糖转移酶的调节

用我室建立的ＨＰＬＣ法测定分化诱导剂,视黄酸（ＲＡ）和双丁酰环磷酸腺苷（ｄｂ－ｃＡＭＰ）,及增殖促进剂,佛波醇肉桂酸乙酸酯（ＰＭＡ）对ＳＭＭＣ－７７２１人肝癌细胞Ｎ－乙酰氨基葡萄糖转移酶Ｖ和ＩＩＩ（ＧｎＴ－Ｖ,ＧｎＴ－ＩＩＩ）的影响,发现对照细胞在培养５天后ＧｎＴ－Ｖ略见升高。经ＲＡ和ｄｂ－ｃＡＭＰ处理后,可通天降低ＧｎＴ－Ｖ的活力,但不论对照或处理细胞均未测出ＧｎＴ－ＩＩＩ的活力。ＰＭＡ可增高ＧｎＴ－Ｖ和ＧｎＴ－ＩＩＩ的活力,对ＧｎＴ－ＩＩＩ的增加较ＧｕＴ－Ｖ发生较早亦较强。以上结果和我室报道的ＲＡ或ｄｂ－ｃＡＭＰ减少而ＰＭＡ增加ＳＭＭＣ－７７２１细胞表面Ｎ－糖链的天线数相符,也和大鼠化学诱发肝癌中ＧｎＴ－ＩＩＩ和Ｖ的增高相一致。     

DDPH对猪肺动脉平滑肌细胞PDGF·BB和bFGF表达的影响：免疫细胞化学研究

ＤＤＰＨ［１－（２．６－二甲基苯乙氧基）－２－（３．４二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐］是南京药科大学合成的降压新化合物,也具有降低肺动脉高压和抑制肺动脉平滑肌细胞增殖作用。本实验用细胞培养、免疫细胞化学、图像分析、３Ｈ－ＴｄＲ、细胞周期测定等方法,进一步探讨ＤＤＰＨ对缺氧性肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣＳ）增殖的抑制机制。结果：缺氧促进肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣｓ）的ＰＤＧＦ·ＢＢ和ｂＦＧＦ两种生长因子的表达（积分光密度ＯＤ值）增高。缺氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）能促进ＰＡＳＭＣＳ的ＰＤＧＦ·ＢＢ的ＯＤ值增高,ｂＦＧＦ的ＯＤ值无明显改变。加药组（ＨＥＣ－ＣＭ＋ＤＤＰＨ）的ＰＤＧＦ·ＢＢ和ｂＦＧＦ的ＯＤ值均显著降低,尤以ＰＤＧＦ·ＢＢ的ＯＤ值减少最多．提示：ＤＤＰＨ能抑制ＨＥＣＣＭ引起ＰＡＳＭＣＳ的ＰＤＧＦ·ＢＢ和ｂＦＧＦ表达增多和细胞增殖。结果与大鼠实验观察相符。