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1.
菜心(BrassicacampestrisL.ssp.chinensisvar.utilis)叶子高速捣碎后,滤液经酸碱处理,硫酸铵分步沉淀,凝胶柱层析等步骤分离纯化溶菌酶,酶比活力达3414.6U/mg,纯化倍数为197.4。菜心溶菌酶在较宽的温度或pH值范围均有活性,最适温度为60℃,最适pH值为5.8,底物Km值为87μg/mL。该酶对热和酸碱的稳定性较高,巯基和酪氨酸残基不是该酶活性中心的必需基团。 相似文献
2.
邓瑞春 《氨基酸和生物资源》1998,20(3):5-8
蟾蜍血清梭曼水解酶已被纯化。该酶有两个温度作用高峰,最适为pH10,其次为pH7。最适温度为30℃。以梭曼为底物,在pH7.73条件下测定其米氏常数为5.864mmol/L,最大反应速度为692μmol/L。过高的底物浓度对酶活性有抑制作用。Mg++、Ca++对酶有激活作用,而Ni++、Cu++、Fe++、Na+、K+对酶活性无明显影响。 相似文献
3.
曲霉木聚糖酶发酵条件与性质 总被引:14,自引:0,他引:14
从实验室培养污染物上分离出一株产木聚糖酶活力高的曲霉(AspergillusSp.)A3菌株。研究了其发酵过程,该菌经30℃,培养96小时,酶活力可达320IU/ml,研究了碳源,氮源,发酵起始pH值及通风量对产酶的影响。酶的最适反应温度为55℃,最适pH值为4.4。在不同温度下保温1小时,测得该酶的半失活温度为51℃。 相似文献
4.
竹笋经加工成食品后,大量脚料被丢弃,严重浪费资源,污染环境。文中采用水抽提、硫酸铵分级沉淀、丙酮分级沉淀和CM-52离子交换层析三步法从竹笋脚料中快速提取并纯化该酶;同时对该酶部分的酶学性质(温度、pH对酶促反应的影响、酶的热稳定性、酸碱稳定性)进行了考查。结果表明经过纯化后的过氧化物酶的Rz值达到2.5,纯化倍数为12倍,回收率为28%。最适反应温度为55℃,最适pH为6.8,且其温度和pH的适用范围均较宽,热稳定性和酸碱稳定性均较高的中性同工酶。这些优越的酶学性质能为竹笋脚料过氧化物酶的应用提供依据。 相似文献
5.
巨大芽孢杆菌产胞外青霉素酰化酶发酵液经硫酸铵分级抽提及SephadexG-100、羟基磷灰石、DEAE纤维素DE52等层析步骤,提纯了青霉素酰化酶,得到电泳均一的酶制剂。纯酶比活力约为25U/mg蛋白,纯化49倍,活力回收58%,经PAGE及SDS-PAGE测知该酶不含亚基,其分子量约为140kD。该酶最适pH为9.0,最适温度47℃,用底物NIPAB测活,其Km值为6.2×10~(-4)mol/L,Vm值为1.24×104mol/L。此外还探讨了部分金属离子对该酶的影响。 相似文献
6.
用硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析、免疫亲和层析、SephadexG100凝胶柱层析从人胃组织中提取出腺苷脱氨酶,酶纯化19324倍,比活力为5797U/mg蛋白.提取酶液经PAGE、SDS-PAGE和等电聚焦只呈现一条区带。测得该酶的分子量为41.2kD,等电点为pH4.8.氨基酸组成分析表明该酶由388个氨基酸残基组成,N端氨基酸为精氨酸。酶的最适pH为6.5,pH小于5.0或大于9.0时不稳定;最适温度为37℃,对热不太稳定,以腺苷及2-脱氧腺苷作为底物,其Km分别为87μmol/L和41μmol/L。 相似文献
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柑叶片蔗糖酶的分离纯化及其部分性质的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
唐云明 《Acta Botanica Sinica》1995,(8)
柑(Citrusreticulata Blanco)幼叶中存在高活性的酸性蔗糖酶。经硫酸铵盐析、DEAE-琼脂糖离子交换层析、SephacrylS-200 凝胶层析纯化,活性回收率6.4% ,纯化倍数179.2 倍。纯化的酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白带,SDS-PAGE显示1 条蛋白带,其亚基分子量40 kD。用SephacrylS-200 凝胶层析法测得分子量为80 kD。推测该酶由两个相同亚基构成。以蔗糖为底物测定该酶的表观Km 为1.6×10- 2 m ol·L- 1,Vm ax为100 m g 还原糖·m g- 1蛋白质·h- 1。最适pH 5.0,酸碱稳定区在pH 4.5—5.5 之间。最适温度55℃ 相似文献
8.
芽孢杆菌木聚糖酶的发酵条件研究 总被引:20,自引:3,他引:17
本文研究了芽孢杆菌L23产木聚糖酶的时间曲线,碳源种类和浓度,添加物,发酵起始ph以及接种量对产酶的影响。该菌经37℃培养50小时,酶活力为30IU/ml,酶最适反应温度为57℃,最适pH值为7.0。 相似文献
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番茄感染TMV诱导的β—1,3—葡聚糖酶的纯化和性质 总被引:2,自引:0,他引:2
番茄系统感染TMV诱导叶胞外β-1,3-葡聚糖酶活性升高,番茄叶胞外提取液经冰冻干燥浓缩、-20℃丙酮沉淀、CM-Sephadex C-25离子交换层析和PBE94聚焦层析纯化,获得PAGE和SDS-PAGE均一的β-1,3-葡聚糖酶,测得该酶的分子量为22kD;以昆布多糖为底物,该酶的最适pH5.4,最适温度30-40℃;Kmt Vmax值分别为5.64mg/ml和0.328nmol/s。在感染 相似文献
10.
菜豆幼苗EPSP合成酶的分离纯化和它的部分性质 总被引:3,自引:0,他引:3
利用硫酸铵分级沉淀,Sephedex G-50凝胶柱层析,FPLC Mono-Q和磷酸纤维素离子层析法从菜豆幼苗中分离提纯了EPSP合成酶。该酶被纯化2961.6倍,比活性达到6219.4nmolmg^-1蛋白min^-1。该酶分子量经SDS-PAGE检测为51kD,等电点为pH5.7,酶促反应最适pH7.5,最适温度45℃。6.2μmol/L的除草剂草甘膦能抑制EPSP合成酶活性的50%。 相似文献
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胞外青霉素酰化酶的纯化及部分理化性质 总被引:1,自引:0,他引:1
巨大芽孢杆菌产胞外青霉素酰化酶发酵液经硫酸铵分级抽提及Sephadex G-100、羟基磷灰石、DEAE-纤维素DE52等层析步,提纯了青霉素酰化酶,得到电泳均一的酶制剂,纯酶比活力约为25U/mg蛋白,纯化49倍,活力回收58%,经PAGE及SDS-PAGE测知该酶不含亚基,其分子量约为140kD。该酶最适pH为9.0,最适温度47℃,用底物NIPAB测活,其Km值为6.2×10^-4mol/L 相似文献
12.
番茄果实ACC合成酶的性质 总被引:3,自引:0,他引:3
测定了经4步纯化,比活性达20000U/mg蛋白质以上的番茄果实伤诱导ACC合成酶的一些酶学性质。酶反庆最适pH值为9.5;酶在pH8.0下最稳定,pH7.5-10短时间处理不会使酶发生不可逆变性;酶在pH8.0和9.5的Km值分别为23和40μmol/L;根据酶反应不同时间的产物累积量,得出反应速度随时间的变化符合函数关系式Vt=V0e^-kt,并根据此式求出酶的半寿期为107min。 相似文献
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中温碱性脂肪酶的研究:Ⅲ.扩展青霉PF868变株碱性脂肪酶的纯化及其… 总被引:7,自引:1,他引:7
扩展青霉PF868变株发酵液经硫酸铵盐析和Sephadex-G-200及Sepharose4B柱层析纯化,获得纯化倍数为32.4的酶粉。该酶分子量为23442Dal,酶学特性表明:该酶的最适作用温度为32℃,50℃保温30min仍保留50%酶活性,最适pH为9.0,作用pH稳定范围在7.0-10.0之间,Ca^2+和Mg^2+对酶有激活作用,Fe^2+,Cu^2+和Mn^2+酶活力有抑制作用。 相似文献
14.
竹笋经加工成食品后,大量脚料被丢弃,严重浪费资源,污染环境.文中采用水抽提、硫酸铵分级沉淀、丙酮分级沉淀和CM-52离子交换层析三步法从竹笋脚料中快速提取并纯化该酶;同时对该酶部分的醇学性质(温度、pH时酶促反应的影响、酶的热稳定性、酸碱稳定性)进行了考查.结果表明经过纯化后的过氧化物酶的Rz值达到2.5,纯化倍数为12倍,回收率为28%.最适反应温度为55℃,最适pH为6.8,且其温度和pH的适用范围均较宽,热稳定性和酸碱稳定性均较高的中性同工酶.这些优越的酶学性质能为竹笋脚料过氧化物酶的应用提供依据. 相似文献
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黑曲霉A3木聚糖酶固体发酵研究 总被引:19,自引:3,他引:19
筛选了一株高产木聚糖酶的黑曲霉A3菌株,研究了其在固体培养基中的发酵条件。该菌最适培养条件为:起始pH4.6。28℃,1ml孢子悬液接种量,蔗渣粉:麸皮为1.5:1,发酵3天,木聚糖酶活力可达5147IU/g培养基干重。氮源组成,温度、pH及发酵时间对曲中木聚糖酶和纤维素酶的比例有较大影响。与液体发酵相比,粗酶的最适反应温度均为55℃,最适反应pH值分别为4.6和4.2,在不同温度下保温1h,测得 相似文献
16.
不同来源溶菌酶的性质比较 总被引:3,自引:0,他引:3
比较两种从新鲜鸡蛋清中提取溶菌酶的方法。采用较为简单的并且产率较高的结晶法分别从鸡蛋清、鹌鹑蛋清中提取了溶菌酶 ,并分别测定了各溶菌酶的酶活力、最适pH值和最适温度。同时 ,证明了该法无法从鸭蛋清中提取出纯溶菌酶 ,故仅对粗提物进行了酶活力、最适 pH值和最适温度的测定 相似文献
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嗜热脂肪芽孢杆菌HY-69耐热中性蛋白酶的性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
嗜热脂肪芽孢杆菌HY-69的耐热中性蛋白酶已纯化。研究了纯酶的性质;该酶分子量为24kd,由6个单体构成一个六聚体。酶的等电点9.15.最适作用pH为7.5,最适作用温度为85℃:该酶具有很好的耐热性,90℃时酶活半寿期为22min,80℃保温3小时,酶活仍保持63%;酶的pH稳定性也很好。该酶是金属蛋白酶,活性中心含锌离子,酶的热稳定性依赖于钙离子。测定了酶的氨基酸组成和N末端氨基酸序列。 相似文献
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链霉菌Z94-2碱性脂肪酶产生条件及酶学性质 总被引:2,自引:0,他引:2
在152株脂肪酶产生菌中,链霉菌Z94-2产脂肪酶活力为596u/mL,其最适培养基(g/L)为:糊精10、黄豆饼粉30、尿素10、K2HPO40.5、MgSO40.5、NaCl1和AEO90.5,产酶的最适条件为:初始pH9.5~10.0,在26℃培养48h。用PVA橄榄油乳化系统测定该酶的最适pH9.8,最适温度37℃,在pH8.6~10.2于5℃存放24h,酶活力不变。0.14mol/L的氯 相似文献
19.
产碱性纤维素酶的嗜碱芽孢杆菌SHY8-5725发酵液经絮凝预处理后,采用混合盐析方法沉淀酶,盐析收率可达95%以上,所制得酶粉CMCase可达500u/g以上。酶的最适pH为8.0和10.5,稳定pH范围为4~12;最适温度为45℃(pH9.0,10min)稳定温度范围为50℃(pH9.0,30min)以下;洗衣粉中各种表面活性剂和助剂对CMCase基本无影响,酶的底物特异性表明,该碱性纤维素酶主 相似文献
20.
嗜热脂肪芽孢杆菌HY—69耐热中性蛋白酶的性质研究 总被引:3,自引:0,他引:3
嗜热脂肪芽孢杆菌HY-69的耐热中性蛋白酶已纯化。研究了纯酶的性质,该酶分子最为24kd,由6个构成一个六聚体。酶的等电点9.15。最适作用pH为7.5,最适作用温度为85℃;该酶具有很好的耐热性,90℃时酶活半寿期为22min,80℃保温3小时,酶活仍保持63%;酶的pH稳定性也好,该酶是金属蛋白酶,活性中心含锌离子,酶的热稳定性依赖于钙离子。测定了酶的氨基酸组成和N末端氨基酸序列。 相似文献