共查询到20条相似文献,搜索用时 31 毫秒
1.
表皮生长因子(EGF)对纯化的鼠胚成纤维细胞(C_3H_10T_1/2C18)胞核~3H-UTP掺入有明显的促进作用。这一作用在EGF与细胞核共同培养90min时达到高峰。该作用是EGF浓度依赖性的。EGF对β射线转化的上述细胞的纯化细胞核,亦同样有促进转录作用。本实验所用的细胞核经光镜,电子显微镜观察,细胞膜、细胞浆标志酶检测及放射性同位素示踪法鉴定,未检出有核外成份的污染。本实验结果为膜受体信号传递途径以外的EGF对核直接作用途径的存在提供了证据。 相似文献
2.
表皮生长因子对鼠胚成纤维细胞细胞周期的调节作用 总被引:5,自引:0,他引:5
本文观察了表皮生长因子(EGF)对小鼠胚胎成纤维细胞C3H/10T1/2CL8(简称C3H/10)细胞周期的影响。结果表明:EGF使S期提前,细胞周期缩短。进一步探讨了EGF对细胞周期影响的机制,发现EGF可活化在细胞周期调节中起重要作用的P34^cdc2激酶(简称CD2K),使CD2K在周期中活性高峰出现的时间提前,提示EGF对细胞周期的影响可能通过作用于CD2K实现的。 相似文献
3.
本文观察了表皮生长因子(EGF)对小鼠胚胎成纤维细胞C_3H/10T_1/2CL_8(简称C_3H/10)细胞周期的影响。结果表明:EGF使S期提前,细胞周期缩短。进一步探讨了EGF对细胞周期影响的机制,发现EGF可活化在细胞周期调节中起重要作用的P34~(cdc2)激酶(简称CD2K),使CD2K在周期中活性高峰出现的时间提前,提示EGF对细胞周期的影响可能通过作用于CD2K实现的。 相似文献
4.
表皮生长因子对培养的气道上皮细胞抗臭氧损伤的保护作用 总被引:8,自引:2,他引:8
本研究观察到臭氧(O3)对体外培养经3H-UdR标记的免气道上皮细胞有明显细胞毒性作用,且损伤程度与O3作用时间呈正相关。O3暴露组细胞内丙二醛(MDA)产生增多(P<0.01),提示O3损伤细胞的机制与胞膜脂质过氧化有关。表皮生长因子(EGF)可明显降低O3所致的3H释放率(P<0.01)、降低O3的细胞毒指数及细胞内MDA含量(P<0.01),证明EGF对气道上皮细胞有保护作用。进一步还观察到浓度为5ng/ml的EOF可以取消O3所引起的细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)含量降低(P<0.01),并增加细胞内谷胱甘肽总含量(P<0.05),但不能改变O3所致的氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量的增加(P>0.05),对GSH/GSSG比值也无明显提高,这些都提示EGF的细胞保护机理可能与其促进细胞内谷胱甘肽合成有关,而对GSSG转化为GSH的还原过程影响不明显。 相似文献
5.
DDPH[1-(2.6-二甲基苯乙氧基)-2-(3.4二甲氧基苯乙胺基)丙烷盐酸盐]是南京药科大学合成的降压新化合物,也具有降低肺动脉高压和抑制肺动脉平滑肌细胞增殖作用。本实验用细胞培养、免疫细胞化学、图像分析、3H-TdR、细胞周期测定等方法,进一步探讨DDPH对缺氧性肺动脉平滑肌细胞(PASMCS)增殖的抑制机制。结果:缺氧促进肺动脉内皮细胞(PAECs)的PDGF·BB和bFGF两种生长因子的表达(积分光密度OD值)增高。缺氧内皮细胞条件培养液(HECCM)能促进PASMCS的PDGF·BB的OD值增高,bFGF的OD值无明显改变。加药组(HEC-CM+DDPH)的PDGF·BB和bFGF的OD值均显著降低,尤以PDGF·BB的OD值减少最多.提示:DDPH能抑制HECCM引起PASMCS的PDGF·BB和bFGF表达增多和细胞增殖。结果与大鼠实验观察相符。 相似文献
6.
EGF作用于NC3H10和TC3H10细胞核,对RNA聚合酶Ⅱ有促进作用,但对RNA聚合酶Ⅰ和酶Ⅲ没有影响,此外还发现转化细胞核内的RNA聚合酶Ⅰ和酶Ⅱ的活性比正常细胞高1倍多。但两种细胞的RNA聚合酶Ⅱ差别不大。同时,以非放射性标记的c-fos、CLN1、CLN3探针进行点杂交,结果发现,EGF直接作用于细胞核可使c-fos、CLN1基因的转录水平提高;但是,对CLN3无影响。 相似文献
7.
低氧对肺动脉内皮细胞PDGF—B链释放及平滑肌细胞生长的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
应用蛋白dotblot技术检测了低氧内皮细胞条件培养液(HECCM)和常氧内皮细胞条件培养液(NECCM)内PDGF相对含量,并利用[3H]-TdR掺入法和流式细胞术观察了HECCM和NECCM及加入特异PDGF抗体对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)生长的影响。结果表明,HECCM中的PDGF含量明显高于NECCM;HECCM能明显增强PASMC内DNA合成,促进PASMC从Go/G1期进入S期;当预先加入PDGF-B链抗体时,则会明显地抑制HECCM对PASMC的DNA合成,阻止PASMC从Go/G1期进入S期。结果提示,低氧时PASMC增殖与肺动脉内皮细胞分泌释放PDGF增加有关 相似文献
8.
EGF作用于NC3H10和TC3H10细胞核,对RNA聚合酶Ⅱ有促进作用,但对RNA聚合酶I和酶Ⅲ没有影响,此外还发现转化细胞核内的RNA聚合酶I和酶Ⅲ的活性比正常细胞高1倍多,但两种细胞的RNA聚合酶Ⅱ差别不大,同时,以非放射性标记的c-fos,CLN1,CLN3探针进行点杂交,结果发现,EGF直接作用于细胞核可使c-fos,CLN1基因的转录水平提高,但是,对CLN3无影响。 相似文献
9.
通过培养的人主动脉平滑肌细胞(hASMC)及脐静脉内皮细胞(hUVEC),应用^3H-TdR参入、Northern blot分析、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、放射免疫分析(RIA)、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)对hASMC和hUVEC DNA合成的作用及对血小板源生长因子(PGDF)、PGDF受体、转化生长因子β(TGF-β)、内皮素-1(ET-1)或 相似文献
10.
细支气管肺泡细胞增生和细支气管肺泡细胞癌内生长因子和蛋白激酶C的表达 总被引:4,自引:0,他引:4
表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α(TGFα)、表皮生长因子受体(EGFR)和蛋白激酶C(PKC)与细胞生长、增殖分化调节和细胞癌变有密切关系。作者用免疫组织化学方法检测了细支气管肺泡细胞增生(BAH)和细支气管肺泡细胞癌(BAC)的EGF、TGFα、EGFR和PKC表达。结果表明:BAC中的EGF、TGFα阳性率和阳性强度以及EGFR、PKC阳性强度均明显高于BAH。BAH的重度不典型增生病例,其EGF、TGFα、EGFR和PKC均呈高表达。TGFα、EGFR和PKC三者在BAC和BAH中的表达存在明显相关性。提示:TGFα及其受体EGFR和PKC是细支气管肺泡细胞增生、恶性转化和肺泡癌细胞失控生长的重要因素。 相似文献
11.
应用PCR-SSCP技术并结合Southern印迹杂交从基因水平对正常和 ̄3H-TdR恶性转化小鼠胚胎成纤维细胞NC3H10和TC3H10中neu基因进行研究。Southern印迹杂交结果表明恶性转化的TC3H10细胞neu基因出现重排和扩增,SSCP分析未发现TC3H10细胞neu基因跨膜区突变。上述结果说明TC3H10细胞neu基因结构异常可能在跨膜区外,neu基因异常在 ̄3H-TdR诱导的细胞恶性转化过程中可能有重要的作用,EGF可促进neu基因表达增高,研究发现在EGF持续作用下,NC3H10细胞neu基因甲基化水平无显著变化,说明EGF可能是通过其它途径调控neu基因表达增高的,排除了EGF通过改变neu基因甲基化水平而调控neu基因表达的可能性。 相似文献
12.
13.
本工作建立了臭氧对原代培养的兔支气管上皮细胞(BEC)损伤模型,观察到血管活性肠肽(VIP)、表皮生长因子(EGF)、热应激等微环境理化因子可减轻细胞损伤,具有细胞保护作用,其保护机制与提高还原谷胱甘肽(GSH)含量有关,并依赖于蛋白激酶的磷酸化调节及基因转录。BEC细胞在基础情况下有bcl-2基因的低水平表达。VIP和EGF可促进bcl-2基因转录,增强BEC的抗氧化损伤能力。EGF或热应激促进 相似文献
14.
采用3H-TdR参入法,测定碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、胰岛素和内皮素-1(ET-1)对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖的影响,以及胰岛素与bFGF或ET-1促MC增殖的协同作用。结果表明,不同浓度的bFGF(5-200ng/ml)和胰岛素(0.1-2.4U/ml)均显著升高MC的3H-TdR参入值(cpm值)(P<0.01)。ET-1对MC的cpm值的影响依剂量不同呈现两种不同的效应,在10-9-10-7mol/L时,随着浓度的升高,MC的cpm值明显升高(P<0.01),并以10-8mol/L作用最强;当升高到10-6mol/L时,MC的cpm值出现降低趋势。胰岛素与bFGF或低浓度ET-1(≤10-8mol/L)共同作用于MC时,MC的cpm值明显高于二者单独作用之和(P<0.01),与高浓度ET-1(>10-7mol/L)共同作用于MC时,MC的cpm值小于二者单独作用之和(P>0.05)。上述结果说明,胰岛素、bFGF和ET-1均能显著促进MC增殖;胰岛素与bFGF或低浓度的ET-1促MC增殖具有正协同作用,与高浓度ET-1呈现负协同作用。 相似文献
15.
本实验应用(^3H)胸腺嘧啶核苷(^3H-TdR)掺入法测定前列腺素F2α(PGF2α)对大鼠肾小球系膜细胞DNA合成的作用,测定系膜细胞合成的二脂酰甘油(DAG)及磷酸肌醇(IP)。结果表明,PGF2α促进系膜细胞的DNA合成、DAG及IP的生成。提示PGF2α使系膜细胞的磷脂酶C活化,产生IP及DAG,激活蛋白激酶C,从而促进DNA合成及细胞增殖。 相似文献
16.
本研究着重探讨表皮生长因子(EGF)对大鼠肺动脉的收缩作用及对肺动脉平滑肌细胞分裂增殖的影响。浓度为1×10-9-1×10-7mol/L的EGF可引起大鼠肺动脉剂量依赖性收缩(r=0.968,P<0,001),其Emax为100.6mg,EC50为11.96nmol/L。在同时存在0.5%胎牛血清(FCS)时,EGF能促进平滑肌细胞的3H-TdR参入率,该作用与剂量呈正相关(r=0.823,P<0.05),其EC50为6.5×1O-12mol/L。1×10-9mol/L的EGF+0.5%FCS能产生与10%FCS相当的促细胞分裂增殖能力(在培养的第1,3,5,7天,二者促分裂增殖能力相差不明显,P均>0.05,第9天时,前者大于后者,P<0.05)。1×10-9mol/LEGF单独存在时对平滑肌细胞未显示出明显的致分裂活性。上述作用提示ECF在某些肺血管病变如缺氧性肺动脉高压中可能有一定意义。 相似文献
17.
为探讨硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)对内皮细胞生长的作用,用解聚提取及离子交换柱层析法分离出人主动脉HSPG,用倒置显微镜、细胞计数、及 ̄3N-TdR参入观察其对培养的第一代人脐静脉内皮细胞(hUVFC)生长的影响。结果发现:(1)倒置显微镜下观察,加入HSPG(1.70μg已糖醛酸/ml)的hUVEC生长密度高于对照组(未加HSPG).(2)随着培养时间增加(24,48及72h).根据细胞计数计算出同一剂量的HSPG(17.0μg已糖醛酸/ml)对hUVEC的促增殖%增高(分别为14%,30%及37%)。(3)随着加入HSPG浓度的升高(4.3,8.5及17.0μg已糖醛酸/ml.培养72h).根据 ̄3H-TdR参入计算出HSPG对hUVEC的促增殖%亦增高(分别为49%,71%及98%)。故人主动脉HSPG对培养的人脐静脉内皮细胞有促增殖作用。 相似文献
18.
血管活性肠肽对兔支气管上皮细胞抗臭氧损伤的保护作用 总被引:6,自引:0,他引:6
用支气管刷洗法收集新西兰兔支气管上皮细胞(BEC),以臭氧(O3)攻击培养的BEC,建立细胞损伤模型。测定BEC的3H释放率计算O3的细胞毒指数(CI)、测定细胞内丙二醛(MDA)的含量反映细胞氧化性损伤的程度,测定细胞内过氧化氢酶(CAT)活性及还原型和氧化型谷胱甘肽(GSH和GSSG)的含量反映细胞抗氧化能力。观察血管活性肠肽(VIP)预处理对BEC的细胞保护作用并初步探讨其保护机制。观察到:BEC的3H释放率与O3暴露时间成正比;O3暴露2h使MDA含量和GSSG含量明显增加,GSH减少;VIP预处理呈剂量依赖性降低O3暴露的CI值、降低MDA和GSSG含量、增加GSH及GSH/GSSG比值、增加CAT活性,显示出细胞保护效应;VIP的保护效应可被放线菌素D(A-D)或蛋白激酶C阻断剂H7部分取消。结果表明:O3暴露会导致BEC损伤,VIP可通过增强BEC的抗氧化能力而保护BEC,VIP的信号在细胞内的转导途径与基因转录及依赖PKC的酶蛋白磷酸化有关。 相似文献
19.