雌激素拮抗剂对胎盘EGF受体及其基因表达的影响

中期孕鼠在他莫昔芬作用下,其颌下腺,血清中ＥＧＦ含量下降,胎盘中ＥＧＦ受体结合位点数下降以及它的ｍＲＮＡ表达受到抑制,再次证实了他莫昔芬抑制雌激素诱导ＥＧＦ受体ｍＲＮＡ的表达。从而使ＥＧＦ受体结合位点数减少,因此,他莫昔芬对孕鼠胚胎生长发育有不可忽视的影响。     

人主动脉硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对培养的人血管壁细胞生长的作用

通过培养的人主动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）及脐静脉内皮细胞（ｈＵＶＥＣ）,应用３Ｈ－ＴｄＲ参入、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析、逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（ＨＳＰＧ）对ｈＡＳＭＣ和ｈＵＶＥＣＤＮＡ合成的作用及对血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）、ＰＤＧＦ受体、转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、内皮素－１（ＥＴ－１）或碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达和肾素－血管紧张系统（ＲＡＳ）的影响,结果显示,ＨＳＰＧ明显抑制培养的ｈＡＳＭＣ基础的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：１０３８５±３２６３ｖｓ,２５５４１±６４２１,Ｐ＜０．０１）及外源性ＰＤＧＦ诱导的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：９８７８±１９４７ｖｓ．１３４８１±４４ｌ０,Ｐ＜０．０５）;抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－Ｂｐ和ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,提高ＰＤＧＦａ和β受体ｍＲＮＡ的表达;显著降低ｈＡＳＭＣ培养液中血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的浓度和血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的活性,推测ＨＳＰＧ抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－β及ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,降低ＡＣＥ活性及ＡｎｇⅡ浓度是其抑制ｈＡＳＭＣ增殖的重要机     

GABA减缓缺氧引起的神经营养素mRNA表达量的变化

γ－氨基丁酸是中枢神经系统中的一种内源性抑制递质。近年已有实验证据揭示ＧＡＢＡ具有抵抗中枢神经元缺氧或缺血损伤的作用,但其机制尚不清楚。脑源性神经营养因子ＢＤＮＦ,神经生长因子ＮＧＦ和神经营养素－３是同一家族的成员,它们在海马脑区均有表达。为研究ＧＡＢＡ抗缺氧作用的机制,我们以培养的海马ＣＡ１神经元为材料,采用原位杂交的方法检测了缺氧后ＢＤＮＦｍＲＮＡ,ＮＧＦｍＲＮＡ和ＮＴ－３ｍＲＮＡ表达量的变化以及ＧＡＢＡ对这种变化的影响。结果显示,缺氧使ＮＧＦｍＲＮＡ和ＢＤＮＦｍＲＮＡ的表达量迅速上调且前者的变化极为剧烈,而ＮＴ－３ｍＲＮＡ的表达量显著下降;用２０μＭ的ＧＡＢＡ处理细胞后,上述缺氧引起的神经营养因子ｍＲＮＡ表达量的上升或下降幅度均被减缓,其中对ＮＧＦｍＲＮＡ表达量变化的影响最为显著。这些结果表明,ＧＡＢＡ具有稳定缺氧后ＢＤＮＦｍＲＮＡ,ＮＧＦｍＲＮＡ和ＮＴ－３ｍＲＮＡ表达水平的作用。推测这种作用与ＧＡＢＡ增加氯电导,维持钙稳态以及提高神经元的抗缺氧能力的效应有一定联系     

IGF—I及其受体,IGF结合蛋白—2和LH受体mRNA在卵泡中的表达

利用原位杂交和原位ＤＮＡ－３’末端标记的方法研究了胰岛素样生长因子－Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）,ＩＧＦ－Ｉ受体,ＩＧＦ结合蛋白－２,和促性腺激素受体的信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）在不同生长与闭锁阶段的大鼠卵巢卵泡中表达的变化,结果表明：ＩＧＦ－Ｉ主要在正常生长的初级卵泡,窦前卵泡和小窦状卵泡中表达。在各生长与成熟阶段的卵泡中都检测到ＩＧＦ－Ｉ受体ｍＲＮＡ,闭锁卵泡的ＩＧＦ－Ｉ受体表达降低,窦前与窦状的生长和闭锁     

血管内皮生长因子C的研究进展

血管内皮生长因子Ｃ（ＶＥＧＦ－Ｃ）是一种特异性血管、淋巴管内皮细胞调节因子,其结构与ＶＥＧＦ具有同源性。ＶＥＧＦ－Ｃ通过受体ＣＥＧＦＲ－２和ＶＥＧＦＲ－３发挥作用,其ｍＲＮＡ的表达具有一定的组织特点,并受多种因素的调节。ＶＥＧＦ－Ｃ对于胚胎发育,细胞分化、活体内外血管、淋巴管内皮细胞均有重要的调节作用。     

人γ干扰素（IFN－γ）－表皮生长因子（EGF）融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用与靶细胞的EGF受体有关

采用表皮生长因子（ＥＧＦ）受体丰富的Ａ４３１细胞进一步研究了人ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白￣〔１〕的抗细胞分裂活性,以及它和靶细胞ＥＧＦ受体的关系。结果表明,ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用明显高于其母体分子。￣１２５Ｉ－ＥＧＦ受体竞争抑制试验表明,ＩＦＮ－γ可与ＥＧＦ竞争Ａ４３１细胞的ＥＧＦ受体,而ＩＮＦ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的ＥＧＦ受体竞争抑制作用更为明显,说明人ＩＦＮ－γ和ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞分裂活性,与靶细胞ＥＧＦ受体被竟争抑制密切相关。     

老年大鼠单核／巨噬细胞分泌和表达肿瘤坏死因子增多

为研究老年时肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）分泌及表达的改变,在内毒素（ＬＰＳ）１．０μｇ／ｍｌ刺激大鼠单核／巨噬细胞后,用酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）测定培养液中ＴＮＦ－α含量,用半定量逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＫ）测定ＴＮＦ－αｍＲＮＡ。同时测定培养液中一氧化氮（ＮＯ）和前列腺素Ｉ２（ＰＧＩ２）的含量。结果显示：老年鼠ＴＮＦ－α分泌量及其ｍＲ－ＮＡ明显高于青年鼠。ＮＯ产量在老年鼠与青年鼠之间无明显差异。老年鼠ＰＧＩ２分泌明显低于青年鼠。由于ＰＧ能抑制ＴＮＦ－α释放,从而推测,ＰＧＩ２产生能力的降低可能是老年大鼠单核／巨噬细胞ＴＮＦ－α分泌量明显高于青年鼠的原因之一。     

GSTs同工酶基因在乳腺癌中的扩增与基因的表达

采用ＤＮＡ和ＲＮＡ的斑点杂交分析方法,对３２例乳腺癌和相应的癌旁正常组织中ＧＳＴ－π、ＧＳＴ－α和ＧＳＴ－μ基因的ＤＮＡ扩增和ＲＮＡ转录表达情况进行研究,发现ＧＳＴ－π在乳腺癌中存在基因扩增和明显的ｍＲＮＡ表达升高,ＧＳＴ－π基因表达调控主要在转录水平进行的;ＧＳＴ－α和ＧＳＴ－μ在乳腺癌中表达水平较低,但仍可见α和μ类ＧＳＴ同工酶ｍＲＮＡ转录在肿瘤和正常组织中发生了较大的变化。结合乳腺癌中雌激素受体（ＥＲ）表达情况还发现ＧＳＴ－π表达水平与ＥＲ的表达存在负相关性。     

内皮细胞E选择蛋白的表达及p53基因的影响

为探讨血管内皮细胞Ｅ选择蛋白的表达及野生型ｐ５３ 基因对其表达的影响, 采用流式细胞术及ＲＴＰＣＲ法分别测定其Ｅ选择蛋白及其ｍ ＲＮＡ水平。结果表明： 静息状态的内皮细胞表面检测不到Ｅ选择蛋白的表达, 尽管此时细胞内存在Ｅ选择蛋白的ｍＲＮＡ。肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα） 可浓度依赖性地诱导内皮细胞表达Ｅ选择蛋白, 内皮细胞表面Ｅ选择蛋白表达的增加伴随着细胞内Ｅ选择蛋白ｍＲＮＡ 水平的升高。ＴＮＦα刺激内皮细胞后４ ～６ ｈ ,Ｅ选择蛋白的表达达高峰。将ｐ５３ 基因导入内皮细胞后, 经ＴＮＦα诱导的内皮细胞表面Ｅ选择蛋白的表达显著下降, 同时细胞内的Ｅ选择蛋白ｍＲＮＡ 的水平也明显降低。导入ｐ５３ 基因不影响静息状态内皮细胞Ｅ选择蛋白的表达及其ｍ ＲＮＡ 的水平。提示： ｐ５３ 基因至少部分通过降低Ｅ选择蛋白的ｍＲＮＡ 水平而抑制ＴＮＦα诱导的内皮细胞表面Ｅ选择蛋白的表达。     

表皮生长因子，生长抑素对人早孕胎盘hCG分泌及基因表达的影响

观察了表皮生长因子（ＥＧＦ）,生长抑素（ＳＳ）对体外培养的人早孕绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）分泌及ｈＣＧβ－ｍＲＮＡ含量的影响。发现ＥＧＦ可明显刺激绒毛分泌ｈＣＧ,显著增加ｈＣＧβ－ｍＲＮＡ含量,生长抑素虽然对绒毛ｈＣＧ分泌及ｈＣＧ　β－ｍＲＮＡ含量无明显影响,但可抑制ＥＧＦ,ＧｎＲＨ刺激的ｈＣＧ分泌及ｈＣＧβ－ｍＲＮＡ水平。提示ＥＧＦ,ＳＳ在妊娠早期参与了ｈＣＧ分泌的调节。     

EGFR反义脱氧寡核苷酸及其硫代修饰片段抑制人肝癌细胞系BEL…

本文旨在研究针对ＥＧＦＲ ｍＲＮＡ的反义寡核苷酸片段对ＢＥＬ－７４０４细胞ＥＧＦＲ基因表达及其对细胞生长的影响。合成了互补于ＥＧＦＲ基因５’起始编码区的２１聚脱氧寡核苷酸（ＯＤＮｓ）。实验结果显示,３．２ｕｍｏｌ／Ｌ ＯＤＮｓ明显抑制ＢＥＬ－７４０４细胞生长,「３Ｈ」Ｔｄｒ掺入抑制试验显示其对细胞ＤＮＡ合成的抑制作用表现剂量依赖性;密度扫描分析显示ＯＤＮｓ处理６、２４ｈ后,肝癌细胞ＥＧＦＲ ｍＲＮ     

表皮生长因子,生长抑素对人早孕胎盘hCG分泌及其因表达的影响

观察了表皮生长因子,生长抑素对体外培养的人早孕绒毛膜促性腺激素分泌及ｈＣＧβ－ｍＲＮＡ含量的影响,发现ＥＧＦ可明显刺激绒毛分泌ｈＣＧ,显著增加ｈＣＧ β－ｍＲＮＡ含量。生长抑素虽然对绒毛ｈＣＧ分泌及ｈＣＧβｍ－ＲＮＡ含量无明显影响,但可抑制ＥＧＦ,ＧｎＲＨ的ｈＣＧ分泌及ｈＣＧβ－ｍＲＮＡ。提示ＥＧＦ,ＳＳ在妊娠早期参与了ｈＣＧ分泌的调节。     

细支气管肺泡细胞增生和细支气管肺泡细胞癌内生长因子和蛋白激酶C的表达

表皮生长因子（ＥＧＦ）、转化生长因子－α（ＴＧＦα）、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）与细胞生长、增殖分化调节和细胞癌变有密切关系。作者用免疫组织化学方法检测了细支气管肺泡细胞增生（ＢＡＨ）和细支气管肺泡细胞癌（ＢＡＣ）的ＥＧＦ、ＴＧＦα、ＥＧＦＲ和ＰＫＣ表达。结果表明：ＢＡＣ中的ＥＧＦ、ＴＧＦα阳性率和阳性强度以及ＥＧＦＲ、ＰＫＣ阳性强度均明显高于ＢＡＨ。ＢＡＨ的重度不典型增生病例,其ＥＧＦ、ＴＧＦα、ＥＧＦＲ和ＰＫＣ均呈高表达。ＴＧＦα、ＥＧＦＲ和ＰＫＣ三者在ＢＡＣ和ＢＡＨ中的表达存在明显相关性。提示：ＴＧＦα及其受体ＥＧＦＲ和ＰＫＣ是细支气管肺泡细胞增生、恶性转化和肺泡癌细胞失控生长的重要因素。     

缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织中血小板源性生长因子和c—my…

本研究分析了大鼠肺组织中血小板源性生长因子Ａ链、Ｂ链和ｃ－ｍｙｃ原癌基因ｍＲＮＡ。正常肺组织可表达１．７ｋｂ的ＰＤＧＦ－ＡｍＲＮＡ和３．５ｋｂ的ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ,还有少量２．２ｋｂｃｍＲＮＡ．在缺氧过程中,ＰＤＧＦ－Ｂ链ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ迅速增加,至缺氧１４ｄ时,分别为正常的３倍和５倍。而ＰＤＧＦ－ＡｍＲＮＡ在缺氧７ｄ时增高,而后又略有降低。结果表明：缺氧的肺组织局生成的ＰＤＧＦ激活     

前列腺专一蛋白因子抑制雄激素受体与其应答元件作用

雄激素受体片段（氨基酸：３５９￣７３２）以及糖皮质激素受体片段（氨基酸：３９６￣５４８）以与ＧＳＴ融合形式在大肠杆菌中分别表达为ＧＳＴ－ＡＲ和ＧＳＴ－ＧＲ两种融合蛋白,它们含有ＤＮＡ结合结构域和一些旁侧氨基酸,凝胶阻滞分析表明能与雄激素／糖皮质激素应答元件（ＡＲＥ／ＧＲＥ）在体外结合。本文报道在大鼠前列腺中发现有抑制ＧＳＴ－ＡＲ以及ＧＳＴ－ＧＲ与ＡＲＥ／ＧＲＥ结合的因子,抑制作用与ＡＲＥ／ＧＲＥ来     

缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织中血小板源性生长因子和c－myc基因表达增强

本研究分析了大鼠肺组织中血小板源性生长因子Ａ链、Ｂ链（ＰＤＧＦ－Ａ,ＰＤＧＦ－Ｂ）和ｃ－ｍｙｃ原癌基因ｍＲＮＡ在正常和缺氧时的含量变化。正常肺组织可表达１．７ｋｂ的ＰＤＧＦ－ＡｍＲＮＡ和３．５ｋｂ的ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ,还有少量２．２ｋｂｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ。在缺氧过程中,ＰＤＧＦ－Ｂ链ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ迅速增加,至缺氧１４ｄ时,分别为正常的３倍和５倍。而ＰＤＧＦ－ＡｍＲＮＡ在缺氧７ｄ时增高,而后又略有降低。结果表明：缺氧的肺组织局部生成的ＰＤＧＦ激活了ｃ－ｍｙｃ原癌基因,这对于缺氧性肺动脉高压的形成具有重要作用。     

RFP_（134）对UMR106细胞EGF受体酪氨酸蛋白激酶的调节作用

以大鼠成骨肉瘤细胞（ＵＭＲ１０６）为模型,研究了表皮生长因子（ＥＧＦ）对其受体酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）的调节作用。以本实验室从植物中提取纯化的二萜类活性物质（ＲＦＰ１３４）为诱导分化剂,观察了ＲＦＰ１３４对ＵＭＲ１０６细胞ＥＧＦ受体ＴＰＫ的活性和磷酸化作用的影响,并与ＲＡ和ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞做了比较,结果显示ＥＧＦ与其受体结合后能激活ＴＰＫ,使ＴＰＫ活性增加２倍．ＲＦＰ１３４,ＲＡ,ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞后,分别降低ＥＧＦ诱导的受体ＴＰＫ活性５０％,４３％,５５％,降低磷酸化ＴＰＫ含量５５％,３６％,５３％。从结果中发现无ＥＧＦ刺激的细胞也具有受体ＴＰＫ磷酸化作用,用ＲＦＰ１３４,ＲＡ,ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞,分别降低受体磷酸化ＴＰＫ含量５９％,４０％,５７％,而且我们发现用ＥＧＦ诱导的细胞受体ＴＰＫ含量高于无ＥＧＦ作用的细胞．提示ＵＭＲ１０６细胞本身可能具有受体ＴＰＫ活性,能够引起细胞受体自动磷酸化,ＥＧＦ刺激后ＴＰＫ的磷酸化作用增强,可见ＲＦＰ１３４对ＥＧＦ诱导的ＴＰＫ磷酸化和无ＥＧＦ诱导的受体自动磷酸化都具有明显的抑制作用,（并强于ＲＡ）这可能与在第二信使水平上阻抑ＰＴＰＫ活性密切相关     

PDGF-BB多肽刺激肺动脉平滑肌细胞PDGFmRNA表达

应用地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ）标记的血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）Ａ和ＰＤＧＦＢ链ｃＤＮＡ探针,原位检测了ＰＤＧＦＢＢ多肽对单层培养的肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦ基因表达的影响。结果表明,无血清培养的肺动脉平滑肌细胞内ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ阳性表达颗粒稀少,ＰＤＧＦＢＢ多肽培养的肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ阳性表达颗粒增多,较密集的分布于整个细胞内。全自动图像分析结果显示,ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ表达,ＰＤＧＦＢＢ培养组分别为无血清培养组的１７４倍和１７倍,差异显著（Ｐ＜００１）。本研究结果提示,ＰＤＧＦＢＢ多肽能刺激肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦｍＲＮＡ表达,促进其分泌,在慢性低氧性肺动脉高压血管平滑肌细胞增殖中具有重要作用     

N42—A神经生长因子诱导PC12细胞分化的抑制作用

研究表明,缺乏神经生长因子（ＮＧＦ）的营养支持是Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓ等神经元退行性疾病发生发展的重要原因,而ＮＧＦ和／或ＮＧＦ受体的过度表达则与一些神经系统肿瘤的发生发展有着十分密切的因果关系。采用＾１２５Ｉ－ＮＧＦ受体特异结合实验作为ＮＧＦ受体活性物质筛选实验模型从中药牛膝中筛选出了能强烈地抑制＾１２５Ｉ－ＮＧＦ受体结合的活性成分Ｎ４２－Ａ（ＩＣ５０＝６．１８±３．４３,ｎ＝４）;细胞培养实验     

G蛋白偶联受体激活丝裂原活化蛋白激酶的机理

多种Ｇ蛋白偶联受体的均能激活丝裂原活化蛋白激酶。Ｇｉ蛋白偶联受体主要通过其βγ亚基,依赖Ｒａｓ蛋白途径;在大多数哺乳类细胞中Ｇｓ蛋白偶联受体通过ＰＫＡ途径抑制Ｒａｓ依赖的ＭＡＰＫ活化,但在ＣＯＳ－７细胞,Ｇｓ蛋白偶联受体通过ＰＫＡ途径使表达的ＭＡＰＫ活化;Ｇｑ蛋白偶联受体主要通过ＰＫＣ途径依赖或非依赖于Ｒａｓ使ＭＡＰＫ活化。ＭＡＰＫ信号途径中ＥＧＦ受体,酪氨酸激酶及调节蛋白Ｓｈｃ等联级反应蛋白可能