人参皂甙 Rb1对大鼠缺血再灌注心肌细胞Bcl-2、Bax、Bad、Fas基因表达的影响

目的观察人参皂甙Rb1对缺血再灌注心肌细胞Bcl-2、Bax、Bad、Fas基因表达的影响.方法结扎/松解Wistar大鼠左冠状动脉前降支,建立大鼠缺血再灌注动物模型,免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Bad、Fas基因的蛋白表达,并利用图象分析系统测量蛋白阳性表达区域平均光密度值,进行定量分析.结果缺血再灌注组及Rb1治疗组Bcl-2、Bax、Bad、Fas基因的表达较假手术组明显增加(P<0.05), Rb1治疗组Bcl-2的表达与缺血再灌注组比较无明显差异(P>0.05),而Bax、Bad、Fas的表达明显下降(P<0.05),人参皂甙Rb1治疗组Bcl-2/Bax、Bcl-2/Bad以及Bcl-2/Fas比值均较假手术组与缺血再灌注组明显增加.结论人参皂甙Rb1治疗可以抑制缺血再灌注心肌细胞中促凋亡基因Bax、Bad、Fas的表达,并使Bcl-2/Bax、Bcl-2/Bad以及Bcl-2/Fas比值增加.     

Rb1、Rg1对肾缺血／再灌注血清诱导HK-2细胞凋亡中Bcl-2、Bax表达的影响

目的：探讨人参皂甙Rb1、Rg1在肾缺血／再灌注血清诱导HK-2细胞凋亡中对Bol-2、Bax表达的影响。方法：制备家兔肾缺血／再灌注血清（SIR）和对照组血清（SC）用于HK-2细胞培养,TUNEL法检测细胞凋亡。实验分组：对照组、缺血／再灌注组、Rb1干预组、Rg1干预组,培养24h后免疫细胞化学法检测Bcl-2、Bax的表达。结果：与缺血／再灌注组比较,Rb1干预组和Rg1干预组Bax的表达明显下降（P〈0．01）,Bcl-2／Bax比值增大。结论：人参皂甙Rb1、Rg1对肾缺血／再灌注血清诱导HK-2细胞凋亡具有保护作用。     

维生素E对老年大鼠卵巢颗粒细胞保护作用机制的探讨

目的：通过观察维生素E（VE）对老年雌性大鼠卵巢凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响及对其抗氧化能力的影响,探讨VE延缓卵巢衰老的作用和机制。方法：采用自然衰老雌性大鼠,给予不同剂量外源性VE,用免疫组化方法观察卵巢颗粒细胞凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax的表达,用Western Blot法检测卵巢Bcl-2、Bax蛋白含量,用生化法测定血清总超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量。结果：与成年对照组相比,老年对照组Bcl-2表达明显降低、Bax表达明显升高（P〈0．01）,血清中SOD活力下降、MDA含量显著升高（P〈0．01）。与老年对照组相比,VE纽Bcl-2表达升高,Bax表达降低（P〈0．05）,MDA含量显著减少（P〈0．01）。结论：VE可调控凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达和对抗自由基对颗粒细胞的损伤,对卵巢颗粒细胞具有一定的保护作用。     

降压通络方对大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的:研究降压通络方对大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法:体外培养大鼠肾小管上皮细胞,经过缺血缺氧,将大鼠肾小管细胞随机分为4组:正常组、模型组、降压通络方组、缬沙坦组。采用CCK-8检测细胞增殖情况,免疫组化法检测大鼠肾小管上皮细胞p-AKT蛋白的表达,蛋白免疫印迹法检测大鼠肾小管上皮细胞凋亡相关基因调控蛋白Bcl-2、Bax的表达,对Bcl-2、Bax蛋白的表达水平进行相关性分析。结果:缺血缺氧呈时间依赖性抑制大鼠肾小管上皮细胞活性;免疫组化结果示:p-AKT在正常组呈高表达,模型组低表达,降压通络方组p-AKT表达明显高于模型组(P0.01),缬沙坦组表达低于模型组(P0.05);蛋白免疫印迹法结果示:模型组Bcl-2表达较正常组明显降低(P0.01),降压通络方组和缬沙坦组Bcl-2的表达均高于模型组(P0.05,P0.01);模型组Bax表达较正常组明显升高(P0.01),降压通络方组和缬沙坦组Bax的表达均较模型组降低(P0.05);Bcl-2蛋白与Bax蛋白表达呈负相关性(r=-0.811,P0.01)。结论:降压通络方可抑制大鼠肾小管上皮细胞凋亡,其作用机制可能与上调p-AKT、Bcl-2蛋白,下调Bax蛋白表达有关。     

人参皂甙Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨人参皂甙Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织Bcl-2和Bax表达的影响及其意义。方法分别给大鼠腹腔注射人参皂甙Rg1 10、20、40 mg/kg,采用大脑中动脉闭塞方法建立脑缺血再灌注模型,观察大鼠脑缺血再灌注后不同时间段（2 h、24 h）神经功能缺损评分;应用免疫组化法检测脑组织缺血再灌注24h后Bcl-2、Bax的表达。结果人参皂甙Rg1组大鼠脑缺血后各时间点神经功能缺损评分显著低于单纯缺血再灌注组（P〈0.05）;与单纯缺血再灌注组相比,人参皂甙Rg1各组Bcl-2表达显著增高,Bax表达显著降低,Bcl-2/Bax比值显著上调（P〈0.05）。结论人参皂甙Rg1防治大鼠脑缺血再灌注损伤的机制可能与促进脑组织Bcl-2表达、抑制Bax表达有关,且以高剂量效果较好。     

多囊卵巢综合征模型鼠颗粒细胞凋亡及TRAIL蛋白的表达

目的通过观察卵巢颗粒细胞凋亡及TRAIL(肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)蛋白的表达情况,探讨颗粒细胞凋亡与PCOS发病的相关性及凋亡调控蛋白TRAIL在PCOS颗粒细胞凋亡中的作用。方法采用硫酸普拉睾酮钠诱导大鼠PCOS模型,3’-末端原位标记法(TUNEL)检测大鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况,免疫组化染色及RT-PCR分析检测TRAIL蛋白及TRAIL mRNA在颗粒细胞的表达。结果PCOS组大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞凋亡发生率及TRAIL蛋白的表达较对照组明显增强(P<0.01,P<0.05),窦前卵泡颗粒细胞凋亡发生率及TRAIL蛋白的表达两组无显著性差异(P>0.05),两组卵巢始基卵泡颗粒细胞未发现凋亡征象及TRAIL蛋白表达。PCOS组大鼠卵巢颗粒细胞TRAIL mRNA的表达较对照组明显增强(P<0.01)。结论PCOS大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞凋亡明显增强,TRAIL在PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控中发挥了作用。     

人参皂甙Rb1对大鼠脑缺血再灌注神经损伤后的修复作用

通过阻塞大鼠大脑动脉,制备短暂性脑缺血大鼠模型,将出现神经功能缺失症状的大鼠随机分组,实施再灌注后立即按(40mg/kg)进行腹腔注射人参皂甙Rb1。结果发现大鼠脑缺血再灌注后,人参皂甙Rb1通过促进NAIP、Bcl-2表达和抑制Bax表达发挥神经损伤后的修复作用。人参皂甙Rb1给药组在各时间点的胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)阳性细胞数远远高于单纯脑缺血再灌注组(P<0.01)。GDNF的表达与缺血性损伤有一定的联系,可认为人参皂甙Rbl对神经系统有一定保护作用。     

人参皂甙Rb1对阿尔茨海默病大鼠海马结构β-淀粉样蛋白表达的影响

目的观察人参皂甙Rb1对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠学习记忆能力及海马结构β-淀粉样蛋白表达的影响。方法动物分3组：对照组、模型组及治疗组,用D半乳糖联合三氯化铝建立AD大鼠模型,治疗组在造模后给予人参皂甙Rb1腹腔注射4周;采用Morris水迷宫测试大鼠的空间学习记忆能力,用免疫组织化学方法观察海马结构β-淀粉样蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组大鼠各时间段的逃避潜伏期均显著延长（P〈0．01）,海马CA1、CA3区及齿状回β-淀粉样蛋白表达的阳性细胞数明显增多（P〈0．01）;治疗组大鼠的逃避潜伏期较模型组明显缩短（P〈0．01）,海马CA1、CA3区及齿状回的β-淀粉样蛋白阳性细胞数显著减少（P〈0．01）。结论人参皂甙Rb1对AD模型大鼠学习记忆损害具有明显改善作用,其机制可能与人参皂甙Rb1减少海马结构β-淀粉样蛋白的表达有关。     

姜三七对子宫肌瘤大鼠子宫组织细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:探究姜三七对子宫肌瘤大鼠子宫组织细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法:选取SPF级雌性SD大鼠60只,随机分为对照组、模型组、姜三七组,每组20只。模型组和姜三七组给予黄体酮注射液和苯甲酸雌二醇注射液腹腔注射,16周后建立大鼠子宫肌瘤模型,对照组给予等量生理盐水腹腔注射。模型建立后,姜三七组予0.1 g/ml的姜三七混悬液10 ml/kg灌胃,正常对照组和模型组给予等量生理盐水,每日一次,4周为一个疗程,治疗3个疗程。治疗结束后,对比各组大鼠子宫湿重、子宫系数、子宫组织ER(雌激素受体)、PR(孕激素受体)、细胞凋亡率以及Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结果:(1)与对照组比较,模型组大鼠的子宫湿重、子宫系数明显升高,而姜三七组大鼠子宫湿重、子宫系数明显低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05);(2)与对照组(30%)比较,模型组大鼠子宫组织ER的阳性表达率(90%)明显较高,姜三七组大鼠子宫组织ER的阳性表达率(75%)明显低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05);(3)模型组大鼠子宫组织PR的阳性表达率(80%)明显高于对照组(30%),而姜三七组大鼠子宫组织ER的阳性表达率(35%)明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05);(4)模型组大鼠子宫组织细胞凋亡率低于对照组、Bax阳性细胞表达明显低于对照组,Bcl-2的阳性表达明显高于对照组,姜三七组大鼠子宫组织Bax的阳性表达与模型组比较明显增强,Bcl-2的阳性表达及细胞凋亡率明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:姜三七能够降低子宫肌瘤大鼠子宫组织细胞凋亡、ER、PR及Bcl-2的表达,增强Bax蛋白表达。     

缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因蛋白表达的影响

目的：探讨缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法：制备缺血预处理（IP）和缺血再灌注损伤（I／R）模型,采用末端标记技术（TUNEL）检测心细胞凋亡,应用免疫组织化学方法检测Bcl-2和Bax的蛋白表达,结果：缺血再灌注组心肌细胞凋亡率明显比正常对照组高（P＜0．05）,而缺血预处理组心肌细胞凋亡率明显比缺血再灌注组低（P＜0．05）,缺血再灌注组Bcl-2表达阳性细胞率明显比正常组低（P＜0．05）,而缺血预处理组Bcl-2表达阳性细胞率明显较缺血再灌注组高（P＜0．05）。缺血再灌注组Bax表达阳性细胞率明显较正常组高,而缺血预处理组Bax表达阳性细胞率明显较缺血再灌注组低（P＜0．05）。结论：缺血再灌注可诱导心肌细胞凋亡,缺血预处理可减少心肌细胞凋亡,Bcl-2和Bax的蛋白表达在心肌凋亡发生中起重要作用,缺血预处理可上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax蛋白表达。     

蓝莓花色苷预处理对大鼠心肌梗死的保护作用

目的观察蓝莓花色苷（blueberryanthocyanin,BBA）预处理对实验性急性心肌梗死大鼠心肌梗死面积,心肌肌钙蛋白-T（cTn-T）表达,Bax、Bcl-2mRNA表达的影响,探讨其干预心肌梗死的机制。方法40只Wistar大鼠随机分为假手术组,心肌梗死模型组,BBA低、中、高剂量组,药物干预4周,末次给药30min后结扎左冠状动脉前降支建立心梗动物模型。24h后,TTC检测心肌梗死面积;Westernblotting方法检测心肌细胞cTn-T蛋白表达;realtimePCR方法检测Bcl-2mRNA、BaxmRNA表达。结果模型组和假手术组相比,模型组心肌梗死面积显著升高（P〈0．01）,心肌细胞cTn．T蛋白表达下降（P〈0．05）,Bcl-2mRNA表达下降（P〈0．05）,BaxmRNA表达显著升高（P〈0．01）,Bcl-2／Bax比值显著降低（P〈0．01）。BBA干预给药组和模型组相比,中剂量组心肌梗死面积低于模型组（P〈0．05）,低剂量组心肌细胞cTn-T蛋白表达升高（P〈0．05）,中剂量组Bcl-2mRNA表达升高（P〈0．05）,低、中剂量组BaxmRNA表达下降（P〈0．05）,中剂量组Bcl-2／Bax比值升高（P〈0．05）。结论蓝莓花色苷对心肌梗死后心肌细胞具有明确的保护作用,其机制可能与减少心肌梗死面积,上调心肌细胞eTn-T蛋白的表达,上调Bcl-2mRNA表达、下调BaxmRNA表达,抑制心肌梗死后心肌细胞凋亡有关。     

缺血后处理对肺缺血／再灌注损伤的保护作用及其机制

目的：探讨缺血后处理（聃）是否通过抑制P38丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）活化来减轻再灌注损伤肺细胞的凋亡。方法：雄性SD大鼠40只,随机分成5组（n=8）,即对照组（C组）、肺缺血／再灌注组（I／R组）、肺缺血／再灌注＋缺血后处理组（IPO组）、缺血后处理＋溶剂对照组（D组）、缺血后处理＋SB203580组（SB组）。各组分别于再灌注2h留取左肺组织,检测肺组织湿／干重比（W／D）和总肺含水量（TLW）;光镜观察肺组织形态学结构改变并进行肺组织损伤定量评估（IQA）;原住末端标记法（TUNEL）检测肺细胞凋亡情况并计算凋亡指数（AI）;RT-PCR和免疫组化法测定Bax、Bcl-2基因和蛋白的表达。结果：与C组相比,I／R组W／D、TLW、IQA和AI均显著升高（P〈0．05,P〈0．01）,肺组织结构发生明显损伤;Bcl-2、Bcl-2／Bax基因及蛋白表达明显降低,Bax基因及蛋白表达明显升高（P〈0．05,P〈0．01）;IPO组、D组、SB组与I／R组相比,w／D、TLW、IQA和AI均显著降低（P〈0．05,P〈0．01）,肺组织结构损伤情况有所改善;Bcl-2、Bcl-2／Bax基因及蛋白表达明显升高,Bax基因及蛋白表达明显降低（P〈0．05,P〈0．01）;D组与IPO组比较各项指标均无明显差异（均P〉0．05）;SB组与IPO组相比,肺组织W／D、TLW、IQA和AI均显著降低（P〈0．05,P〈0．01）,肺组织结构未见明显损伤;Bcl-2、Bcl-2／Bax基因及蛋白表达明显升高,Bax基因及蛋白表达明显降低（P〈0．05,P〈0．01）。结论：I／R通过激活P38MAPK导致大鼠肺泡结构严重破坏,肺内细胞大量凋亡;IPO可能是通过抑制P38MAPK通路的激活而减轻L／R损伤。     

G1对EA.hy926内皮细胞内质网应激的抑制作用

目的观察GPR30受体激动剂G1对高糖诱导的EA.hy926内皮细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的影响。方法选用EA.hy926内皮细胞为研究对象,分为3组:正常对照组(Con,17.51mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG,33.3mmol/L葡萄糖)、高糖+G1组(HG+G1,HG+1umol/L G1),利用流式细胞术检测3组细胞凋亡率,Western blot法检测ERS相关分子Bip、IRE1、PERK及凋亡分子Bax、Bcl-2的表达变化,RT-PCR法检测Bip和CHOP的mRNA表达变化。结果 HG组与Con组比较,细胞凋亡率明显升高(P0.01),Bip、IRE1、PERK及凋亡分子Bax表达上调(P0.01,P0.05或P0.001),Bcl-2的表达下调(P0.01),Bip mRNA、CHOP mRNA表达上调(P0.001及P0.01);HG+G1组与HG组比较,细胞凋亡率明显降低(P0.05),Bip、IRE1、PERK及凋亡分子Bax表达下调(P0.05或P0.01),Bcl-2的表达上调(P0.05),Bip mRNA、CHOP mRNA表达下调(P0.001及P0.01)。结论 GPR30受体激动剂G1可抑制EA.hy926内皮细胞内质网应激。     

Altered expression of Bcl-2 and Bax in follicles within dehydroepiandrosterone-induced polycystic ovaries in rats

PCOS (polycystic ovary syndrome) is a heterogeneous disease characterized by hyperandrogenaemia, hirsutism, oligo- or amenorrhea, insulin resistance and anovulation. The aim of the present study was to evaluate if the balance between the ovarian expression of Bax (proapoptotic protein) and Bcl-2 (antiapoptotic protein) is altered in a PCOS model developed in rats by DHEA (dehydroepiandrosterone) administration. In addition, the ovarian morphology and the circulating progesterone levels were evaluated. Histological studies confirmed the presence of follicular cysts, atretic follicles and the absence of corpora lutea in the ovaries from the PCOS group and a significant decrease in circulating progesterone levels. Immunohistochemical studies showed that the expression of Bcl-2 and Bax were mainly localized in granulosa cells of AFs (antral follicles) in both groups. Bax expression was greater in preantral and AFs from PCOS ovarian sections than in the controls. In contrast, intense Bcl-2 immunostaining was observed in the control AFs, while Bcl-2 protein was either absent in PFs (preantral follicles) or weakly expressed in AFs from PCOS rats. These results were partially confirmed by Western studies. Data revealed that the ovarian level of Bcl-2 protein was lower in PCOS than in the control and that there were no differences in Bax ovarian levels between groups. However, Bax/Bcl-2 ratio was significantly higher in PCOS group than in the control group. In conclusion, an increase in ovarian apoptosis through an imbalance among the Bcl-2 family members may be involved in the transformation of growing follicles in cystic follicles in the ovaries from DHEA-induced PCOS rats.     

HOXA10基因在多囊卵巢综合症患者卵巢中的表达

目的 探讨HOXA10基因在卵巢中颗粒细胞的表达及其与多囊卵巢综合征的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应及免疫印迹法分别测定25例多囊卵巢综合征(PCOS)妇女和32例卵巢功能正常(Non-PCOS)妇女卵巢黄素化颗粒细胞中HOXA10 mRNA和蛋白的表达水平.结果 PCOS妇女黄素化颗粒细胞中HOXA10 mRNA的表达和蛋白的表达均低于Non PCOS妇女(P＜0.01,P＜0.05).结论 HOXA10基因在卵巢中有表达,PCOS妇女卵巢黄素化颗粒细胞HOXA10 mRNA和蛋白表达水平明显低于Non-PCOS妇女,提示该基因可能参与了PCOS的发生及发展过程.     

缺血后处理对大鼠再灌注损伤肺细胞凋亡的影响

目的：探讨缺血后处理对再灌注损伤肺细胞凋亡的影响。方法：健康雄性sD大鼠24只,随机分为对照组（C组）、缺血／再灌注组（I／n组）和缺血后处理组（IPostC组）（n=8）。对比观察各组血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、髓过氧化物酶（MPO）活力及含量变化,原位缺口末端标记法（TUNEL）检测肺组织细胞凋亡情况,免疫组化及RT-PCR法检测肺组织中Bax、Bcl一2蛋白和基因的表达。结果：I／R组与c组相比,MDA含量、MPO活力明显升高,SOD活力明显下降（均P〈0．01）,肺组织原位细胞凋亡检测示I／R组凋亡指数（AI）（39．03±3．46）显著高于C组（2．88±0．34）,Bcl-2／Bax比值在蛋白和基因水平明显降低（均P〈0．01）;IPostC组与I／R组相比MDA含量显著降低（P〈0．05）,MPO活力显著降低（P〈0．01）,SOD活性升高（P〈0．01）,AI为8．03±0．88显著低于L／R组,并能明显升高Bcl-2／Bax比值（均P〈0．01）。结论：缺血后处理通过减轻脂质过氧化反应及中性粒细胞聚集,降低Bax／Bel．2比值,使肺组织细胞凋亡减少,从而有效地减轻肺缺血／再灌注损伤。     

益坤宁对围绝经期大鼠卵巢bcl-2和bax表达的影响

目的:研究中药益坤宁(Yikunning,YKN)对围绝经期大鼠卵巢bcl-2和bax基因表达的影响,探讨益坤宁治疗围绝经期综合征的作用机制。方法:选用自然衰老的围绝经期雌性大鼠,随机分为3组(n=10):围绝经期对照组、利维爱(Livial)对照组和益坤宁组,另选10只青年雌性大鼠作为青年对照组。连续灌胃处理4周后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠卵巢中凋亡相关基因bcl-2和baxmRNA表达,采用蛋白印迹(Westernblot)检测大鼠卵巢中Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:益坤宁组大鼠卵巢中Bcl-2、BaxmRNA及其蛋白表达高于围绝经期对照组,差异有统计学意义(P0.01);益坤宁组大鼠卵巢中Bcl-2/BaxmRNA比值和蛋白比值高于围绝经期对照组,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:中药益坤宁通过上调围绝经期大鼠卵巢中凋亡相关基因bcl-2和bax的表达,上调Bcl-2/BaxmRNA比值和蛋白比值,从而延缓卵巢衰老,这可能是其治疗围绝经期综合征的分子机制之一。