α_1-抗胰蛋白酶的分离纯化及应用研究进展

α_1-抗胰蛋白酶为人血浆中微量蛋白,其浓缩制剂在临床上具有治疗肺气肿等疾病的确切疗效．综述了近来α_1-抗胰蛋白酶分离纯化工艺和应用研究的进展,结合生化分离纯化技术的发展,讨论了该产品制备新工艺的开发方向．     

α1-抗胰蛋白酶的缺乏与治疗

α1-抗胰蛋白酶缺乏症(α1-antitrypsin deficiency,AATD)是遗传性疾病,可引起肝脏疾病,也与早发型肺气肿等肺部疾病有关。编码α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,AAT)的基因具有复杂的单核苷酸多态性,并以常染色体共显性方式遗传。临床上,以混合人血浆为来源的静注AAT可提高AATD患者的血清AAT水平。除这种增补疗法外,新的治疗方法也在不断发展,包括基因治疗及干细胞治疗等。     

α1-抗胰蛋白酶的研究进展

自1963年首次报道α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)缺失与肺气肿的关系以来,α1-AT的结构和功能、作用原理等得到进一步的认识。伴随α1-AT产品的不断研制,对其临床应用及其临床研究更加广泛深入,对此进行综述。     

西藏地区藏族群体α1-抗胰蛋白酶的遗传多态性及一种新的Pi变异型

作者用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术,调查了204名西茂地区无血缘关系藏族个体血清α1-抗胰蛋白酶（Pi）的表型,除检出6种常见PiM亚型外,还检出了4种变异型。其中,1种是国内外尚未见报道的新的Pi变异型,1种是缺陷型,其血清Pi相对含量为69.51%。推算出Pi等位基因频率为：PiM1=0.7624,PIM2=0.1634,PiM3=0.0668和PiV=0.0074。 The distribution of subtypes and gene frequencies ofα1-antitrypsin were studied in 204 unrelated healthy blood donors in Tibetan population in Tibet using ULPAGIF.Besides six common PiM subtypes,four kinds of Pi variants were detected.They were as follows:PiM1/L,R,M1-and a new variant.The relative concentration of M1-was 69.51%.The gene frequencies of Pi alleles were PiM1=0.7624,PiM2=0.1634,PiM3= 0.0668,PiV=0.0074.     

蒙古族、朝鲜族和壮族中腺苷酸激酶、腺苷脱氨酶、血清触珠蛋白、α_1-抗胰蛋白酶的多态性

调查了中国内蒙古的蒙古族、吉林的朝鲜族和广西壮族的红细胞腺苷酸激酶(AK)、腺苷脱氨酶(ADA)及血清触珠蛋白(Hp)、a_1-抗胰蛋白酶(a_1-AT)的遗传多态性。蒙古族、朝鲜族、壮族的基因频率:AK_1~1分别为0.9843、1.0000、1.0000;ADA~1分别为0.9529、0.9468、0.9573;Hp~1分别为0.2597、0.3152、0.3571;在a_1-AT中Pi~M分别为0.9953、0.9953、0.9928,Pi~s分别为0.0000、0.0000、0.0072,Pi~F分别为0.0047、0.0047、0.0000。x~2检验表明,三个民族各项指标的表型观察值都符合Hardy-Weinberg法则。     

自发性高血压大鼠主动脉α_(1B)及α_(1D)肾上腺素受体第三细胞内环不存在点突变

我们以前的实验显示自发性高血压大鼠（SHR）离体主动脉磷酸肌醇蓄积在无激动剂存在的基础状态下就显著增高。根据G蛋白偶联受体固有活性假说，推测SHR主动脉中介导肌酸磷脂水解的主要受体－α1D和α1B-肾上腺素受体的第三细胞内环可能存在点突变。本实验通过PCR－SSCP鉴定，表明上述突变并不存在。从而提示SHR主动脉磷酸肌醇蓄积基础水平增加并非因α1D和α1B-肾上腺素受体第三细胞内环区域突变所引起的受体固有活性所致。     

草鱼α1-抗胰蛋白酶基因cDNA全长克隆与表达分析

采用RACE技术获得α1-抗胰蛋白酶基因cDNA全长序列为1 469 bp,开放阅读框为1 329 bp,可编码442个氨基酸。5′非编码区长19 bp,3′非编码区长121 bp。核苷酸序列分析表明,在N端可能存在一个由1～21位氨基酸残基组成的信号肽;与斑马鱼的同源性最好,其次是虹鳟;在系统进化上,与在斑马鱼、虹鳟共聚为一个大支。用半定量RT-PCR分析正常及细菌诱导下草鱼α1-抗胰蛋白酶基因在不同组织中的表达分布。结果显示:正常情况下,草鱼α1-抗胰蛋白酶在肝脏表达最丰富,在脾脏、前肾、前肠、中肠、后肠和也有少量表达;细菌诱导下,肝脏中表达最强,前肾、脾脏、肠道中表达均明显提高,心脏和后肾中也出现较高表达。提示α1-抗胰蛋白酶可能参与了机体对嗜水气单胞菌感染的免疫应答。     

载脂蛋白E基因多态性在中国4个民族中的分布

本研究提取中国东北汉族和达斡尔、鄂伦春、鄂温克等４个人群的基因组ＤＮＡ后,利用ＰＣＦ－ＲＦＬＰ方法扩增ａｐｏ Ｅ基因等４外显子片段并进行遗传分析,计算各个人群中的ａｐｏ Ｅ等位基因频率。结果发现４个人群中的ａｐｏ Ｅ等位基因频率分布趋势与国风个报告基本一致,但等位基因ε３的频率显著高于欧美国家。     

六个民族中结合珠蛋白的遗传多态性

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究了黑龙江省及内蒙古自治区6个民族共计1854例健康人的血浆结合珠蛋白的遗传多态性。分别计算了每个群体中的Hp基因频率,经X~2检验证明6个群体中Hp的表型分布均符合Hardy-Weinberg法则。同时,和其它地区报告的汉族群体资料进行比较,发现Hp~1基因频率在中国不同地区有从北到南逐渐增高的倾向。     

黄牡丹七个居群的细胞学研究

本文对产于云南中部至西北部的黄牡丹Paeonia delavoyivar. lutea 7个居群进行了细胞学研究。7个居群的染色体数目均为2n=10,核型都属“2A”型。在7个居群中,第二、第三和第五对染色体相对稳定,而第一和第四对染色体存在着变异。第四对染色体的变异较大,存在着结构上的杂合性,其杂合性不仅表现在其长度上,而且表现在臂比值上。这种结构上的杂合性可能与其形态变异有着相关性。在居群之间,随体和次缢痕的数目及位置也有着差异。     

肤纹参数在52个中国人群中的分布

根据11项肤纹参数对28个民族的52个群体进行分析表明:指纹W频率在每一个群体中都是女性不显著多于男性或少于男性,指纹L″频率都是男性不显著多于女性或少于女性;在L_2距离的系统树上可以看到南方群、北方群、混合群,混合群中又各包括了南、北方民族的小聚类群;L_2距离与地理位置有平行关系,南、北群间以长江或北纬30°—33°为界带。     

免疫球蛋白同种异型Gm因子在四十个中国人群中的分布

根据免疫球蛋白同种异型Gm因子在维吾尔族、哈萨克族、回族、蒙古族、朝鲜族、藏族、鄂伦春族、壮族、侗族、白族、汉族等40个人群中的分布,计算Gm单倍型频率及遗传距离,提出了“中华民族以北纬30度为界,分南北两大发源地”的假说。     

MYS2多态位点在中国26个人群中分布的研究

对中国26个人群中Y染色体小卫星分位点MYS2的分布进行了研究,结果显示：MYS2*4是常见的等位基因类型,MYS2*3在中国不同人群中分布差异很大（0-32.4％）;并对该位点在不同人群中分布的频率进行了AMOVA分析,结果为：不分组、南方人群和北方人群的遗传学差异分别为7.76％、8.11％和1.42％。南北方人群间、东北和西北人群间的差异分别为4.34％和1.57％。结论：MYS2是研究中国人群遗传结构有价值的多态位点,中国不同人群之间存在一定的遗传学差异,中国南方人群间的遗传学差异较大,再次证实了中国人群的南北差异。     

广西壮族健康人群IL-1β基因多态性的研究

目的了解白细胞介素-1β基因多态性在广西地区壮族健康人群中的分布及其与其他不同种族间的差异.方法采用PCR-RFLP方法,对155名广西地区壮族健康者IL-1β( 3953)位点进行了检测,计算其基因型和等位基因频率,并与德国和西班牙人群的基因多态性分布进行比较.结果广西地区壮族健康人群与德国、西班牙人群相比,C等位基因频率明显偏高(97%比78%和80.3%),T等位基因频率明显偏低(2.6%比22%和19.7%)(P<0.005).结论广西地区壮族健康人群与德国、西班牙种族比较,IL-1β( 3953)基因多态性的分布存在明显差异.     

中国银额果蝇自然群体B染色体的分布

经对我国银额果蝇自然群体Ｂ染色体（Ｂｓ）的分布进行多年广泛地调查,共作过２４个群体,５７２个单雌系,６７３８只个体的观察。从细胞和群体水平研究Ｂｓ的地理分布。结果发现,中国（除台湾省外）银额果蝇自然群体中普遍存在Ｂｓ。结合前人报道得出。Ｂｓ的地理分布出现了由东向西和由南向北的规律性的依次升高趋势。这种跨越不同地理环境的区域性梯度变异与其宿主向大陆内地扩散的推论相符。Ｂｓ频率最高（８７．７％）的是海     

中国4个少数民族中SDF1多态性研究

研究与HIV 1感染相关的基质细胞衍生因子 (SDF1)等位基因突变频率和多态性在中国 4个少数民族的分布特征。应用PCR/ RFLP等方法检测回族 (5 7例 )、鄂伦春族 (71例 )、蒙古族 (30例 )及锡伯族 (2 6例 )共 184个个体中SDF1 -3’A基因突变频率。结果得出中国 4个民族中SDF1- 3’A基因的基因频率分别为 :蒙古族为 38 3%,锡伯族为 2 3 .1%,回族为 2 0 .2 %,鄂伦春族为 10 .6 %。中国 4个少数民族中SDF1- 3’A等位基因频率存在较大的差异 (χ2 =37 .82 6 ,P<0.01) , 提示这 4 个民族的遗传结构存在着一定的差异。 本研究 为评估中国不同民族对 HIV-1 的易感性及艾滋病的流行病学研究提供了基本数据。     

我国大陆部分地区黑腹果蝇群体线粒体DNA多态性研究

用１０种限制性内切酶对我国大陆５个地方（武汉,长沙,桂林,南宁和北海）６个黑腹果蝇（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）群体的线粒体ＤＮＡ进行了限制片段长度多态性分析,在５６个单雌系中,发同了２５种不同的限制类型,应用Ｎｅｉ等（１９７９）的数学模型和ＵＰＧ法,构建了限制类型间和群体间的系统进化树,结果发现：所研究的群体分为３个类群,对应于南,中和北３个亚热带地区,除长沙玉合醋厂外,所有采