氟烷,七氟醚对缺血再灌注心肌功能和ATP酶活性的影响

心肌缺血再灌注过程中细胞内存在着严重的Ｃａ２＋、Ｎａ＋紊乱。Ｃａ２＋ＡＴＰ酶和Ｎａ＋,Ｋ＋ＡＴＰ酶在维持细胞内外离心平衡中起着重要作用。本文用大鼠离体心脏Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ模型结合缺血前后心功能指标的变化,研究氟烷、七氟醚对缺血前、缺血期、复灌...     

间歇性低压低氧方式对发育大鼠心脏缺血/再灌注损伤的影响

本研究旨在探讨两种不同形式的间歇性低压低氧（intermittent hypobaric hypoxia,IHH）对发育大鼠心脏缺血,再灌注损伤的影响。雄性Sprague-Dawley（SD）新生大鼠72只,随机分为三组：对照组、IHH3000in组（IHH3000）、IHH5000m组（IHH5000）。低氧组大鼠出生后立即于低压氧舱分别接受28d、42d和56d（海拔5000m、每天6h：海拔3000m、每天5h）的低压低氧处理。应用Langendorff离体心脏灌流技术,给予心脏缺血（停灌30min）／再灌注（复灌60min）处理,分别在缺血前5min及复灌后l、5、10、20、30、60min记录心功能和冠状动脉流量变化,并测定乳酸脱氢酶（1actate dehydrogenase,LDH）活性。实验结束时测定心脏重量。结果显示：（1）IHH3000组大鼠体重增长与对照组无明显差异;IHH5000组大鼠体重增长明显慢于对照组及IHH3000组大鼠（P〈0．01）。（2）IHH3000组人鼠表现明显的心脏保护效应。与对照组相比较,在心脏停灌,再灌注60min时,心功能（LVDP、±LVdp／drmax）恢复增强（P〈0．05）、LDH活性降低（P〈0．05）、冠状动脉流量增多（P〈0．05）;心脏重量与对照组大鼠无差异;IHH42d处理的大鼠心功能恢复明显好于IHH28d处理的大鼠（P〈0．05）。（3）IHH5000组大鼠表现出明显的心脏损伤效应,各项心功能指标（LVDP、±LVdp／dtmax）的恢复均低于对照组（P〈0．05）,复灌过程中LDH活性明显高于相应对照组（P〈0．05）,右心室重量明显高于对照组大鼠（P〈0．05）。结果表明,适当的IHH增强发育大鼠心脏对缺血,再灌注损伤的抵抗能力;间歇性低氧方式是影响其心脏保护作用的重要因素。     

丙泊酚预处理对大鼠离体心肌浅低温缺血／再灌注损伤后线粒体细胞色素C释放的影响

目的：探讨丙泊酚预处理对大鼠离体心肌浅低温缺血／再灌注（I／R）损伤后心肌细胞凋亡及线粒体细胞色素C释放的影响。方法：应用Langendorff离体心脏灌注模型,取50只SD大鼠随机分为5组：对照组（C组）,二甲基亚砜（DMSO）预处理组（D组）,25、50、100μmol·L^-1丙泊酚预处理纽（P1、P2、P3组）。各组均浅低温缺血55min,再常温灌注60min。D组、P1、P2、P3组在缺血前分别以含DMSO、相应浓度丙泊酚的K-H液灌注10min,再冲洗5min,重复2次。记录平衡灌注末、缺血前即刻、再灌注30、60min时的心功能指标。再灌注60min时测定凋亡细胞,提取心肌线粒体,测定线粒体和胞浆的细胞色素C水平。结果：与C组相比,P3组再灌注30min、60min时左室舒张末压（LVEDP）降低、左室发展压（LVDP）升高（P〈0．05或P〈0．01）;P2、P3组再灌注末心肌细胞凋亡率降低（P〈0．05或P〈0．01）,线粒体细胞色素c释放减少,胞浆细胞色素C的量明显降低（P〈0．05或P〈0．01）。结论：丙泊酚预处理能够通过抑制心肌线粒体细胞色素C释放到胞浆,降低浅低温I／R损伤心肌细胞凋亡率,减轻心肌桶伤．     

红花对兔肺缺血/再灌注损伤及环氧酶表达的影响

目的：探讨红花（safflor injection,SI）抗肺缺血/再灌注损伤作用及其机制。方法：复制在体兔肺缺血/再灌注损伤模型。30只日本大耳兔,随机均分为三组：假手术组（S组）,缺血/再灌注组（I/R组）和缺血/再灌注＋红花注射液组（SI组）。实验结束时,自颈动脉抽血检测丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和黄嘌呤氧化酶（XO）活力。取肺组织测湿干重比（W/D）,计算肺泡损伤率（IAR）,电镜观察细胞超微结构改变。免疫组化法检测肺组织COX-1、COX-2蛋白表达的变化 组织原位杂交法检测肺组织COX-1mRNA、COX-2mRNA表达的变化。结果：I/R组血清MDA、XO均显著高于S组,SOD明显低于S组（P〈0.01） I/R组和SI组的W/D与IAR均高于S组（均P〈0.05和P〈0.01）,SI组显著低于I/R组（P〈0.01） I/R组肺组织的超微结构损伤严重,SI组损伤程度明显较轻 免疫组化和原位杂交发现I/R组肺组织COX-2蛋白和COX-2mRNA表达皆显著高于SI组（均P〈0.01）,肺组织COX-1蛋白和COX-1mRNA表达三组间无明显变化。结论：肺缺血/再灌注损伤可诱导肺组织COX-2的表达,SI可能通过抗氧化应激和下调肺组织COX-2蛋白及其基因的表达而减轻肺缺血/再灌注损伤。     

维拉帕米对骨骼肌缺血再灌注损伤保护作用的酶组织化学研究

实验选用大鼠骨骼肌缺血再灌注模型, 观察骨骼肌缺血及再灌注后酶组织化学和超微结构的变化, 并观察维拉帕米的保护作用。结果显示： 骨骼肌缺血６ｈ 时, 骨骼肌细胞ＳＤＨ、ＣＣＯ、Ｃａ２＋ －ＡＴＰａｓｅ活性呈下降趋势, 而ＬＤＨ 活性则有所增强。再灌注１２ｈ 时, 骨骼肌细胞ＳＤＨ、ＣＣＯ、Ｃａ２＋ －ＡＴＰａｓｅ 活性进一步明显下降,同时ＬＤＨ 活性亦下降明显,而应用维拉帕米能在一定程度上保护上述酶的活性。与此同时,骨骼肌超微结构的改变与其酶活性的变化相一致。因此, 本实验提示： 骨骼肌缺血再灌注可损害其能量代谢酶的活性, 而维拉帕米则有较强的保护作用。     

胎脑提取液对衰老小鼠海马神经元酶活性影响的实验研究

目的 观察胎脑提取液对衰老小鼠海马神经元酸性磷酸酶（ACP）和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响,探讨胎脑提取液的抗衰老作用。方法 选用健康昆明种小白鼠30只,随机分为3组;采用D-半乳糖制备亚急性衰老模型;酶组织化学方法结合显微图像分析。观察各组小鼠海马神经元ACP和SDH的活性。结果 衰老模型组与正常对照组相比,小鼠海马神经元ACP活性明显升高,SDH活性明显降低;给药组与衰老模型组相比,小鼠海马神经元ACP活性明显降低。SDH活性明显升高。结论 胎脑提取液可以延缓海马神经元的衰老进程,具有一定的抗衰老作用。     

玉米灌浆期水分差异供应对籽粒淀粉积累及其酶活性的影响

利用普通玉米(Zay mays)‘掖单22’和高油玉米‘高油115’,研究了灌浆期水分差异供应对籽粒淀粉及其组分积累、相关酶活性动态变化的影响。结果表明,两种类型玉米淀粉积累和酶活性动态变化趋势基本一致,但对水分的反应有差异。缺水提高了‘掖单22’籽粒中淀粉、支链淀粉含量,而直链淀粉含量下降,‘高油115’则是籽粒中的淀粉含量、支链淀粉和直链淀粉含量提高;充分供水使淀粉及其组分产量提高;叶片中蔗糖合成酶(SS)、磷酸蔗糖合成酶(SPS)活性随水分供应水平而提高,尤其在授粉后10~30 d增幅更加明显。充分供水明显提高籽粒中腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADPG-PPase)、尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDPG-PPase)、可溶性淀粉合成酶(SSS)和淀粉粒结合淀粉合成酶(GBSS)活性,缺水使籽粒中酶活性下降较早且迅速;SPS、ADPG-PPase、SSS酶活性对缺水反应比较敏感。     

微囊藻毒素-LR对小鼠肠道消化酶的影响

微囊藻毒素-LR（MCLR）是一类对动物和人类健康影响很大的蓝藻毒素。已有调查认为MCLR能导致某些胃肠道疾病,相关实验室资料也证实MCLR能在肠道积累并引起肠道损伤。研究对小鼠连续腹腔染毒MCLR 28d,观察肠道病理水平及超微结构的变化,并测定肠黏膜刷状缘膜酶活性。结果显示,小肠绒毛受损较严重,绒毛数量减少、部分脱落至肠腔,固有层及黏膜下层水肿、充血;电镜观察发现肠细胞细胞质电子密度降低,伴有线粒体肿胀、细胞核变形现象;肠黏膜二糖酶（蔗糖酶、麦芽糖酶、乳糖酶）、碱性磷酸酶及-谷氨酰转移酶活性均呈下降趋势。在亚慢性MCLR染毒条件下,肠道的消化功能可能受到抑制,进而导致机体对营养物质吸收不良。研究对理解蓝藻毒素引起的胃肠道不适（如恶心、呕吐、腹痛、腹泻）提供了新的证据。       

Noggin 对脑缺血大鼠自主神经系统活动的影响

高血脂Wister大鼠结扎双侧颈总动脉制作缺血性脑损伤模型,检测noggin注射组、缺血模型组以及对照组大鼠的自主神经系统活性,探讨重组蛋白noggin对脑缺血再灌注损伤的作用.结果表明缺血模型组大鼠的脑电图频谱表现出明显的缺血样改变,而noggin注射组大鼠的脑电图谱和对照组类似.Noggin注射组大鼠心率变异性指标的中频与高频的比值低于缺血模型组,肾交感神经活动也显著低于缺血模型组,表明noggin对脑缺血再灌注损伤后的自主神经功能活动异常具有一定的改善作用.     

甲状腺素与甲巯咪唑对大鼠视前区与下丘脑前部温度敏感神经元的影响

本文观察了皮下注射甲状腺素和胃饲甲巯咪唑对大鼠视前区-下丘脑前部(PO/AH)温度敏感神经元的影响。PO/AH 存在温度敏感神经元(TSN)和温度不敏感神经元(TIN),在 TSN 中又可分为热敏神经元(WSN)和冷敏神经元(CSN)。在正常大鼠,TSN∶TIN=1.43∶1;WSN∶CSN=1.86∶1。以上比例可被甲状腺素和甲巯咪唑所改变:前者使之分别下降为1∶2.36和1.20∶1;后者使 TSN∶TIN 下降为1∶1.29,WSN∶CSN 上升为2.40∶1。各组神经元构成比有显著性差异,(X_2=9.64,P<0.05)。正常大鼠中所记录到的高频神经元(>15H_z)占32%(11/34),甲状腺素组仅有8%(3/37),甲巯咪唑组为9%(3/32)。实验中还发现甲状腺素组和甲巯咪唑组中 TSN 对热刺激的耐受性显著低于正常组。以上结果提示:甲状腺素或甲巯咪唑所致体温上升或下降可能与 PO/AH 神经元兴奋性及比例等改变有关;甲状腺素合成、释放和代谢的紊乱可以在下丘脑水平干扰体温调节过程;但这一作用的具体途径有待于进一步研究。     

丹参对心肌低氧/复氧损伤的保护作用的研究

目的：研究中药丹参（ＳＭ）对心肌低氧／复氧损伤的保护作用。方法：运用＾３１Ｐ－ＮＭＲ技术对离体灌流大鼠心脏的高能磷酸化合物含量及细胞内的ｐＨ值（ｐＨｉ）进行动态跟踪。结果：丹参注射液能明显减轻低氧期间心肌高能磷酸合物含量的下降,促使复氧期间ＰＣｒ、ＡＴＰ相对含量的恢复,减少低氧及复氧阶段心肌ｐＨｉ的下降。结论：丹参参改善低氧及复氧期间心肌能量代谢水平,减轻心肌低氧／复氧损伤,并能显著改善细胞内酸碱     

Carvedilol对大鼠实验性缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

研究 Carvedilol对缺血再灌注心肌细胞凋亡及 Bcl- 2、Bax蛋白表达的影响 ,探讨 Carvedilol抑制心肌细胞凋亡的可能机制。结扎 Wistar大鼠左冠状动脉前降支 (L AD) ,建立大鼠缺血再灌注动物模型。采用末端标记原位细胞凋亡法检测心肌凋亡细胞 ,并利用光学显微镜进行细胞计数 ;免疫组化法检测 Bcl- 2和 Bax蛋白表达 ,并利用图象分析系统检测二者的平均光密度值 ,进行定量分析。结果显示手术组心肌细胞凋亡数为 37.5 3± 9.2 2个 /视野 ,假手术组 0 .18± 0 .91个 /视野 ,治疗组为 7.6 3± 4.0 5个 /视野。各组间有显著差异 (P<0 .0 5 ) ;手术组 Bcl- 2蛋白平均光密度值为 0 .14± 0 .0 1,假手术组为 0 .0 9± 0 .0 2 ,治疗组为 0 .14± 0 .0 2 ,手术组和治疗组与假手术组相比均有显著差异 (P<0 .0 5 ) ,治疗组与手术组相比无显著差异(P>0 .0 5 ) ;手术组 Bax蛋白平均光密度值为 0 .10± 0 .0 2 ,假手术组为 0 .0 6± 0 .0 1,治疗组为 0 .0 7± 0 .0 1,手术组与治疗组、假手术组相比有显著差异 (P<0 .0 5 ) ,治疗组与假手术组相比无显著差异 (P>0 .0 5 )。结果表明 Carvedilol有显著抗缺血再灌注心肌细胞凋亡作用 ,其作用机制可能与抑制 Bax基因的蛋白表达 ,使 Bcl- 2基因表达的蛋白功能相对增强 ,Bcl- 2     

甲状腺素和甲巯咪唑对大鼠视前区-下丘脑前部中及血清中单胺类递质的影响

反复皮下注射甲状腺素(T_4,1mg/100g·d,连续10d)和胃饲甲巯咪唑(10mg/100g·d,连续15d)后,用高效液相色谱加电化学检测器(HPLC-EGD)分析了大鼠视前区-下丘脑前部(PO/AH)中单胺神经递质的含量。发现经甲状腺素处理后,PO/AH区中多巴胺(DA)和高香草酸(HVA)含量显著增加,具有统计学意义(P<0.01),5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)轻度上升,但无统计学意义(P>0.05),去甲肾上腺素(NE)无明显变化;经甲巯咪唑处理后的动物则出现NE含量显著下降(P<0.05),但DA、HVA、5-HT和5-HIAA各项变化不显著。本文还同步观察了外周血清中单胺介质含量的变化,结果表明其与中枢单胺介质含量变化基本上不同步。本文还讨论了甲状腺素和甲巯咪唑影响单胺介质含量和影响体温变化之间的关系。     

EFFECTS OF NH4+ ASSIMILATION ON DARK CARBON FIXATION AND β-1,3-GLUCAN METABOLISM IN THE MARINE DIATOM SKELETONEMA COSTATUM (BACILLARIOPHYCEAE)

The effects of NH₄⁺ assimilation on dark carbon fixation and β-1,3-glucan metabolism in the N-limited marine diatom Skeletonema costatum (Grev.) Cleve (Bacillariophyceae) were investigated by chemical analysis of cell components and incorporation of ¹⁴C-bicarbonate. The diatom was grown in pH-regulated batch cultures with a 14:10 h LD cycle until N depletion. The cells were then incubated in the dark with ¹⁴C-bicarbonate, but without a source of N for 2 h, then in the dark with 63 μmol·L⁻¹ NH₄⁺ for 3 h. Without N, the cellular concentration of free amino acids was almost constant (∼4.5 fmol·cell⁻¹). Added NH₄⁺ was assimilated at a rate of 12 fmol·cell⁻¹·h⁻¹, and the cellular amino acid pool increased rapidly (doubled in <1 h, tripled in <3 h). The glutamine level increased steeply (45× within 3 h), and the Gln/ Glu ratio increased from 0.1 to 2.4 within 3 h. The rate of dark C fixation during N depletion was only 1.0 fmol·cell⁻¹·h⁻¹. The addition of NH₄⁺ strongly stimulated dark C fixation, leading to an assimilation rate of 4.0 fmol·cell⁻¹·h⁻¹, corresponding to a molar C/N uptake ratio of 0.33. Biochemical fractionation of organic ¹⁴C showed no significant ¹⁴C fixation into amino acids during N depletion, but during the first 1–2 h of NH₄⁺ assimilation, amino acids were rapidly radiolabeled, accounting for virtually all net ¹⁴C fixation. These results indicate that anaplerotic β-carboxylation is activated during NH₄⁺ assimilation to provide C₄ intermediates for amino acid biosynthesis. The level of cellular β-1,3-d-glucan was constant (16.5 pg·cell⁻¹) during N depletion, but NH₄⁺ assimilation activated a mobilization of 28% of the reserve glucan within 3 h. The results indicate that β-1,3-glucan in diatoms is the ultimate substrate for β-carboxylation, providing precursors for amino acid biosynthesis in addition to energy from respiration.