杜仲含胶细胞的形态学研究

通过变性处理、整体透明及离析等方法的综合运用,可见杜仲体内含胶细胞是一种细长、两端膨大的单细胞,含胶细胞的分枝比较常见,大多为二叉状分枝,罕见三叉状分枝。整体透明后可见含胶细胞在叶片和果皮中的分布状况,同时对含胶细胞的形态学指标进行了测量。     

杜仲含胶细胞的形态学研究

通过变性处理、整体透明及离析等方法的综合运用,可见杜仲体内含胶细胞是一种细长、两端膨大的单细胞,含胶细胞的分枝比较常见,大多为二叉状分枝,罕见三叉状分枝。整体透明后可见含胶细胞在叶片和果皮中的分布状况,同时对含胶细胞的形态学指标进行了测量。     

杜仲含胶细胞形态特征的研究

利用离析、石蜡制片以及电镜扫描等方法对杜仲含胶细胞的形态特征进行研究,结果表明,大多数的含胶细胞是一种细长的、两端略膨大的,丝状的分泌单细胞、少数含胶细胞在表面形成突起,并能进一步伸长,形有盲端或分枝。     

内耳整块染色石蜡包埋制片法

内耳制片常用的是火棉胶——石蜡双重包埋H-E片染法。此法制片步骤较多,不易掌握。我采用Bouin氏固定液固定,H-E整块染色、石蜡包埋法制片,操作简便,易于成功,内耳的基本结构(前庭膜、盖膜、毛细胞都完好无损,如取材适当,可在同一切片同时显示壶腹嵴。染色液的配制: 1.苏木精染液的配制: 苏木精 25毫克硫酸铝钾 1.25克碘酸钠5毫克蒸馏水 75毫升由于以上药品称量很小,故需称的较准确。配出来的液体若呈现混浊,则是因为以上药品(主要是碘酸钠)称得不准造成的,这种混浊染色液不能用。 2.复制伊红染色液的配制: 将伊红(Y或B均可)0.5克溶于3毫升蒸馏水中,溶解后将冰醋酸—滴—滴加于其中,边滴边搅动,     

一种用于染色体观察的改良绒毛细胞直接制备法

为弥补羊水检查时间过晚之不足,1984年 Simoni利用绒毛标本直接制备法观察染色体获 得成功,此后,即日益为人们所注目。我们改良 了绒毛细胞直接制备方法,以胶原酶代替乙酸 处理,对绒毛细胞直接制备法（简称乙酸法）和 改良法（简称胶原酶法）进行了比较。大致过程 如下： 取妊娠6-7周人流绒毛组织50mg左 右,严格挑选后,生理盐水洗净,移人含最终浓 度0.5,ug/ ml秋水仙素的RPMI 1640培养液中 孵育1小时（pH7.2, 370C),然后分成两份。一 份按乙酸处理法进行制片：(1)去除培养液,加 3m11.5外拘椽酸钠溶液低渗15分钟;(2）加人 数滴3:1的甲醇：冰乙酸预固定10分钟;(3）吸 弃固定液,重复固定巧分钟;(4)吸弃固定液, 加入1m160并乙酸水溶液,处理2分钟,即追加 纯甲醇2ml; (5)吸取细胞悬液于离心管内离心 (1500-1800rpm); (6）冰水滴片,风干,Giemsa 染色。另一份按改良的胶原酶法制备染色体,大 致如下：(1)弃培养液加人15ng/ml胶原酶4ml, 孵育15-20分钟（370C); (2）加人4m1生理盐 水,离心（1000rpm),分钟,弃上清液,经0.75% 氯化钾4 ml低渗20分钟（370C),用甲醇冰醋 酸固定液lml预固定后,依上法离心,弃上清 液;(3）甲醇冰醋酸（3:1)重复固定15分钟,混 匀后自然沉降,吸上层细胞悬液离心,如此重复 二次后,再固定15分钟,气干法制片。28例实 验结果见表1,无论是可数分裂相,还是完整分 裂相出现率,胶原酶法均比乙酸法为高,二者间 有显著差异。     

几种食物的试验方法

1淀粉的试验──碘液试验1．1步骤（l）用一试管盛小量淀粉加水成一稀溶液。（2）加数滴碘液（将碘溶于碘化钾液而成）人淀粉溶液。（3）摇动试管使液体混和。1．2结果混合液变成蓝黑色。若一种未知成分的食物与碘液作用,而产生相同结果,则可显示当中有淀粉存在。2还原糖的试验2．l费林氏试验（Fehling’stest）费林氏试液（Fehling’ssolution）包括有2种溶液,应用时将2种溶液混和,新鲜费林氏试液有较佳效果。2·1．刃步骤（1）将1～Zml费林氏试液加人葡萄糖溶液中。（2）将溶液加热,观察颜色的变化。2．1．2结果蓝色的混合液首先转…     

HPV16L1—pPIC3.5重组质粒的PEG1000转化法

采用PEGI000转化法将HPV16LI－pPIC3．5重组质粒转化人GSI15酵母菌中，并对阳性菌株进行了筛选，现将研究结果报告如下。1材料与方法是．且质粒及菌株HPV16LI－pPIC3．5重组质料：哈医大微生物学教研室建立并保存。GSI15甲醇营养型酵母菌株：由InvtfogenUSA提供。豆．2主要试剂及其配制YEPD培养基（增殖GSll5所用）。MM培养基、MD培养基（筛选阳性转化菌株所用）及RDB琼脂平板（筛选阳性转化株所用）按Pichiapas．tonsEXpressionKit进行配制。LB培养基及碱裂解法质粒小量提取所用试剂，根据《分子克隆实验指南》进行配…     

杜仲雌雄株细胞学,顶芽及叶含胶量的比较

杜仲（ＥｕｃｏｍｍｉａｕｌｍｏｉｄｅｓＯｌｉｖ．）为严格的雌雄异株植物,其雌雄株的比例近似于１：１,说明其性别可能由性染色体决定。但在形态上看不到特异的性染色体,雄株花粉母细胞整个减数分裂过程中,同源染色体的配对和分离是正常的。偶尔可发现个别细胞有染色体桥和环状或链状四价体。从１９９３年和１９９４年的１２月到翌年４月芽完全展开前对顶芽的测量说明,雄株顶芽的长度和最大直径都明显大于雌株的（Ｐ＜０．０１）,而整个生长季节中雌株叶子的杜仲胶含量却明显高于雄株的（Ｐ＜０．０１）。不管雄株还是雌株,其叶的含胶量都随季节变化和叶子的长大而降低。实践证明可用芽的大小鉴别杜仲幼株的性别。     

去氧核醣核酸,多醣类,蛋白质的三色染色

甲)材料及固定:哺乳类、两栖组织,包括甲状腺、肾、小肠、胃、睾丸;昆虫的精巢,肌组织;及数种植物组知,固定于 Carnoy 氏液,福尔马林液,Helly 氏液,或 Smith 氏液皆可。乙)试剂试剂 T:天青 A-schiff 液——溶0.5克天青 A(azureA)于100毫升漂白液内(见下)可保持数周,用前加100%偏亚硫酸氢钾(K-me(?)abisulfite)数滴。试剂Ⅱ:漂白液——1N盐酸5毫升;10%偏亚硫酸氢钾或钠5毫升;蒸馏水90毫升;新鲜制备。试剂Ⅲ:高碘酸液(periodic acid solu)——高碘酸0.8克;蒸馏水90毫升;0.2M醋酸钠10毫升;新鲜配制。试剂Ⅳ:硷性复红 schiff 液——根据 Stowell 氏法(1945)配制,溶液置冰箱内可保持数月。     

植物染色体SSG分带方法与带型

植物染色体Giemsa C一带技术,目前广泛 使用BSG法（Barium hydroxide-Saline-Giemsa). 但是,此法用Ba(OH),进行变性处理,容易发 生制片污染t5],因此我们改用NaHC03代替 Ba(OH)：进行变性处理,首先在蚕豆上分带成 功,并取名为SSG法（Sodium b carbonate-Saline- Giemsa )。此后又应用本方法对大葱、韭葱进行 了分带试验,效果也良好。现报告如下。     

分子生物学技术讲座（三）——真核细胞mRNA的提取,纯化,分析及cDNA文库的构建

哺乳动物平均每个细胞含有10-5μgRNA,理论上认为每克细胞可分离出5～10mgRNA。其中rRNA为80％～85％,tRNA占10％～16％,而mRNA仅占1％～5％,并且rnRNA分子种类繁多,分子量大小不均一,但绝大多数mRNA分子均在3’端存在ZO～250个多聚腺着酸P0ly（A）,所以利用其此特性,用寡聚（dT）亲和层析柱,很容易从总的RNA中纯化mR－NA分子。mRNA的分析通常采用甲醛变性胶电泳法和其它变性胶电泳法进行,或进一步用Northern印迹法和放射性探针杂交反应进行分析。N0rthern印迹法是指将RNA变性电泳后,转移至固相支持物上的过程。…     

怎样应用甘油銅新試剂來演示唾液对淀粉的作用

甘油铜试剂是目前一种比较新的醛类及还原糖试剂。在讲人体解剖生理学消化器官的消化作用一节时,如有需要演示唾液对淀粉的消化作用,我们建议使用甘油铜试剂来代替过去常用的斐林溶液(Fehlings solution)和本立狄溶液(Benedicts solution),因为甘油铜试剂不仅在配制时简便省料,而且在使用上也非常方便和满意。现特介绍于下,提供同志们参考。配制方法甘油铜是氢氧化铜溶解于甘油中而生成的可溶性络化合物。配制时可先把氢氧化钠30克溶解200c.c.水中制成冷溶液;另把结晶硫酸铜15克溶解于200c.c.水中制成冷溶液,然后把两种溶液在500c.c.     

一种贴壁培养细胞制片方法

细胞形态分析以及免疫组织化学技术中一个必不可少的操作过程,就是细胞制片,即把细胞附着于透明的支撑物上（比如：玻璃、塑料等）,大部分的细胞制片是对离体组织细胞进行固定切片处理．而对于科研、教学等基础实验室的少量培养细胞制片．则需要有更合适的技术。     

渗透胁迫诱导的小麦叶片细胞程序性死亡

用20%PEG6000（-0.63MPa）溶液对小麦（Triticumaestivum）根系进行渗透胁迫,在DNA琼脂糖凝胶电泳图谱上观察到明显的梯状DNA条带,表明PEG处理诱发了DNA核小体间的断裂,从而表现出典型的细胞程序性死亡的生化特征;末端脱氧核糖核酸转移酶介导的3′-OH末端标记法（terminal deoxynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end     

一种呈多色反应的徒手切片染色剂

徒手切片法是指用刀片将新鲜的或固定的材料（一般为植物材料)切成薄片的方法,因其方法简便、制片迅速并能及时观察植物组织生活状态下的结构而成为组织化学、生物鉴定、教学实验及科研选材的常用方法。常用的徒手切片染色剂如质量分数1％番红水溶液、质量分数1％苯胺蓝溶液及0．5％固绿溶液只     

小金海棠果实表皮制片方法的比较研究

为了简便而快速制作适用于光学显微镜观测的苹果属植物果实表皮标本,采用7种方法分别对小金海棠果实表皮进行整体制片后于光学显微镜下观察其形态特征,比较制片效果。结果表明:用离析刮片法、指甲油印迹法、刮片法和煮沸剥离刮片法制备的标本在光学显微镜下均呈现出清晰结构,其中煮沸剥离刮片法的制片效果最佳。因此,煮沸剥离刮片法最适用于苹果属植物果实表皮整体制片,该方法操作简便且效率高。     

分离和鉴定沙冬青抗冻蛋白质

采用经典的蛋白质色谱技术,纯化沙冬青（ Ａｍｍｏｐｉｐｔａｎｔｈｕｓ ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｓ （Ｍａｘｉｍ ．） Ｃｈｅｎｇｆ．） 叶片中的抗冻蛋白质,然后经非变性ＰＡＧＥ胶分离、回收,得到具有热滞活性的两条带：Ｂ１ 和Ｂ３。前者在８ ｇ／Ｌ时热滞活性为０．４６ ℃,并在ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ胶上分离出两条带（ 分子量为６７ ｋＤ和２１ ｋＤ） ;后者在１０ ｇ／Ｌ时热滞活性为０．４５ ℃,在ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ胶上只有１ 条带（ 分子量为３９．８ ｋＤ）。Ｂ１ 和Ｂ３ 均不能被Ｓｈｉｆｆ 试剂染色,也不具有典型糖蛋白的紫外吸收特征,因而可能不是糖蛋白     

普通小麦与鸭茅摩擦禾的远缘杂交：Ⅲ.受精和早期胚的发育

用石蜡制片法和整体解剖法，对小麦品种Ｆｕｋｕｈｏ经鸭茅状摩擦禾花粉粉后不同时间固定的子房样品进行了细胞胚胎学观察。结果表明，观察的１６８个授粉后１２０小时以内的小麦了房中有３２．１％、０．６％和２６．２％分别发生了卵细胞单受精、极核单受精和卵卵细胞、极核双受精现象。     

活性氧簇在白假丝酵母菌诱导RAW264．7细胞自噬中的作用

目的探究活性氧簇（ROS）是否参与白假丝酵母菌诱导RAW264．7细胞的自噬活化并明确其来源。方法RAW264．7细胞培养至对数生长期并分别以5种ROS生成系统抑制剂处理,白假丝酵母菌刺激细胞后采用二氯荧光素双醋酸盐（DCFH-DA）显示ROS水平,免疫印迹法检测LC3Ⅱ蛋白的表达量,免疫荧光技术观察LC3的表达与定位。结果白假丝酵母菌刺激后RAW264．7细胞的ROS与LC3Ⅱ表达水平显著升高,同时LC3呈斑点状聚集并与白假丝酵母菌共定位;NADPH氧化酶（NOX）抑制剂氯化二亚苯基碘翁（DPI）处理后ROS与LC3Ⅱ表达量明显降低,并且LC3在细胞内弥散分布;其他药物处理后ROS水平无显著变化。结论在白假丝酵母菌作用下NOX来源的ROS介导了RAW264．7细胞的自噬活化。     

棉花胚胎发育过程的整体制片法

用整体解剖制片的方法观察棉花胚胎的发 育过程,比通常采用的石蜡制片法具有以下的 优点：制片的全过程比较简易,观察可以比较及 时毒特别是能够保持胚及胚乳的完整性。如双受 精过程在石蜡制片中很难在同一切面上看到, 卵器和极核往往分散在不同的切面上。而在整 体解剖制片中,则可以在一个视野中看到胚囊 的全貌（图1, a, c)。在胚胎发育的早期还可以 对胚乳游离核准确地进行计算,游离核的分裂 及胚乳细胞的形成过程看得比较清楚（图1,b). 此外,由于这种方法不需要切片机等设备,也便 于基层科研单位进行这方面的研究。现将制片 过程及注意事项介绍如下：