用150×2.6毫米柱分离23种氨基酸的方法

<正> 目前就氨基酸分析来说,日立835—50型氨基酸自动分析仪是国内分布较广的一种进口仪器,日立835—50型氨基酸自动分析仪说明书中提供的分析柱有二种:一种用于蛋白质水解物分析;一种用于生理体液分析。在检测一些食品、饲料、中药材和发酵液产     

二四——二硝基氯苯柱前衍生化HPLC法在测定3—AA注射液含量的应用

主要论述了使用一种流动相,二四——二硝基氯苯柱前衍生化ＨＰＬＣ法测定国内药厂生产的３—ＡＡ注射液含量,达到了与专用氨基酸分析仪同等检测效果     

日立835型氨基酸分析仪高分辨率分析人血浆氨基酸谱26例报告

报告26例人血浆以日立835——10型高速氨基酸分析仪高分辨率分析法(2.6×250mm规格离子交换柱)测定氨基酸值结果发现:1.BCAA/AAA(支链氨基酸/芳香族氨基酸)比值明显低于标准分析法(2.6×150mm规格离子交换柱);2.酪氨酸检测值明显高于标准分析法。对其原因将作进一步的探讨。     

软枣猕猴桃氨基酸分析

本文应用日立—835型氨基酸自动分析仪测定了软枣猕猴桃不同部位的氨基酸含量。结果表明:软枣猕猴桃根、叶中均含有16种以上氨基酸,其中有8种人体必需氨基酸;果实中含有14种氨基酸,其中有6种必需氨基酸,精氯酸含量最高,其次为赖氨酸、亮氨酸、丙氨酸和天门冬氨酸。     

82分钟内旧树脂使20种氨基酸获高分辨分离

<正> 日立835型氨基酸分析仪,采用2.6mmID×150mm 分析柱(即标准分析柱)作蛋白质水解液分析,缺点有:1)苏氨酸—丝氨酸、甘氨酸—丙氨酸的分辨率往往达不到规定的70%和80%的指标,特别是在树脂柱用久了的时候。门冬氨酸—苏氨酸、胱氨酸—缬氨酸的分辨率也容易敏感地随之降低。2)标准分析柱需要用高纯度的分析用水,对样品因素的耐受能力也比较差,柱子的使用期限不长。     

一种适于蛋白质测序仪分析的蛋白质样品预处理方法

氨基酸序列自动分析仪大大提高了氨基酸序列分析的速度,但碰到的问题是供分析用的蛋白质样品的纯度不易掌握,常常半途中断分析过程。以ABI 470A/900A机为例,每设置10～15个氨基酸的分析,在许多情况下只分析到一半或多一些即被中断。该机为ODS-C18反相柱型,经化学处理的逐个氨基酸按各自在该柱的保留时间被仪器区分开并记录下来。我们选用此机型来分析工程菌产霍乱毒素B亚单位(rBS)。由于我们的rBS是新型口服霍乱疫苗的成分之一,国家药政部门要求分析N端20个氨基酸     

日立835-50型氨基酸自动分析仪蛋白质水解液分析新方法

本文报道了在日立835—50型氨基酸自动分析仪上,采用4×150mm 柱代替2.6×150mm 柱进行蛋白质水解液分析的方法。本法与仪器说明书提供的标准分析相比,具有分离率高,费用低等优点。各氨基酸峰位复现性和峰面积复现性均优于仪器的规定指标。日立835—50型氨基酸自动分析仪是目前应用广泛,性能较好的氨基酸分析装置。但仪器说明书提供的标准分析(蛋白质水解液分析)法分离率较低,若采用高分离平方法进行分析则所需时间又太长。为了能适应某些工作的要求,需研究分析速度快又具有较高分离率的方法。参照日立公司有关技术资料,我们探讨了采用4×150mm 柱代替2.6×150mm 柱,分析周期为62分钟的蛋白质水解液分析方法,现简要报道如下。     

用日立835-50型氨基酸分析仪分析还原糖

氨基酸分析仪在结构上与糖分析仪相似,本文仅讨论利用日立835-50型氨基酸分析仪分析还原糖。一、原理在硼酸缓冲液洗脱条件下,糖的混合物能够在强碱性阴离子交换树脂柱上得到分离。经分离的单一糖组分在98℃温度下,与2,2′-双金鸡纳酸盐试剂作用,生成蓝紫色的络合物。该络合物在波长562nm处有最大吸收,因此可用氨基酸分析仪检测器的570nm通道进行检出。检出信号经数据处理机处理,电传打字机打印出色谱图和分析实验报告。     

日立835—50型氨基酸自动分析仪标准分析程序的改进

<正> 日立835—50型氨基酸自动分析仪标准分析法(柱2.6mmID×150mm),目前尚存在二点不足之处,一是当检测样品的含量为30NHOL/50μ1或更高时,氨基酸和茚三酮显色剂作用后,生成大量的双二酮茚亚胺(DYDA)兰紫色复合物,或当样     

乌梢蛇氨基酸图谱研究

目的建立乌梢蛇的氨基酸指纹图谱。方法采用L-8800型全自动氨基酸分析仪提取乌梢蛇水解氨基酸。色谱条件:分离柱直径4.6mm×40mm,离子交换树脂型,缓冲液流速0.4ml/min,茚三酮流速0.3ml/min;缓冲液泵压力茚三酮泵压力8~11.5Pa;柱温56℃。结果建立16个共有特征峰的水解氨基酸指纹图谱。结论本研究有助于提高乌梢蛇药材的质量控制水平。     

贝克曼6300氨基酸分析仪17种水解氨基酸分析程序的改进与应用

主要介绍了使用改进后的17种水解氨基酸分析程序,在贝克曼6300氨基酸分析仪上,使用2u12cm长NA型氨基酸分离柱,可将17种水解氨基酸在45min内完全分离开来,达到了原贝克曼6300氨基酸分析仪83min分析程序的分离效果     

用日立835-50型氨基酸分析仪分析还原糖

氨基酸分析仪在结构上与糖分析仪相似,本文仅讨论利用日立835-50型氨基酸分析仪分析还原糖。一、原理在硼酸缓冲液洗脱条件下,糖的混合物能够在强碱性阴离子交换树脂柱上得到分离。经分离的单一糖组分在98℃温度下,与2,2′-双金鸡纳酸盐试剂作用,生成蓝紫色的络合物。该络合物在波长562nm处有最大吸收,因此可用氨基酸分析仪检测器的570nm通道进行检出。检出信号经数据处理机处理,电传打字机打印出色谱图和分析实验报告。二、材料与试剂阴离子交换树脂Aminex A-28(美国Bio-RAD实验室);2,2′-双金鸡纳酸钠(美国Sigma     

EGFP-LC3稳定细胞系的建立及对Aβ自噬效应的研究

该文建立了稳定表达EGFP-LC3的HEK293细胞系,以10μmol/L的Aβ肽及其不同疏水性氨基酸含量的截短形式处理细胞24 h,计数LC3的荧光斑点数;Western blot检测LC3B表达量的变化;MTT检测特定Aβ诱导细胞自噬后对细胞活性的差异;用透射电镜确认自噬体的细胞超微结构。结果显示,G418(700μg/m L)筛选6周后,建立了稳定表达EGFP-LC3的HEK293细胞系;Aβ25-35、Aβ40和Aβ42诱导细胞内LC3荧光斑点的效果较明显;Western blot结果显示LC3B的酯化,即LC3BI向LC3BII转变;MTT检测发现,与Aβ40相比,Aβ42处理后伴随自噬的细胞毒性更强;电镜可以见到Aβ诱导的自噬小体。提示,Aβ肽及其截短的疏水性片段均可诱导自噬,且诱导自噬的效果与疏水性氨基酸含量无关;同时,Aβ42细胞损伤强于Aβ40。该研究为进一步探讨AD自噬机制提供了实验基础。     

氨基酸的离子交换色谱(理论原理和实践)

<正> 第二章非自动分析仪中氨基酸离子交换色谱在第一章我们叙述了自动仪器中柱操作及有关参数,在这一章我们将叙述非自动仪器即手动操纵装置中色谱柱操作及有关规定。虽然非自动仪器也象自动仪器(氨基酸分析仪)一样,用聚苯乙烯磺酸阳离子交换剂填充柱子,但是色谱柱操作和柱流出液的检测,以及研究样品中成分的计算都用手工操作,因此有别于自动仪器,而具有其独特之处。     

HPLC在氨基酸注射液中乙酰—酪氨酸含量测定方法上的应用

<正> 含有乙酰—酪氨酸的氨基酸注射液由于乙酰—酪氨酸的存在,在氨基酸分析仪上无法一次将全部组分同时检测出来,而需将样品进行水解反应,将乙酰酪转化成能在氨基酸分析仪上出峰的酪氨酸,这样单独测一个酪氨酸组分在氨基酸分析仪上需1小时方能完成。本文采用HPLC法在常温下只需5分     

20例健康成人血清中游离氨基酸的分析比较

使用Beckman 119CL 氨基酸分析仪生理柱方法对20例健康成人血清中游离氨基酸作了分析测定:所得结果与Dickinson 等人实验结果进行了比较,从而确定了健康成人血清中游离氨基酸的正常参考值,这些数据可对于先天性氨基酸代谢紊乱、慢性肝炎、中枢神经系统等疾病治疗和临床诊断提供参考。     

茶叶中茶氨酸及其它游离氨基酸的定量测定

本文报道了在日立835—50型氨基酸分析仪上,采用2.6×250mm 分离柱和标准分析用Na~+盐缓中液,自设120分钟分析程序,一次完成茶叶中茶氨酸及其它游离氨基酸的测定。该方法重现性好,分辨率高,茶氨酸(约占60%)并相邻氨基酸的分辨率均在95%以上,取得令人满意的分析结果。茶叶中游离氨基酸的构成和含量是决定茶叶品质优劣的重要因素之一,其中茶氨酸又是影响较大的重要非蛋白氨基酸。随着氨基酸分析仪的广泛使用,有关分析方法也在不断改进和发展。一般来说,植物中的游离氨基酸需采用生体液分析法进行测定,但生体分析时间长达240分钟,Li~+盐缓冲液价格昂贵,操作条件也较复杂,且不易与标准分析法简便地转换,使应用受到一定限制。若采用2.6×150mm 分离柱来分析,则由于茶氨酸的保留时间与较难分离的酸性氨基酸的保留时间十分接近,含量又高。对其出峰附近的其它氨基酸峰复盖严重。分离困难,不易达到理想的分离效果。为了既便分析操作,降低费用,又能满足定量分析的要求,我们对本文所述的方法进行了初步研究。现扼要介绍如下。     

烫伤大鼠早期口服谷氨酰胺对血浆氨基酸代谢的影响

研究烫伤早期口服谷氨酰胺 (GLN)后GLN及其相关氨基酸的代谢变化。以Wistar大鼠为烫伤模型 ,烫伤后早期口服GLN ,并以 83 5-50型氨基酸自动分析仪的生理体液法测定血浆游离氨基酸。结果烫伤后饲标准饲料(C)组血浆GLN在烫伤后 2d和 5d降低 ,与GLN代谢相关的丙氨酸和氨无显著性变化 ;GLN饲料 (G)组各时相点GLN均增加 ,1 0h和 8d增加显著 ,与GLN代谢相关的丙氨酸和血氨增加显著 ;GLN +精氨酸 (G +A)组GLN在 2d降低 ,血氨升高显著。与C组比 ,G和G +A组血浆总氨基酸、支琏氨基酸、GLN、丙氨酸、r-氨基丁酸和氨均较C组高。提示 ,烫伤后早期口服GLN能提高血GLN和与之代谢相关的氨基酸浓度。     

福建产太子参氨基酸成分分析

采用日立L8800全自动高速氨基酸分析仪,从福建柘荣产太子参中检出18种氨基酸,全氨基酸总质量分数为77.7g.kg-1,其中精氨酸(Arg)高达20.8 g.kg-1;此外,还发现太子参中含有丰富的γ-氨基丁酸,质量分数高达16.5 g.kg-1。采用RT-HPLC(柱前衍生-反相液相色谱分离)检测质量分数为20.5 mg.kg-1,验证了HPCEC(离子交换色谱分离-柱后衍生法)氨基酸自动分析结果。     

DNFB柱前衍生化RP-HPLC测定大黄种子氨基酸的含量

采用柱前衍生RP-HPLC法测定大黄种子中氨基酸的含量。6 mol/L盐酸水解得到氨基酸,以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为柱前衍生化试剂,梯度洗脱。色谱柱为Gemimi-NX C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A相为0.1 M乙酸钠水溶液,B相为乙腈-水(1∶1),柱温37℃,检测波长360 nm。结果表明,三种正品大黄种子中均含有17种氨基酸,总量在11.30%~19.26%。该方法灵敏、准确,有良好的重复性和稳定性。