烟草受精前后胚囊中钙调素的免疫细胞化学定位

应用辣根过氧化物酶标记抗体的光镜免疫细胞化学技术和胶体金标记抗体的电镜免疫细胞化学技术定位烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍｖａｒ．ｍａｃｒｏｐｈｙｌａ）胚囊成员细胞中的钙调素,比较了不同类型细胞之间钙调素的分布特点,并探讨了受精前后钙调素在胚囊中分布的变化规律。     

山东师范大学生命科学学院动物生理研究室简介

本研究室主要运用免疫细胞化学技术、电生理技术、大鼠脑立体定位技术、脑机接口等技术进行应激状态下胃肠机能的中枢调控机制(参与调控的中枢核团、神经元放电、神经通路、神经递质及受体等)、     

细胞中流行性出血热(EHF)病毒抗原部分弥散及其原位检测

用流行性出血热病人尸检及活检材料。以不同固定液、不同免疫细胞化学方法等对细胞中的EHFV抗原进行了检测。用目前我国自产的六种单克隆抗体(McAbs)单用或混用,只能定位出固定及时,近期保存标本中的抗原。在长期保存的尸检标本上及延期固定的活检标本上,光镜及电镜下均可见抗原有明确的弥散现象。用多克隆抗体(PcAb)配合高级敏感的免疫细胞化学方法可显示保存近三十年的陈旧尸检蜡块切片中残存的部分抗原。不同的固定剂、固定时间、免疫细胞化学方法、清除内源酶的时间及病期都对定位EHFV抗原有一定影响。     

热点名词释疑:组织化学和细胞死亡的几个概念

1．免疫组织化学和免疫细胞化学：这两个词均起源于美国人Coons等1941年创立的免疫荧光技术[1],是利用抗原抗体反应原理在组织和细胞原位检测特定抗原定位和分布的组织化学技术,结合图象分析也可对所检测的物质做半定量分析。经典意义上两者的区别在于,免疫组织化学是指在光镜水平的检测,而免疫细胞化学是指在电镜水平的检测也即免疫电镜技术。在一些欧美的杂志中,现在仍可见到这种区别性的用法。但目前许多人对两者已混用．在大部分场合已没有什么差别。免疫组织化学和免疫细胞化学技术已广泛应用于生物医学研究及临床诊断。2．原位…     

人外周血淋巴细胞酶超微结构定位与活性研究

应用电镜酶细胞化学方法研究了人外周血淋巴细胞ＡＴＰ酶、Ｇ６Ｐ酶、５′ＮＤ酶的超微结构定位与活性。结果：１ＡＴＰ酶主要定位在淋巴细胞膜下方,在内质网及线粒体等膜相结构也见到此酶的分布。Ｇ６Ｐ酶主要定位在内质网、线粒体等膜相结构。５′ＮＤ酶主要定位在细胞膜外表面。三种酶定位准确,颗粒清晰。２此结果与我们对人体淋巴结淋巴细胞酶超微结构定位结果相同。结果提示应用电镜酶细胞化学方法可以检测人外周血淋巴细胞酶活性变化,对于判定免疫细胞功能状态,具有一定意义。     

LRIG2蛋白在人催乳素腺瘤细胞中的表达研究

目的:明确LRIG2蛋白在人催乳素腺瘤细胞中的表达与定位。方法:采用免疫细胞化学方法检测LRIG2蛋白在人催乳素腺瘤原代细胞中表达情况,人胶质瘤细胞系U87细胞设为阳性对照。结果:LRIG2蛋白在原代培养的人催乳素腺瘤细胞中高表达(86.6±2.15)%,与其在U87细胞中表达率无明显统计学差异;同时免疫细胞化学结果提示LRIG2蛋白在人催乳素腺瘤细胞中定位于胞浆,也与其在U87细胞中表达一致。结论:LRIG2蛋白在人催乳素腺瘤细胞中高表达,定位于胞浆,提示其可能在垂体腺瘤发生、发展过程中发挥作用,为进一步研究垂体腺瘤发生机制奠定基础。     

低分子量聚乙二醇在电子显微镜术中的应用

Sandstrm为研究磷酸酶的电镜组织化学,使用聚乙二醇1000(熔点32—38℃)包埋鸡胚肝脏和中枢神经系统,得到了磷酸酶定位和细胞细节保存良好的照片。Mazurkiewicz应用聚乙二醇1000包埋鼠脑垂体,显示了酸性和碱性磷酸酶活力,认为这一技术能用于免疫细胞化学     

植物激素的免疫细胞化学定位

本文介绍了植物激素免疫细胞化学定位研究中常用抗原与抗体的制备、激素小分子在植物细胞内的原位固定及其在激素生理研究中的应用。     

植物酶的组织和细胞化学定位研究方法

酶是参与植物体内生化反应的特殊蛋白质。在保持活组织和细胞结构完整性的条件下,利用组织化学、细胞化学、免疫学和显微检测等技术研究酶的即位定位,是了解酶在组织、细胞和亚细胞中的分布、活性动态与定量及酶功能等的重要途径。对植物体中酶定位的组织化学和细胞化学方法的概念、原理与研究进展进行了综述,并根据国际酶化学分类编号顺序,分别介绍了25种酶的组织化学染色定位所用的反应介质和染色方法及46种酶的细胞化学定位方法的参考文献。     

人5～6月胎儿眼球壁组织中纤维粘连蛋白的免疫细胞化学

本文对4例(8眼)5～6月人胎儿眼球壁组织中纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)进行了光镜和电镜免疫细胞化学定位观察。结果显示:Descemet膜及虹膜、瞳孔膜、脉络膜和视网膜的血管壁为FN强阳性反应;小梁组织和Schlemm管为FN阴性反应。视网膜血管电镜免疫细胞化学显示:FN阳性反应产物主要分布于血管周细胞的外侧,而与内皮细胞相邻的内侧很少,提示:血管的周细胞可能是FN合成和分泌的主要细胞。     

新鲜分离大鼠脊神经节细胞分类的免疫细胞化学研究

本文对应用酶及机械分离方法处理得到的新鲜分离ＤＲＧ细胞的大小分布进行了统计分析,并且对单个细胞经免疫细胞化学处理前后的大小进行了比较。实验证明ＤＲＧ细胞经免疫细胞化学处理后体积减小１７．３８％、据此我们提出对于新鲜分离ＤＲＧ细胞,其形态学分类标准应在原标准的基础上放宽５μｍ,即大、中、小细胞的直径分别修改为＞４５μｍ,４５—２５μｍ和＜２５μｍ。本实验并对以往的单个细胞免疫细胞化学处理中的漂洗过程作了改进,设计出一种专门的单细胞漂洗方法,提高了单个细胞免疫细胞化学处理的稳定性和成功率。     

皱瘤海鞘神经腺上皮细胞活动周期与性腺发育关系的研究

对皱瘤海鞘神经腺上皮细胞活动周期进行了组织学、超微结构和免疫细胞化学的研究。结果表明皱瘤海鞘神经腺细胞活动周期与性腺发育相关。在性发育早期,神经腺各小叶上皮细胞基本上属胞质致密形式。性腺Ⅱ－Ⅲ期,有些小叶腺细胞出现空泡化,空泡化小叶占统计总数的２３％,性腺Ⅳ,Ⅴ期,增至３５－３９％和６３％。产卵后大多数腺小叶为空泡形式,或网状形式。超微结构研究进一步证实组织学观察。免疫细胞化学定位首次证实了神经腺     

生物素——亲和素系统及其应用

<正>一、概述 当数十前首次报道使用荧光素标记的抗体进行免疫细胞化学染色时,人们曾认为它是一个灵敏的方法。在产生抗体的细胞中观察到免疫球蛋白的存在标志着细胞免疫学的开始,而在肾基底膜中获得抗原——抗体复合物的定位则成为研究自身免疫性疾病的一个里程牌。     

植物环核苷酸门控离子通道基因的功能及其调控

环核苷酸(cAMP/cGMP)是生命体重要的信号分子,环核苷酸门控离子通道(CNGC)是环核苷酸主要的受体之一,目前已在植物中克隆并鉴定了多个环核苷酸门控离子通道基因,它们参与调控植物的生长、发育以及抗病等反应.这些通道既可通过一价阳离子,也可通过二价阳离子,其活性受Ca2+/Calmodulin调控.本文概括了近年来植物环核苷酸门控离子通道(CNGC)基因的克隆、植物CNGC对离子的选择特性、CNGC的生物学功能与调控等方面的研究进展.     

磷酸化TrkA受体在与其核转位相关的运输膜泡内的定位

大量的跨膜受体能靶向并定位于细胞核内, 但细胞表面的受体是如何转运到细胞核内尚不清楚. 报道了磷酸化的TrkA在人脑胶质瘤细胞株U251中的定位. 利用免疫细胞化学和免疫荧光技术, 发现磷酸化的TrkA主要定位于一系列的运输泡和细胞核内, 这些膜泡包括: 细胞膜侧的环状泡、核周的大核心泡和小核心泡; 同时还观察到大核心泡出芽成小核心泡, 以及小核心泡与核膜相互作用. 基于上述结果认为这些膜泡可能与跨膜受体TrkA转位到核的通路相关.     

GnRH及其受体在性成熟前后鲇、黄颡鱼脑、垂体和卵巢中的免疫细胞化学定位

用链霉亲和素 -生物素化过氧化物酶复合物 (StreptAvidinBiotin peroxidaseComplex ,SABC)免疫细胞化学方法 ,使用促性腺激素释放激素 (Gonadotropin releasinghormone ,GnRH)以及促性腺激素释放激素受体 (GnRHR) 2种抗血清对性成熟前后的黄颡鱼 (Pelteobagrusfulvidraco)和鲇鱼 (Silurusasotus)的脑、垂体、卵巢中的免疫活性内分泌细胞进行了免疫细胞化学定位。结果表明GnRH和GnRHR免疫活性在两种鱼的各脑区、垂体、卵巢中均有分布 ;两种鱼在性成熟时它们的下丘脑、垂体和卵巢中的GnRH和GnRHR免疫反应细胞数目和免疫反应强度明显高于性成熟前。本文讨论了GnRH、GnRHR直接或间接参与黄颡鱼和鲇鱼性腺发育成熟调节的可能性及形态学证据。可为下丘脑 垂体 性腺轴、神经 内分泌、GnRH功能的多样性等研究领域提供新的形态学依据。     

PINK1与α-synuclein相互作用结构域鉴定

目的: 确定PINK1与α-synuclein相互作用的结构域。方法: 将PINK1不同结构域质粒(pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1^WT, pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1(G309D),pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1(ΔN35),pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1(ΔC145),pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1(156~509), pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1(Δ156~581), pcDNA3.1-3xFlag-vector)分别和pCMV-Myc-α-synuclein质粒共转染人胚肾HEK293T细胞,通过免疫共沉淀(Co-IP)技术验证PINK1与α-synuclein相互作用的结构域;同时进行免疫细胞化学染色,利用激光扫描共聚焦显微镜观察两种蛋白的共定位关系。结果: Co-IP实验结果表明PINK1与α-synuclein相互作用的结构域为PINK1的激酶结构域。免疫细胞化学实验也证实α-synuclein只与含激酶结构域的PINK1蛋白在细胞中存在共定位关系。结论: PINK1与α-synuclein相互作用的结构域位于其激酶结构域。     

驱动蛋白在一种新的微管动力中可能的生物学作用

细胞器沿着微管的转运能够用分离出的成份重新建立,从而对这一复杂的运动过程得以进行生物化学的剖析.这一技术途径己导致一个新颖的、普遍存在的、以微管为基础产生动力的蛋白质的提纯,称之为驱动蛋白(Kinesin,源于希腊语"运动").驱动蛋白的体外运动性质和免疫细胞化学定位提示,它可能作为细胞器转运和有丝分裂中微管依赖性运动的原动力而起作用.     

Lowicryl K4M 低温包埋显示甲状腺球蛋白的免疫电镜法

免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体 ,能显示抗原或抗体在细胞微细结构水平的定位 ,已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。目前透射电镜观察的样本制备中 ,为保存良好超微结构的需要一般采用戊二醛、锇酸两种固定液 ;为使超薄切片有一定硬度采用的包埋剂如环氧树脂 6 18、 812需高温聚合 ,这些实验条件均可使多种抗原活性减低或丧失。因此 ,探索既能保持超微结构又能保存抗原性的电镜包埋剂及其应用很有必要。已知ＬｏｗｉｃｒｙｌＫ4Ｍ等低温包埋剂系列可能符合以上要求 ,为此我们进行了有关实验。材料和方法1.材料1 1…     

几种实验技术在犁鼻神经元研究中的应用

重点介绍了犁鼻神经元的研究现状,尤其是犁鼻神经元的特点及其对信息素响应格局的研究,免疫细胞化学、基因敲除法、染色体工程法等先进实验技术的运用,为进一步揭示犁鼻神经元对气味刺激的响应和犁鼻神经元之间的信号转导机制提供了技术支撑。