蓖麻根提取物对HepG2,NCI-H460和SGC-7901细胞增殖及凋亡作用的影响

探讨蓖麻根不同提取物对肝癌HepG2细胞株、肺癌NCI-H460细胞株和胃癌SGC-7901细胞株增殖及其凋亡的影响.采用MTT法检测蓖麻根不同提取物处理48h、72h对HepG2细胞、NCI-H460细胞和SGC-7901细胞增殖的抑制率;Hoechst 33258荧光染料染色法观察HepG2细胞凋亡,流式细胞术检测...     

麦积山野生刺五加多酚与黄酮的超声辅助提取与体外抗氧化活性的研究

以麦积山野生刺五加为原料,研究了其有效成分总多酚和总黄酮的超声波辅助提取工艺及体外抗氧化活性。通过单因素试验和正交试验,确定最佳工艺条件为:超声时间40 min、超声功率600 W、提取温度60°C、料液比1∶35(g∶m L),并对此条件进行三次平行验证实验,得出平均提取量为总多酚25. 21±0. 17 mg GAE/g和总黄酮28. 11±0. 19 mg RE/g;以人工合成VC为对照,进行了体外抗氧化活性的研究,得出提取物质量浓度达到300mg/L时,总抗氧化能力最大;提取物质量浓度达到440. 00 mg/L时,DPPH自由基清除能力最强,清除率为94. 52%±1. 30%;提取物质量浓度达到130. 00 mg/L时,超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力最强,清除率为86. 71%±1. 28%;提取物质量浓度达到100. 00 mg/L时,羟基自由基(·OH)清除能力最强,清除率为94. 23%±1. 53%。整体来看,野生刺五加提取物体外抗氧化能力显著强于人工合成的VC(P 0. 05)。     

石韦提取物抗氧化及抑制亚硝化作用研究

研究石韦不同溶剂提取物的总酚、总黄酮含量和抗氧化及抑制亚硝化活性,并分析其相关性。采用福林酚比色法和硝酸铝络合分光光度法分别测定各提取物中总酚、总黄酮的含量,以DPPH法、ABTS法和普鲁士蓝法分别测定各提取物的自由基清除能力和铁离子还原力,采用盐酸萘乙二胺法和α-萘胺法分别测定石韦各提取物对亚硝酸盐的清除率和对亚硝胺合成的阻断率,采用Pearson法分析总酚、总黄酮含量与抗氧化及抑制亚硝化活性的相关性。结果表明:石韦不同溶剂提取物的总酚和总黄酮含量存在显著性差异,其中正丁醇提取物的总酚、总黄酮含量均最高,分别为29.85±2.15和37.23±2.41 mg/g。各提取物均具有较强的抗氧化和抑制亚硝化活性,以正丁醇提取物的效果最显著,其DPPH自由基清除能力(IC_(50)=44.14±1.21μg/mL)、ABTS自由基清除能力(IC_(50)=97.47±12.10μg/mL)和还原能力(822.08±24.82μmoL Vc/g),以及对亚硝酸盐的清除能力(IC_(50)=7.071±0.231 mg/mL)、对亚硝胺合成的阻断能力(IC_(50)=15.010±1.224 mg/mL)均最强,并显著强于其他提取物(P0.05)。相关性研究显示,石韦各提取物的抗氧化活性和抑制亚硝化活性与其总酚和总黄酮含量呈显著正相关(P0.05),表明总酚类和总黄酮类物质是石韦发挥作用的物质基础。通过对石韦不同提取物的总酚和总黄酮含量的测定、抗氧化和抑制亚硝化作用评价及相关性分析,为石韦的进一步开发利用提供实验数据和参考依据。     

香榧假种皮提取物的体外抗氧化活性研究

测定了香榧假种皮提取物中的总酚含量,并采用DPPH自由基清除法、β-胡萝卜素漂白法、硫代巴比妥酸法等3种方法评价了香榧假种皮提取物的体外抗氧化活性。结果表明:香榧假种皮提取物中总酚含量为(76.67±2.06)mg/g。香榧假种皮提取物具有一定的抗氧化活性,且在一定浓度范围内呈剂量效应关系,但是其抗氧化活性低于BHT和抗坏血酸。DPPH自由基清除法、硫代巴比妥法、β-胡萝卜素漂白法等3种方法测定香榧假种皮提取物体外抗氧化活性的IC50值分别为1.55 mg/m L、2.02 mg/m L、0.58 mg/m L。     

赤芍总苷抗氧化活性及对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的:研究赤芍总苷体外抗氧化活性及对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞增殖的影响.方法:采用DPPH法测定赤芍总苷体外清除DPPH自由基及抗氧化活性,根据清除率曲线,确定EC50值;采用MTT法考察赤芍总苷对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞增殖的影响,确定起效剂量,并考察其量效关系.结果:赤芍总苷对DPPH自由基具有较强清除作用,其对DPPH的清除率的回归方程为y=7.4432x0.6111(r=.9967),EC50值为6.64mg/L;赤芍总苷对HSC-T6的增殖具有明显的抑制作用,给药浓度为1.152mg/mL时,其对HSC-T6细胞增殖的抑制率可达39.240%.结论:赤芍总苷具有较强的抗氧化活性,对肝星状细胞的增殖有一定抑制作用.     

赤芍总苷抗氧化活性及对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的：研究赤芍总苷体外抗氧化活性及对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞增殖的影响。方法：采用DPPH法测定赤芍总苷体外清除DPPH自由基及抗氧化活性,根据清除率曲线,确定EC50值;采用MTT法考察赤芍总苷对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞增殖的影响,确定起效剂量,并考察其量效关系。结果：赤芍总苷对DPPH自由基具有较强清除作用,其对DPPH的清除率的回归方程为y=7.4432x＋0.6111（r=0.9967）,EC50值为6.64 mg/L;赤芍总苷对HSC-T6的增殖具有明显的抑制作用,给药浓度为1.152mg/mL时,其对HSC-T6细胞增殖的抑制率可达39.240%。结论：赤芍总苷具有较强的抗氧化活性,对肝星状细胞的增殖有一定抑制作用。     

三个不同产地香菇多糖的理化性质及生物活性研究

本研究分析了浙江、湖北和新疆香菇多糖的结构、抗氧化及抗肿瘤活性。采用水提醇沉法,制备3个产地香菇多糖,分别利用Sevag法及透析法对其进行初步纯化,获得浙江香菇多糖（ZLP）、新疆香菇多糖（XLP）、湖北香菇多糖（HLP）。进一步通过高效阴离子交换色谱（HPAEC）测定其单糖组成,傅里叶变换红外光谱（FTIR）分析其结构。检测了3个多糖的自由基清除能力和抑制肿瘤细胞增殖能力。结果表明,3个多糖均主要由葡萄糖、半乳糖及甘露糖组成。3个多糖红外光谱的特征吸收峰相似,均含有β糖苷键。HLP、ZLP、XLP均可有效清除1,1-二苯基-2-苦基肼（DPPH）、2,2-联氮基双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（ABTS）和羟基自由基。此外,HLP和XLP对人肝癌细胞（HpG2）、人肺癌细胞（NCI-H460）、人胃腺癌细胞（SGC-7901）的抑制增殖能力高于ZLP。     

4种珍稀食用菌水提物的抗氧化活性研究

用DPPH自由基清除法、羟基自由基清除法和超氧阴离子自由基清除法对4种珍稀食用菌灵芝、云芝、茶树菇、松茸的水提物进行抗氧化活性评价,为更好评价其抗氧化活性,以维生素C作为阳性对照。实验结果显示：4种食用菌水提物具有不同程度的抗氧化活性。云芝对DPPH自由基的清除能力最强,其IC₅₀值为1.46 mg/mL,维生素C清除DPPH自由基的IC₅₀为0.046 mg/mL;茶树菇对清除羟基自由基的清除能力最强,其IC₅₀值为1.41 mg/mL,云芝和松茸也有较强清除羟自由基能力,其IC₅₀值分别为1.56、1.57 mg/mL,三者的清除能力均明显优于阳性对照样品,维生素C清除羟自由基的IC₅₀为2.41 mg/mL;灵芝和云芝有较强清除超氧阴离子自由基能力,其IC₅₀值分别为124.48、138.28 mg/mL。     

李氏块菌提取物抗氧化活性的研究

对李氏块菌Tuber liyuanum子实体的不同提取物,包括甲醇提取物(ME)、乙醇提取物(EE)、丙酮提取物(AE)、正丁醇提取物(BAE)和乙酸乙酯提取物(EAE),进行清除DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、铁离子螯合能力、还原力以及总酚含量的测定和研究,发现ME对DPPH自由基、超氧阴离子自由基清除及还原力活性最高,EC50值分别为23.37mg/m L、11.65mg/m L和24.47mg/m L;EE对羟基自由基清除和铁离子螯合能力活性最高,EC50值分别为7.24mg/m L和小于0.5mg/m L;ME的总酚含量最高(3.08mg GAE/g提取物),其次是EE(1.34mg GAE/g提取物),提取物总酚含量与抗氧化活性呈现出一定的正相关性。     

芫菁体内结合斑蝥素对胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用

本文考察了芫菁体内结合斑蝥素和人工合成的斑蝥素盐类衍生物斑蝥素酸镁的体外抗肿瘤活性。采用WST-1法检测两者在体外对人胃腺癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用。实验结果显示两者对SGC-7901细胞均表现出明显的抑制效果,且随药物浓度升高其抑制作用增强,呈剂量效应关系;其半数抑制浓度(IC50)分别为10.86和8.65μmol/L。此外,通过流式细胞术检测表明,结合斑蝥素能引起SGC-7901细胞G0～G1期阻滞;斑蝥素酸镁则引起SGC-7901细胞S期阻滞,两者均能通过干预SGC-7901细胞的周期来抑制其增殖。     

氧化苦参碱对SGC7901与ECV304的体外活性比较研究

本论文主要探讨氧化苦参碱对人脐静脉内皮细胞ECV304和人胃癌细胞SGC-7901细胞活性影响并进行比较研究。采用MTT法、生长曲线法检测氧化苦参碱在不同浓度、不同时间对两种细胞增殖抑制作用。HE染色、透射电镜观察氧化苦参碱作用后两种细胞形态变化。结果显示,氧化苦参碱对SGC-7901,ECV304的IC50值分别是660.07、1555.17μg/m L,对SGC-7901具有明显的增殖抑制作用。氧化苦参碱对SGC-7901细胞形态改变较大,出现细胞质浓缩,细胞染色加深,细胞核变大等形态学改变,细胞出现中期及晚期凋亡。而氧化苦参碱对ECV304形态改变较小,细胞多处于早期凋亡。氧化苦参碱对SGC-7901和ECV304均具有增殖抑制和促凋亡作用,对SGC-7901更明显对,氧化苦参碱具有抗肿瘤细胞增殖、抗肿瘤血管生成作用,但对肿瘤细胞较为敏感。     

川贝母内生真菌Fusarium tricinctum CBY11抗氧化活性及代谢成分研究

结合形态特征和分子生物学方法,将一株分离自川贝母鳞茎的内生真菌CBY11鉴定为Fusarium tricinctum。分别研究其发酵液石油醚提取物(PEE)、乙酸乙酯提取物(EAE)、正丁醇提取物(BAE)和乙醇提取物(ETE)的DPPH自由基清除活性、总抗氧化活性(以ABTS法测定)和总还原力(FRAP法测定),以及其总多酚含量(TPC)、总黄酮含量(TFC)和总皂苷(TSC)含量。结果发现EAE、BAE和ETE均具有较强的DPPH自由基清除活性(IC50分别为1.95mg/m L、1.19mg/m L、1.64mg/m L)和总抗氧化活性(IC50分别为0.43mg/m L、0.58mg/m L、0.43mg/m L),但总还原能力相对较弱;PEE的抗氧化活性整体较低。此外,EAE、BAE和ETE的TPC、TFC及TSC显著高于PEE(P0.05)。可见TPC、TFC及TSC与抗氧化活性呈现出一定的正相关性。HPLC分析表明EAE含有多种具有较强抗氧化活性的酚酸等物质,如芹菜素。GC/MS分析表明PEE中含有少量抗氧化酚类物质,最主要成分是烷烯烃类。本研究表明川贝母内生真菌CBY11具有产生丰富抗氧化活性成分的能力,具有多种利用价值。     

枸骨叶提取物对酪氨酸酶的抑制与抗氧化作用

本实验以枸骨叶为研究对象,经75%乙醇浸提,用极性递增的溶剂分离制备获得枸骨叶提取物,测定了枸骨叶提取物对酪氨酸酶的抑制作用,并使用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除的方法检测了枸骨叶提取物抗氧化能力。实验结果表明:枸骨叶三氯甲烷和正丁醇提取物对酪氨酸酶具有较强的抑制作用,IC50值分别达到0.414 mg/m L和0.667 mg/m L,均为混合型可逆抑制类型。同时,二者均具有一定的清除DPPH自由基的能力,IC50值分别为0.132 mg/m L和0.039 mg/m L,表明枸骨叶提取物同时具有抑制酪氨酸酶活性和抗氧化的功效,在美容、药物及食品等行业具有潜在的应用价值。     

药用拟层孔菌石油醚提取物的GC-MS分析及各相提取物生物活性

通过形态学和分子生物学分析,实验菌株为药用拟层孔菌。采用不同有机溶剂提取药用拟层孔菌子实体,分别获得石油醚、氯仿、乙酸乙酯和甲醇提取物。采用GC-MS方法,分析药用拟层孔菌石油醚提取物中的化学成分,同时对不同有机溶剂提取物的生物活性进行检测。结果表明:药用拟层孔菌石油醚提取物中共鉴定出46个化合物。体外抑制肿瘤细胞活性实验表明,在100μg/m L时,不同有机溶剂提取物都表现出抑制肿瘤细胞活性。其中,石油醚提取物在50μg/m L时,其对NCI-H460和SGC-7901肿瘤细胞的抑制率分别为99.03%和82.57%。甲醇提取物在8mg/m L时,DPPH自由基清除率达93.35%。     

红冬蛇菰提取物抗氧化及抑制亚硝化作用研究

对红冬蛇菰不同溶剂提取物的抗氧化活性及抑制亚硝化作用进行比较研究。采用DPPH法、ABTS法和普鲁士蓝法分别测定各提取物的自由基清除能力和铁离子还原力,以评价红冬蛇菰的抗氧化能力;采用盐酸萘乙二胺法和α-萘胺法分别测定红冬蛇菰各提取物对亚硝酸盐的清除率和对亚硝胺合成的阻断率,以评价红冬蛇菰的抑制亚硝化作用。实验结果表明,红冬蛇菰各提取物中乙酸乙酯提取物清除DPPH自由基(IC_(50)=0.06±0.001 mg/mL)和ABTS自由基(IC_(50)=0.07±0.001 mg/mL)能力以及对铁离子还原能力最强,并显著强于其他提取物(P0.01),其中清除ABTS自由基的能力显著高于Vc(IC_(50)=0.10±0.002 mg/mL)(P0.01);在模拟人体胃液的条件下(pH 3.0,温度37℃),各提取物能有效地清除亚硝酸盐以及阻断亚硝胺合成,并随着反应质量浓度增加清除率和阻断率增大最后趋于平缓,其中乙酸乙酯提取物对亚硝酸盐的清除能力(IC_(50)=1.91±0.022 mg/mL)和亚硝胺合成的阻断能力(IC_(50)=8.44±0.091 mg/mL)均显著强于其他提取物(P0.01)。红冬蛇菰提取物属天然产物,具有较好的抗氧化活性和抑制亚硝化作用,因此在抗氧化剂的研究方面具有潜在的开发利用价值,同时极有可能是一种新的防癌抗癌天然保健品。     

翼蓼块根提取物的抗氧化活性和血管紧张素转化酶抑制活性研究

本文主要对翼蓼块根的甲醇提取物及其乙酸乙酯、正丁醇、水萃取层的DPPH自由基清除能力、还原力、金属离子螯合能力和ACE抑制活性进行研究。四种提取物的总酚含量分别为147.97、228.31、162.99、168.16mg没食子酸/g,黄酮含量分别为19.45、21.57、13.89、14.80 mg槲皮素/g。DPPH自由基清除能力的EC50值分别为52.37、11.43、46.45、50.32μg/m L。四种提取物的还原能力均表现出随着浓度增加,其还原能力也增加的趋势;当终浓度为100μg/m L时,各提取物还原能力均强于抗氧化剂BHA。在100μg/m L时,乙酸乙酯层具有最强的金属螯合能力。在ACE抑制实验中,甲醇提取物和乙酸乙酯层在100μg/m L时,抑制率分别为39.45%和39.76%。实验结果表明,翼蓼块根的总酚和总黄酮含量与其抗氧化活性呈正相关。抗氧化活性与其对应的ACE抑制活性存在一定程度的联系,具体发挥ACE抑制活性的单体化合物尚需要进一步分离分析研究。     

五味子抗氧化及抑制α-葡萄糖苷酶活性的比较研究

筛选出五味子抗氧化活性最强及α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用最优的部位。对各提取物及有效部位进行含量测定。以对DPPH·清除能力和铁离子还原能力代表其抗氧化活性,比较五味子各提取部位的抗氧化活性。以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,阿卡波糖(ACAR)为阳性对照,对各提取部位的α-葡萄糖苷酶活性的体外抑制作用进行比较。采用Origin 8软件中的多项拟合计算活性实验的IC50值及Abs0.7值,并采用皮尔森相关性分析测定活性成分含量与抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性间的相关性。五味子药材中含量最高的是总多糖类物质,含量为72.9 mg GL/g DM,其次为总酚酸类物质,含量为46.8 mg GA/g DM,木脂素类物质含量为39.6 mg SC/g DM,三萜类物质含量为32.2 mg OL/g DM,总黄酮类物质含量最低,为22.6 mg RU/g DM。五味子各有效部位抗氧化活性顺序为:总木脂素总黄酮总三萜总酚酸总多糖。对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用最强的为总木脂素(IC50值为0.24),抑制作用最弱的为总三萜。五味子70%乙醇提取物和乙酸乙酯萃取物的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶活性抑制作用最优。五味子中总木脂素具有最优的抗氧活性及α-葡萄糖苷酶活性抑制活性。抗氧活性和α-葡萄糖苷酶活性抑制活性与木脂素类物质的含量呈正相关。     

蓝莓果渣提取物总酚含量及抗氧化活性研究

研究了蓝莓果渣提取物总酚含量及其抗氧化活性。分别采用水、40%乙醇及纤维素酶辅助乙醇超声提取蓝莓果渣,并用Folin-Ciocalteu试剂对3种提取物的总酚含量进行评估;并采用DPPH清除实验及O2—.清除实验对3种提取物的抗氧化活性进行研究。实验结果表明,纤维素酶辅助超声提取蓝莓果渣的总酚含量最高,可达425.36±15.21 mg GAE.100 g-1DW,远远高于水提物(169.46±9.75 mg GAE.100 g-1DW)及醇提物(218.39±12.54mg GAE.100 g-1DW)中的总酚含量。且纤维素酶辅助乙醇超声提取物对DPPH的清除能力为2.67±0.13 gVc.100 g-1DW,对O—.2的清除能力2.48±0.14 g Vc.100 g-1DW,明显好于醇提物及水提物抗氧化活性。     

香蕉皮抗氧化和抑制人肝癌HepG2细胞活性研究

对香蕉皮提取物（banana peel extraction,BPE）的体外抗氧化作用和抗肿瘤活性进行了研究。使用福林酚和硝酸铝法测定BPE中总多酚和总黄酮含量;通过检测DPPH和O₂^-自由基清除能力测定BPE的体外抗氧化活性;采用Alamar Blue法检测BPE对HepG2细胞活性的影响;荧光染色及流式技术检测HepG2细胞凋亡;免疫印迹技术检测凋亡蛋白的变化;Caspase活性检测试剂盒测定Caspase-3和Caspase-9的活性;Caspase-9和Caspase-3抑制剂验证BPE抗肿瘤相关的信号转导通路。结果表明,BPE中总多酚和总黄酮含量分别为39.23 ± 2.35 mg·L^-1和26.53 ± 1.97 mg·L^-1;BPE显示出一定的DPPH和O₂^-自由基清除能力（65.31%±3.82%和51.29%±4.23%）,可明显抑制HepG2细胞的增殖（IC₅₀=54.32 mL·L^-1）;BPE通过上调Caspase-3、Bax、Bid、Apaf-1、Bak、p53、Caspase-9的表达,下调Bcl-2、Bcl-xl的表达诱导HepG2细胞凋亡;Caspase-9和Caspase-3抑制剂（Z-LEHD-FMK、Ac-DEVD-CHO）在一定程度上逆转了BPE的增殖抑制活性。BPE具有一定的自由基清除能力,对HepG2细胞具有明显增殖抑制作用,这些结果为香蕉皮的进一步开发利用提供了数据支撑。     

不同方法处理的九香虫对人胃癌SGC-7901细胞体外作用比较及其抑癌组分分布

本实验探讨冷冻和传统中药炮制方法处理的九香虫对胃癌细胞增殖的影响及九香虫抑癌活性组分的体内分布。体外培养人胃癌SGC-7901细胞,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)观察不同方法处理的九香虫各组分水溶液对SGC-7901细胞的体外抑制作用。结果发现,炮制九香虫蛋白浓度为50和100mg·L~(-1)时作用48h对SGC-7901细胞生长具有抑制作用,抑制率分别为13.45%和14.68%,而浓度达到200和400mg·L~(-1)时对SGC-7901细胞生长具有促进作用,抑制率为-7.94%和-82.50%;冷冻处理下九香虫不同浓度对SGC-7901细胞生长具有显著的抑制作用,该处理组蛋白浓度为50、100、200和400mg·L-1时抑制率分别为0.49%,3.82%,4.42%,39.33%。选取九香虫整虫及分解后的各部位处理组最大作用浓度比较,增殖抑制率为血淋巴腹部整虫头部。因此,冷冻处理的九香虫对胃癌细胞抑制率更高,且在该条件下九香虫的抑癌活性组分主要分布于血淋巴和腹部。