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高度耐盐双价转基因烟草的研究 总被引:29,自引:1,他引:29
随着全球性人口的增长和土地退化的加剧,开发利用广阔盐碱地和干旱土地的需要日益迫切。植物生物技术的日臻完善,为培育高效耐盐植物迎来了一丝曙光。在高渗条件下,耐盐的微生物或植物细胞通过增加胞内一些相溶性溶质的浓度来维持渗透压的平衡。这些可溶性溶质包括无机离子、糖类、多元醇、氨基酸和生物碱等。通过基因工程手段,使细胞内积累脯氮酸⑴、甜菜碱⑵、甘露醇⑶、海藻糖⑷,能够不同程度地提高转基因烟草的耐盐性。多元醇含有多个羟基,亲水性能强,能有效维持细胞内水活度。山梨醇、甘露醇等己糖分子结构、理化性质和生理功能相近。故此.我们认为:不同糖醇在转基因烟草中的积累.可能具有协同(或累加)效应,有希望更大地提高植物耐盐性。我们在获得大肠杆菌mtlD基因(编码l-磷酸甘露醇脱氢酶)和gutD基因(编码6-磷酸山梨醇脱氢酶)克隆⑸的基础上,获得了分别表达mtlD和gutD基因的单价转基因烟草,并首次证实了gucD基因的表达,能显著地提高转基因烟草的耐盐性⑹。本文工作进一步报道同时表达大肠杆菌mtlD和gutD基因双价转基因烟草的高效高度耐盐性。 相似文献
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检测烟草中烟草花叶病毒的RNA斑点杂交法 总被引:2,自引:0,他引:2
用普通烟草花叶病毒OM株3′-端约2kb的cDNA为探针,探索了用RNA斑点杂交法对烟草组织中烟草花叶病毒RNA进行检测的条件。这些条件包括用分子杂交法观察云南烟区和上海烟草上分到的烟草花叶病毒与OM株的同源性,从烟草组织中提取烟草花叶病毒的几种方法的比较,使RNA有效地固定在硝酸纤维素滤膜上的方法,烟草组织中是否有干扰RNA固定和杂交的物质,斑点杂交方法检测烟草花叶病毒的特异性、灵敏度等。 相似文献
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金海翎 《Acta biochimica et biophysica Sinica》1996,28(4):358-366
根据对TMV高效复制和基因表达的顺式作用元件的分析,在体外重组包装了2个缺失型TMV粒子:TMVRP和TMVCP。前者缺失了TMV外壳蛋白CP基因的3′端及后序区域,后者缺失了大部分复制酶基因。把两者分别或共同电击感染烟草原生质体:1.用CP抗体进行免疫印渍检测,单独感染的原生质体内的CP在16小时内无增加,而在共同感染的原生质体内,CP在感染2小时后就开始明显增加。2.用RT一两次PCR法专一地检测新生负链RNA的合成情况,在单独感染的原生质体内没有检测到,但在混合感染的原生质体内在感染1小时后就检测到CP基因特异的负链RNA的形成,并用Southern杂交得到进一步验证。这些结果表明,复制酶缺失型TMVCP内的CP基因不能表达,但可以在TMVRP存在时,通过其所表达的复制酶互补作用得到复制从而有效表达. 相似文献
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病毒诱导烟草的基因沉默 总被引:2,自引:1,他引:1
病毒诱导基因沉默是利用RNA介导病毒防卫机制的一项技术。构建含有目的基因片段的人工改造病毒载体,通过农杆菌侵染导致植物内源目的基因沉默。为建立病毒诱导基因沉默体系,选用烟草脆裂病毒(TRV)和烟草为实验材料。构建了八氢番茄红素去饱和酶基因(PDS)的基因沉默病毒载体,病毒载体侵染结果显示目的基因PDS沉默导致烟草幼苗出现光漂白现象。采用RT-PCR的方法检测目的基因PDS的沉默效果,结果显示PDS基因mRNA被显著降解。该体系的建市有利于将来对植物基因进行高通量功能分析。 相似文献
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3种烟草基因组SSR位点信息分析和标记开发 总被引:1,自引:0,他引:1
利用生物信息学方法对绒毛状烟草、林烟草和本塞姆氏烟草3份烟草野生种基因组数据中的SSR位点信息进行了分析。结果表明,在全长分别为2.14Gb、2.44Gb和2.59Gb的绒毛状烟草、林烟草和本塞姆氏烟草基因组中分别获得153 357个、196 493个和278 784个SSR位点,平均相隔13.94kb、12.42kb和9.31kb出现一个SSR。在SSR位点分布区域上,绝大部分的SSR位点分布在内含子和UTR(尤其是5′-UTR)区域;在SSR基序类型上,主要集中在二、三碱基基序且二者占总SSR位点数目的80%以上,并以二碱基基序类型丰度最高;在SSR基序结构上,基因组中出现频率及数量最高的是含有A(T)n的基序结构;在SSR基序的重复次数上,除单碱基基序类型外,重复次数多在3~10次之间。利用分别属于5个不同烟草组的8份烟草材料验证所合成的300对引物,所有合成的引物均能扩增获得目标片段,其中有80对引物存在扩增多态性。表明来源于绒毛状烟草、林烟草和本塞姆氏烟草基因组的SSR标记在亲缘关系相对较近的烟草种间具有高度保守性和通用性,基于此3份烟草野生种基因组数据开发SSR引物用于后续的相关遗传研究具有可行性。 相似文献
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广东省烟草花叶病病原病毒的鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
烟草花叶病是广东省产烟区的主要病害之一。我们在南雄等八个县进行调查,1983年至1984年的一般发病率为2~20%。根据血清学反应、病毒粒体形态、鉴别寄主反应及寄主范围、媒介昆虫种类、物理性质、交互保护反应等各项检验结果,鉴定广东省烟草花叶病病原是:三个黄瓜花叶病毒可能株系(普通株系CMV-C,烟草坏死株系CMV-TN,烟草黄色坏死株系(CMV-TYN),烟草花叶病毒(TMV),马铃薯病毒Y(PVY),烟草脉带花叶病毒(TVBMV)和烟草褪绿斑驳病毒(TCMV)(暂定)。 相似文献
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通过构建植物表达载体,由农杆菌介导,将望江南核糖体失活蛋白基因cassin转入烟草。PCR和Southern blot杂交结果证明:外源基因已经以单拷贝整合到烟草基因组内,并且在后代发生遗传分离。RT—PCR和Northern blot杂交结果显示:外源基因可以正常转录。用不同浓度的TMV机械摩擦接种转基因T1、T2代各3个自交株系,以非转基因烟草为阴性对照,实验结果表明转基因烟草对TMV表现出不同程度的抗性。 相似文献
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本研究以美国烟草G_(140)(Nicotiana tabacum)和野生波缘烟草[(Nicotiana undulata)。抗花叶病]为材料,在组织水平上进行烟草G_(140)髓细胞离体培养,进行体细胞无性系变异和再生植株筛选;在细胞水平上进行两种烟草的原生质分离、培养及植株再生,外源基因导入及体细胞融合,选育优质抗病毒病的烟草新品种。试验结果及分析一、G_(140)髓细胞脱分化和再分化成苗 9-15叶期的G_(140)植株的髓组织切成0.5cm~2方块,接种于M S+2,4-D2mg/L+水 相似文献
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本文针对建立空间细胞电融合技术存在的三个主要问题进行了研究。结果表明,用低温(4℃)、融合介质(0.55mol/L甘露醇)并添加0.1%纤维素酶保存原生质体,72h内可以使约94%细胞维持无壁状态,同时并未使细胞丧失再生能力,基本满足从地面制备亲本细胞到在微重力条件下进行电融合,对亲本细胞保持无壁状态的要求。为减少剪切力环境对亲本细胞造成的损伤,一方面用超速离心对亲本细胞之一去液泡,另一方面用电泳 相似文献
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转人工合成GFM CryIA基因烟草表现明显杀虫活性 总被引:2,自引:0,他引:2
为了使来自原核生物的苏云金芽孢杆菌的杀虫晶体蛋白(ICP)基因能够在高等植物中得到很好的表达,对编码这种杀虫晶体蛋白基因的核苷酸顺序进行了必要而又合理的修饰和改造:不改变杀虫晶体蛋白基因的氨基酸编码顺序,将杀虫晶体蛋白基因的密码子更换成植物基因组中常用的优化密码子,同时更换掉Bt杀虫晶体蛋白结构基因中的不稳定元件,人工全合成了长度为1824bp的杀虫晶体蛋白基因-GFM CryIA基因。为了检测合 相似文献
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烟草高蛋白品种及其丰产技术研究朱荣誉缪建兰江华山于学玲孙晓明史劲松(南京野生植物所,南京210042)烟草为茄科植物,目前国内外种植烟草主要用作卷烟。由于吸烟危害人体健康,世界不少国家大声疾呼要求禁烟。美国等国科学研究认为烟草将成为二十一世纪人类... 相似文献
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