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生物工程如果从1972年美国斯坦福大学生物化学家P.伯格首次构成第一批重组DNA分子开始,迄今才18年的历史。在这短短的十几年中,由于生物工程学家的努力,生命科学迅速进入了人工改造和创造新生命的时代。生物工程技术的发展,是与某些细菌质粒工具的利用分不开的。由于质粒DNA分子只有细菌核物质DNA分子的1%,易于提取分离和纯化,又极易与目的基因重组,就成了基因工程生产不可缺少的手段。细菌体内的基因,如抗性基因、合成特殊产品的基因等又是人们培育抗逆良种、获取重要生化产品的目的基因。我们可以把运用于生物工程生产,为人类作出巨大贡献的细菌、真菌、放线菌称之为基因工程菌。 相似文献
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运用PCR方法,从磷酸乙酰转移酶(Pta)-乙酸激酶(Ack)代谢途径缺失菌株E.coliPA1染色体上,扩增出天氨酸激酶-1-高丝氨酸脱氢酶-I(thrA)和高丝氨酸激酶(thrB)基因部分序列,构建了整合型重组质粒pVHb-Kan;应用染色体-质粒同源重组的方法,将透明颤菌血红蛋白(Vitreoscila haemoglobin,VHb)基因整合到大杆菌PA1染色体上的thr操纵子,构建了新型整合工程菌G830。在高密度发酵条件下,G830的细胞呼吸强度、能量代谢、最高菌密度和细胞干重,均明显优于对照菌株PA1和BL21;重组蛋白脯氨酰内肽酶在G830和PA1中获得稳定高表达;重组菌生长状况及发酵指标均与空宿主菌基本一致且表达质粒能维持较好的稳定性。整合型vhb的表达及乙酸代谢途径(Pta-Ack)的缺陷,改善了宿主在贫氧条件下的生长,且促进了重组蛋白的表达。该工程菌具有良好的氧耐受力,且乙酸积累得到大幅度降低,可作为适于高密度发酵的基因工程菌。 相似文献
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传统的育种方法由于本身的缺陷受到了基因工程育种的强有力挑战,基因工程技术应用于发酵工业创立了全新的发酵基因工程。传统发酵菌种棒状杆菌的分子生物学研究欣欣向荣,棒状杆菌的受体系统、载体系统以及DNA转移技术都已取得长足进展。对棒状杆菌的分子遗传机制的阐明使得构建表达载体并表达目的基因成为现实。利用基因突变和基因重组技术选育优良的棒状杆菌发酵菌种,业已取得明显成效。 相似文献
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木糖发酵重组菌研究进展 总被引:7,自引:1,他引:7
木糖发酵是植物纤维原料生物转化制取乙醇商业化生产的基础和关键 ,但自然界存在的微生物菌株不能满足商业化生产的需要。利用基因工程技术对细菌和酵母进行改造 ,以提高它们在厌氧条件下的木糖发酵能力成为目前研究和开发的重点。通过转基因和基因删除技术 ,主要对Escherichiacoli、Zymomonasmobilis、Pichiastipitis和Saccharomycescerevisiae等典型的乙醇发酵菌株实施基因改造 ,构建出一系列不同类型的木糖发酵重组菌株。与野生型菌株相比 ,重组菌株在厌氧条件下的木糖发酵能力得到了不同程度的改善 ,但是它们仍然未能投入于商业化生产。微生物的木糖代谢工程和木糖发酵重组菌株的构建有待于进一步的深入研究 。 相似文献
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基因工程菌的发酵研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文对大肠杆菌表达的rhGM - CSF 工程菌的发酵条件进行了详细的研究, 探讨了发酵条件对工程菌表达外源蛋白量的影响, 优化了影响发酵的各种条件, 形成了一套工程菌发酵表达外源蛋白的工艺, 并从工业化角度对工程菌的高密度高表达间的关系进行了探讨。 相似文献
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基因工程大肠杆菌发酵的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
基因工程菌的发酵工艺研究在生物高技术产业化的发展中具有重要的意义。研究结果表明,每10L发酵液可得1~2kg湿菌体,发酵时间从一般的24~30h缩短到6~8h,5L、15L、150L发酵罐都可得重复性的结果。这项发酵工艺研究不仅适用于E.Coli各种不同类型的表达启动子的工程菌,也适用于野生菌株疫苗等的生产,将对我国基因工程产业化起重要作用。 相似文献
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利用途径工程的方法,将来源于克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)的甘油脱水酶基因dhaB和1,3-丙二醇氧化还原酶基因dhaT构建成多顺反子重组质粒pSE-dhaB-dhaT并在大肠杆菌JM 109中进行表达,在大肠杆菌中构建一条新的产1,3-丙二醇代谢途径。研究表明,重组菌株JM 109/pSE-dhaB-dhaT在微好氧条件下,尝试用廉价的乳糖为诱导物、维生素B12为辅酶,可以将甘油转化为1,3-丙二醇,产量达15.34 g/L,甘油转化率为35.7%,对低成本生产1,3-丙二醇作了有益的探索。 相似文献
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一、前言本世纪70年代在分子生物学和酶学技术基础上发展起来的基因工程技术使得科学家能够有目的地修改某些生物体的基因组成,使之为人类的最大利益服务,它的发展标志着现代遗传学的研究进入了一个崭新的阶段。利用基因工程技术制备的工程菌株可广泛应用于生物工程学实践的各个领域,例如干扰素,胰岛素和人体生长激素的发酵生产都已取得了令人瞩目的成果。然而,基因工程菌的应用范围远非局限于此,它也可应用于各种环境工作中,例如可用作为生物杀虫剂,农作物生长刺激剂,化学污染物的生物 相似文献
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基因工程技术是当代生物工程的核心.在实验室中已经应用基因工程菌株得到多种有重要价值的产矿1,但真正能转化为工业化生产的还不多。这主要因为工程菌培养技术是传统发酵工艺的延伸和发展,缺乏完善的理论和成熟的操作准则,使得工艺设计和操作存在较大缺陷。而对基因工程菌培养过程进行控制的关键在于解决这样一个问题m:宿主的生理遗传特性影响着外源基因的表达,外源基因的表达又影响着宿主的生长特性.研究其培养过程的动力学行为主要就是将二者之间的作用规律和控制因素了解清楚,建立合理的数学模型.因此工程菌培养过程的动力学研… 相似文献