基因工程

<正> 853821热自养甲烷杆菌的同类物-抗性和营养缺陷突变体[英]/Kiener,A.…//Ar-ch.Microbi0l.-1984,139(1).-87～90[译自DBA,1985,4(1),85-00002]发展甲烷菌基因转移受体系统的先决条件,就是要分离到嗜热的热自养甲烷杆菌     

基因工程

<正>发展了奶制品发酵生产中的重要乳酸链球菌质粒DNA的快速纯化方法。将Strepto coccus cremoris wg2一2和Streptococcus lactis MG1216在含酵母膏和DL一苏氨酸的培养基中分别在25℃和20℃培养24小时,然后离心收集细胞,加人溶菌酶和Mutanolysin溶液以除外壳。再加入Tris-HC1蔗糖溶液混均,培养于37℃经3.5分钟,将制备物冷却,     

基因工程

<正> 854231 大肠杆菌延伸因子 Ts 的改进的大量提纯方法[英]/Yoder,M.…//Anal.Biochem.-1984,141(2).-351～354[译自 DBA,1984,3(25),84-12465]在大肠杆菌中蛋白质合成时,Ts 是多肽链延伸必需的三个细胞质因子之一。Ts 催化     

基因工程

<正> 852571链霉菌噬菌体载体的构建:硫链丝菌肽抗性基因(tsr)引入R4噬菌体[英]/Morino,T.…//Agric.Biol.Chem.-1984,48(8).-1985～1990[译自DBA,1984,3(23),84-10928]用焦磷酸浓缩法从R4-δ-2中分离出R4噬菌体的两个进一步缺失突变体R4-δ-21和     

基因工程

<正> 为了找到能将基因克隆在产蛋白质的B.bre沉:高产菌株47中的适合载体,测定了12株菌的质粒的存在。从B.breois(pWT481)菌株481鉴别出的一个质粒,被选作可能的载体,因为这株菌与菌株打有许多共同特     

基因工程

<正>851741DNA在酵母和动物细胞的寄主一载体系统中的分子克隆和表达[会,英]/ScottJF//Abstr.Pap.Am.Cliem.Soe-1984,287 Meet一CHED 76[译自DBA1984 ,3(19)-08940] 分子克隆技术及其应用的许多迅速进展是利用细菌系统实现的,但是将类似的方法用于真核寄主-载体系统是既定的目标。已研究出的这类系统(作为寄主细胞)使用各种低     

基因工程

<正> 853001 从专利文献看遗传物质的特性[英]/Knuth,S.…//Acta Biotechnol.-1984,4(3).-195～208[译自DBA,1984,3(25),84-11951]从德意志联邦共和国(D E)专利局、德意志民主共和国(D D)、欧洲专利局     

基因工程

852171 DNA片段链的分开及其从非变性聚丙烯酞胺凝胶中的分离〔英〕/James,R.…了Anal.Bioehem一1954,140(2)一456一458〔译自DBA,1984,3(21),84一09915〕 报道利用尿素和温和加热快速而定量地变性双链DNA(d sDNA)的一个技术。利用DNA聚合酶和适当的““PdNTP,通过填充反应将带有5产延长末端的DNA片段的3/末端加以标记,没结合的标记混合物通过SephadexG一50柱并用SDS一EDTA洗脱除去。标记的dSDNA加入固体尿素,65℃保温3分钟,接着在上聚丙烯酸胺凝胶前快速冷却变性。变性的互补DNA链在丙烯酞胺与双丙烯酸胺比率为60,1的非变…     

基因工程

<正>考虑了从琼脂糖和聚丙烯酞胺凝胶中用转移电泳回收DNA片段。大肠杆菌质粒pBR322和腺病毒2 DNA分别进行聚丙烯酞胺凝胶电脉和琼脂糖凝胶电泳。SephadexG一50床(B)包在上端装有电     

基因工程

<正> 853411 枯草芽孢杆菌精氨酸基因以开始不稳定的杂合质粒形式被克隆到大肠杆菌后的转录分析[英]/Mann,N.H.…∥Mol.Gen.Genet.-1984,197(1).-75～81[译自 DBA,1984,3(25),84-11993]用鸟枪法在大肠杆菌中将枯草芽孢杆菌染色体 DNA 的 EcoR Ⅰ片段克隆到 pBR322     

基因工程

<正> 用给体一受体原生质体融合技术研究了叶绿体和线粒体控制的性状在种间的转移。野生烟草或普通烟草白化系(V BW)用作受体原生质体,下一射线照射的花烟草、印度烟草和波状叶烟草原生质体用作细胞器给体。融合细胞经培养后再生成胞质杂种植株。     

用改良的杆状病毒载体在家蚕中进行人α-干扰素基因的高水平表达

基因工程的目的之一是增加在细胞中所需的基因产物的表达量。首先用大量生产的宿主有大肠杆菌和一些其他的细菌。但是当细菌作为宿主时存在着几个问题,例如多肽糖基化缺陷、寄主蛋白酶造成的产物降解及缺乏分泌等。采用哺乳类动物细胞可排除上述问题,但要大量生产,仍然存在着许多与培养系统的复杂性及效率有关的问题。     

基因操作的运载体

随着遗传工程研究的深入,新的运载体不断出现,使人难以跟上它的发展。     

农业其它

<正> 854533 从二倍体烟草 Nicotiana plumbagi-nifolia 的原生质体培养中分离出大量母体遗传的抗林肯霉素突变体[英]/Cseplo,A.…//Mol.Gen.Genet.-1984,196(3).-     

哺乳动物的基因工程(续三)

5.提高外源基因在动物细胞巾表达的途径:近10余年来,人们将各式各样的克隆基因导入哺乳动物细胞进行表达的兴趣日增。虽然大肠杆菌系统已能成功地表达人和动物活性蛋白,并有许多优点,但其致命的缺点是不能完成真核蛋白的转译后加工,而这类转译后加工对许多真核蛋白生物活性的表现至关重要。例如糖基化、磷酸化、酰胺化、羟基化、羧基化、磺酸化、硒化,以及信号肽的删除、链内和链间二硫键的正确连接和亚基的正确装配等等。     

基因工程菌合成哺乳动物蛋白的下游加工问题

70年代兴起的基因工程,使人们很快地看到这一新技术的巨大潜力,迄今为止,通过多种高效大肠杆菌载体系统的构建和应用,使许多原核和真核蛋白,特别是哺乳动物蛋白都可在大肠杆菌中成功地生产。这些蛋白高水平的表达是由于通过克隆该蛋白的编码顺序到多拷贝质粒上的强启动子,和核糖体的结合部位之后,从而构成重组表达质粒。运用这种技术所克隆的基因在大肠杆菌中表达时,蛋白的积累可高达大肠杆菌体总蛋白的50％。     

微生物学

<正> 从聚丙烯酞胺凝胶中有效地电泳转移DNA片段到硝酸纤维素纸上的方法得到发展。此法已用于带有小牛胸腺载体DNA的未经处理的Xl74-RF-DNA和用NaOH处理过的变性DNA。制备好末端标记的限制性片段,进行样品的聚丙烯酸胺凝胶电泳。     

疫苗

<正> 854956 含流感 HA 基因的牛痘病毒重组体[专,英]/US-Dept.Health-Human-Serv./US 6555-811:28.11.83-US-555811(05.06.84)28.11.83 as 555811.84-219196/35     

HER2胞外区基因的克隆及其在大肠杆菌中的可溶性表达

采用反转录PCR和PCR方法分别克隆P185^HER2/neu胞外区基因和噬菌体M13K07g3p—N1结构域基因,然后将二偶联入pET-22b( )载体中,在大肠杆菌中进行融合表达。可溶性目的蛋白表达量占细菌可溶性表达产物总量的30％72右．并通过镍亲和层析纯化出目的蛋白。以上结果为从噬菌体抗体库中筛选抗P185^HER2/neu的抗体奠定了基础。     

基因操作原理

λ噬菌体的基本特性1 λ噬菌体是一种遗传上复杂的但已作了全面深入研究的大肠杆菌病毒。因为它是分子遗传学研究中普遍采用的材料,所以很自然在基因操作刚刚问世,研究者们就对它进行了研究,并且发展成为一种载体。