激素和活性多肽

<正> 853295编码人的类前胰岛素原生长因子的一个cDNA克隆序列[英]/Bell,G.I.…//Nature.-1984,310(5980).-775～777[译自D B A,1984,3(21),84-10026]类胰岛素生长因子(促生长因子,IGF)-特异性克隆是通过分子杂交从一成人     

疫苗

<正> 853255 由cDNA进行脊髓灰质炎3型病毒株的基因组的分子克隆:R N A杂种方法[英]/Stanway,G.…//Arch.Virol.-1984,81(1—2).-67～78[译自D B A,1984,3(20),84-09595]脊髓灰质炎Ⅲ型病毒的2个神经毒力     

表达红色荧光及转胸腺素β4基因绵羊胎儿成纤维细胞系的制备

旨在构建胸腺素β4(thymosin beta4,Tβ4)基因真核表达载体并转染绵羊胎儿成纤维细胞,获得稳定表达胸腺素β4及红色荧光蛋白的转基因细胞克隆。将克隆载体pMD19TT中的胸腺素β4基因亚克隆到表达载体pIRES2-DsRed2的多克隆位点,构建表达载体pIRES2-DsRed2-Tβ4,脂质体介导转染绵羊胎儿成纤维细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞克隆。RT-PCR检测Tβ4基因在宿主细胞中的转录。测序结果显示,构建的表达载体pIRES2-DsRed2-Tβ4序列中,Tβ4基因正确连接在CMV启动子下游,顺序连接IRES2序列和红色荧光蛋白基因,载体构建正确。脂质体介导的稳定转染效率约为15%,经G418筛选得到转基因细胞克隆并高效表达红色荧光蛋白。RT-PCR检测显示外源Tβ4基因在绵羊胎儿成纤维细胞中得到转录。成功构建具有红色荧光蛋白和新霉素抗性双选择标记的胸腺素β4基因真核表达载体并稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞,筛选得到的超表达胸腺素β4绵羊胎儿成纤维细胞系为下一步通过核移植和克隆技术获得转基因绵羊提供了条件。     

基因工程

<正> 854681 一个简单而有效的载体-引物 cDN-A 克隆体系[英]/Alexander,D.C.…//Gene.-1984,31(1～3).-79～89[译白DBA,1985,4(4),85-01574]经修正的 Okayama 和 Berg 的载体-引物     

淋巴因子和干扰素

<正> 853728 抗人β-干扰素的合成多肽抗体[英]/Chow,T.P.…∥J.Biol.Chem.-1984,259(19).-12220～12225[译自 DBA,1985,4(2),85-00719]作者制备了与人β-干扰素 N-末端1-21和18-45氨基序列相一致的合成多肽。将此     

版纳微型猪近交系GHR基因克隆及生物信息学分析

目的获得版纳微型猪近交系(BMI)生长激素受体基因(GHR)序列,通过生物信息学分析预测GHR功能并进行GHR mRNA多组织表达谱分析。方法以版纳微型猪近交系的肝脏组织为材料提取RNA,RTPCR方法扩增GHR基因编码区序列,将序列连接至pMD18-T载体进行克隆、测序和生物信息学分析;半定量PCR检测GHR mRNA在BMI不同组织中表达量的差异。结果克隆出了BMI GHR编码区序列,提交GenBank获得登录号KC999114。该基因CDS长1917 bp,编码638个氨基酸。生物信息学分析表明,与长白猪的GHR序列相比BMI存在4处氨基酸替换,分别为p.E381D、p.A409S、p.L556V和p.A580G,均发生在胞内域。GHR基因多组织表达谱分析显示:GHR mRNA几乎在各组织中均有表达,在肌肉中表达量最高,在小肠、心、肝、神经纤维、脾、卵巢中表达量较高,在肺、胃、大脑、胰和肾中的表达量较低。结论成功克隆了版纳微型猪近交系GHR全长编码区序列,进行了生物信息学功能分析和组织表达谱分析,为进一步阐明版纳微型猪近交系生长矮小机理奠定了基础。     

版纳微型猪近交系 GHR 基因克隆及生物信息学分析简

目的 获得版纳微型猪近交系（BMI）生长激素受体基因（GHR）序列,通过生物信息学分析预测GHR功能并进行GHR mRNA多组织表达谱分析.方法 以版纳微型猪近交系的肝脏组织为材料提取RNA,RT-PCR方法扩增GHR基因编码区序列,将序列连接至pMD18-T载体进行克隆、测序和生物信息学分析;半定量PCR检测GHR mRNA在BMI不同组织中表达量的差异.结果克隆出了BMI GHR 编码区序列,提交GenBank获得登录号KC999114.该基因CDS长1917 bp,编码638个氨基酸.生物信息学分析表明,与长白猪的GHR序列相比BMI存在4处氨基酸替换,分别为p.E381D、p.A409S、p.L556V和p.A580G,均发生在胞内域.GHR基因多组织表达谱分析显示：GHR mRNA几乎在各组织中均有表达,在肌肉中表达量最高,在小肠、心、肝、神经纤维、脾、卵巢中表达量较高,在肺、胃、大脑、胰和肾中的表达量较低.结论 成功克隆了版纳微型猪近交系GHR全长编码区序列,进行了生物信息学功能分析和组织表达谱分析,为进一步阐明版纳微型猪近交系生长矮小机理奠定了基础.     

鲑鱼生长激素cDNA的分子克隆和序列分析

从太平洋切奴克鲑鱼(Pacific Chinook Salmon,Oncorthychus tschawytscha)垂体poly(A)~+ RNA构建cDNA文库。按照鲑鱼生长激素(sGH)部分氨基酸序列合成两个寡聚脱氧核苷酸探针,它们分别与编码第1—7和第166—172氨基酸序列互补。用探针筛查cDNA文库,得到了完整的sGH cDNA克隆。cDNA序列已测定,包括编码210个氨基酸的编码序列。其中含有22个氨基酸的信号肽序列和188个氨基酸的成熟GH序列。该克隆还包括了5'端和3'端非翻译区,分别为72个和438个碱基对长。与Chum鲑鱼比较表明,核酸序列和氨基酸序列的同源性分别为97%和99%。     

无脊椎动物β－胸腺素的功能研究进展

β-胸腺素(β-thymosin)是肌动蛋白单体(G-actin)的锚定因子,它可以阻止后者多聚化形成微丝。当前关于β-胸腺素的研究主要集中在脊椎动物中,发现其在淋巴系统的发育、维持免疫系统的平衡、中枢神经系统的发育等生命过程中起着重要作用。人体中胸腺素β4(Thymosinβ4,Tβ4)参与了机体抗菌过程,并且能促进伤口愈合,组织、器官的修复重塑。在无脊椎动物中,也发现了β-胸腺素的存在,研究发现这类蛋白与Tβ4具有一定的相似性,但是在结构及功能上却比Tβ4更为复杂,详细讨论了β-胸腺素在无脊椎动物中的研究进展。     

疫苗

<正> 852831单克隆抗体识别的抗原决定簇定位方法:猫白血病病毒外壳蛋白上的病毒中和定簇的定位[英]/Nunberg,J.H.…/Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.-1984,81(12).-3675～3679[译自D B A,1984,3(19),     

生物防治因子

<正> 852788附生细菌噬夏孢欧文氏菌的质粒[英]/Thiry,G.//J.Gen.Microbiol.-1984,130(7).-1623～1631[译自D B A,1984,3(20),84-09673]分析了两个噬夏孢欧文氏菌菌株20D3和20C31存在的质粒,可把它们作为附生细菌用于对付在原位活动的致病菌的潜在的生防因子。上述菌株的粗溶菌物的琼脂糖凝     

牛生长激素cDNA的分子克隆

我们克隆了与牛生长激素Poly(A)⁺RNA互补的DNA(cDNA)。首先从小牛垂体中提纯总的Pply(A)⁺RNA,用AMV逆转录酶合成单链cDNA,以单链cDNA为模板合成双链cDNA,用多聚G及多聚c谱尾法将双链cDNA克隆到pBR322质粒的Pst I位点上,构建成牛垂体PoIy(A)⁺RNA的cDNA文库。以牛生长激素基因为探针,筛选出7个阳性菌落,经电泳鉴定有两个菌落(1号和2号)含有大于500bp的插入片段。1号克隆经酶切图谱、southeTn blot 杂交及序列分析证实含有牛生长激素的编码序列。     

激素和活性多肽

<正> 854119霉菌孢子转化甾类:Ⅲ.雅致小克银汉霉(Cunninhamella elegans)孢囊孢子在萌芽和营养生长不同时间的11-羟化酶活性[英]/Jaworshi,A.…//Appl.Micro-biol.Biotechnol.-1984,20(5).-313～317[译自DNA,1985,4(2),85-     

胸腺素α原基因的克隆与序列分析

应用RT-PCR法从正常成人外周血和胎儿胸腺中分别克隆得到了四种胸腺素α原基因,经序列分析结果表明,克隆的四种ProTα基因的核苷酸序列并不一致。与已报道的胸腺素α原基因进行比较,胎儿胸腺中克隆的胸腺素α原基因几乎无变化,而从成人外周血中所克隆的则变化较大,但变化区域有一定规律,109-120位都有GGGAATGCTAAT碱基的缺失,变化较多的氨基酸集中为天冬氨酸和谷氨酸,而胸腺素α原前28个氨基酸、中心酸性区和末端核定位信号区域变化较小。该结果为胸腺素α原的结构、功能和演化研究提供了信息。     

基因工程

<正> 853001 从专利文献看遗传物质的特性[英]/Knuth,S.…//Acta Biotechnol.-1984,4(3).-195～208[译自DBA,1984,3(25),84-11951]从德意志联邦共和国(D E)专利局、德意志民主共和国(D D)、欧洲专利局     

细胞工程

<正> 852628 限定伴随人类T细胞表面糖蛋白的T细胞白血病单克隆抗体SN2[英]/Seon,B.K.…//J.Immunol.-1984,132(4)-2039～2095[译自DBA,1984,3(13),84-06314]从一个白血性T细胞系,MOLT-4的膜分离得糖蛋白,经纯化,在弗氏完全佐剂中制备成白血病抗原给小鼠腹腔注射。用聚乙二醇使免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细     

疫苗

<正> 854075传播疟疾感染的血清因子[专,德]/Muenchun.App Kimmel/D E3304-048: 07.02.83-D E-304048(09.08.84)07.02.83 as 304048.84-202274/33(16页)[译自DBA,1984,3(22),84-10598]用至少2种不同的层析法从血清(最好是人或大鼠的血清)分离传播疟疾致病有机     

其它药剂

<正> 854145单克隆抗体:技术及其对革兰氏阴性菌感染的应用[英]/Young,L.S.//In-fection.-1984,12(4).-303～307[译自DBA,1984,3(22),84-10607]讨论了用于传染性疾病诊断和治疗的单克隆抗体生产的基本技术和原则。最好的研究系统涉及BALB/c小鼠脾细胞在抗原刺激     

基因工程

<正> 853411 枯草芽孢杆菌精氨酸基因以开始不稳定的杂合质粒形式被克隆到大肠杆菌后的转录分析[英]/Mann,N.H.…∥Mol.Gen.Genet.-1984,197(1).-75～81[译自 DBA,1984,3(25),84-11993]用鸟枪法在大肠杆菌中将枯草芽孢杆菌染色体 DNA 的 EcoR Ⅰ片段克隆到 pBR322