TCTP在辐射诱导胶质瘤细胞旁效应中的作用及机制研究

目的:研究肿瘤翻译控制蛋白(TCTP)在辐射诱导胶质瘤细胞旁效应中的作用及机制。方法:给予不同剂量的X射线照射U87、SHG44两种胶质瘤细胞,观察U87以及SHG44细胞的克隆形成率,并在给予最佳照射剂量后,通过Western Blot检测TCTP蛋白表达水平。将经过最佳X射线照射剂量的U87以及SHG44两种胶质瘤细胞与未经过辐射照射的细胞放在一起共培养,通过MTT实验检测胶质瘤细胞的增殖率,Western Blot检测共培养的胶质瘤细胞与经过辐射的胶质瘤细胞中Caspase3蛋白表达水平。结果:U87以及SHG44两种胶质瘤细胞的克隆形成率随着X射线照射剂量增加而显著性降低(P0.05),给予最佳X射线照射剂量后,与未经过X射辐射照射后的细胞相比,其TCTP蛋白表达水平明显升高(P0.05)。经过辐射照射与未经过辐射照射的胶质瘤细胞经过共培养后,与经过辐射的胶质瘤细胞相比,细胞的增殖率明显升高,同时共培养的胶质瘤细胞与经过辐射的胶质瘤细胞相比,Caspase3的蛋白表达明显降低(P0.05)。结论:TCTP的表达增高能够诱导未经过辐射的U87以及SHG44两种胶质瘤细胞的抗凋亡作用增强,其作用机制可能与Caspase3的表达降低有关。     

60Co照射后小鼠肝脏金属硫蛋白含量的动态变化

小鼠经不同剂量 ⁶⁰Co照射后,用HPLC结合AAS和ELISA方法检测第1,5,15,27天小鼠肝脏中金属硫蛋白两种亚型——MT-Ⅰ和MT-Ⅱ的变化发现,照后第1,5天MT-Ⅰ增加10—20倍,MT-Ⅱ增加40—60倍;而且600Rad照射较400Rad照射增加更明显,第15天后趋于正常。     

X射线对根尖细胞分裂和分化的作用

用30—70GyX射线照射小麦幼苗(浸种后5天)后发现根毛区到根尖的距离缩短,根毛变密,根毛长度为对照的2—3倍。照射后2—3天就可看到该现象。根毛着生处到根尖的距离随剂量增加而减少,甚至根尖全为根毛所复盖,另外还看到有分叉的根毛。根尖纵切片表明根尖分生区随剂量增加而缩小,分生区后接着就出现输导组织。玉米和黄瓜也有类似现象。这现象说明根细胞的分裂过程对射线很敏感,而分化过程则相当耐辐射,细胞分裂停止后立即转向细胞分化过程。     

PER1对人肝癌细胞BEL-7402辐射敏感性的影响

本文通过X射线照射SMMC-7721、BEL-7402和HepG2三种肝癌细胞后,以克隆形成试验检测其存活分数,结果显示在梯度剂量X射线0、2、4、6、8、10 Gy照射下SMMC-7721、BEL-7402、HepG2三种细胞克隆存活分数逐渐下降,其中SMMC-7721在三种肝癌细胞系中对辐射最敏感,BEL-7402辐射抗性在三种肝癌细胞系中最高。Western blot检测发现PER1在SMMC-7721中的表达水平明显显著高于BEL-7402和HepG2(P<0.05)。过表达PER1蛋白以后,BEL-7402接受5 Gy X射线照射后凋亡明显增多,同时,western blot和RT-qPCR试验结果发现,X射线照射过表达PER1的BEL-7402细胞,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显降低,凋亡执行蛋白Caspase-3断裂明显增多。研究结果表明PER1蛋白的高水平表达可以促进X射线诱导的凋亡,增强肝癌细胞的辐射敏感性。     

X射线对植物细胞有丝分裂的作用

(1)用不同剂量X射线照射向日葵萌发种子,研究了照射后3—4日期间根端细胞有丝分裂频率的变化。结果证明50—1,000r的X射线这时对有丝分裂的活跃性仍有抑制作用,并且抑制的程度与照射剂量的大小成比例关系。 (2)用不同剂量X射线照射蚕豆萌发种子,研究了照射后12—13日期间根端细胞有丝分裂频率的变化。结果发现10r、50r、100r和300r照射各粗的有丝分裂频率都超出对照组,其差别均达到统计学上可以置信的程度。通过对有丝分裂各期出现频率的比例的分析,说明10—300r各照射组有丝分裂指数的升高并不是由于中期或后期时间拖长的结果,而是有丝分裂频率的真正提高。另外通过分析照射后12—13日一昼夜间六个不同时间有丝分裂频率的变化情况,说明10—300r各照射组有丝分裂频率的升高并不是由于补偿效应,而是有丝分裂活跃性真正得到促进。 700r照射组的蚕豆细胞有丝分裂频率显著低于对照组。 (3)根据上述实验结果可以看出,一定剂量范围的X射线对细胞有丝分裂的活跃性有促进作用。这种促进作用是照射后比较远期的效应。在蚕豆被照射后12—13日期间我们看到了这种促进作用。     

辐射对大鼠肺巨噬细胞Fc受体表达和特异吞噬功能的影响

以往的实验表明,巨噬细胞(Macrophages简称Mф)对一定辐射剂量内的照射表现出较强的辐射抗性。因此学者们转向研究照射后时间依赖性的Mф损伤变化。这主要是涉及照射后所致的迟发损伤效应。有关大剂量照射后,短时间观察Mф损伤效应的研究报道甚少。为此本文观察了大鼠肺巨噬细胞(AlveolarMacrophages简称AM)在体外受100—500 Gy     

电离辐射对血管内皮细胞骨架蛋白F-actin影响的激光共聚焦显微镜观察

目的： 观察电离辐射对血管内皮细胞骨架蛋白F-actin影响,探讨血管内皮细胞电离辐射损伤的机理.方法： 用Co60 γ射线对体外培养的血管内皮细胞进行0、2、4、6、8、10、12 Gy照射,于照射后6小时后用激光共聚焦显微镜对其细胞骨架蛋白F-actin进行观察.结果： 细胞骨架蛋白F-actin随着辐射剂量的增加而解聚增加,这种变化呈剂量依赖性.结论： 电离辐射对血管内皮细胞骨架蛋白F-actin的破坏可能是血管内皮细胞辐射损伤机体机理之一.     

Co~(60)輻射甜菜种子效应的研究

随着新兴科学技术的飞跃发展,放射性同位素在甜菜上的应用逐漸引起重視。在报导上,应用低剂量的Co~(60)照射甜菜种子(种球),可以促进甜菜萌发、生长,提高块根产量和含糖率,并有提高抗病力、降低立枯病和斑点病罹病率的作用。在土壤中施入适当的鈷盐或用0.01—0.05％的鈷盐溶液进行根     

微波辐射对家兔血清蛋白的影响

本文报道微波辐射对家兔血清蛋白及血沉的影响。使用微波理疗机对家兔睾丸局部照射１５分钟，温度４２℃。在照射前４天和照射后７天、１４天、５７天从心脏取血，进行血沉、总蛋白、白蛋白、球蛋白的测定。结果表明，照后７天，总蛋白、白蛋白、球蛋白均有显著下降，１４天后有所回升，５７天后基本恢复照前水平。照后７天的血沉只有少许改变，可见微波辐射的组织和器官扔直接作用外，还对机体血浆蛋白质代谢产生一定影响。     

大剂量~(60)Co照射后残余造血干细胞增殖与分化性能的研究

本文报道了F_1小鼠经~(60)Co γ射线一次整体照射8.5 Gy后不同时间,骨髓CFU_s、GM-CFU_c、BMC、脾脏T淋巴细胞转化功能和外周血象的动态变化,以及对BFU-E、CFU-E进行了抽样检测。结果表明,照射后各项指标均呈指数级锐减,但下降幅度依各自不同的辐射敏感性而异。恢复的先后顺序是:BMC数和外周血象经过1个月即达正常;GM-CFU_c和CFU_s于2—4个月后逐渐恢复原来的数量;淋转功能直至3个月末仍为对照值的55%。应用Ara-C自杀率测出照射后CFU_s的增殖率持续高于正常,3个月末才回复常态。针对临界全致死剂量γ射线照射对小鼠造血细胞动力变化过程的观察,以及对残余造血干细胞增殖与多向分化能力的影响进行了分析和讨论,以期全面地揭示造血功能辐射损伤的基本规律。     

UV-B辐射对小麦叶片蛋白的影响

为研究增强的UV-B辐射对植物的影响,选取了生长于中国北方的经济作物冬小麦为研究对象,采用双向电泳的方法,分析了经UV-B辐射后小麦叶片蛋白的变化。结果显示,经UV-B辐射后,第4天、第8天的小麦叶片蛋白变化明显,双向电泳图谱显示发现15个蛋白差异点;通过质谱鉴定了3个蛋白差异点,分别为铜/锌过氧化物歧化酶、钙调素、Rubiso大亚基结合蛋白α亚基。结果表明增强的UV-B辐射可以通过调节小麦叶片基因编码蛋白而调节植物生长。     

家蚕蛹期雌雄生殖腺蛋白质双向电泳比较分析

分析家蚕Bombyx mori雌雄生殖腺细胞蛋白质,有利于发现性别分化相关的功能蛋白质,探讨生殖腺发育相关基因的表达调控机理。本研究利用蛋白质双向凝胶电泳和图像分析技术,分析家蚕蛹期第2天的雌雄生殖腺细胞蛋白质。结果表明: 在雄蚕生殖腺蛋白质电泳图谱中共检测到435个蛋白斑点,其中特异性蛋白斑点73个,占总蛋白斑点数的16.8％;雌蚕生殖腺的电泳图谱中有417个蛋白斑点,其中特异性蛋白斑点55个,占总蛋白斑点数的13.2％。雌雄能匹配的蛋白斑点有362对,匹配率达85.0％。     

铜锌超氧化物歧化酶的重组研究——Ⅱ.电离辐射对重组的影响

电离辐射对牛红细胞超氧化物歧化酶的铜锌重组产生重大影响。(1)去Cu、Zn后的酶蛋白(Apo-SOD)比天然酶(Holo-SOD)更容易遭受辐射的攻击,Cu~(2+)和Zn~(2+)的加入增强了Apo-SOD对辐射损伤的抵抗性。(2)照射后的Apo-SOD再加Cu~(2+)、Zn~(2+)重组,其酶活力的恢复受到抑制,抑制程度与照射剂量和剂量率有关。(3)·OH自由基清除剂甲酸钠对Apo-SOD的重组复活有明显的保护作用。(4)甲酸钠和过氧化氢酶共同使用,不仅保护了Holo-SOD的辐射失活,而且使辐射所引起的UV吸收增色效应消失,使照射后的Holo-SOD的CD图谱保持未经照射的天然酶的状态。     

X射线全身辐射对乌龟存活率的影响

利用X射线全身辐射对乌龟进行了抗辐射作用的研究,并用小鼠作参照.根据前人的研究资料,照射剂量选用6.5 Gy和15 Gy两个水平. 结果显示,乌龟受照射后,6.5 Gy剂量组60 d内无死亡;15 Gy剂量组从第16 d开始出现死亡,30 d内死亡率为20%,60 d内死亡率为70%.乌龟体重照射前后变化不大.小鼠受照射后,6.5 Gy剂量组第14d开始出现死亡,30 d内死亡率为30%,60 d内死亡率为80%:15 Gy剂量组第4 d出现死亡,第5 d死亡率达100%.研究结果表明,乌龟的抗辐射能力明显高于小鼠.     

紫外光对大白鼠红细胞膜 γ—射线损伤的恢复效应

本文研究了紫外、光对细胞膜γ—射线损伤的恢复作用。结果发现经γ—射线300Gy照射后再经紫外光照射5分钟的大白鼠红细胞悬浮液，不但不会加强细胞膜的损伤，反而对细胞膜有明显的恢复作用。经统计处理有显著差别（P＜0.05). 实验还进一步证明:红细胞悬浮液经γ—射线或紫外光照射后, 在低温中释放的血红蛋白量与照射剂量成正比关系.可作为辐射(包括电离辐射或非电离辐射)对细胞膜损伤的一个方便易行的检查指标.     

椰扁甲啮小蜂寄生后椰心叶甲蛹血淋巴蛋白质双向电泳图谱分析

分析昆虫被寄生蜂寄生后血淋巴蛋白质组分及组分含量变化,从蛋白质水平分析寄生蜂寄生引起寄主昆虫的生理变化,有利于探索寄生蜂调控寄主的机理。以椰心叶甲Brontispa longissima和椰扁甲啮小蜂Tetrastichus brontispae为研究材料,采用蛋白质双向电泳技术及图像分析技术分析了椰心叶甲蛹被椰扁甲啮小蜂寄生后不同时期血淋巴蛋白质图谱及其变化情况。结果表明:寄生后0.5, 1, 2, 3和4 d,被寄生蛹血淋巴共检测到的蛋白斑点数分别为982, 926, 712, 636和680个,其中特异性蛋白斑点的数量分别为650, 400, 336, 229和150个;同期未被寄生蛹血淋巴共检测到的到的蛋白斑点数分别为645, 817, 640, 873和940个,其中特异性蛋白斑点的数量分别为313, 291, 264, 466和410个;被寄生蛹和同期未被寄生蛹能匹配的蛋白斑点分别为332, 526, 376, 407和530对。被寄生蛹血淋巴蛋白斑点数量的异常变化表明寄主的生理功能受到了严重的影响。     

军事医学科学院放射与辐射剂量学研究进展与展望

本文系统介绍了60年来军事医学科学院放射与辐射医学研究所从防原医学至放射与辐射医学研究各个阶段辐射剂量学研究的主要情况,包括核试验剂量保证、生物效应照射实验条件及剂量学方法的建立、事故照射剂量重建技术、辐射防护学及其剂量评价、医疗和诊断剂量学、辐射加工剂量及辐照工艺、辐射剂量测量技术、核设施事故剂量学、辐射剂量标准、微波剂量学等所获得的成果和经验,在此基础上,对该所辐射剂量学发展方向和研究重点进行了分析和论述.     

^60钴—r射线辐照灭菌对蛇毒抗栓酶粉针剂质量及药效影响的研究

用~(60)钴—r 射线对蛇毒抗栓酶冻干粉针剂进行辐射灭菌,效果显著.经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别、酶活性分析等项目的检测.分别比较了辐射前后蛇毒抗栓酶的质量,证明在3×10~5r 伦琴照射剂量以内,其物理化学性质不改变.动物实验表明,对药效也无影响,适用于本品的灭菌。可弥补生物制品酶制剂在高温条件下灭菌时,酶易失去活性的不足.     

高畸形率水牛精子与正常水牛精子差异表达蛋白的分离和鉴定

旨在分析高畸形率和正常水牛精子的差异表达蛋白.运用双向凝胶电泳以及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分析鉴定出高畸形率和正常的水牛精子的差异表达蛋白,并对部分蛋白进行生物信息学分析.结果显示,高畸形率和正常水牛精子之间存在16个表达差异明显的蛋白点,与正常水牛精子相比,5个蛋白斑点表达量上调,6个蛋白斑点下调,3个蛋白斑点缺失,2个蛋白斑点在畸形率高的水牛精子特有.质谱鉴定16个差异蛋白,成功鉴定出6个差异蛋白斑点,对应4种蛋白:左旋天冬酰胺酶、热应激蛋白β-9、半乳糖激酶、β-微管蛋白-2C.研究表明,高畸形率和正常水牛精子蛋白质表达存在一定的差异.     

SARS康复患者血浆蛋白谱的双向凝胶电泳分析

以蛋白质双向凝胶电泳（2-DE）比较了不同中和抗体效价的SARS康复患者血浆样本（试验组）与正常人单采血浆样本（对照组）蛋白谱的异同。结果显示：对照组9份样本的2-DE 图谱出现蛋白斑点338±24个,试验组9份样本出现蛋白斑点348±45个,二者主要斑点的位置与数量基本一致;对照组中少量蛋白斑点的出现频度不同,且有4个蛋白点群的灰度值存在明显的差异;试验组有6个蛋白点群与对照组出现差异,并在相同区域Ⅲ内有4个蛋白斑点的灰度值出现变化,且灰度值与样本的中和抗体效价呈正相关性。结果表明,试验组与对照组的蛋白谱存在差异,且与SARS病毒中和抗体效价呈现相关性。