黄道蚜蝇螺原体的分离及其基本生物学特性

摘要：【目的】调查我国部分昆虫螺原体的存在情况,收集我国的昆虫螺原体资源,并研究它们的基本生物学特性,初步确定其分类地位。【方法】螺原体分离、培养方法,应用暗视野显微镜和透射电子显微镜观察螺原体形态,根据16S rDNA构建系统发育树研究螺原体分离菌株可能的分类地位。【结果】从黄道蚜蝇昆虫体内分离到螺原体YY0801,并对其进行了形态学、基本生物学及分子生物学特性研究。分离菌株在R2液体培养基中生长良好,能通过孔径为0.22 μm、0.45 μm的微孔滤膜;在R2固体培养基上呈颗粒状菌落;在对数期呈典型的螺旋状;能利用葡萄糖、D-果糖作为碳源;能强烈代谢精氨酸;不能利用尿素,在含氨苄青霉素钠(2000 U/mL)的R2液体培养基中生长良好。根据16S rDNA构建的系统发育树显示,分离菌株YY0801与血清组Ⅰ的Spiroplasma melliferum 聚类较近。【结论】首次在国内从食蚜蝇科中的黄道蚜蝇（Phytomia zonata）分离到螺原体,分离菌株YY0801可能是Spiroplasma melliferum,但其确切的分类地位需要进行血清学进一步分析。     

牛虻螺原体的基本生物学特性

【目的】通过分析分离自牛虻体内的螺原体NM1108-1和NM1108-5的基本生物学特性,了解分离菌株可能的分类地位,为进一步研究螺原体与宿主的相互作用提供信息。【方法】运用常规方法分离培养牛虻螺原体,利用暗视野显微镜和透射电镜观察分离菌株的形态特征,结合其生理生化特性及系统发育学特性研究初步确定分离菌株的分类地位。【结果】从牛虻中分离到大量螺原体,以其中两个代表性的菌株NM1108-1和NM1108-5为主要研究材料,在暗视野显微镜下观察其形态均呈螺旋状,做翻滚式运动;两者都能利用葡萄糖、果糖、蔗糖作为碳源,不利用尿素和精氨酸,对四环素比较敏感,对青霉素不敏感;系统发育树显示,分离到的牛虻螺原体菌株NM1108-1和NM1108-5属于Apis一支但属于不同亚支,NM1108-1与S.turonicom聚为一支;NM1108-5与S.gladiatoris聚为一支。【结论】两株牛虻螺原体NM1108-1和NM1108-5的分类地位分别初步被确定为S.turonicom和S.gladiatoris,这是首次报道我国牛虻体内的螺原体。     

分离自我国蜜蜂的一株新的致病螺原体及其基本特性

【目的】通过分析分离自我国患病蜜蜂体内的螺原体MF1006的基本生物学特征,初步确定其分类地位及致病性。【方法】应用暗视野显微镜和透射电子显微镜观察螺原体形态,运用常规螺原体分离和培养方法、分子生物学方法和血清学方法研究螺原体分离菌株可能的分类地位,并采用饲喂接种法研究其致病性。【结果】菌株MF1006具有典型的螺旋形和运动性,能通过0.22μm孔径的滤膜,与我国之前发现的引起蜜蜂螺原体病的参比菌株Spiroplasma melliferum CH-1的基本生物学特征差异较大。S.melliferum CH-1抗血清对其没有抑制作用。根据16S rDNA、ITS序列构建系统发育树显示,菌株MF1006与在法国发现的引起蜜蜂"五月病"的Spiroplasma apis的亲缘关系最近。此外,菌株MF1006对供试意蜂有较强的致病性。【结论】分离菌株MF1006是在我国蜜蜂体内发现的除S.melliferum以外的另一种致病螺原体。     

蜜蜂螺原体的分离鉴定及致病性研究

从患"爬蜂病"的蜜蜂体内分离到一株螺原体M10,具有典型的螺原体形态和运动性,能透过0.22μm孔径的滤膜,在含青霉素浓度为2000U/mL的R-2培养基中生长良好。该菌株生长需要血清,能利用葡萄糖、精氨酸、不能利用尿素,其16S rDNA序列与Spiroplasma melliferum BC-3(=ATCC33219)同源性为99.86%。通过饲喂菌液的方式,发现供试蜜蜂4d开始出现"爬蜂病"病症,15d内71%的蜜蜂死亡,说明M10对蜜蜂具有较强的致病性,且感染致死的蜜蜂体内螺原体的分离率为100%,利用螺原体特异性16S rDNA引物在感染致死的蜜蜂的不同部位(头、胸、腹、足)均能扩增出螺原体16S rDNA,反映了螺原体对蜜蜂的系统性侵染。     

分离自蜜蜂(Apis mellifera)的三株螺原体的基本特性

【目的】调查我国蜜蜂螺原体的种类,研究它们的基本生物学特性,初步确定其分类地位,为研究螺原体在自然界中的传播途径提供依据。【方法】螺原体的分离、培养方法,应用暗视野显微镜和透射电子显微镜观察螺原体形态,运用分子生物学方法(选16S rDNA、ITS、rpoB基因进行系统发育分析)和血清学方法(生长抑制试验、代谢抑制试验、菌体变形试验)研究螺原体分离菌株可能的分类地位。【结果】从健康的意蜂(Apis mellifera)体内分离到3株螺原体MF0903、MF0904、MF0905。3株螺原体都呈典型的螺旋状,但菌株MF0905的菌体短小,螺旋数较少;MF0903和MF0904菌落呈规则的圆形,MF0905菌落近圆形、较大;它们都能利用葡萄糖、D-果糖作为碳源,不能利用尿素;菌株MF0903、MF0904能强烈代谢精氨酸、不能利用蔗糖作为碳源,而MF0905不能代谢精氨酸、能利用蔗糖作为碳源;根据16S rDNA、ITS、rpoB基因序列构建系统发育树显示,分离菌株MF0903、MF0904与Spiroplasma melliferum聚类较近,而MF0905与Spiroplasma clarkii聚类较近。生长抑制试验、代谢抑制试验、菌体变形试验结果均表明标准菌株Spiroplasma melliferum CH-1的抗血清对菌株MF0905没有抑制作用,而能抑制菌株MF0903和MF0904生长。【结论】分离菌株MF0903、MF0904属于Spiroplasma melliferum,而MF0905可能是Spiroplasma clarkii,这表明我国蜜蜂中存在的螺原体不仅仅是Spiroplasma melliferum。     

蜜蜂螺原体细胞骨架相关基因mreB的克隆表达及在螺原体二种形态时的表达差异

【目的】在大肠杆菌中克隆表达蜜蜂螺原体细胞骨架相关基因mreB1?5,并预测所编码蛋白的理化性质,分析这些基因在螺原体螺旋状和非螺旋状时的表达水平,为进一步分析该基因的功能奠定基础。【方法】通过PCR扩增,从Spiroplasma melliferum CH-1基因组中获得mreB1?5基因,构建的重组表达载体pETmreB1?5分别在大肠杆菌BL21中诱导表达,利用镍亲和树脂纯化重组蛋白,通过在线工具预测MreB蛋白质的理化性质和功能域。利用Real-Time PCR比较螺原体CH-1在两种不同形态时mreB1?5基因的表达量。【结果】成功克隆到5个mreB基因,并在大肠杆菌BL21中高效表达。MreB蛋白分子量分别为36、23、23、37和25 kD,可能均为疏水性的蛋白,属于MreB/Mbl蛋白质家族。荧光定量PCR结果显示,螺原体在非螺旋状时mreB1?5基因的表达水平均远低于在螺旋状时基因的表达水平。【结论】本文第一次克隆表达了螺原体细胞骨架相关基因mreB1?5,初步表明这些基因在螺原体形态方面可能具有重要作用,为后续研究螺原体mreB基因在其运动和形态方面的功能提供了重要信息。     

太白山5种杜鹃属植物叶片光合特性及解剖结构的生态适应性研究

对分布于太白山海拔2 000～3 700 m的5种杜鹃属植物的叶片光合特性和形态解剖结构进行了研究.结果显示:头花杜鹃分布于高山灌丛,光饱和点、光补偿点高,强光适应性好,耐荫性差;爬枇杷分布于3 000～3 400 m的太白红杉林下,光饱和点较低,光补偿点最高,利用强光能力较弱,生态幅较窄;金背杜鹃、药枇杷、秀雅杜鹃分布于2 000～3 200 m的红桦、牛皮桦林下,光补偿点低,耐荫性强,生态幅宽.在形态结构上,5种杜鹃的栅海组织比均远小于1,属耐荫植物.头花杜鹃叶表密被鳞片,栅栏组织发达,通气组织发达;爬枇杷栅栏组织发达,排列紧密;金背杜鹃叶下表皮密被毛,气孔密度最高,海绵组织排列疏松;秀雅杜鹃叶上下表皮密被鳞片;药枇杷的栅栏组织厚度最小,栅海组织比最低.研究表明,5种杜鹃属植物叶片结构特征的形成是对生境条件长期适应的结果.     

珍稀香辛植物山葵的生物学特性及栽培技术

山葵（ＥｕｔｒｅｍａｗａｓａｂｉＭａｘｉｍ）又名山嵛菜,为十字花科多年生草本半阴生植物,原产中国和日本,其根状茎磨成粉,会产生特殊芳香的辛辣味,具有强烈的杀菌和助消化功能,还能促进淀粉性食物的消化及稳定肠胃中维生素Ｃ的功能,在日本及东南亚,山葵是鲜食...     

光合细菌H3菌株的分离及其生物学特性研究

H3菌株系由盐田微生物垫中分离获得的光合细菌株。革兰氏阴性杆菌,0.5-0.7×15-2.5μm,在培养条件改变时呈多形态,其膨大细胞可达4.0-7.0μm.单根极生鞭毛,二均分裂。菌落及液体培养物呈深紫红色。菌体蛋白质含量约50%,各种必需氨基酸齐全,并含有丰富的细菌叶绿素a和类胡萝卜素。H3菌株在光照和黑暗条件下均可生长,能利用多种有机和无机碳、氮源,并能固N2.在含0.5-7.0%NaCI培养基中均可生长。但光照、盐浓度、温度、pH和通气等条件对其生长量有明显的影响。作者对其分类地位和应用潜力作了讨论。       

Tissue-specific infection dynamics of male-killing and nonmale-killing spiroplasmas in Drosophila melanogaster

The male-killing spiroplasma strain NSRO causes an extremely female-biased sex ratio of the host, Drosophila melanogaster, as a result of selective death of male offspring during embryogenesis. The spiroplasma strain NSRO-A, a variant of NSRO, does not cause such symptoms. In an attempt to gain insights into the mechanism underlying the symbiont-induced reproductive phenotype, infection densities of the spiroplasmas in different tissues were monitored during host aging using a quantitative PCR technique. The density dynamics in the hemolymph were reminiscent of those in the whole body, whereas the density dynamics in the fat body, intestine and ovary were not. These results suggest that the majority of the spiroplasmas colonize and proliferate in the hemolymph of the host. In the hemolymph and whole body, the infection densities of NSRO were generally higher than those of NSRO-A, which may be related to the different reproductive phenotypes caused by the spiroplasmas.     

醇化烟叶酵母菌分离鉴定及其生物学特性研究

采用涂布培养法和富集培养法对醇化烟叶样品中酵母菌进行了分离,富集培养法分离到23株,涂布培养法分离到6株。29株酵母菌的生物学特性研究表明,其中果胶酶、蛋白酶、淀粉酶、脂酶、纤维素酶、酚类利用、木质素利用、尼古丁降解、发酵产物气味等试验呈阳性的菌株数分别是1、10、0、3、10、22、1、21和29株。利用ATB系统,将ATY1、ATY8和ATY27等3株酵母菌分别鉴定为黏红酵母(Rhodotorula glutinis)、罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)和粗壮假丝酵母(Candida valida),各菌株鉴定结果的符合率分别为99.4%、98.2%和89.9%。研究结果表明,醇化烟叶中酵母菌种群数量较小,但酵母菌的生物学特性有利于烟叶醇化,值得进一步深入研究。     

切花月季生物学特性的研究

对江苏常州引进的 2 6个切花月季品种的物候期、花枝生长、开花特性及适应性等作了详细的观测记录 ,为今后切花月季的引种栽培提供科学的依据     

大叶相思的生态生物学特征

通过对大叶相思的生态生物学特征研究表明：大叶相思在我国热带、南亚热带各种类型土壤上及水土流失地区均能正常生长,冬季的低温是其主要限制因子;大叶相思叶片的光合速率高,纯林的垂直结构合理,生产力高,可以作为速生丰产林加以推广;在营造大叶相思混交林时,需注意其喜阳性和根系浅的特性;大叶相思林的根瘤生物量大,固氮力强,凋落物多,且营养元素的循环快,具有较好的改良土壤结构、提高土壤肥力和保持水土的作用;虽然大叶相思树干的生物量高,但其干形差,用材率不高,需加强修枝和直干形种类的研究和推广。     

接种番茄斑萎病毒番茄植株对西花蓟马生物学特性的影响

西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pergande)是我国的一种重要入侵害虫。本文研究了西花蓟马在番茄3种处理(健康CK、机械接种番茄斑萎病毒MI、机械损伤MD)叶片上的生长发育、存活及种群增长。结果表明:健康、机械接种番茄斑萎病毒、机械损伤叶片上的发育历期依次为12.68、12.99和11.79d。雌雄成虫寿命和雌虫繁殖能力在各处理叶片上差异不显著(P>0.05)。健康、机械接种番茄斑萎病毒、机械损伤叶片上的内禀增长率依次为0.1362、0.1526和0.1292d-1。本研究表明,接种番茄斑萎病毒的番茄叶片未缩短西花蓟马发育历期,也不能延长寿命及提高产卵量,不能明显加速种群数量增长。这意味着番茄斑萎病毒对西花蓟马在番茄叶片上的生物学特性未能产生明显的有利作用。     

白网籽棕的引种及生物学特性观察

白网籽棕树形优美,老叶浓绿向下弯曲,新叶暗红,观赏效果颇佳。本文介绍西双版纳热带植物园引种的白网籽棕的形态特征、生物学特性、适应性及观赏利用价值。     

Photosynthetic characteristics and productivity of spring rape plants as related to crop density

Optimal density of spring rape (Brassica napus L.) crop stand was determined by plant photosynthetic characteristics at the beginning of flowering. As crop density increased from 100 to 350 plants/m², leaf surface index (LSI) of the crop was found to increase by 18.2–80.2%, and LSI decreased by 38.8–67.3% as compared with the sparsest crop (50–100 plants/m²). LSI depended on the rate of incident PAR reaching 0.5 and 0.25 heights of the crop stand and to the soil surface. When crop density increased from 100 to 350 plants/m², the photosynthetic potential (PP) of the crop increased 1.8 times as compared with the sparsest crop. PP of the densest rape crop stand was 3 times lower than in the sparsest crop. When the crop density increased from 100 to 250 plants/m², the daily increment in biomass calculated per leaf surface unit increased by 27.0% as compared with the sparsest crop and depended on LSI. When leaf area decreased, the daily increment in biomass calculated per leaf surface unit declined; in the densest stand, this characteristic was by 58.3% lower than in the sparsest crop. Rape productivity at the flowering stage depended on the crop density, LSI of plants, rate of PAR reaching 0.5 and 0.25 heights of the crop stand and to the soil surface, PP, and the daily increment in biomass calculated per leaf surface unit. Crop productivity at the flowering stage and the rape seed yield were associated by a significant parabolic relationship. When crop density increased from 100 to 350 plants/m², seed yield per plant considerably decreased (by 33.1–78.5%) as compared with the sparsest crop. The greatest influence on seed yield per plant was exerted by LSI and the daily increment in biomass calculated per leaf surface unit. When crop density increased to 250–300 plants/m², the seed yield considerably rose (by 28.6–58.8%) as compared with the sparsest crop; when this index reached 300–350 plants/m², the seed yield decreased because plant growth was suppressed, with the productivity reduced. The results thus obtained suggest that the photometric characteristics of spring rape were at optimum at crop density of 100–250 plants/m². The agroclimatic conditions of Lithuania ensure potential for rapid accumulation of total biomass and high seed yield.     

血清白蛋白的生物学特性研究进展

人类血清白蛋白是单链、多结构域的大分子物质,是血浆中含量最丰富,也是人体中很重要的。一种蛋白质。白蛋白有77个结合配体的位点,能与一系列内源性和外源性物质相结合,起着存储和转运的作用。此外,白蛋白还具有维持血液正常的渗透压、抗氧化及参与炎症反应等一系列的生理和药理学功能。在临床上,白蛋白的应用已有50多年的历史,主要应用于中风、烧伤、低白蛋白血症等。回顾了近年来相关文献,就白蛋白的生物学特性作一阐述。     

斑翅食蚧蚜小蜂的生物学特性

斑翅食蚧蚜小蜂Coccophagus ceroplastae是橡副珠蜡蚧Parasaissetia nigra的重要内寄生蜂。对斑翅食蚧蚜小蜂的形态特征进行了描述,在实验室条件下观察了斑翅食蚧蚜小蜂的行为、发育、存活、繁殖等生物学特性。结果表明:斑翅食蚧蚜小蜂幼虫分3龄,完成一个世代需21-26d。卵巢左右成对,各由3条卵巢管组成,为发育成熟型,成虫期补充营养和发育时间对抱卵量的影响不明显。羽化后即可进行交配,交配时间2-3s,雄蜂有竞争交配行为,交配对雌蜂产卵有显著刺激作用。产卵行为有寻找、寄主检查、产卵器刺探、产卵、产卵针拔出等步骤,存在过寄生现象。羽化主要是在08:00-10:00,温度、相对湿度、光照对其羽化节律均有影响,温度升高羽化提前,且相对集中;相对湿度在20%-90%范围内,随湿度的升高成虫羽化高蜂延后;而光照时间过长或过短均可使斑翅食蚧蚜小蜂的羽化相对分散。随着温度的升高,雌成蜂的寿命逐渐缩短;补充营养能延长成虫寿命,取食10%蔗糖的寿命最长,清水和无补充营养寿命短。     

弯齿琵甲生物学特性的研究

弯齿琵甲BlapsfemoralisFischer Waldheim在宁夏银川2年发生1代。以成虫和不同龄期的幼虫越冬,3月下旬至1 0月上旬产卵,卵期1 2～1 5d ;幼虫一般为1 1龄,幼虫期3 2 0～490d ;越冬幼虫于次年6月下旬至9月上旬化蛹,蛹前期1 2～1 8d,蛹期1 8～2 5d;羽化成虫经2 0 0～2 60d性成熟开始交配产卵。食性杂,不喜光,活动有明显的节律性。成虫具有利用防御腺进行自卫的特性,防御腺分泌物可为医学提供天然的药物。幼虫各项营养成分较高,是一种很有开发价值的资源昆虫。