树脂包埋半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中的应用

目的探讨半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中的应用,寻找一种视神经形态学研究和疾病诊断的有效方法。方法健康Sprague-Dawley大鼠视神经分别行树脂包埋制成半薄切片与石蜡包埋制成石蜡切片,分别采用HE、甲苯胺蓝染色及髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫组织化学方法染色,光学显微镜下观察并比较半薄切片与石蜡切片染色结果的差异。结果石蜡切片HE和甲苯胺蓝染色均显示视神经髓鞘不着色,MBP免疫组织化学染色示MBP阳性着色较重,着色较紊乱,髓鞘着色不清晰。半薄切片HE及甲苯胺蓝染色均显示髓鞘呈环形,着色清晰,颜色对比鲜明;MBP免疫组化染色结果可见髓鞘呈环形,非特异性染色不明显,阳性对比显著,可清晰显示髓鞘结构。结论半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中优于石蜡切片,可用于视神经疾病的诊断和研究。     

早期心肌缺血与梗死后肌钙蛋白和肌红蛋白的观察

目的：观察早期心肌缺血（可疑）与梗死心肌细胞内肌钙蛋白（CTnT）、肌红蛋白（Mb）的变化情况.方法：应用H.E染色和免疫组织化学技术分别对6例正常心肌、11例早期心肌缺血（可疑）及9例梗死的心肌细胞内肌钙蛋白、肌红蛋白进行观察.结果：H.E染色正常组心肌未见异常;早期（可疑）心肌缺血组未见明显心肌梗死病灶;心肌梗死组见心肌梗死病灶.CTnT和Mb的免疫组织化学染色和图像分析显示,CTnT和Mb在正常组心肌的表达量明显高于早期（可疑）心肌缺血组和心肌梗死组（p＜0.05）.结论：CTnT、Mb免疫组织化学染色可用于早期（可疑）心肌缺血和心肌梗死的诊断.     

三种自动免疫组化仪的染色结果比较分析

目的 探讨常用Leica、Roche和Dako等3种常用自动免疫组化仪在免疫组织化学染色过程中的优缺点.方法 选取中山大学第一附属医院病理科在2021年4月期间进行免疫组织化学染色病例,抽取常用25种抗体进行评分,相同抗体在3种不同自动免疫组化仪的同时行免疫组织化学染色,染色结果由病理医生和技术质控员一起评议.结果 相...     

具有腺和神经内分泌双向分化及伴Paget样扩散的肛门癌合并腺癌1例并文献复习

目的 探讨1例具有腺和神经内分泌双向分化伴Paget样扩散的肛门癌合并腺癌的临床病理特征、组织学起源、诊断及鉴别诊断。方法 应用HE染色、免疫组织化学染色对重庆市中医院收集的1例肛门具有腺和神经内分泌双向分化的癌伴Paget样扩散合并腺癌进行临床病理分析,并进行相关的国内外文献复习,探讨其临床病理特征。结果 手术切除标...     

大鼠心肌梗死动物模型的制备

目的建立一种稳定可重复的大鼠急性心肌梗死动物模型。方法SD大鼠经口气管插管,呼吸机辅助呼吸,开胸结扎冠脉左前降支。术后28 d行心脏超声,血流动力学及组织病理学检查。结果大鼠术后存活率60%;手术组LVEF较假手术组显著降低（P〈0.01）;与假手术组比,手术组的LVSP明显下降（P〈0.05）,±dp/dt显著降低（P〈0.01）,而LVEDP明显升高（P〈0.01）;病理组织学检查可见瘢痕形成,纤维组织增生。结论本文建立心肌梗死动物模型的方法操作简便、重复性好。     

脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色的影响

目的:探讨脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色影响.方法:用不同脱钙液处理小鼠颅骨标本,组织切片后进行苏木素一伊红染色、甲苯胺蓝染色、醛品红染色以及免疫组织化学染色.结果:经过不同脱钙液处理后的颅骨组织切片组织结构保存完好,肥大细胞的组织化学染色(甲苯胺蓝和醛品红染色),及肥大细胞中胰蛋白酶的免疫组织化学染色清晰.结论:不同脱钙液(8%盐酸脱钙液、EDTA脱钙液、混合酸脱钙液)处理不影响鼻腔粘膜中肥大细胞的组织化学和免疫组织化学染色.     

实验动物心肌梗塞模型的建立和染色方法的改进

介绍了如何建立可靠稳定的心肌梗塞动物模型。通过应用常规病理苏木素－伊红（H.E)染色及改进的碱性复红－苦味酸（HBFP）组织化学染色,结果表明,在建立实验动物心肌梗塞模型时,操作规范、及时取材制片、选用改进的染色液和染色时间流程,即可证明心肌梗塞的发生。     

实验动物心肌梗塞模型的建立和染色方法的改进

介绍了如何建立可靠稳定的心肌梗塞动物模型.通过应用常规病理苏木素-伊红(H.E)染色及改进的碱性复红-苦味酸(HBFP)组织化学染色,结果表明,在建立实验动物心肌梗塞模型时,操作规范、及时取材制片、选用改进的染色液和染色时间流程,即可证明心肌梗塞的发生.     

免疫组织化学技术检测石蜡切片组织中BCG抗原的体会

为了进一步提高免疫组织化学技术在检测结核杆菌感染的组织中免疫牛型分枝杆菌 (ＢＣＧ)抗原的表达 ,我们收集了2 0例结核病变的组织标本。用不同的抗原修复方法比较和摸索 ,并采用抗酸染色做对照 ,比较抗酸与ＢＣＧ的结果及如何制作出较令人满意的免疫组织化学染色结果得出一点体会 :1 材料和方法1 1　病例 :收集我院手术切除的经病理组织学确诊的结核病变标本 2 0例 ,均经 10 %福尔马林液固定 ,石蜡包埋的组织标本。1 2　使用ＤＡＫＯ ,ＥｎｖｉｓｏｎＳｙｓｔｅｍ二步法试剂盒 ,兔抗牛型分支杆菌 (ＢＣＧ)多克隆抗体。1 3　不同的抗原修…     

23例皮脂腺癌的临床病理观察及文献复习

目的研究和分析皮脂腺癌的临床病理特征及诊断要点。方法搜集我院从2013年1月至2017年12月诊断的23例皮脂腺癌,研究其发病部位、年龄、性别等临床特征,运用组织学和免疫组织化学染色对其组织学形态、免疫组织化学表型特征进行分析,并进行随访和复习相关文献。结果 23例皮脂腺癌有17例(73.9%)发生于眼周,中位年龄66.5岁,男女患病比例约相等。23例皮脂腺癌镜下分化程度不一,但均可见巢状或条索状分布的典型病变区域,其内中央区皮脂腺样细胞外包绕基底样细胞,具有不同程度的异型性,免疫组织化学EMA、AR等可辅助诊断,但缺乏特异性指标。随访至今其中6例患者出现了局部复发或淋巴结转移。结论皮脂腺癌是一种少见的具有一定侵袭性的恶性肿瘤,早期诊断对降低复发率和转移率有一定帮助,需要病理医生深入了解其临床病理特征,避免漏诊和误诊。     

建立小鼠心肌梗死模型的研究

目的建立心肌梗死小鼠模型。方法40只昆明小鼠,PTCA导丝逆行引导下气管插管,人工呼吸,采用开胸结扎左冠状动脉前降支方法造成心肌梗死。结果40只小鼠成功行左前降支结扎术;术后1天存活小鼠38只,术后2周存活32只。结论此方法可有效模拟心肌梗死的发生。     

大鼠心肌梗死模型的建立及梗死后心电生理和左室功能的变化

目的建立具有稳定性高,重复性强,存活时间长的大鼠心肌梗死模型,探讨采用心电图（ECG）和心脏超声心动图（UCG）监测心梗后心电生理和左室功能变化的可行性。方法Wistar大鼠经10%水合氯醛麻醉后,气管切开插管及连通呼吸机,开胸后结扎冠状动脉左前降支。于手术后4、8和12周行ECG检测和UCG检查,术后12周取出心脏行病理检查。结果采用本法建立大鼠心肌梗死模型,术后72h内大鼠存活率为83.3%,术后12周以上大鼠存活率为73.3%。术后48、和12周ECG监测示心梗后PR间期,QRS时限,QT间期和QTc间期均较假手术组延长,同期行UCG监测示心梗后左室舒张末期内径和左室收缩末期内径显著增加,左室射血分数值和左室短轴缩短率值显著降低,12周后组织病理HE染色符合慢性心肌梗死的病理改变。结论本技术操作简单、创伤轻、成功率高,术后采用ECG和UCG可有效监测心梗后不同时期心电变化和左室功能变化。     

二维斑点追踪技术评价犬心梗后自体骨髓CD34＋干细胞移植对心肌功能的影响

目的应用二维斑点追踪成像超声心动图（2D-STE）,评价犬心梗后自体骨髓CD34＋干细胞移植对心肌功能的影响。方法 12只杂种犬行冠脉左前降支结扎术,导致前壁心肌梗死,随机分为两组,A组为对照组,结扎术后两周二次开胸手术,经心肌注射磷酸盐缓冲液（PBS）1 mL;B组为治疗组,结扎术后两周二次开胸手术,经心肌注射含自体骨髓CD34＋干细胞的磷酸盐缓冲液1 mL。应用STE对12只犬结扎术前、术后左室短轴基底段及心尖段心室节段径向应变（RS）、圆周方向应变（CS）以及局部心肌旋转（Rot）进行分析,并对对照组和治疗组治疗后的RS、CS及Rot变化进行比较。结果心肌梗死后梗死节段的RS、CS以及Rot均下降,治疗后治疗组梗死段RS及Rot较对照组好转。结论 STE能够评价左室短轴局部心肌的收缩功能,心肌梗死后梗死段短轴各方向应变减低,自体骨髓CD34＋干细胞移植能够提高局部心肌的收缩功能。     

大鼠心肌梗死模型构建和评价方法的改良

目的 优化和改良大鼠心肌梗死模型的构建和评价方法,提高模型的可靠性和稳定性.方法 取雄性SD大鼠结扎左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,在模型的构建过程中从麻醉、插气管、保温、手术操作、术后护理等环节进行优化和改进,并观察不同的麻醉方法和术后时间对心肌梗死程度的影响,用不同的染色方式进行心肌梗死模型的评价.结果 对比大鼠心肌梗死模型构建过程中各组大鼠麻醉时间、术后恢复以及心肌梗死面积的结果,戊巴比妥钠是更合适的麻醉药;结扎手术后时间对模型心肌梗死范围无明显影响（P＆gt;0.05）,但心肌缺血危险区面积随术后时间的延长明显减少（P〈0.01）;TTC与依文思蓝双重染色相对TTC染色能明显观察到心肌缺血危险区和梗死区范围.结论 优化和改进后的大鼠心肌梗死模型,提高了动物福利,制备和评价方法更加客观准确.     

蓝莓花色苷预处理对大鼠心肌梗死的保护作用

目的观察蓝莓花色苷（blueberryanthocyanin,BBA）预处理对实验性急性心肌梗死大鼠心肌梗死面积,心肌肌钙蛋白-T（cTn-T）表达,Bax、Bcl-2mRNA表达的影响,探讨其干预心肌梗死的机制。方法40只Wistar大鼠随机分为假手术组,心肌梗死模型组,BBA低、中、高剂量组,药物干预4周,末次给药30min后结扎左冠状动脉前降支建立心梗动物模型。24h后,TTC检测心肌梗死面积;Westernblotting方法检测心肌细胞cTn-T蛋白表达;realtimePCR方法检测Bcl-2mRNA、BaxmRNA表达。结果模型组和假手术组相比,模型组心肌梗死面积显著升高（P〈0．01）,心肌细胞cTn．T蛋白表达下降（P〈0．05）,Bcl-2mRNA表达下降（P〈0．05）,BaxmRNA表达显著升高（P〈0．01）,Bcl-2／Bax比值显著降低（P〈0．01）。BBA干预给药组和模型组相比,中剂量组心肌梗死面积低于模型组（P〈0．05）,低剂量组心肌细胞cTn-T蛋白表达升高（P〈0．05）,中剂量组Bcl-2mRNA表达升高（P〈0．05）,低、中剂量组BaxmRNA表达下降（P〈0．05）,中剂量组Bcl-2／Bax比值升高（P〈0．05）。结论蓝莓花色苷对心肌梗死后心肌细胞具有明确的保护作用,其机制可能与减少心肌梗死面积,上调心肌细胞eTn-T蛋白的表达,上调Bcl-2mRNA表达、下调BaxmRNA表达,抑制心肌梗死后心肌细胞凋亡有关。     

小鼠心梗模型的建立与无创评价

目的建立小鼠的心肌梗死模型,提高动物存活率,并使用心脏超声进行无创心功能评价。方法昆明雄性小鼠20只,气管插管后由左侧第4肋间进胸,结扎冠状动脉左前降支建立小鼠心肌梗死模型,在模型建立的前1 d和术后1 d、1周分别使用心脏超声检测左室收缩末直径、舒张末直径、缩短分数和射血分数,并于术后第8天进行病理检查。结果小鼠心肌梗死模型建立过程中早期死亡率10%（2/20）,术后1周内死亡率15%（3/20）,经过超声评价,造模成功率为75%（15/20）。小鼠心功能明显下降,射血分数由手术前的（92.1±3.45）%下降到术后1周的（49.8±14.20）%,缩短分数由手术前的（61.4±2.85）%下降到（26.1±9.01）%;心室明显扩大,左室收缩末直径由（13.9±1.98）μm扩大到（36.5±7.37）μm,舒张末直径由（35.9±3.12）μm扩大到（48.9±6.05）μm。病理学检查见明显瘢痕形成。结论通过结扎冠状动脉左前降支的方法建立了小鼠心肌梗死模型并可以使用超声心动图评价这一模型。     

扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠心肌纤维化的影响

目的：急性心肌梗死是危害人类健康的重大疾病之一,心肌梗死后心肌纤维化是造成心脏结构破坏、心功能下降、心律失常发生、心衰甚至猝死的微观病理机制。防治心肌纤维化是当前医学研究的重点和热点。本研究主要探讨扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠心肌纤维化的干预作用。方法：大鼠随机分为假手术组、模型组、扶正化瘀胶囊组和卡托普利组,采用结扎冠状动脉前降支的方法建立心肌梗死模型,假手术组只穿线,不结扎。于造模成功后第10天开始给予相应药物治疗2个月。治疗结束后,检测左心室梗死范围和心肌胶原含量。结果：与假手术组比较,模型组、扶正化瘀胶囊组和卡托普利组的非梗死区面积显著减小（P〈0.01）。与模型组比较,扶正化瘀胶囊组和卡托普利组的梗死区面积和梗死百分比显著减小（P〈0.05,P〈0.01）。在心肌胶原表达上,与假手术组比较,模型组和扶正化瘀胶囊组胶原含量显著增加（P〈0.01）。与模型组比较,卡托普利组和扶正化瘀胶囊组胶原含量显著降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论：扶正化瘀胶囊能够改善心肌缺血,缩小心肌梗死范围,抑制心肌胶原表达,除能用于肝纤维化的治疗外,还能用于防治心肌梗死后的心肌纤维化。     

适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立

目的建立适用于Lansendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死的动物模型,为评价干细胞移植对急性心肌梗死后的心功能变化提供基础。方法选用Sprague-Dawley（SD）大鼠16只,结扎其左冠状动脉前降支中远1/3处,在结扎前后通过MPA多导生理记录仪连续描记心电图;4周后再次开胸进行Langendorff离体心脏灌流测定左室心功能和心肌组织病理学检查;另选仅开关胸后存活的10只SD大鼠作为对照组。结果造模成功率为62．50％（10／16）;心电图动态监测在冠脉结扎后出现ST-T抬高的融合波,30min后可见病理性Q波;4周后Langendorff离体心脏灌流装置系统检测显示左室收缩压峰值（LVSP）、左室内压等容相最大上升及下降速率（＋dp／dtmax,-dp/dtmax）等指标较对照组降低,左室舒张末压峰值（LVEDP）则反之;病理组织切片可见结扎区域心肌纤维排列紊乱、坏死心肌被纤维组织取代。结论通过结扎左冠脉前降支的方法,4周后能够形成稳定的适用于Langendorff离体心脏灌流的心肌梗死动物模型,该模型能应用于干细胞移植对心脏功能影响的研究。     

Direct delivery of syngeneic and allogeneic large-scale expanded multipotent adult progenitor cells improves cardiac function after myocardial infarct

BACKGROUND: Multipotent adult progenitor cells (MAPC) comprise interesting candidates for myocardial regeneration because of a broad differentiation ability and immune privilege. We aimed to compare the improvement of cardiac function by syngeneic and allogeneic MAPC produced on a large scale using a platform optimized from MAPC research protocols. METHODS: Myocardial infarction was induced in Lewis rats by direct left anterior descending ligation followed immediately by direct injection into the infarct border zone of either Sprague-Dawley or Lewis MAPC from large-scale expansions. Echocardiography was performed to evaluate improvement in cardiac function, and immunohistochemistry was performed to identify MAPC within the infarct zone. RESULTS: Significant increases were observed in functional performance in animals transplanted with expanded MAPC compared with saline controls, with no significant differences between the syngeneic and allogeneic groups. Immunostaining demonstrated significant engraftment of expanded MAPC at 1 day after acute myocardial infarction, with <10% of either syngeneic or allogeneic cells remaining at 6 weeks. At this point there was no evidence of myocardial regeneration. However, a significant increase in vascular density within the infarct zone in MAPC-transplanted animals was observed, and MAPC were found to produce high levels of VEGF in culture. DISCUSSION: These findings support a model in which delivery of expanded MAPC following acute myocardial infarction results in improvement in cardiac function because of paracrine effects resulting in vascular density increases, as well as potentially other trophic effects, supporting newly injured cardiac myocytes. Thus transplantation with MAPC may represent a promising therapeutic strategy with application in the stimulation of neovascularization in ischemic heart disease.