剪切力诱导微血管内皮细胞K~ 通道的开放

利用膜片钳及内皮细胞流动小室方法对大鼠脑微血管内皮细胞在剪切力作用下内皮细胞膜K 通道的开放进行了初步研究 ,结果提示脑微血管内皮细胞膜上存在剪切力敏感的K 通道 ,剪切力作用后 ,内皮细胞膜上K 电流明显增大 ,此电流有明显的短暂延迟现象 ,也可以被胞外施加的TEA抑制 ,符合IKv特征。流动剪切力可以通过影响内皮细胞膜上的K 通道的开放引起穿细胞的离子通透性的增加 ,进而引起细胞内Ca2 的变化。在K 、Ca2 等离子浓度改变的诱导下可以促使G -Actin装配为F -Actin。同时诱导内皮细胞内钙库调节机制的激活 ,这些变化都可以进一步引起细胞信号转导机制的激活。该工作为进一步开展剪切力对微血管内皮细胞信号转导机制的影响提供了实验数据。     

ERM蛋白在微血管内皮细胞通透性调控中的研究进展

埃兹蛋白(Ezrin)/根蛋白(Radixin)/膜突蛋白(Moesin)(ERM)是细胞膜与胞内骨架的连接蛋白,具有高度同源性。细胞外刺激因子可通过多种信号通路磷酸化ERM蛋白,使细胞骨架重构,从而调控微血管内皮细胞通透性,在感染、炎症、代谢异常等病理过程中发挥作用。ERM功能调节的一个重要环节就是其羧基末端苏氨酸残基磷酸化后引起ERM构象的改变,暴露的羧基末端尾部的肌动蛋白(actin)-细胞骨架结合位点;故通过ERM的桥接作用,可将肌动蛋白微丝与细胞膜相连,使血管内皮细胞屏障功能发生变化。目前已知能使ERM磷酸化的激酶有蛋白激酶C(PKC)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)、Rho相关激酶(ROCK),分别通过p38-MAPK、Rho/ROCK、PKC信号通路参与微血管内皮屏障功能的调控。本文旨在阐述ERM及其相关信号通路在微血管内皮细胞通透性调控中发挥的作用。     

肾上腺素能受体平衡与肺血管通透性关系的研究

本实验动态地检测了油酸所致大鼠肺血管通透性增高的发生、发展过程中肺组织中α、β肾上腺素能受体(αAR、βAR)的最大结合容量及亲和力的变化。结果发现:实验组大鼠肺组织中αAR与βAR之间的平衡遭到了破坏,αAR显著增多,而βAR却显著减少。应用αAR阻断剂——酚妥拉明或βAR激动剂——舒喘灵均可有效地防治油酸引起的大鼠肺血管通透性增高,使肺系数明显减小,支气管肺泡灌洗液中蛋白质含量明显减少,肺组织病变明显减轻。实验结果提示:肾上腺素能受体在肺微血管通透性的调控过程中可能起着重要的作用;肺组织中αAR与βAR之间的平衡失调可能是肺血管通透性增高的重要原因;纠正这种失衡是防治通透性肺水肿的有效手段。     

β-Catenin和p120的S亚硝基化:内皮高通透性的一种新的调控机制

<正>内皮粘着连接蛋白是调控微血管通透性的关键分子。血小板激活因子(platelet-activating factor,PAF)通过转运eNOS至胞浆并激活eNOS依赖的一氧化氮信号通路增加内皮对大分子物质的通透性。但是一氧化氮信号在粘着连接处调控内皮通透性的具体机制目前还不清楚。本文作者假设PAF是通过对粘着连接蛋白的S亚硝基化从而导致内皮高通透性。他们的研究结果发表在2012年8月17日在线出版的《循环研究》(Circulation Research)杂志上。文中,作者在ECV-eNOSGFP、EAhy926、毛细血管后微静脉内皮细胞三种细胞系以及在体小鼠睾提肌检测了PAF刺激的     

大鼠肺微血管内皮细胞培养及鉴定

取大鼠周边肺组织进行肺微血管内皮细胞培养。将肺组织切成小块,用含有２０％新生牛血清、肝素９０μｇ／ｍｌ、Ｌ－谷胺酰胺４ｍｍｏｌ、青霉素１００Ｕ／ｍｌ和链霉素１００μｇ／ｍｌ的ＲＰＭＩ－１６４０培养基培养。血细胞立即从肺组织周围游出。继而是肺微血管内皮细胞。成纤维细胞及其他细胞７２ｈ才游出。培养６０ｈ后取出肺组织块,培养瓶中只有微血管内皮细胞和血细胞。后者可通过传代除去。获得的肺微血管内皮细胞具有规律的鹅卵石样形态和对异植物血凝素结合试验及八因子相关抗原免疫荧光染色均阳性。     

剪切力对脑微血管内皮细胞骨架蛋白的影响

利用自行研制的细胞流动小室对大鼠脑微血管内皮细胞在剪切力作用下细胞骨架蛋白的结构改变进行了初步研究,结果提示脑微血管内皮细胞在剪切力作用下,细胞形态学发生明显改变,细胞间隙增大、皱缩、脱落,细胞骨架蛋白的结构也有类似的变化,骨架蛋白沿流动方向重新排列,微丝中Ｆ－Ａｃｔｉｎ的数量增加、变粗。这些改变的直接后果是内皮细胞通透性的增加。该工作为进一步开展剪切力对微血管内皮细胞功能、代谢等方面的影响提供了实验数据     

血管内皮细胞间紧密连接的研究进展

紧密连接是物质经旁细胞途径转运的结构和功能基础。近年来研究发现,在脑、视网膜、肺及肾等多个器官的微血管内皮细胞以及主动脉等大血管内皮细胞表达的紧密连接对维持血管稳态发挥了重要作用,一些细胞因子或环境刺激可通过调节紧密连接的表达、分布、结构和功能进而改变内皮通透性,从而影响血管及相应器官和组织的功能。本文重点综述了内皮细胞间紧密连接的研究进展,为防治与紧密连接相关的血管疾病提供新的思路。     

定量研究脑缺血及再灌注下微血管的通透性

利用示踪剂ＦＬＮａ在脑缺血及再灌注的动物模型上,通活体观察和测定血液、脑等脏 荧光强度,以及对软脑膜微血管荧光光图象的平滑处理与定量分析,研究软脑膜微血管的通透性,探讨脑缺血及再灌注对微血管通透性的影响及内在规律。实验结果表明：缺血、缺血及再灌注会引起微血管内皮细胞的损伤,导致微血管通透性增大,这种损伤一般发生在缺血或再灌注早期,早然各脏器微血管都受到损伤,但其荧光值不同,说明各脏器抗缺血与缺氧的     

蛋白激酶在微血管通透性中的作用

微血管内皮细胞层是一层半选择通透性屏障,可以调节血液中的液体、溶质和血浆蛋白进入组织间隙。在炎症刺激作用下,可通过旁细胞途径和跨细胞途径引起内皮通透性上升。旁细胞通路主要由内皮细胞间的紧密连接、黏附连接和细胞与外基质的黏着斑组成。炎症介质,如脂多糖和肿瘤坏死因子α可激活多种蛋白激酶。活化的蛋白激酶主要包括Rho相关的卷曲蛋白激酶、肌球蛋白轻链激酶、蛋白激酶C、酪氨酸激酶和丝裂原活化蛋白激酶等,参与引发内皮屏障生化和结构改变,旁细胞通路开放,导致通透性上升。该文对上述蛋白激酶在微血管通透性中作用机制的研究进展进行综述。     

流动剪切力对鼠脑微血管内皮细胞ICAM—1表达的影响

利用内皮细胞流动小室方法,对大鼠脑微血管内皮细胞的剪切力作用下细胞内粘附分子－1（ICAM－1,intercellular adhesion molecule-1）的表达进行了研究。图像分析结果提示,脑微血管内皮细胞在剪切力作用下ICAM－1的表达呈特异上调,且存在着时间依赖性,与一定范围内的剪切力强度无关,用对细胞施加剪切力作用后提取上清液孵育内皮细胞的方法证明：剪切力对鼠脑微血管内皮细胞ICAM－1表达的影响,是直接作用于内皮细胞引起的细胞内的直接反应,而不是剪切力导致细胞先释放细胞因子,释放的细胞因子再引起ICAM－1变化的间接反应。该工作为进一步开展剪切力对微血管内皮细胞信号转导机制的影响提供了实验数据。