实验用鱼遗传质量控制及标准化

在遗传学及其他生命科学研究领域, 实验用鱼已成为一类应用越来越广的实验动物, 但是尚缺少标准化的质量控制标准和监管。在我国, 实验动物实行严格的许可证制度和质量监督制度。实验用鱼遗传质量控制标准是实验用鱼质量控制的基础。为了规范实验用鱼的遗传质量, 避免实验用鱼种质退化、遗传漂移, 导致实验结果误差, 开展了本标准的研究。依据《实验动物管理条例》, 参考国内外实验用鱼遗传学相关的研究成果, 结合我国实验用鱼生产和使用的实际情况, 在全面收集、分析实验数据和广泛征询专家意见的基础上, 以实验用斑马鱼和剑尾鱼遗传质量控制为规范对象, 研究制定了实验用鱼遗传质量控制标准, 供科研工作者参考、讨论。本标准对实验用斑马鱼和剑尾鱼的遗传分类及命名原则、实验用鱼的繁殖方法、近交系和封闭群的遗传质量监测进行了规范。新标准将为实验用鱼的使用和管理提供理论支撑。     

实验用小型猪信息管理系统开发

为满足小型猪培育数字化管理需要开发的"中国实验用小型猪信息管理系统"由育种管理、饲养管理、群体监测和操作规程等14个模块组成,其中最具特色的部分是育种管理和群体监测模块。为确保数据库质量,育种管理模块创建了以级联表和单选框勾选、个体号和群体类型自动生成的个体信息录入方式;根据近交系和封闭群建系规则创建了自动配种模块,基于系谱生成配种计划表,结合发情记录、产仔记录等实现繁殖管理数字化。群体监测模块由生物学特性、微生物和寄生虫质量控制、遗传质量控制三个部分组成,是建立高品质实验用小型猪群体的信息保障。     

几种近交品系小鼠的毛色基因

生物医学研究的不断发展,要求提供各种基因型的近交系动物,用作试验模型。近交系动物具有遗传背景清楚,特性明确,基因纯合性较高等特点。国际上应用广泛。1975年第三版《国际实验动物索引》公布的近交系小鼠有388个品系。但尽管近交系动物的遗传性状相对稳定,在长期饲养过程中仍可能发生变异;也可能因为饲养管理的不慎而造成基因污染。所以饲养繁殖近交系动物时,必须定期进行遗传质量的监测,以确保近交系动物主要遗传特性的延续,使科学工作者能获得可靠的研究成果。     

长爪沙鼠的遗传多样性分析

利用17个微卫星DNA标记对Z:ZCLA长爪沙鼠封闭群、野生群和近交系进行遗传多样性分析, 评估群体内的遗传变异和群体间的遗传分化。结果表明：在Z:ZCLA封闭群和野生群中共有9个微卫星DNA标记获得稳定的结果, 分别为AF200940、AF200941、AF200942、AF200945、AF200946、AF200947、D11Mit128、PKC和 SCN, 共检测到41个等位基因, 每个基因的等位基因数从1～7不等, 片段大小在120～283 bp之间, 所有位点的平均期望杂合度(He)和多态信息含量(PIC)值分别为0.5032和0.4656, Z:ZCLA封闭群和野生群9个微卫星位点平均有效等位基因数分别为2.78和2.89, 平均基因杂合度分别为0.3704和 0.3893, 平均多态信息含量分别为0.3256和0.3344, 两个群体都表现为中度多态, Z:ZCLA封闭群较野生群稍低; 在3个近交系中共有8个位点获得稳定的扩增结果, 分别为AF200941、AF200942、AF200945、AF200946、AF200947、D11Mit128、PKC和 SCN, 共检测到11个等位基因, 片段大小在140~241 bp之间, 其中5个位点在群体内表现为单态纯合, 3个位点在群体内表现为单态杂合, 所有位点在群体内和群体间均呈单态性, 表明这3个长爪沙鼠品系基本符合近交系的要求, 微卫星标记技术适用于近交系长爪沙鼠的遗传检测。     

实验大鼠的生化多态性及在遗传监测中的应用

利用生化标记基因(biochemical markergene)对近交系小鼠的遗传纯度进行检测,目前已成为各国实验动物遗传监测的主要方法。随着大鼠在生物医学研究中应用的日益广泛,目前世界上育成的近交系大鼠数目已逾百个,我国近年来引进及自己育成的至少也有十几个品系。为了建立近交系大鼠遗传质量监测的生化方法,根据近年来国际上大鼠生化遗传学方面的进展,我们利用同工酶电泳方法,对Wistar等两个远交封闭群和ACI等两个近交系大鼠在九个生化位点的遗传多态性进行了检查,现报告如下:     

红鲫近交系的建立

目的应用人工雌核发育繁殖技术建立红鲫近交系.方法红鲫卵子被经紫外线照射的鲤鱼精子激活后,在0～4℃的温度下进行冷休克处理30min,再在常温下静水孵化;以红体色为遗传标记,在连续2代雌核发育子代中选择二倍体红鲫,放置水泥池中常规饲养;用同样的人工雌核发育繁殖技术进行保种,随机交配繁殖1～2代供应实验;用常规方法测量形态学指标.结果红鲫卵子激活率在91%以上;实验组2中摄食期仔鱼成活率为15.20%,80%的成鱼为二倍体红鲫,其中有较高比例的遗传上真实的雄性个体.鳞式主要为27(5)/(6)28;鳍式主要为D.i,17～18;A.i,6;V.i,7～8;P.i,15～16;C.24～25;其他外部形态指标与封闭群红鲫近似.结论本实验建立的人工雌核发育繁殖技术,设备要求简单,操作安全可靠,并且省时节资,完全能够用于培育鱼类近交系,本实验结果完全可以满足育种繁殖的要求;所获得的二倍体红鲫,经同工酶电泳等检测,被证实是纯合的,具备鱼类近交系品系特征;出现遗传上真实的雄性个体是正常的.     

麋鹿的配偶制度、交配计策与有效种群

模拟分析了繁殖群体大小、繁殖偏倚和占群优势雄性数目对麋鹿的有效种群大小的影响.发现麋鹿占群优势雄性数目越少,其有效种群越小.麋鹿的繁殖计策对遗传多样性的保存的作用十分有限.雄性繁殖后代数目的方差越大,繁殖群体的有效群体越小.近交系数在封闭繁育种群中会上升.麋鹿有效种群越大,近交系数上升越快.根据分析结果,为了保存麋鹿种群中现有的遗传多样性,应当采取如下措施：（1）建立麋鹿繁殖群的遗传谱系档案,检测参加繁殖的麋鹿的遗传结构,记录繁殖的麋鹿的谱系;（2）每个麋鹿繁育基地应建立两个以上的繁殖群,组成繁殖群时,应隔离亲缘关系近的繁殖公鹿和雌鹿;（3）由于麋鹿的繁殖系统是后宫制,组成的每个麋鹿繁殖群不宜太大,繁殖公鹿和雌鹿数目应尽可能相等;（4）组成迁地保护的奠基群体时,根据应根据麋鹿繁殖群的遗传谱系档案注意保留原种群的遗传多样性以及奠基群体的遗传代表性.     

三个近交系C57BL/6J小鼠群体微卫星遗传变异分析(英文）

应用微卫星遗传标记对近交系C57BL/6J(B6)小鼠遗传稳定性进行分析。用FAM标记的引物PCR扩增了来自北京和上海三个实验动物生产单位提供的三个B6小鼠群体共15个微卫星位点并进行分型。结果显示,所有位点均处于纯合状态,其中7个位点为多态位点。研究表明各B6群体虽然为高度近交群体,但不同生产单位维持的B6群体之间存在遗传分化。     

近交系小鼠的保种

随着生命科学的发展,近交系动物正在越来越广泛地用于实验工作。近交系小鼠在其繁育过程中,保种是个首要问题。除满足各近交系动物特殊饲养条件的要求外,核心种子群的建立是个关键。现根据我所引进繁育四年多的经验,作一简单介绍。近交系种子群除必须严格按照同胞兄妹(b×s)交配进行繁育传代外,繁育中要求搞好选种、育种工作。近交系动物还须经常进行遗传检测,保证其特性不致消失或发生突变。在选种工作中,根据生殖力系数(P)来进行。如从配种日算起,在100天内一只母种小鼠分出仔20只,其生殖力系数为1.40。即:P=出仔数×7/繁殖天数=20×7/10…     

微电脑在实验动物繁殖和遗传系谱研究中的应用

在实验动物培育与保种过程中需记录大量详细的繁殖与遗传资料,如父、母编号,出生日期,上种时间,每一胎产仔数等;在供应近交系的种用动物时,至少应向用户提供5代以上完整家系资料。国外先进国家对于这一类资料的记录与管理已实现电脑化,查询迅速、准确。而国内目前仍沿用人工记录,费时、费力易出差错或丢失记录,尤其是在查找动物系谱时,必须翻     

山医群体近交系中国地鼠(Cricetulus griseus)的研究——Ⅰ、驯养与繁殖

经过12年工作,将野生中国地鼠驯养和近亲交配,繁育成山医群体,其中A-30家系已繁殖到22代。经遗传监测,证明20代鼠已育成近交系。文中对饲养条件、繁殖方法、近交系的建立等进行了讨论。     

诸氏鲻虾虎鱼实验动物化研究进展

诸氏鲻虾虎鱼是我国特色海洋鱼类,具有诸多实验动物培育与应用优势。本文概述了诸氏鲻虾虎鱼的生物学特性、封闭群和近交系培育、质量控制等实验动物化研究进展,并介绍了诸氏鲻虾虎鱼作为海洋实验鱼类在海洋环境监测、水生态毒理等研究中的应用。结合目前研究和应用现状,对诸氏鲻虾虎鱼的质量标准化、近交系培育及其在功能基因组等领域的应用进行了展望。     

长爪沙鼠脑缺血模型近交系的培育及其发病机制研究进展

长爪沙鼠具有脑血管变异缺失的特性,是脑缺血研究良好的模型动物。普通长爪沙鼠群体中模型成功率低,影响研究结果稳定性,不符合实验动物福利要求。我们团队在证实脑血管Willis环(circle of Willis,COW)变异缺失具有遗传性的基础上,首先通过定向选育建立了脑缺血高发群体,进而通过全同胞近亲繁殖的方式,建立了脑缺血模型近交系,其COW缺失率达76.62%,模型成功率达到88.89%。此外,建立了近交系微卫星DNA和生化位点遗传检测方法,分析了长爪沙鼠脑缺血模型近交系动物的生长发育和血液生理生化等指标,为该模型的推广应用奠定了基础。我们还发现,VEGFA基因、AKT/PI3K和Notch信号通路在长爪沙鼠脑血管发育中发挥重要作用。通过抑制消减杂交方法筛选获得4个与长爪沙鼠脑血管发育相关的基因。长爪沙鼠脑缺血模型近交系的培育成功解决了模型发生率低的问题,减少了动物使用量,提高了研究结果可信度和稳定性,促进了相关机制研究。     

贵州白香猪两品系微卫星座位的遗传分析

采用24个微卫星标记对贵州白香猪2个品系的遗传变异进行了检测.试验结果表明,2个品系在24个微卫星基因座的平均等位基因、平均期望杂合度、平均多态信息含量和平均近交系数分别为2.1667、2.0417,0.4074、0.4188,0.3436、0.3249和0.5377、0.5605.结果 提示贵州白香猪具有一定的遗传稳定性,已成为一个稳定的遗传群体,符合封闭群动物的遗传特征.     

昆明小鼠4个可能近交系的基因分型验证

在我国,昆明小鼠作为一种实验动物广泛应用于药理和遗传学相关的研究领域。但由于昆明小鼠属于远交群,而且不同地区的种群间已经出现了严重分化,缺乏具有显著特征的近交系,这使得它在生物学上的应用受到了很大的限制。研究人员已经以昆明小鼠为背景培育出了几个可能的近交系,但由于缺乏可靠的遗传检测,至今未得到广泛的认可和应用。文章收集昆明小鼠的4个已经60代以上兄妹交配繁殖的可能近交系,并以两个标准近交系BALB/c和C57BL/6为参照,利用30个微卫星标记对每个品系的5只小鼠进行了微卫星基因分型,进而分析其遗传纯度。结果发现,品系A1和品系N4在本研究所用的30个位点均呈纯合状态;而T2和N2均在D15Mit16位点呈杂合状态。本研究第一次为我国昆明小鼠近交系的遗传学纯度提供了可靠的分子水平证据。今后应当加强昆明小鼠近交系的标准化,以扩大其在遗传学方面的应用。     

23个实验小鼠和大鼠近交系的保种研究

从1985年开始,陆续从国外实验动物著名机构引进常用近交系小鼠共23个品系(亚系和亚群)。在多年来保种繁殖过程中,根据修饰平行线系统选择留种动物,同时对动物进行全兄妹近亲交配繁殖,保持完整的谱系记录,控制饲养环境条件,成功地保持了绝大多数品系。同时对多数品系的繁殖性能和体重增长进行了观察,为这些品系的实验应用提供基本参数。     

利用微卫星标记对四带无须鲃不同种群的遗传质量评价

目的分析四带无须鲃封闭群及近交群的遗传质量。方法筛选多态性丰富的四带无须鲃微卫星序列,通过构建两个多重PCR反应体系再利用毛细管电泳技术进行分型,开展群体遗传多样性分析。结果野生群、WT封闭群、BT封闭群及近交群的平均等位基因数分别为6.5833、3.1667、3.0833和3.1818,平均多态信息含量分别为0.5969、0.3748、0.4159和0.4241。群体遗传质量检测分析表明:4个群体间遗传分化结果和近交群由野生群、封闭群逐渐筛选获得的过程相符。结论筛选的微卫星标记可用于四带无须鲃不同群体的遗传质量分析,为其遗传质量控制及监测提供方法基础。     

实验小鼠结合珠蛋白的研究

结合珠蛋白（Haptoglobin,简称Hp）是 一种血清蛋白。在人类方面,国内外有许多报 道I‘一‘,‘一,,,根据Smithies E9〕的分型方法,常见的 有Hpl-1, Hp2-1及Hp2-2型,呈孟德尔共 显性遗传。此外,也有一些报道证明在人类存在 着Hp0型“-a7。动物方面的Hp研究,国外的 报道只r- ＿‘明家兔、大鼠、豚鼠、马、鸡、狗、猪及 猴子【61-在着Hp,并且不同动物Hp-Hb的部 位有差异,但对于每种动物Hp的遗传多态性 并无研究。实验小鼠的Hp研究国内外尚未见报 道。随着医学和生物学的不断发展,对实验小 鼠的研究越来越受到人们的重视,特别是大量 近交系的使用,使人们对不同近交系小鼠之间 的遗传差异及生物学特征的研究就更趋深人。 为此,我们对7个近交系和2个远交群实验小 鼠的Hp进行了研究。     

鹌鹑近交系动物培育方案的设计

在说明我国培育鹌鹑近交系动物优点的基础上,提出鹌鹑近交系动物培育的设计依据、主要研究内容、技术路线、主要技术指标、技术难点和重点。利用朝鲜鹌鹑的羽色突变系北京白羽鹌鹑、中国黄羽鹌鹑和突变系黑羽鹌鹑为原始动物,每种羽色鹌鹑实行全同胞交配法,经过一定程度的近交和选择,培育出3个遗传背景清晰、生产性能稳定的近交系。如能按设计培育出3个鹌鹑近交系,每年可提供780万枚种蛋或540万只实验鹌鹑,对提升鹌鹑的实验动物价值、推动我国实验动物的标准化将起到重要作用。     

近交系MIJ和HFJ大鼠生化标记基因的测定

目的 观察MIJ和HFJ大鼠的基因纯合度和遗传稳定性.方法 MIJ大鼠7只,取自F22代基础群中3对种鼠和F22代雄性生殖缺陷鼠1只.HFJ大鼠6只,取自HFJ大鼠F25代基础群中的3对种鼠.按照中华人民共和国国家标准GB/T14927.1-2001实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测方法测定.结果　MIJ和HFJ近交...