远缘杂交的分子基础——通过远缘杂交后高粱DNA序列确实重组入水稻

在我国的农业科学研究中,不少人利用远缘杂交手段将植物间的某些优良特性相互引入,并已有不少成功的例子。在一部份远缘杂交的例子中,对它们的稳定的杂交后代进行细胞学的光学显微镜观察,在染色体上未看见与母本有差异。但这些后代与母本比较有颇多的变化,有些还显示出远缘父本的性状。对于这种现象人们存在着不同的看法。有的认为既然在染色体水平上没有变化就不是杂交而是自然变异或母本品系不纯引起的分离现象。对于这些,周光宇提出DNA片段杂交的假设。即就整体而言,远缘植物     

远缘杂交的分子基础——DNA片段杂交假设的一个论证

通过远缘杂交,扩大基因库,弥补近缘杂交的局限性,已日益成为农业战线上的重要研究课题。近20年来在我国采用常规杂交育种技术,广泛地进行了粮食作物和其他作物的远缘杂交,其中许多是在属间甚至科间进行的。从杂交后代中往往能选出具有高产、抗病虫害、抗寒、抗旱、抗倒伏和地区适应性较广等某些特点或比较全面的作物新类型、新品种。     

DNA分子进化的研究基础和策略

从研究方法和技术手段等方面讨论了分子进化研究上的一些重大问题．阐述了基因的基本结构及DNA分子的进化方式：净化选择、中性进化和分化选择。探讨了利用DNA分子进化数据构建系统树的原理,评价了NJ、UPGMAM、MP和ML4种算法在构建进化树时的合理性与不足,以及进化树可靠性检验的方法,并对未来分子进化生物学的发展加以展望。     

DNA纤维上的原位杂交技术

ＤＮＡ纤维上的荧光原位杂交（Ｆｉｂｅｒ－ＦＩＳＨ）技术是一种非重要的分子细胞遗传学技术。对于高分辨物理图的绘制、基因组和染色体结构的研究、致病基因的定位克隆等都有很大作用,本文介绍了该技术的基本操作和应用,以及与引物原位ＤＮＡ合成（ＰＲＩＮＳ）等技术相结合进行更精确基因定位的潜力。     

DNA烷化损伤及修复的分子基础

烷化剂可以造成细胞DNA分子的烷化损伤。其中鸟嘌呤第6位氧原子的甲基化(O~6-MeG)会造成碱基错误配对,引起细胞致突致死。O~6-甲基鸟嘌呤DNA-甲基转移酶(O~6-MT)可以修复O~6-MeG损伤。原核细胞中编码O~6-MT的烷化损伤修复酶基因ada已经克隆成功。哺乳动物细胞的烷化损伤修复基因的克隆工作正在研究中。根据O~6-MT含量可以把人肿瘤细胞分为两类,Mer~ 和Mer~-。Mer~-不含O~6-MT,约占1/5左右。细胞学及裸鼠实验证明使用双功能烷化剂ACNU可以特异性地杀死Mer~-类肿瘤。提示以DNA烷化损伤修复研究为基础,可以开拓出一条肿瘤选择性化疗的新途径。     

乙型肝炎病毒DNA克隆的菌落原位杂交

在遗传工程的DNA 重组试验中,需从大 量的转化子中筛选含特殊DNA 序列的克隆, 尤其是当被克隆的基因中无选择标记时,应用 菌落原位杂交进行筛选是最理想的。其主要 优点是特异性强,因此它成为DNA体外重组 实验的重要方法之一。为了便于使Grunstein 等〔习的菌落原位杂交法在我国推广应用,我们 对Grunstein等的方法作了适当修改,并对影 响实验结果的几个主要因素作了初步比较。采 用本修改方法筛选含乙型肝炎病毒DNA的克 隆的结果表明,此法是特异而可靠的。     

花粉——雌蕊相互作用的分子基础

显花植物授粉过程包含了花粉与雌蕊一系列复杂的细胞间相互作用。花粉在柱头上必须发生粘附与水合作用后才能萌发,花粉胞被蛋白可能在粘附机制中起主要作用,而水孔蛋白调节了花粉的水合过程;花粉管在花柱引导组织中定向生长,受引导组织胞间质、向化性物质及细胞粘附机制等因素的影响,也与花粉受体及子房有关。在植物的自交不亲和性反应中,配子体型自交不亲和性反应主要是由自交不亲和基因蛋白产物降解花粉RNA或以Ca^2 介导的信号级联反应实现的;孢子体型自交不亲和性反应则依赖于干性柱头以及雌蕊的S受体激酶及S位点糖蛋白与花粉S基因配体之间的相互作用。     

DNA疫苗的分子佐剂

在揭示体内注射ＤＮＡ可转染细胞后 ,进一步研究发现 ,注射编码抗原的质粒ＤＮＡ能诱导免疫应答反应。由此兴起了一种新的疫苗研究领域 ,这就是以接种编码各种抗原的裸露质粒ＤＮＡ为基础的ＤＮＡ疫苗[1] 。尽管ＤＮＡ疫苗的免疫接种技术已取得很大进展 ,但与小鼠相比 ,应用于大动物和非人灵长类的ＤＮＡ疫苗的免疫原性依然相对较弱[2 ] 。在大多数情况下 ,免疫原性强弱通过检测抗体水平来衡量 ,因此并不能完全反映保护性免疫的水平。事实上 ,ＤＮＡ疫苗诱导初次免疫应答特别有效 ,其诱导的免疫记忆通常足以保护动物 ,ＤＮＡ疫苗的这些特征 …     

DNA修复的分子机制

ＤＮＡ是遗传信息的载体,需要有极高的保真度,这不仅有赖于完善的复制体系,而且还需要有能纠正已存在的错误的修复系统。对于不同的ＤＮＡ损伤,生物体内存在许多不同的修复系统。本文介绍三种主要修复系统即核苷酸切割修复,错配修复及转录偶联修复的分子机制,深入研究ＤＮＡ修复作用对了解某些癌症成因及细胞衰老等过程有重要意义。     

DNA修复的分子机制

ＤＮＡ是遗传信息的载体,需要有极高的保真度,这不仅有赖于完善的复制体系,而且还需要有能纠正已存在错误的修复系统。对于不同的ＤＮＡ损伤,生物体内存在许多不同的修复系统。本文介绍三种主要修复系统即核苷酸切割修复,错配修复及转录偶联修复的分子机制,深入研究ＤＮＡ修复作用对了解某些癌症成因及细胞衰老等过程有重要意义 。     

叶绿体 DNA 分子克隆技术

由于叶绿体与原核生物之间有着遗传和其它相似性,与细胞核染色体又有相关性,所以,对叶绿体基因组的研究就有特殊的意义。对基因的结构与功能进行研究,首先要有     

远缘杂交早代稳定小麦导入了外源DNA片段并发生了DNA重排

在植物界, 多倍体植物非常普遍. 具有A, B, D三个部分同源染色体组的普通小麦是异源多倍体物种的一个典型代表. 近几年, 模拟普通小麦的起源过程进行的研究表明, 从四倍体小麦注入节节麦整个基因组形成异源六倍体小麦的早期阶段, DNA序列和基因表达发生了可能有利于遗传“二倍化”的变化. 利用普通小麦-黑麦远缘杂交自然结实的早代稳定特异小麦99L2研究发现: (ⅰ) 99L2至少导入了两个黑麦染色体上的DNA片段, 表明可能存在不同于传统的小麦-外源染色体配对重组的外源DNA导入机制; (ⅱ) 99L2自身的DNA序列发生了变化, 表明外源DNA部分片段注入小麦染色体组过程中, 也可能导致小麦自身DNA序列发生变化.     

莲C_0t-1 DNA的荧光原位杂交分析

为分析中国莲C_0t-1 DNA在其中期染色体上的分布,从中国莲基因组DNA中分离出C_0t-1 DNA,将基因组和所分离的C_0t-1 DNA用生物素标记后作探针,对中国莲染色体进行原位杂交。杂交结果用耦联有荧光素Cy3的生物素抗体检测,发现在每对染色体上均显示出特定的荧光原位杂交带。同时分析了FISH和GISH信号分布的异同。基于C_0t-1 DNA荧光原位杂交带型及染色体型,构建了中国莲核型。     

莲C0t-1 DNA的荧光原位杂交分析

为分析中国莲Cot-1DNA在其中期染色体上的分布,从中国莲基因组DNA中分离出Cot-1DNA,将基因组和所分离的Cot-1DNA用生物素标记后作探针,对中国莲染色体进行原位杂交。杂交结果用耦联有荧光素Cy3的生物素抗体检测,发现在每对染色体上均显示出特定的荧光原位杂交带。同时分析了FISH和GISH信号分布的异同。基于Cot-1DNA荧光原位杂交带型及染色体型,构建了中国莲核型。     

用荧光原位杂交技术构建高分辨率的DNA物理图谱

用荧光原位杂交技术构建高分辨率的ＤＮＡ物理图谱钟筱波ＰａｕｌＦ．ＦｒａｎｓｚＪ．ＨａｎｓｄｅＪｏｎｇＰｉｍＺａｂｅｌ（荷兰瓦赫宁根农业大学分子生物学系）ＨｉｇｈＲｅｓｏｌｕｔｉｏｎＰｈｙｓｉｃａｌＭａｐｐｉｎｇｂｙＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕ...     

血型的分子基础

本文仅就ABO、MN和HLA等血型的结构和功能进行扼要介绍。 (一)ABO血型系统 ABO血型系统又可分为A、B、AB和O型等四种血型。红细胞含A抗原和H抗原的叫做A型,A型的人血清中含有抗B抗体;红细胞含B抗原和H抗原的叫做B型,B型的人血清中含有抗A抗体;红细胞含A抗原、B抗原和H抗原,叫做AB型,这种血型的人血清中没有抗A抗体和抗B抗体;红细胞只有H抗原,叫做O型,O型的人血清中含有抗A抗体和抗B抗体。     

DNA免疫的基础研究进展

ＤＮＡ免疫或ＤＮＡ疫苗是近年发展的新型疫苗。ＤＮＡ免疫除可诱生保护性体液免疫应答,更重要的是能诱生以特异性ＣＴＬ为代表的保护性细胞免疫应答,因而从１９９０年发现至今,对其研究的进展迅速。本文介绍了近年ＤＮＡ免疫的基础性研究进展,讨论了ＤＮＡ免疫作为嵌合型及多重抗原型疫苗的可能性,诱生的免疫尖答特征及与保护性的关系,ＤＮＡ免疫的某些影响因素,最后对ＤＮＡ免疫的可能机制亦作了一些讨论。