合欢皮提取物抑制血管生成的体内药效学研究

为了探讨合欢皮提取物体内对血管生成的抑制作用。本文采用MTT法和Matrigel plug方法考察合欢皮提取物对人血管内皮细胞(HMEC)增殖和体内Matrigel胶小管形成的影响,运用Lewis肺癌转移小鼠模型,观察合欢皮提取物对小鼠Lewis肺癌的疗效。结果表明合欢皮提取物可明显抑制HMEC细胞的体外增殖(IC50为30μg/mL),并且呈明显的剂量依赖性,同时具有抑制Matrigel plug中的血管新生的作用。合欢皮提取物还能够明显抑制Lewis肺癌肿瘤细胞生长,减少转移病灶。提示合欢皮提取物具有明显抑制血管生成的作用,有可能成为有效的血管生成抑制剂。     

软骨血管生成抑制因子抑制血管生成的研究

小牛气管软骨经盐酸胍抽提,丙酮分级沉淀,膜超滤,柱层析等步骤得到软骨血管生成抑制因子(cartilage angiogenesis inhibiting factor,CAIF).SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示CAIF由单一组分组成,分子量为27700.通过[ ³H]-TdR掺入,活细胞检测等方法测定CAIF对内皮细胞、Hela细胞、QGY7703细胞与小鼠骨髓细胞、人皮肤成纤维细胞等的DNA合成的影响,以及细胞毒作用.采用鸡胚绒毛尿囊膜实验测定CAIF对血管生成的抑制效应.结果显示:CAIF对内皮细胞产生强的抑制作用,对Hela细胞抑制很弱,对QGY7703细胞、小鼠骨髓细胞、人皮肤成纤维细胞均无抑制作用;对鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成产生明显的抑制作用.提示CAIF能较特异地抑制血管生成,CAIF达到电泳纯,是专一性较强的血管生成抑制因子.     

茶儿茶素抑制肿瘤血管生成的作用

对近几年茶儿茶素抑制肿瘤血管生成的研究进展进行了综述。从抑制血管内皮细胞生长、抑制细胞黏附分子表达和抑制基底膜降解三个部分讨论了其抗肿瘤血管生成的机制,并对儿茶素研究存在的问题和儿茶素开发前景进行了探讨。     

血管生成抑制素作用机理的研究进展

血管生成抑制素(angiostatin)是纤溶酶原(plasminogen)在体内的天然水解产物,能够有效抑制血管内皮细胞的增殖、迁移和管状结构的形成而参与对血管生成过程(angiogenesis)的调节。血管生成是指从已经存在的血管生长出新的分枝血管的过程。该过程在成体组织并不活跃,然而在某些病理条件下如伤口愈合、炎症、肿瘤的生长和恶性转移时却常常伴随活跃的血管生成过程。血管生成抑制素对血管生成的抑制作用,提示其作为一种特异性的针对血管内皮细胞的药物治疗与血管生成有关的一些疾病,如肿瘤的可能性。本文主要介绍近年来关于Angiostatin作用机理的研究进展以及其作为治疗药物的应用前景。     

鲨鱼软骨制剂抑制血管生成的研究

以鲨鱼软骨为原料,经盐酸胍抽提,丙酮分级沉淀, 超滤等步骤得到鲨鱼软骨制剂(shark cartilage preparation,SCP). 利用整装细胞扫描电镜方法测定SCP对血管内皮细胞骨架系统的影响,体外细胞迁移实验测定它对内皮细胞迁移的抑制效应,及鸡胚绒毛尿囊膜实验测定对血管生成的抑制效应. 结果表明SCP能显著抑制内皮细胞的骨架形成;显著抑制内皮细胞的迁移,并有明显的浓度依赖关系;显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成. 细胞骨架是细胞分裂增殖及运动迁移的基础,血管内皮细胞的运动迁移又是血管生成的基础,因此SCP的作用机理可能是通过抑制细胞骨架的形成,抑制内皮细胞的运动迁移,从而抑制血管生成.     

原核表达Arresten蛋白抑制血管生成作用

目的:研究原核表达的Arresten蛋白纯化品对血管内皮细胞及血管生成的抑制作用。方法:MTT法检测Arresten蛋白对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响;流式细胞仪分析Arresten蛋白作用下HUVEC凋亡的情况;细胞迁移实验观察Arresten蛋白对HUVEC迁移能力的影响;鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验观察Arresten蛋白对新生血管的抑制情况。结果:原核表达的Arresten蛋白纯化品能特异性地抑制 HUVEC的增殖、迁移,诱导HUVEC的凋亡,并在一定范围内呈现出剂量—效应关系。Arresten蛋白能有效抑制鸡胚尿囊膜血管的生长(P<0.01)。结论:原核表达的Arresten蛋白纯化品对内皮细胞有特异的抑制作用,能有效抑制血管生成。     

血管生成抑制素

血管生成抑制素盛节罗进贤（中山大学生命科学学院,广州５１０２７５关键词血管生成抑制素结构与功能血管生成抑制素能抑制血管内皮细胞增生,对转移灶癌的生长和原发癌的生长都有强烈抑制作用,有希望用于癌的诊断和治疗。本文讨论了它的起源、结构、功能和应用前景。１...     

MicroRNA与肿瘤血管生成

microRNA（miRNA）是近年来发现的一类长度约为22个核苷酸的非编码小分子RNA.它主要通过与靶标基因3′UTR的完全或不完全配对,降解靶标基因mRNA或抑制其翻译,从而参与多种生命活动.血管生成在肿瘤的发生、发展过程中起着重要的作用.实验证据表明,miRNAs可通过调控其靶标基因参与的信号通路,影响肿瘤血管的生成.本文主要介绍近年来miRNAs与血管生成相关性研究的进展.     

人血管生成抑制素抑瘤研究进展

肿瘤的发展和转移需要新生血管的形成。人血管生成抑制素是近年发现的能够专一性抑制血管内皮细胞的内皮抑制因子。大量研究表明,在体外用血管生成抑制素处理血管内皮细胞可以抑制新生血管的形成,在体内单独使用血管生成抑制素,或者将血管生成抑制素与其他物质如基质金属蛋白酶、尿激酶联合处理荷瘤小鼠,可以降低小鼠体内肿瘤组织新生血管密度,抑制肿瘤的生长和肿瘤细胞的迁移。简要综述了血管生成抑制素抑制肿瘤生长和转移及其作用机理。     

蝎毒多肽提取物的抗血管生成作用

用不同浓度的东亚钳蝎素的多肽提取物PESV(4～20μg／ml)作用于人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察HUVEC增殖活性和凋亡变化,增殖活性检测采用BrdU掺入的ELISA法,凋亡水平和凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的检测采用流式细胞术检测;用鸡胚尿囊膜(CAM)显示PESV对血管生成的抑制作用。结果显示,PESV抑制HUVEC的增殖,而对乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖无明显影响;PESV作用72h后,HUVEC凋亡相关基因Bcl-2表达降低,Bax表达增加,凋亡细胞比例增至10．5％,明显高于对照组;0．5mgPESV能明显抑制CAM新生血管的形成。因此,PESV具有良好的体外抗肿瘤血管生成活性,PESV作为一种肿瘤血管抑制剂的天然药物来源,其有效成分和药理作用有待进一步研究。     

合欢皮中抗肿瘤新生血管高效低毒组分的筛选及药效学研究

从合欢皮中提取分离组分1~24,SRB法测定IC50,LDH试剂盒评价毒性,筛选出乙醇回流正丁醇萃取的组分23为抗肿瘤新生血管高效低毒组分,化学定性其主要成分为皂苷,HMEC-1细胞上的IC50为4.18±0.37μg·mL-1,LDH阳性药物浓度为40μg·mL-1。细胞迁移、成管实验表明组分23对细胞迁移、成管均有抑制作用。急性毒性实验测得最小致毒量和最小致死量分别为100 mg·kg-1,4000 mg·kg-1。建立肿瘤小鼠模型进行组分23的体内药效学研究:中剂量4 mg·(kg·d)-1,高剂量组8 mg·(kg·d)-1CD31蛋白标志肿瘤血管数明显降低,低剂量2 mg·(kg·d)-1、中剂量、高剂量组肿瘤细胞凋亡数目显著增高。     

合欢花对慢性应激大鼠生长和脑单胺类神经递质含量的影响

为探讨合欢花对慢性应激大鼠生长和脑单胺类神经递质的影响,采用15只大鼠,设置了对照组、应激组和合欢花组3组实验。应激组和合欢花组均接受7天的应激刺激,之后合欢花组再灌胃合欢花10天。实验结束后,取3组大鼠的脑组织,用高效液相色谱法测定高香草酸(HVA)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)的含量。结果表明,应激组大鼠日增重显著低于对照组(P=0.011);而合欢花组大鼠的日增重极显著高于应激组(P=0.002)。应激组大鼠海马、纹状体和前额叶中的HVA含量与对照组相比,虽有升高的趋势,但无显著差异;两组间的NE、DA和5-HT也无显著差异。合欢花组大鼠海马中的HVA、DA含量明显高于应激组,而前额叶中的多巴胺和5-羟色胺,以及纹状体中的5-羟色胺均明显低于应激组。这表明合欢花对慢性应激引起的大鼠生长受抑有缓解作用,对其脑内单胺类神经递质有调节作用。     

根癌农杆菌介导合欢转TaNHX2基因体系的优化

通过对农杆菌菌液浓度、侵染时间、预培养时间和共培养时间等影响转化效率的因素进行优化,建立了合欢农杆菌转化体系。在此基础上,利用农杆菌介导法将TaNHX2基因导入合欢基因组内,获得大量Kan抗性再生植株。常规PCR和实时荧光PCR检测结果表明,外源基因已整合到合欢基因组中,并正常转录。     

Hierarchical patterns of paternity within crowns of Albizia julibrissin (Fabaceae)

The floral architecture and phenology of the tree species Albizia julibrissin (Fabaceae) offer the potential for flowers within inflorescences to share common pollen donors. Patterns of paternity within individual tree crowns may differ among isolated individuals and those in populations due to differences in pollinator foraging behavior. To determine how genetic diversity is partitioned within individual seed pools and whether these patterns differ among isolated and population trees, we obtained all fruits from three inflorescences from four clusters from three isolated trees and from three population trees in Athens, Georgia. We assayed 14 polymorphic allozymes to genotype all progeny within singly sired fruits to determine the multilocus genotype of each fruit's pollen donor. Inflorescences had multiple pollen donors, but simulation analyses revealed that redundancy of pollen donors tended to be more likely within inflorescences than randomly across the crown. Analysis of genetic and genotypic diversity indicated that individual maternal trees received pollen from many donors in uneven frequencies. Results suggest that isolated trees receive pollen from slightly fewer pollen donors and experience more within-plant pollinator movement than trees in populations. However, isolated trees receive qualitatively similar pollen from many sources, suggesting that these trees are not effectively isolated and that pollen moves long distances in this species.     

Inferring recruitment history from spatial genetic structure within populations of the colonizing tree Albizia julibrissin (Fabaceae)

Comparative analyses of spatial genetic structure (SGS) among species, populations, or cohorts give insight into the genetic consequences of seed dispersal in plants. We analysed SGS of a weedy tree in populations with known and unknown recruitment histories to first establish patterns in populations with single vs. multiple founders, and then to infer possible recruitment scenarios in populations with unknown histories. We analysed SGS in six populations of the colonizing tree Albizia julibrissin Durazz. (Fabaceae) in Athens, Georgia. Study sites included two large populations with multiple, known founders, two small populations with a single, known founder, and two large populations with unknown recruitment histories. Eleven allozyme loci were used to genotype 1385 individuals. Insights about the effects of colonization history from the SGS analyses were obtained from correlograms and Sp statistics. Distinct differences in patterns of SGS were identified between populations with multiple founders vs. a single founder. We observed significant, positive SGS, which decayed with increasing distance in the populations with multiple colonists, but little to no SGS in populations founded by one colonist. Because relatedness among individuals is estimated relative to a local reference population, which usually consists of those individuals sampled in the study population, SGS in populations with high background relatedness, such as those with a single founder, may be obscured. We performed additional analyses using a regional reference population and, in populations with a single founder, detected significant, positive SGS at all distances, indicating that these populations consist of highly related descendants and receive little seed immigration. Subsequent analyses of SGS in size cohorts in the four large study populations showed significant SGS in both juveniles and adults, probably because of a relative lack of intraspecific demographic thinning. SGS in populations of this colonizing tree is pronounced and persistent and is determined by the number and relatedness of founding individuals and adjacent seed sources. Patterns of SGS in populations with known histories may be used to indirectly infer possible colonization scenarios for populations where it is unknown.     

合欢核型的分析

应用根尖压片法对含羞草科合欢属合欢的染色体数目和核型进行了研究,结果表明:合欢体细胞染色体数目为2n=26,核型为:2n=26=18m 6sm 2st,属于“2B”类型。染色体相对长度组成为2n=26=4L 8M2 12M1 2S。从染色体水平证明合欢在系统演化上属于较进化的种类。     

合欢皮总皂苷对雄性小鼠的抗生育作用研究

目的探讨合欢皮总皂苷对雄性小鼠的抗生育作用。方法将60只健康的雄性性成熟昆明小鼠随机分成3个试验组和1个对照组,各试验组小鼠灌胃540 mg·(kg·d)-1,270 mg·(kg·d)-1和135 mg·(kg·d)-1的合欢皮总皂苷水溶液,对照组自由饮水,灌胃1周后按雌雄比2∶1合笼,继续对雄鼠灌胃至19 d,采集雄性小鼠的血液并测定血液生化指标,剖检灌胃雌性小鼠,统计雌性小鼠的怀孕率,测定雄性小鼠睾丸与附睾的脏器系数及附睾精子活力,并固定睾丸和附睾,研究其组织学变化。结果与对照组相比较,雄性小鼠灌胃合欢皮总皂苷后,导致雌性小鼠的怀孕率降低,睾丸脏器系数和附睾精子活率极显著降低(P<0.01),精子畸形率极显著升高(P<0.01)。光学显微镜下,试验组小鼠睾丸和附睾均有一定程度的损失,睾丸生精细胞排列疏松,间质减少,可见曲细精管内有多核巨噬细胞浸润,各级生精细胞脱落。附睾具正常的管腔结构,但能明显观察到管腔内精子几乎消失。结论合欢皮总皂苷对雄性小鼠具有抗生育作用,主要通过影响精子的生成及破坏生精组织而达到。     

合欢皂甙Julibroside J8对人微血管内皮细胞凋亡的影响研究

本文采用体外培养人微血管内皮细胞(HMEC-1),不同浓度和时间的Julibroside J8干预,SRB法测定细胞存活率,同时结合DAPI荧光染色,TUNEL染色法检测细胞凋亡情况;Annexin-V/PI双标记行流式细胞仪测定定量观察细胞凋亡率。发现合欢皂甙Julibroside J8可显著抑制HMEC-1生长,抑制率可达75.6%,并呈时间-剂量效应关系。同时诱导细胞发生凋亡率,最高比例可达32.32%。     

壳聚糖絮凝法精制合欢皮多糖水提液的工艺

采用壳聚糖对合欢皮总多糖的絮凝纯化工艺进行研究。通过单因素和正交试验,得到优化的工艺条件:壳聚糖用量为生药量0.8 mL/g,絮凝温度35℃,絮凝时间4 h,药液浓缩比(质量体积比)为1∶10(g/mL),在此条件下,多糖保留率、脱蛋白率和多糖纯度分别为91.23%、22.26%和47.27%,优于传统的水提醇沉法。