新分离菌Streptomyces产小分子CMC液化酶的研究

新分离纤维素分解菌经鉴定为链霉菌属中的新种,暂定名为ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐＬＸ,革兰氏阳性,产气生孢子,好氧生长,最适生长温度和ＰＨ为３０℃和７．２。该菌能够完全降解纤维素且不产生还原糖,并分泌一种分子量为９．２ｋｕ的液化性质的内切纤维素液化酶,亦即ＣＭＣ液化酶,该酶在裂解滤纸为短纤维的过程中既没有还原糖生成,也没有失重现象发生,而且纤维素的聚合度也几乎没有明显变化,推测可能是一种能打开氢键的小分子解链酶。     

诺卡氏菌形放线菌β甘露聚糖酶的纯化和性质

产β１ ,４Ｄ甘露聚糖酶的诺卡氏菌形放线菌（ Ｎｏｃａｒｄｉｏｆｏｒｍ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ） 菌株ＮＡ３５４０ ,发酵培养７２ｈ ,发酵液离心去菌体,上清经硫酸铵沉淀,９５ ％ 乙醇沉淀,ＣＭＳｅｐｈａｄｅｘ Ａ５０ 柱层析、羟基磷灰石柱层析、ＤＥＡＥ纤维素离子交换及Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ１００ 分子凝胶过滤柱等步骤,β甘露聚糖酶的比活提高了１３７ 倍,获得凝胶电泳均一的蛋白样品。经ＳＤＳＰＡＧＥ 和凝胶过滤法分别测定β甘露聚糖酶分子量为４１ｋＤ和４０ｋＤ,证明该酶为单聚体;用等电聚焦电泳测得其等电点为４－８ ;经氨基酸组成分析,发现蛋白中有较高含量的Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ａｌａ 及Ｇｌｕ 残基。该酶的最适反应温度为７５ ℃,在不超过６０ ℃时酶活较稳定;酶反应的最适ｐＨ 为８－０ ,ｐＨ 稳定范围为６－５～１１－０ 。重金属离子Ｈｇ^２＋ 、Ｃｕ^２＋ 、Ｐｂ^２＋ 、Ｆｅ^3＋ 、Ｃｏ^２＋ 、Ｚｎ^２＋ 能强烈抑制该酶活性,而Ｍｎ^２＋ 、Ｆｅ^２＋ 、Ａｇ^＋ 对该酶有部分的抑制作用,低浓度的Ｎａ^＋ 、Ｋ^＋ 、Ｌｉ^＋ 对该酶基本没有影响。     

地衣芽孢杆菌β－甘露聚糖酶的纯化及酶学性质

地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ＮＫ－２７菌株发酵产生的β－甘露聚糖酶（β－ｍａｎｎａｎａｓｅ）经硫酸铵盐析沉淀,两次ＤＥＡＥ纤维素和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００离子交换柱层析以及制备ＰＡＧＥ筹步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用ＳＤＳ－凝胶电泳测得纯化后的β－甘露聚糖酶分子量为２６ｋＤ,用凝胶聚焦电泳测得等电点ＰＩ为５．０。酶反应的最适ｐＨ为９．０,最后温度为６０℃,稳定ｐＨ为６．０—９．０,稳定温度为４０℃。金     

合成己酸乙酯脂肪酶产生菌的筛选及产酶条件

从２７株脂肪酶产生菌中筛选到能由乙醇和己酸合成己酸乙酯的菌株８株。其中Ｒｈｉｚｏｐｕｓｓｐ．Ｈ－３菌株脂肪酶活力为５０－６０ｕ／ｍｌ,全细胞在有机溶剂中的酯化率可达己酸的９１％。Ｈ３产酶的最适碳源为淀粉或葡萄糖。６％黄豆饼粉加４％蛋白陈复合氮源有利于酶活力的增加。     

原生质体融合技术选育耐热性β-淀粉酶产生菌

从土壤中分离到两株产β-淀粉酶芽孢杆菌菌株,经紫外线、丫-射线,氯化锂、亚硝基胍等诱变和筛选,得到β-淀粉酶高产菌和耐热性β-淀粉酶产生菌各一株。将两菌进行原生质体融合,获得兼有两亲株遗传特性的融合子wg6。从菌落形态和产酶特性等证实此融合子系两亲株融台所得的杂交子代。W96菌株产酶能力介于两亲株之间,酶的热稳定性较高,60℃处理15min,酶活力仍达93．2％。此菌株还可产生少量茁霉多糖酶(一种支链淀粉酶)．与所产生的β-淀粉酶协同作用,使淀粉水解率达到80．6％,因而有较高的应用价值。     

表型相似的热带假丝酵母和麦芽糖假丝酵母在脉冲电泳核型上的差异

热带假丝酵母Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ （Ｃａｓｔｅｌｌａｎｉ ）Ｂｅｒｋｈｏｕｔ和麦芽糖假丝酵母Ｃ． ｍａｌｔｏｓａＫｏｍａｇａｔａ, Ｎａｋａｓｅ ＆ Ｋａｔｓｕｙａ是两种可利用烃类作为碳和能量来源的酵母菌,前者还是一种条件致病菌,可引起系统感染。这两种假丝酵母菌在形态和生理生化性状上非常相似,用常规分类方法不易准确地鉴别。本研究对Ｃ． Ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ和Ｃ ｍａｌｔｏｓａ的模式菌株以及中国普通微生物菌种保藏中心（ＣＧＭＣＣ）保藏的归于这两个种名下的其它菌株进行了脉冲电泳核型比较分析。发现这两个表型相似的种具有明显不同的染色体ＤＮＡ分子带型,而同一种内的不同菌株却具有相同或相似的分子核型。Ｃ．Ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ的特异染色体ＤＮＡ分子带谱为２条８．５—１．２ Ｍｂ的带, ４条２．３－３．４ Ｍｂ的带。 Ｃ ｍａｌｔｏｓａ的特异带谱为： ３～４条分子量在１．１－１．３Ｍｂ范围内的带, １条约为２．２Ｍｂ的带以及２－３条大小为３．２－３．５Ｍｂ的带。 Ｃ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ与Ｃ ｍａｌｔｏｓａ在染色体ＤＮＡ分子带型上的差异与二者在可溶性淀粉的同化能力和４０℃下的生长能力上的差异具有明显的相关性…     

脉冲电泳核型分析在酿酒酵母菌分类学研究中的应用

根据酵母属（ Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ Ｍｅｙｅｎ ｅｘ Ｒｅｅｓｓ） 分类学研究最新进展,核实并更新了保藏于中国普通微生物菌种保藏中心的该属菌株的种类归属。在形态和生理生化性状,包括对６ 种糖的发酵能力、对１８ 种碳源和３ 种氮源化合物的同化能力、在无维生素培养基中和３７ ℃下的生长情况、对放线菌素酮的抗性等常规分类学研究的基础上,对部分疑难菌株进行了脉冲电泳核型比较分析。酿酒酵母（ Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ） 、贝酵母（ Ｓ．Ｂａｙａｎｕｓ） 和巴氏酵母（ Ｓ．Ｐａｓｔｏｒｉａｎｕｓ） 三者与少孢酵母（ Ｓ．Ｅｘｉｇｕｕｓ） 在电泳核型上具有明显的差异,主要表现在前三者染色体ＤＮＡ 分子的大小范围均为２２５ ～２２００ ｋｂ ,而Ｓ．Ｅｘｉｇｕｕｓ 缺少小于３６５ ｋｂ 的染色体ＤＮＡ 分子。Ｓ．Ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ 的模式和权威菌株具有１２ ～１４ 条染色体ＤＮＡ 带;Ｓ．Ｂａｙａｎｕｓ 和Ｓ．Ｐａｓｔｏｒｉａｎｕｓ 的模式菌株均有１７ 条带,但在带型上存在一定差异。原归于Ｓ．Ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ 的株菌ＡＳ２－１００ 具有１６ 条带,与Ｓ．Ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ 区别明显而与Ｓ．…     

细菌还原Au3+制备金催化剂的研究

从不同来源的细菌菌株筛选获得一株吸附还原Ａｕ３＋较强的菌株Ｄ０１,经鉴定为巨大芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｍｅｇａｔｈｅｒｉｕｍ）Ｄ０１。菌株Ｄ０１在Ａｕ^３＋浓度６００ｍｇ／Ｌ下仍能较好生长。从电化学反应表明,该菌具有较强的还原力,它能将金催化剂的前驱体Ａｕ^３＋／αＦｅ２Ｏ３还原成具有催化ＣＯ＋Ｏ２→ＣＯ２的高分散度的Ａｕ０／αＦｅ２Ｏ３催化剂     

菌核寄生菌Talaromyces flavus的生物学特性及寄生菌核规律初探

本文对核盘菌菌核寄生菌Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓｆｌａｖｕｓ的基本生物学特性及影响其寄生菌核的生态因子进行了初步研究。结果表明：Ｔ.Ｆｌａｖｕｓ在我国南北方菌核病发生区土壤中普遍存在。其菌丝在３－３５℃及ｐＨ值２－１０范围内均能生长及产孢,最适生Ｋ温度为３０℃,最适生长ｐＨ值为４。对峙培养结果表明Ｔ,fｌａｖｕｓ对核盘菌的抗生作用微弱,对菌丝和菌核均有很强的寄生致腐作用。除核盘菌外它还能寄生三叶草核盘菌、小核盘菌及离菌上的一种待鉴定的产菌核真菌。Ｔ,ｆｌａｖｕｓ     

液化沙雷氏菌胞外脂肪酶产生条件的研究

新分离的一株液化沙雷氏菌（Ｓｅｒｒａｔｉａｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）能产生大量胞外碱性脂肪酶,本文在摇瓶发酵水平上考察了培养基组成、培养条件等因素对其生成脂肪酶的影响。在优选条件下,即培养基组成为（％）玉米油１．２５,豆饼粉２．０,蛋白胨１．０,酵母膏０．２,Ｋ_２ＨＰＯ_４０．２,ＭｇＳＯ_４·７Ｈ_２Ｏ０．１,初始ｐＨ为７．２５时,２８℃,１５０ｒ／ｍｉｎ旋转摇床振荡培养４０ｈ,该菌株的发酵液酶活达到４３ｕ／     

CO2激光辐照对酿酒酵母菌的诱变作用*

应用红外ＣＯ_２激光对甘蔗糖蜜工业性生产用酿酒酵母菌Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＡＳ２．１１８９进行辐照处理,经酵母菌糖蜜酒精发酵试验,发现红外ＣＯ_２激光对酿酒酵母菌具有诱变作用,并初步筛选到产乙醇含量有较大变化的辐照变异菌株;同时,通过对这些辐照变异菌株的乙醇脱氢酶同工酶的比较分析,进一步证实了红外ＣＯ_２、激光对酿酒酵母菌的诱变作用．从而为工业上利用红外ＣＯ_２激光对酿酒酵母菌进行诱变     

紫孢侧耳栽培期基质中纤维素类的降解和有关酶活的变化

以棉籽壳为基质栽培紫孢侧耳（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｓａｐｉｄｕｓ）,分别在菌丝长满期、菇蕾期、一茬菇和二茬菇时测定培养料中纤维素和半纤维素含量的变化以及纤维素酶（ＣＭＣ酶）和半纤维素酶活性的变化。结果表明：从接种到一茬菇时期,纤维素酶、半纤维素酶活不断升高,此后,迅速降低;基质中两种酶的底物含量降低速度以菇蕾一一茬菇时最大。菇蕾期后,两种底物的减少量多,菇蕾期以前较少。菇蕾期以前半纤维素降解稍多,菇蕾期以后纤维素降解较多。     

一株产虾青素的黄杆菌CF-60的研究

从土壤中分离到一株黄杆菌（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐｐ）Ｃ_Ｆ－６０,该菌的生长需Ｍｇ^２＋存在,ＭｇＳＯ_４·７Ｈ_２Ｏ的最适浓度为０．２％;蛋白胨是该菌株生长的最好氮源,它不能利用无机氮。种龄超过９６ｈ的菌体不能在新鲜培养基中生长。经５４ｈ的２Ｌ恒化器发酵,生物量达６．８ｇ／Ｌ,色素产量为１０．６ｍｇ／Ｌ。该菌产生的类胡萝卜素成分简单,主要成分的含量为９０．３％,该成分经初步鉴定是分子结构中含有羰基和羟     

植物细胞离析酶的制备和应用

用 Aspergillus sp．A-19菌经固体发酵研制成一种新的植物细胞离析酶(SeparatasezA—P)。其离析单细胞的酶活力平均为70 767u／g,有效作用的pH在3．0—7．0,温度为20—45℃。发酵培养基配方是麸皮：桔皮粉：(NH₄)₂SO₄(w／w)为100:100:O．63,料水比为1 :2．0,培养适宜条件为25℃、60小时。     

应用聚合酶链式反应快速特异鉴定假单胞菌和伯克霍尔德氏菌（R）-3-羟基酯酰载酯蛋白-辅酶A转酰基酶基因

聚羟基脂肪酸酯 (PHA)是一类具有广泛应用前景的可降解生物塑料。因其可以以葡萄糖等廉价底物直接发酵生产PHA而日益受到重视。目前的研究表明在积累中长链PHA的假单胞菌中 ,由phaG基因编码的（R）3 羟基酯酰载酯蛋白 辅酶A转酰基酶 (PhaG)起关键作用 ,但目前为止对该蛋白还知之甚少。通过聚合酶链式反应 (PCR)建立了一种快速、特异鉴定phaG基因的方法 ,应用该方法成功地从两株积累不同PHA的假单胞菌Pseudomonasstutzeri 1317和Pseudomonasnitroreducens 080 2中分别克隆得到phaG基因 ,并在phaG基因突变株PseudomonasputidaPHAG_N-21中表达成功。同时 ,还首次报道了从非假单胞菌菌株Burkholderiacaryophylli AS 1.274 1中鉴定得到phaG基因 ,提示PhaG介导的中长链PHA合成途径作为一种通用的代谢模式在细菌中广泛存在 ,为进一步实现从廉价的非相关底物合成中长链PHA提供了必要的分子生物学基础。     

香菇原生质体融合及融合子的鉴定

以香菇（Ｌｅｎｔｉｎｕｓｅｄｏｄｅｓ）种内不同株一对亲和的单核菌丝（７４０２〈２〉和９１０１〈１２〉）为亲本,以碘乙酰胺失活７４０２〈２〉作为筛选标记,经过原生质体制备、ＰＥＧ融合及融合子再生等步骤,选育得融合子。融合子与双亲无拮抗性,在菌丝形态,核数目及可溶性蛋白质图谱、酯酶同工酶谱和过氧化物酶谱上均与双亲单核菌丝及担孢子杂交子有区别。将Ｋｎｏｗｌｔｏｎ等于１９８４年建立的一种分离高频再生衍生株的方法首次运用至食用菌中,使原生质体再生率提高２－３倍,为融合操作提供了方便。     

芽孢杆菌M_(50)产生β甘露聚糖酶的条件研究

从土壤中分离到９ 株产生β甘露聚糖酶的芽孢杆菌（ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ ．） 。Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ ． Ｍ５０２５０ｍ Ｌ三角瓶摇瓶培养试验,以４ ％ 的魔芋粉为碳源,１－０ ％ （ ＮＨ４）２ＳＯ４ 为氮源,０－３５ ％Ｎａ２ＣＯ３ ,３０ ～３４ ℃培养６０ｈ 产酶达到高峰。酶活力为１８０ ～２００ｕ／ｍ Ｌ。１００Ｌ 罐发酵,在３０ ～３２ ℃,１∶０ ．７５ｖｖｍ 通气量,２００ｒ／ｍｉｎ 条件下,发酵液酶活力高达３３０ｕ／ｍ Ｌ。酶的最适反应温度和ｐＨ 分别为５０ ℃和６－０ ,低于５０ ℃,ｐＨ５ ．０ ～７ ．０ 酶稳定。Ｆｅ^３＋ 、Ａｌ^３＋ 、ＥＤＴＡ、Ｈｇ^２＋ 对酶有抑制作用,而Ｂａ^２＋ 、Ｍｎ^２＋ 对酶有激活作用。发酵粗酶液对苎麻精干麻精练,显示对精干麻的半纤维素残胶具有降解作用。     

一个具两型子囊的齿裂菌属新种

生于蒙古栎（Ｑｕｅｒｃｕｓ　ｍｏｎｇｏｌｉｃａ）和波罗栎（Ｑ．Ｄｅｎｔａｔａ）上的齿裂菌属一新种,即异襄齿裂菌（Ｃｏｃｃｏｍｙｃｅｓｄｉｍｏｒｐｈｕｓ）。该种因子囊同时以两种状态存在而明显区别于齿裂菌属其它成员。主、副模式标本保藏于安徽农业大学森林保护教研室（ＡＡＵＦＰ）。     

柔膜菌属(柔膜菌目)新种及中国新记录种

本文对采自中国温带部分省区的柔膜菌属Hymenoscyphus标本进行了研究。文中报道新种一个 —— 井冈柔膜菌Hymenoscyphus jinggangensis,中国新记录种三个,它们是无须柔膜菌Hymenoscyphus imberbis, (参照)闪烁柔膜菌H. cf. nitidulus 以及该属的一个未命名种。新种模式标本保藏在中国科学院微生物研究所菌物标本馆。     

变灰青霉固态发酵降解植酸的初步研究

从发霉植酸钠溶液中分离到一株产植酸酶的变灰青霉（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃａｎｅｓｃｅｎｓ）Ｐ４。以麸皮：玉米面：黄豆饼粉＝７：２：１为主要培养基成份,用优选法确定最适培养基为在上述基本培养基中添加４％（ＮＨ４）２ＳＯ４,１％葡萄糖,１．５倍水,自然ｐＨ。发酵过程的动态分析表明,该菌在上述条件下２８℃恒温培养６ｄ后植酸降解率可达９０％;无机磷含量由０．１３％增至０．５７％;可溶性蛋白含量由３．８０％增至７．６０％。用４％ＣａＣｌ_２·２Ｈ_２Ｏ水溶液抽提