KLF7通过抑制缺氧诱导因子1α转录影响肉鸡脂肪组织发育

Krüppel样转录因子7(Krüppel-like factor 7, KLF7)是脂肪形成的负调控因子,而缺氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor 1, HIF1)促进缺氧诱导的哺乳动物脂肪组织发育。本实验室前期利用ChIP-seq技术,发现在鸡的缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1 alpha, HIF1α)基因上游存在1个KLF7的结合峰,提示KLF7可能调控HIF1α基因转录。为此,本研究首先利用ChIP-PCR技术验证ChIP-seq结果,发现KLF7能够与HIF1α基因5′侧翼区结合。双荧光素酶报告基因与qRT-PCR结果显示,过表达KLF7能够显著下调HIF1α(-4 432/-4 182)的荧光素酶报告基因活性（P<0.01）,抑制HIF1α基因表达。与野生型质粒相比,将生物信息学预测的KLF7结合基序“TGCGCAGCAA”(-4 300/-4 290)缺失突变后, HIF1α(-4 432/-4 182)报告基因活性显著增强（P<0.01）。此外,选取第19代1～7周龄东北农业大学高、低脂双向选择品系肉鸡(Northeast Agricultural University broiler lines divergently selected for abdominal fat content, NEAUHLF)作为实验材料,利用qRT-PCR检测HIF1α基因在肉鸡腹部脂肪组织中的表达规律。结果显示,HIF1α在1～7周龄高脂系肉鸡中的相对表达量均高于低脂系,提示HIF1α对鸡脂肪组织发育具有促进作用。在永生化鸡前体脂肪细胞系(immortalized chicken preadipocyte cell line, ICP1)诱导分化过程中,HIF1α相对表达量逐渐升高。综上所述,HIF1α是转录因子KLF7的一个靶基因,KLF7可能通过抑制HIF1α基因转录参与鸡脂肪组织发育过程。     

多种翻译后修饰对低氧诱导因子-1α稳定性调控的机制

低氧诱导因子-1（hypoxia-inducible factor-1, HIF-1）是组织细胞对缺氧感应和调控的一类关键转录因子,在机体中广泛表达.作为细胞低氧应答反应中的重要调节因子,HIF-1能够调节100多种涉及低氧应激下细胞适应和存活的靶基因. HIF-1是由氧依赖的α亚基和细胞内稳定表达的β亚基构成的异源二聚体.其中α亚基对氧浓度变化敏感,是HIF-1的功能性亚基,它的表达活性决定了HIF-1的生物学活性.近期研究发现,HIF-1α的一系列翻译后修饰可改变其稳定性,进而调控其转录激活活性,从而参与肿瘤、低氧性肺动脉高压以及心血管疾病等的发生与发展.本文主要就HIF-1α的一列系翻译后修饰,如羟基化、泛素化、磷酸化、乙酰化、SUMO化修饰作一综述.     

缺氧诱导因子1

缺氧诱导因子1是缺氧诱导细胞所产生的一种蛋白质,由一个120 ku的α亚基和一个91～94 ku的β亚基组成的异源二聚体.在缺氧条件下,促进红细胞生成素和糖酵解酶等基因的转录和表达,维持机体氧稳态.     

缺氧诱导因子1研究进展

缺氧诱导因子１（ｈｙｐｏｘｉａ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ－１,ＨＩＦ－１）是由两个蛋白质亚基组成的二聚体转录因子,对缺氧具有特异感受性,它的表达受细胞内氧分压的严密调节。ＨＩＦ－１参与体内许多缺氧反应性基因的转录调节,是机体缺氧应答反应中的关键作用因子。     

缺氧诱导因子-1α表达在胃癌中的研究进展

胃癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁着人类的健康。大量研究表明,缺氧能促进恶性肿瘤的发展,增强其侵袭性,而缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是这一过程的主要调节因子,是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物及人体内的一种转录因子,通过增加多种转录因子和靶基因产物的表达,使肿瘤在缺氧的环境下生长、增殖、侵袭及转移。本文就HIF-1α在胃癌领域的研究进展做一综述。     

缺氧诱导因子-1α与血管内皮生长因子及其受体2在大鼠3期压力性损伤皮肤组织中的表达及意义*

目的:分析缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体2(KDR)在不同受压时间点大鼠压力性损伤局部皮肤组织中的表达及相互关系,探讨3期压力性损伤慢性难愈的可能机制。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、受压3 d、5 d、7 d、 9 d组( n=8 ),使用磁铁压迫法建立3期压力性损伤动物模型。HE染色观察皮肤组织形态;免疫组化法检测VEGF表达,Western blot 检测皮肤组织HIF-1α、VEGF、KDR蛋白表达;对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果:①HE结果显示,与正常对照组相比,受压组大鼠表皮逐渐增厚,血管数量不断减少,胶原排列紊乱,炎症细胞浸润增加。②免疫组化结果显示:受压3 d组大鼠皮肤组织中VEGF蛋白表达量较正常对照组明显增高(P＜0.01);受压5 d、7 d和 9 d组大鼠皮肤组织中VEGF蛋白表达量均明显低于正常对照组(P＜0.05)。WB结果和免疫组化结果一致。③WB结果显示:受压3 d、5 d和7 d组大鼠皮肤组织中HIF-1α表达量均明显高于正常对照组(P＜0.01 或 P＜0.05);4组受压组大鼠皮肤组织KDR蛋白表达量均低于正常对照组(P＜0.05或P＜0.01)。结论:HIF-1α介导的VEGF和KDR蛋白表达减少引起组织血管生成减少可能是3期压力性损伤慢性难愈的重要原因之一。     

缺氧诱导因子1与缺氧信号转导机制

缺氧诱导因子1(HIF-1)不仅作为维持氧自稳平衡的核心调控因子,调控一系列缺氧相关基因的表达,而且在感受缺氧,传递缺氧信号的过程中发挥重要作用。氧依赖的羟化酶的发现,证明胞内氧浓度直接调控HIF-1α亚基的表达,为揭示缺氧信号调控HIF-1表达的分子机制提供了有力的证据。     

缺氧诱导因子-1α与胰腺癌发生发层的关系

缺氧是实体瘤生长中存在的普遍现象,它和肿瘤的发展、侵润、转移密切相关。研究发现在胰腺癌组织中也存在缺氧现象。缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物及人体中的一种转录因子,它是由α亚基和β亚基组成的异源二聚体。HIF-1α是HIF-1的活性部分,其表达与胰腺癌的血管生成、凋亡抑制、多药耐药、生长转移具有密切关系。同时,缺氧状态下,间质细胞与胰腺癌细胞之间的相互作用促进了癌细胞的侵袭力。现就HIF-1α在胰腺癌组织中的表达及作用做一综述。     

缺氧诱导因子-1结构及功能的研究进展

缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是一种介导机体对缺氧环境产生应答的转录因子。在炎症及实体肿瘤周围的组织大多存在缺氧现象。在缺氧条件下,HIF-1α和HIF-1β两个亚基结合,形成HIF-1并迅速活化,参与机体缺氧环境的适应,并在胚胎发育、多种肿瘤及心肺疾病等发生发展中起到重要作用。因此,更好地认识HIF-1的功能及意义,对进一步地认识与其相关生命过程和疾病本质以及研发新的治疗手段具有重要意义。     

离心力和剪应力应答蛋白1是肿瘤坏死因子受体1的新调控因子

离心力和剪应力应答基因1(responsive to centrifugal force and shear stress gene 1,RECS1)被剔除的小鼠易患囊性内侧坏死和动脉扩张症,伴随着血管组织基质金属蛋白酶9表达水平的增强.本室前期研究发现,稳定表达RECS1的小鼠成纤维细胞对肿瘤坏死因子受体2激动性抗体的敏感性被明显弱化,显示RECS1参与肿瘤坏死因子信号的调控.本文研究了RECS1对肿瘤坏死因子受体1（tumor necrosis factor receptor-1, TNFR1）的调控作用.结果显示,RECS1结合TNFR1,并抑制过量表达TNFR1诱导的核转录因子-κB (NF-κB)活化.缺失突变研究发现,RECS1分子上有NPLY和SPEDY两个模体是其抑制TNFR1信号所必需的.免疫共沉淀实验发现,NPLY是RECS1与TNFR1结合所必需的.而SPEDY的缺失不影响RECS1与TNFR1的结合.另外,免疫共染色实验显示,RECS1与TNFR1共定位于细胞内核体.这些实验结果进一步揭示了RECS1负调控肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)信号进而参与调控血管发育与重塑的生物功能及可能机理.     

乳腺癌乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)与雌激素受体表达的关系

目的探讨乳腺癌乏氧诱导因子-1α(hypoxia induci blefactor-1α,HIF-1α)与雌激素受体(ER)表达的关系。方法利用免疫组织化学方法在42例乳腺癌组织中进行HIF-1α染色,并与ER表达情况及其他临床病理资料进行相关性分析。结果乳腺癌组织中HIF-1α阳性表达率为54.76%,ER表达阳性率为66.67%(28/42)。ER表达率在HIF-1α阳性者中为56.52%,HIF-1α阴性者中为78.95%,P=0.125。而在细胞水平上,ER在HIF-1α阳性者和阴性者中的表达量积分,分别为2.96±1.97、5.11±2.58,t=3.06(P=0.004),Spearman等级分析,r=-0.49(P=0.003)。另外,HIF-1α表达除常见于绝经后患者外,与肿瘤大小、病理类型、孕激素受体、腋窝淋巴结转移、Ki67、C-erbB-2表达均无显著相关。结论乳腺癌组织中HIF-1α表达可能参与了ER表达下调的机制。     

HIF-1alpha和COX-2在溃疡性结肠炎患者外周血及黏膜组织中表达及意义

目的：探讨HIF-1琢和COX-2 在溃疡性结肠炎（UC）患者外周血及黏膜组织中表达及意义。方法：87 例UC患者根据临床病情分为活动期（n=63）和缓解期（n=24）,同期选取行结肠镜检查无异常健康者40 名作为对照组,利用qRT-PCR 对外周血及黏膜组织标本中HIF-1alpha和COX-2 表达进行检测。结果：活动期UC 患者外周血和黏膜组织中HIF-1alpha mRNA和COX-2 mRNA相对表达量均高于缓解期患者,且均高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）;活动期UC 患者中,临床病情重型患者外周血及黏膜组织中HIF-1-alpha mRNA 和COX-2 mRNA 相对表达量高于中型及轻型患者,差异均有统计学意义（P<0.05）,内镜表现分级Ⅲ 级患者外周血及黏膜组织中HIF-1-alpha mRNA和COX-2 mRNA相对表达量高于Ⅱ级及Ⅰ级患者,差异均有统计学意义（P<0.05）;Pearson相关分析显示,活动期UC患者外周血及黏膜组织中HIF-1alphamRNA和COX-2 mRNA相对表达量均与Mayo 评分呈正相关（r=0.592、0.722 和0.694、0.456,P<0.05）;Spearman 相关分析显示,活动期UC 患者外周血及黏膜组织中HIF-1-mRNA 和COX-2mRNA 相对表达量均与临床病情呈正相关（r=0.804、0.826 和0.752、0.763,P<0.05）,且与内镜表现分级呈正相关（r=0.803、0.749和0.858、0.793,P<0.05）。结论：HIF-1-alpha 和COX-2 在UC患者外周血及黏膜组织中呈高表达,且与患者病情严重程度有关。     

Overexpression of HIF-1α in mesenchymal stem cells contributes to repairing hypoxic-ischemic brain damage in rats

Preclinical researches on mesenchymal stem cells (MSCs) transplantation, which is used to treat hypoxic-ischemic (HI) brain damage, have received inspiring achievements. However, the insufficient migration of active cells to damaged tissues has limited their potential therapeutic effects. There are some evidences that hypoxia inducible factor-1 alpha (HIF-1α) promotes the viability and migration of the cells. Here, we aim to investigate whether overexpression of HIF-1α in MSCs could improve the viability and migration capacity of cells, and its therapeutic efficiency on HI brain damage. In the study, MSCs with HIF-1α overexpression was achieved by recombinant lentiviral vector and transplanted to the rats subsequent to HI. Our data indicated that overexpression of HIF-1α promoted the viability and migration of MSCs, HIF-1α overexpressed MSCs also had a stronger therapeutic efficiency on HI brain damaged treatment by mitigating the injury on behavioral and histological changes evoked by HI insults, accompanied with more MSCs migrating to cerebral damaged area. This study demonstrated that HIF-1α overexpression could increase the MSCs’ therapeutic efficiency in HI and the promotion of the cells’ directional migration to cerebral HI area by overexpression may be responsible for it, which showed that transplantation of MSCs with HIF-1α overexpression is an attractive therapeutic option to treat HI-induced brain injury in the future.     

乙肝肝硬化失代偿期并发肝功能衰竭患者血清Copeptin、HIF-1α、Beclin1检测及其临床意义分析

摘要 目的：探讨乙肝肝硬化失代偿期（HBV-DC）并发肝功能衰竭患者血清和肽素（Copeptin）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、Beclin1表达水平及其临床意义。方法：HBV-DC并发肝功能衰竭的患者141例纳入病例组,另选同期73例体检的健康对象纳入对照组。根据随访12个月内患者的生存状况将病例组分为存活组和死亡组。检测血清Copeptin、HIF-1α、Beclin1水平。多因素Logistic回归分析HBV-DC并发肝功能衰竭患者死亡的相关影响因素。结果：病例组血清Copeptin、HIF-1α、Beclin1水平高于对照组（P＜0.05）。死亡组血清Copeptin、HIF-1α、Beclin1高于存活组（P＜0.05）。终末期肝病模型（MELD）评分、Copeptin、HIF-1α、Beclin1升高是HBV-DC并发肝功能衰竭患者死亡的危险因素（P＜0.05）。结论：HBV-DC并发肝功能衰竭患者血清Copeptin、HIF-1α、Beclin1水平升高,是患者死亡的独立危险因素。     

Suppression of hypoxia inducible factor-1alpha (HIF-1alpha) by YC-1 is dependent on murine double minute 2 (Mdm2)

Inhibition of HIF-1alpha activity provides an important strategy for the treatment of cancer. Recently, 3-(5'-hydroxymethyl-2'-furyl)-1-benzyl indazole (YC-1) has been identified as an anti-HIF-1alpha drug in cancer therapy with unclear molecular mechanism. In the present study, we aimed to investigate the effect and mechanism of YC-1 on HIF-1alpha in a hepatocellular carcinoma cell line under hypoxic condition, which was generated by incubating cells with 0.1% O(2). The phenotypic and molecular changes of cells were determined by cell proliferation assay, apoptosis assay, luciferase promoter assay, and Western blot analysis. YC-1 arrested tumor cell growth in a dose-dependent manner, whereas it did not induce cell apoptosis. Hypoxia-induced upregulation of HIF-1alpha was suppressed by YC-1 administration. YC-1 inhibited HIF-1alpha protein synthesis under normoxia and affected protein stability under hypoxia. YC-1 suppressed the expression of total and phosphorylated forms of murine double minute 2 (Mdm2), whereas this inhibitory effect was blocked by overexpression of Mdm2. In conclusion, YC-1 suppressed both protein synthesis and stability of HIF-1alpha in HCC cells, and its inhibitory effects on HIF-1alpha were dependent on Mdm2.     

缺氧诱导因子-1 α（HIF-1α）与卵巢癌多药耐药的关系

卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤,其死亡率居妇科肿瘤之首。化疗是其重要的治疗手段,而随之产生的肿瘤细胞多药耐药成为治疗失败的主要原因。低氧是所有实体肿瘤的特征,缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是介导细胞低氧反应最关键的核转录因子,对卵巢癌多药耐药的形成起到多方面的作用,本文就近年来以HIF-1α为靶点研究卵巢癌耐药的研究进展作一综述。