保加利亚尖椒再生及遗传转化条件的优化

为了提高辣椒子叶不定芽的伸长率和遗传转化效率,本研究以保加利亚尖椒子叶为外植体,通过正交试验分别对影响保加利亚尖椒子叶不定芽伸长的激素组合以及遗传转化参数进行了优化。结果表明:诱导不定芽伸长的最佳激素组合为0.2mg/LIAA+1.0mg/LGA3+0.1mg/LPBU,不定芽伸长率最高为60%;以5mg/L潮霉素为选择压,预培养时间为4d、共培养时间为2d、侵染时间为20min时,诱导的抗性不定芽比率最高。本研究建立的辣椒再生及遗传转化体系为辣椒转基因研究奠定一定的基础。     

三倍体毛白杨组织脱分化培养与植株体再生

采用毛白杨三倍体幼叶作为外植体进行组织培养,以MS为基本培养基获得了再生植株。从NAA和IAA与6-BA间进行的18个正交试验中,选择出适宜脱分化培养基MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L,对三倍体毛白杨愈伤组织诱导率为87.6%。5种生长素与6-BA配比的再分化培养基中,12MS+IAA 0.1mg/L+6-BA 0.1mg/L对不定芽的分化诱导率可达到68.5%;MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.01mg/L的培养基可使单芽直接增殖出7.4个芽。在MS+IBA 1.0mg/L的生根培养基上,试管苗的生根率可达85.7%。     

濒危物种绒毛皂荚组织培养快繁技术的初步研究

以绒毛皂荚(Gleditsia vestita Chun et How ex B.G.Li)种子为外植体,通过愈伤组织诱导、不定芽分化增殖、生根和驯化移栽,建立了绒毛皂荚组织培养的快速繁殖体系。结果表明:1)绒毛皂荚子叶和胚轴在MS+6-BA3.0 mg/L+KT 0.4 mg/L+IAA 0.3 mg/L培养基上同步诱导出愈伤和芽,愈伤组织诱导率达到90.5%,同步分化率高达77.9%;2)不定芽增殖的最佳培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L+NAA 0.2 mg/L,培养20 d后,增殖倍数为4.0;3)MS+NAA 0.5 mg/L+IAA 0.25 mg/L条件下,生根率高达100%,且移栽后植株长势好,成活率达90%以上。     

辣椒再生体系不定芽发生因素的优化研究

以辣椒(Capsicum annuum L)品种"哈椒一号"为试材,选用无菌苗子叶、下胚轴和带柄子叶为外植体,采用正交设计探讨不同外植体、激素组合和AgNO_2浓度等因素对不定芽分化的影响,筛选出了三种外植体不定芽诱导的最适培养基。试验结果表明:在不定芽的分化中,6-BA与IAA相配合使叶片不定芽分化频率明显提高,BA/IAA的比例对不定芽分化有明显影响。并且6-BA 6 mg/L+IAA 2 mg/L的组合能够达到最高的诱导率。AgNO_3不但显著提高了不定芽诱导的频率,并且还缩短了不定芽的发生时间。另外,三种外植体的不定芽诱导率,带柄子叶最高,其次是子叶,下胚轴最差。最适不定芽培养基:MS+6-BA 6 mg/L+IAA 2 mg/L+AgNO_2 4 mg/L,pH 5.8,最高不定芽分化率达88.2%。     

罗汉果叶片离体再生快繁技术

以罗汉果(Ssiraiti grosvenori)叶片为外植体,探讨培养方式、激素组合对愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。结果表明:罗汉果叶片在培养基MS+BA 1.0 mg/L+IBA 0.7 mg/L上培养4周愈伤组织的诱导率达90%以上;罗汉果愈伤组织在培养基MS+BA 1.0 mg/L+IBA0.2 mg/L+赛苯隆(TDZ)0.1 mg/L上不定芽的分化率可达70%,平均出芽指数3.7;罗汉果试管苗在培养基MS+BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L上茎芽增殖比较稳定,在培养基MS+IBA0.1 mg/L上培养2周开始分化不定根,其生根率在90%以上。     

中药“枳壳”的组织培养与植株再生（简报）

以酸橙的茎段为外植体,进行离体再生体系研究.结果表明,培养基MS + 6-BA 1.0 mg/L + IAA 0.5 mg/L + CH 400 mg/L适宜不定芽诱导;培养基MS + 6-BA 0.5 mg/L+ IAA 0.25 mg/L + CH 400 mg/L适宜不定芽增殖;培养基1/2MS + NAA 1.0 mg/L + IBA 2.0 mg/L生根效果较好,生根率达80%以上.     

野生高乌头组织培养及快速繁殖

以野生高乌头的嫩叶和叶柄为材料进行高乌头的组织培养研究。结果表明:高乌头的愈伤诱导培养基为1)MS+2,4-D4.0mg/L,2)MS+2,4-D3.0mg/L+6-BA0.5mg/L;愈伤分化培养基为MS+2,4-D0.2mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L;不定芽增殖培养基为MS+2,4-D0.2mg/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,平均增殖倍数为5.5;生根培养基为1/2MS+IBA1.5mg/L,生根数10条以上,生根率95%以上。     

不同植物生长调节剂对铁皮石斛(Dendrobium candidum)再生的影响

本实验以铁皮石斛无菌苗茎段为外植体,通过添加不同浓度的植物生长调节剂,诱导铁皮石斛愈伤组织形成与分化,建立铁皮石斛组织培养再生体系。结果表明,外植体接种5 d后,在改良MS培养基上添加2 mg/L PBU和0.05 mg/L IAA,可达到100%的愈伤诱导率。将愈伤组织接种在MS培养基上,添加0.1 mg/L NAA和0.5 mg/L 6-BA,不定芽诱导率为90.8%。适合铁皮石斛芽增殖培养基为:MS+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+100 mg/L Vc+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。PBU浓度为0.5 mg/L,NAA浓度为0.05 mg/L时,芽苗生长情况良好,最适合用于不定芽伸长。铁皮石斛最适生根的培养基为:MS+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+100 mg/L Vc+0.5 mg/L IBA,生根率可高达94.1%。本研究成功建立了铁皮石斛高效再生体系。     

不同辣椒材料离体再生及其影响因素的研究

以8个辣椒(Capsicum annuumL.)纯系为材料,对不同材料、外植体种类和激素组合等因素对辣椒植株离体再生的影响进行了研究。结果表明,较高的6-BA/IAA值有利于辣椒外植体的分化再生,而6-BA/IAA值较低则适合于再生芽的伸长;不同辣椒材料的再生能力差别较大;辣椒带柄子叶再生能力比下胚轴强,是较好的外植体材料;12~16 d苗龄的外植体分化频率较高;在供试的8个辣椒材料中‘2096’、‘B4’和‘B7’的再生能力较强。高频率的不定芽分化培养基为MB(MS无机成分 B5有机成分) 0.8 mg/L IAA 5.0 mg/L 6-BA 4.0 mg/L Ag-NO3;不定芽伸长的培养基为MB 0.8 mg/L IAA 2.0 mg/L 6-BA 2.0 mg/L GA3 4.0 mg/L AgNO3;高效生根诱导培养基为MB 0.2 mg/L IAA 0.1 mg/L NAA。     

葶苈愈伤组织诱导及分化研究

为保护野生资源、实现人工栽培,本研究以葶苈(Draba nemorosa)嫩茎为材料,采用组织培养方法进行愈伤组织诱导与分化、不定芽生根与试管苗生根继代增殖培养,以及移栽和定植研究。结果表明,MS+6-BA 0.4 mg/L+2,4-D 2.5 mg/L是愈伤组织诱导培养和继代增殖培养的理想培养基;MS+6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.1 mg/L 是愈伤组织分化培养和不定芽继代增殖培养的理想培养基;1/3MS+IAA 0.6 mg/L是不定芽生根培养和生根继代增殖培养的理想培养基;试管苗移栽成活率为86.8%,定植成活率为96.4%;定植苗保持了野生葶苈的植物学性状。     

火炬松成熟合子胚培养直接器官发生和植株再生

基因型Ｈｂ,Ｍａ和Ｍｃ的火炬松成熟合子胚在附加１．０ｍｇ／ＬＮＡＡ,４．０ｍｇ／ＬＢＡ,５００ｍｇ／ＬＬＨ和５００ｍｇ／Ｌ谷氨酰胺的ＴＥ培养基上培养１２周后,在子叶和胚轴部位形成不定芽原基。然后将合子胚转移到附加０．５ｍｇ／／ＬＮＡＡ,０．０５ｍｇ／ＬＩＢＡ,２ｍｇ／ＬＢＡ,５００ｍｇ／ＬＬＨ和５００ｍｇ／Ｌ谷氨酰胺的ＴＥ不定芽分化培养基上,６周后分化产生大量不定芽,３种基因型中,Ｈｂ的直接不定芽     

紫苏不同外植体的培养及再生

探讨了紫苏（Perilla frutescens）不同外植体在不同激素的不同浓度及组合培养基中的培养及再生情况,建立了紫苏的高效快捷再生体系。结果表明：（1）再生率由高到低依次是茎尖、真叶、子叶和下胚轴;（2）茎尖无论有无激素处理,再生率都在85%以上,添加合适的激素可提高增殖系数。真叶在MS＋TDZ 0.05 mg/L～0.1 mg/L范围处理下再生率均达70%左右。子叶最适激素组合为MS＋KT 1.0 mg/L＋IAA 1.0 mg/L,再生率22.22%。下胚轴最适激素组合为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋IAA 1.0 mg/L,再生率14.61%;（3）再生苗在1/2 MS中生根良好,生根率达86.67%,平均根长7.36 cm;（4）真叶外植体可形成叶簇,并可反复诱导不定芽发生,增殖能力强,培养周期短,是最理想的外植体。     

影响辣椒离体再生芽伸长因素研究

以辣椒子叶为外植体,比较不同浓度BA和IAA激素组合对辣椒再生芽诱导的差异,利用筛选出的高效芽诱导培养基为基础,研究了赤霉素、芽诱导时间、培养基有机成分、不同激素组合和品种等因素对辣椒不定芽伸长的影响。结果表明:不同基因型辣椒子叶再生能力不同,BA3.0mg.L-1 IAA0.5mg.L-1的激素配比对不定芽诱导频率最高;不定芽的伸长百分率随着GA3浓度的增加而增加,GA3的适合浓度为1.0～2.0mg.L-1;不定芽诱导时间对不定芽的伸长有一定的影响,诱导21d的不定芽,其伸长频率明显高于诱导14d的不定芽;B5有机成分在辣椒不定芽的伸长中效果优于MS有机成分;激素组合对不定芽伸长有一定的影响,Zeatin GA3激素组合对伸长效果最好,BA IAA GA3伸长效果较好,BA PAA(苯乙酸,phenylaceticacid) GA3伸长效果次之;不同品种辣椒不定芽的伸长能力有一定差异,楚风和苏椒五号再生芽伸长能力最佳。与IAA和NAA相比,IBA对再生芽生根效果较好。     

荞麦组织培养及高频植株再生体系的建立

通过对荞麦(Fagopyrum esculentum Moench)不同外植体、不同激素配比的比较研究,建立了荞麦离体培养高效植株再生体系。荞麦子叶切段在含2．0 mg/L 2,4-D和1．0 mg/L 6-BA的MS培养基上愈伤组织诱导率为89．6％,而下胚轴切段在含2．0 mg/L 2,4-D和1．0-2．0 mg/L 6-BA MS培养基上愈伤组织诱导率高达100％。在2．0 mg／L 6-BA、0．1 mg,L IAA和1 mg／L KT的MS培养基上通过愈伤组织间接分化或外植体直接分化形成不定芽。来自子叶和下胚轴的愈伤组织的分化率分别为42．5％和73．6％,下胚轴的分化率明显高于子叶。将生长状态良好的不定芽转至含1．0 mg/L IBA和0．5mg/L NAA的1/2 MS培养基上生根,生根率达到100％。再生植株移栽到盆土中,成活率达91．6％,并且生长状态和特征均表现正常。     

影响辣椒离体再生芽伸长因素研究(英文)

以辣椒子叶为外植体,比较不同浓度BA和IAA激素组合对辣椒再生芽诱导的差异,利用筛选出的高效芽诱导培养基为基础,研究了赤霉素、芽诱导时间、培养基有机成分、不同激素组合和品种等因素对辣椒不定芽伸长的影响。结果表明:不同基因型辣椒子叶再生能力不同,BA3.0mg·L^-1+IAA0.5mg·L^-1的激素配比对不定芽诱导频率最高;不定芽的伸长百分率随着GA₃浓度的增加而增加,GA₃的适合浓度为1.0～2.0mg·L^-1;不定芽诱导时间对不定芽的伸长有一定的影响,诱导21d的不定芽,其伸长频率明显高于诱导14d的不定芽;B5有机成分在辣椒不定芽的伸长中效果优于MS有机成分;激素组合对不定芽伸长有一定的影响,Zeatin+GA₃激素组合对伸长效果最好,BA+IAA+GA₃伸长效果较好,BA+PAA(苯乙酸,phenylaceticacid)+GA₃伸长效果次之;不同品种辣椒不定芽的伸长能力有一定差异,楚风和苏椒五号再生芽伸长能力最佳。与IAA和NAA相比,IBA对再生芽生根效果较好。     

马尾松高效再生体系的建立(简报)

利用组织培养技术快速繁殖针叶树,不仅为植树造林所需大量苗木开辟了一条快速高效的新途径,是生产优良无性系的捷径,而且也是植物基因工程技术应用于针叶树品种改良的前提条件。它将在林木种苗产业化和林木良种化进程中发挥重要作用。针叶树的离体培养和植株再生一直是植物组织培养研究中难度较大的一个领域。近几十年来,随着世界各国对发展无性系育林业的日益重视,针叶树组织培养研究取得了很大的进展[1-3]。马尾松(Pinus massoniana Lamb.)是我国南方主要的造林及绿化树种,其木材和松脂具有重要的经济价值。然而在生产实践中,种子园种子…     

Establishment of a highly efficient transformation system for pepper (Capsicum annuum L.)

Application of modern genetic manipulation has been limited in pepper ( Capsicum annuum L.) due to the lack of an efficient transformation system. Following the development of an efficient protocol for in vitro regeneration of pepper cotyledons, we investigated the key factors affecting transformation and established a highly efficient genetic transformation system using the pepper cotyledon as starting material. In this system, cotyledon explants are preconditioned for 2 days on kanamycin (km)-free DM1 medium [Murashige and Skoog (MS) salts/Gamborg B5 vitamins basal medium supplemented with 20 g/l sucrose, 5,000 mg/l DJ nutrients and a hormone combination of 1.0 mg/l indoleacetic acid (IAA) and 5.0 mg/l 6-benzyladenine (BA) solidified with 0.7% agar, pH 5.8], followed by co-cultivation with Agrobacterium tumefaciens on DM1 for 2 days and delay selection on DM1 with 500 mg/l carbenicillin (carb) for 2 days. The explants are then placed on DM1 containing 10 mg/l AgNO(3), 50 mg/l km-sulfate and 500 mg/l carb. After 4-5 weeks, the explants with buds are transferred to EM1 medium (MS salts/Gamborg B5 vitamins basal medium supplemented with 20 g/l sucrose, 5,000 mg/l DJ nutrients, 10 mg/l AgNO(3) and a hormone combination of 1.0 mg/l IAA, 3.0 mg/l BA and 2.0 mg/l gibberellic acid, solidified with 0.7% agar, pH 5.8) with 50 mg/l kanamycin and 500 mg/l carbenicillin for the elongation of buds. After 3-6 weeks, 1- to 2-cm-long elongated shoots are excised and planted on RM1 medium (MS basal medium supplemented with a hormone combination of 0.2 mg/l NAA and 0.1 mg/l IAA, solidified with 0.8% agar, pH 5.8) with 25 mg/l km and 200 mg/l carb for rooting. We tested four genotypes of pepper, and all presented a high differentiation efficiency (81.3% on average), elongation rate (61.5%) and rooting efficiency (89.5%). Polymerase chain reaction analysis results showed that 40.8% of the regenerated plantlets were transgenic plants.     

资源植物罗布麻的愈伤组织诱导和植株再生研究

以罗布麻（Apocynum venetum L.）无菌苗的叶、茎和根作为外植体,在不同激素与浓度组合的MS培养基上进行愈伤组织诱导和植株再生研究。结果表明,在多个激素浓度配比的培养基中,罗布麻叶和茎的愈伤组织诱导率均可达到100%;但进一步将愈伤组织转接到含有不同激素组合的培养基进行不定芽分化时,叶和茎来源的愈伤组织的不定芽分化率有很大不同,茎来源的愈伤组织虽可在多个培养基中有不定芽分化,但最高诱导率仅达20%;而叶片来源的愈伤组织虽仅有4个激素组合培养基中有不定芽的分化,但最高分化率可达到35%。因此,构建罗布麻再生体系的最佳外植体应选择叶片。愈伤组织诱导与不定芽分化的最佳培养基均为：MS＋NAA0.1 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L;不定芽在1/2MS＋NAA 0.2 mg/L生根培养基的生根效果最佳,不仅根群质量好,且生根率也高达100%;此再生苗的移栽成活率也最高,在适宜条件下可达75%。