人睫状神经营养因子结构和功能的研究

睫状神经营养国子在神经系统的发育和损伤修复过程中具有重要作用。本文根据由核苷酸序列推导的氨基酸序列预测了人睫状神经营养因子和二级结构。参考结构预测结果,用片段插入法和缺失地,改造人睫状神经营养因子编码基因,在大肠菌中表达并纯化了五系人睫状神经营养因子的突变体,观察结构改造对人睫状神经营养因子神经营养活性的影响。     

免疫酶双重染色法显示再生神经中的神经生长因子与睫状节神经营养因子

本研究以成人正中神经切割伤后２～３个月的神经干为材料,冰冻切片,用免疫双重染色技术显示了神经生长因子与睫状节神经营养（诱向）因子在再生的周围神经组织中的表达与分布。神经生长因子选用ＡＰＡＡＰ法．其阳性产物呈红色;睫状节神经营养（诱向）因子选用ＡＢＣ系统,４氯－１－萘酚显色,阳性产物为褐色。光镜下观察：神经生长因子的阳性反应产物出现在正中神经切割伤后再生的神经纤维中,高倍镜下可见其阳性产物分布在轴索,而在雪旺氏细胞中没能见到呈红色的阳性反应产物;睫状节神经营养（诱向）因子分布在一些细胞体积大、核大呈增生活跃状态的雪旺氏细胞中。红与褐双色反应产物色调清晰,效果较好。研究结果提示：睫状节神经营养（诱向）因子与神经生长因子在人周围神经再生过程中起着十分重要的作用。     

定量测定重组人睫状神经营养因子活性的新方法

目的：建立一种能定量测定重组人睫状神经营养因子（ciliary neurotrophic factor,CNTF）生物学活性的新方法。方法：从鸡胚中分离出背根神经节并制成神经细胞,将重组人睫状神经营养因子加入到细胞中继续培养64h后,用酸性磷酸酶法检测活细胞内酸性磷酸酶的活性,从而定量测定重组人睫状神经营养因子的生物活性。结果：重组人睫状神经营养因子有促原代鸡胚背根神经细胞存活作用,细胞存活率与加入重组人睫状神经营养因子的量成正相关。结论：通过检测存活的原代鸡胚背根神经细胞内酸性磷酸酶的含量来定量测定重组人睫状神经营养因子生物活性的实验方法具有干扰因素少、定量准确、重复性好等优点。     

睫状神经营养因子的基因结构及受体

睫状神经营养因子最初由于能促进鸡胚胎睫状神经节副交感神经元存活而被发现,现已知道它对神经系统的细胞具有更广泛的作用。最近研究表明睫状神经营养因子与成血细胞因子的一个亚家族成员在结构上相似并共用受体成分。     

人睫状神经营养因子的基因克隆与高效表达

人睫状神经营养因子的基因克隆与高效表达范明,杜方勇,咸海清,刘淑红,甘思德（军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０）睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ,ＣＮＴＦ）以最早发现于鸡睫状神经节而命名,是目前已知的神经...     

睫状神经营养因子研究进展

睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）能够促进多种神经元的存活,在神经系统发育、分化和损伤修复过程中具有重要作用。睫状神经营养因子与白血病抑制因子、白细胞介素６有相似的空间结构,它们的受体组成也相关。睫状神经营养因子的神经营养作用研究为临床治疗神经系统疾病带来了新的希望。     

火棉胶包埋组织切片及冰冻切片的连续切片与染色

近年来为了教学和研究所用之切片标本,曾广泛使用火棉胶包埋组织切片和冰冻切片法,这两种方法虽然它是有比石腊包埋组织切片稍厚一点,但它的优点是远超过了缺点。组织用石腊包埋,在组织经过不同浓度酒精脱水后,须用氯仿或二甲苯透明,再置于58℃温箱石腊中几个小时。以上透明剂具有使组织收缩变小,在经过这样高温之下,组织增加它由收缩而扭转和变形,纤维曲折,细胞及所含物质缩小,折光率增强,组织内所含之尖脂脂亦易于被以上透明剂所溶解,致染色不佳。作为观察和研究组织形态是不够美满的。因为石腊包埋组织制作切片有以上之缺点,     

睫状神经营养因子受体

睫状神经营养因子是一种能够促进感觉、交感和运动神经元存活和分化的细胞因子．睫状神经营养因子受体复合物由三个亚基组成,α亚基是睫状神经营养因子的结合蛋白,它不是跨膜蛋白,而是通过GPI键锚在细胞膜上;信号传递体的两个亚基分别是gp130和LIFRβ．随状神经营养因子受体复合物的形成是一个有序过程、Jak／Tyk家族的激活与细胞内信号传导有关．     

超薄切片套片法

超薄切片捞取方法很多,近年来,我们采用铂金丝环套片法,与目前采用的沾片法和水底捞片法相比,具有较多的优点。铂金丝环套片法操作简单,易于掌握,而且能使切片平整地铺在铜网中央。沾片法易将带状的连续切片打乱,切片也往往有皱折。水底捞片法,固然可以使切片保持平整,但操作不易掌握,对于缺乏经验的新手来说,很容易将切片捞偏,即使是熟练的操作者,     

鱼卵切片技术

鱼类成熟的游离卵球,卵黄十分丰富,连续切片很不容易。若按过去的一般方法,切片易碎,显微照相亦欠佳,同时容易褪色,镜片标本不易长期保存。如果在固定、脱水、染色等方面加以改进,切片即不易脆碎,可得比较满意的结果,且处理过程也较简单。     

观察壳状地衣结构的切片制作方法

可先采集标本连同附属物(一块岩石或树皮)保存好。用前1—2天把壳状地衣连同附属物浸于水中。待地衣由褐变绿张开后,用镊子取一大片标本,底面向上,用三片双面刀片(中间的一片稍抬高些)在壳状地衣的中部横切,取其最薄一片横切片,切面向上放在载片中央的水滴中,盖上盖片即可观察。在低倍镜下,中     

环氧树脂厚切片的染色

供电子显微镜观察的超薄切片,一般用各种环氧树脂作包埋剂。用环氧树脂的包埋头也能切成厚1—2微米的切片,供光学显微镜观察。这种厚度的切片与几百埃计算的超薄切片相对而言,可称之厚切片或半薄切片。在超薄切片之前,用环氧树脂包埋头先切     

动物组织徒手切片技术

本文说明一种新的动物切片法,通过十个基本步骤实现的徒手切片法,其特点是用一种高分子聚合物作材料包埋剂制成包埋块,用剃刀切成薄膜状切片。不用大型贵重仪器,优于石蜡切片法。是动物组织光学显微镜切片技术的革新。     

病理快速冷冻切片染色的质控切片制备

目的探索一种较佳的病理快速冷冻切片染色质控片的制备方法。方法随机抽取60例快速冷冻组织,每例取2块组织,随机分为A、B二组,在-25℃速冻后,A组(标准组)切片放入AAF液(由95%乙醇A、乙酸A、甲醛F按85:5:10的比例配制而成)固定30s后立即进行HE染色,B组切片放入AAF液固定30s后取出室温晾干后放进冷冻切片机内过夜。余下的A组及B组组织进行后续2种不同的操作。C组:得到A组切片后的组织不做任何处理,直接放冷冻切片机机箱内,并将冷冻切片机箱体温度调高至-10℃,第二天上午再次调至-25℃;D组:得到B组切片后的组织于组织上加包埋剂覆盖后放冷冻切片机机箱内,余操作同C组。C、D两组于第二天上午8点再次进行冷冻切片后同B组一同进行HE染色,以十分制评定切片有无裂隙、皱褶或冰晶,染色后组织结构、细胞核着色和核质对比清晰度等6项指标的得分,分别与A组的染色片进行比较。结果 A、B两组切片质量评价指标得分无明显差别,C组切片无裂隙指标得分低于A组,D组无冰晶指标得分低于A组;B、C两组的组织结构清晰、细胞核鲜艳、核质对比清晰指标得分与A组比较无显著差异;D组组织结构清晰、细胞核鲜艳、核质对比清晰指标得分均低于A组。结论新鲜的组织冷冻切片后,切片立即放入AAF液固定30s,随后取出,常温晾干后再次放进冷冻切片机机箱内过夜直至第二天上午放入全自动染色机内进行HE染色,观察染液的染色力,适用于每天快速冷冻切片工作开展前的全自动染色机的染色质控。     

乳腺冷冻切片的优化

目的优化乳腺冷冻切片的关键条件,以期提高制片效率与切片质量。方法通过实验,分别比较不同取材大小、速冻方法、切片厚度等条件对乳腺冷冻切片质量的影响。结果乳腺冷冻切片取材大小以1cm×1cm×0.2cm至2cm×1.5cm×0.3cm为佳;预先制作"带垫"的托头有利于提高速冻效率、减少组织块崩裂、减少冰晶;切片厚度以5μm及6μm为佳。结论优化乳腺组织取材大小、速冻方法、切片厚度等条件,可显著提高乳腺冷冻切片的制片效率与切片质量,为术中病理诊断及手术方案的制定提供保障。     

用石蜡切片法制作内耳切片

用含盐酸的Ｂｏｕｉｎ氏液固定、脱钙软化，延长高浓度酒精的脱水时间，恰当掌握透明时间，注意耳蜗及半规管的包埋方向等方法制作内耳石蜡切片，获得了该器官主要组织结构较理想的切片。     

神经再生过程中睫状神经营养因子基因表达的变化

神经再生过程中睫状神经营养因子基因表达的变化甘思德,杜方勇,范明（军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０）根据现有资料,在众多的神经因子（ｎｅｕｒｏｋｉｎｅｓ）中,睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）与神经营养素家族（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎｅｓ）完全...     

冰冻切片制作体会及常见问题

目的:探讨冰冻切片制作过程中的影响因素及改进措施,提高切片质量,确保实验结果科学性、稳定性及可靠性.方法:从标本的取材、制片以及固定等多个环节阐述冰冻切片常见问题.结果:通过调整切片机的相应设置并且在冰冻切片多个环节中采取了相应措施,使切片更完整,厚薄均匀,无脱片和冰晶空洞现象产生,切片质量优良.结论:制作出高质量的冰冻切片需在取材处理、切片、固定等诸多环节上精益求精,这对冰冻切片这一专业性很强的实验技术的质控有着重大意义.     

薄切片的放射自显影术

薄切片是指厚度为0．5～1μm的树脂类切片。文献中称它为厚切片（thicksection）或半薄切片（semithinsectio）,籍以与电镜观察用的薄切片（thinsection）区别。我国已习惯称电镜用的切片为超薄切片,因此,把这类切片称薄切片就能说明其比超薄切片厚,比普通石蜡切片薄的特性。用薄切片作放射自显影具有下列优点：（1）改善分辨力：放射自显影象的分辨力与样品的厚度成反比,薄切片的厚度低于普通石蜡切片,所以其分辨力高于用石蜡切片制作的放射自显影象的。（2）减少人工假象：用薄切片作放射自显影,不需去除包埋剂,因此,提供了平正…     

塑料薄切片技术

光学显微镜术观察用的薄切片,可用各种塑料包埋剂,如乙二醇甲基丙烯酸酯(glycolmethacrylate)和环氧树脂类(epoxy resins)包埋。这些塑料包埋剂经凝固后,很容易被切成1—2微米的薄切片,比传统的石蜡切片要薄得多;而且染色时无需经过脱蜡手续,便可