琥珀酸脱氢酶的研究 Ⅴ.异咯嗪辅基与酶朊的连接

琥珀酸脱氢酶与其它的黄素朊酶不同,它的酶朊部分与异咯嗪辅基的结合非常牢固,透析、变性或在酸性溶液中沉淀均不能使它们分离,蛋白水解酶的作用也不能分解辅基与酶朊连接的键而仅能得到异咯嗪肽。因此阐明如此牢固结合的酶朊与辅基连接的方式将是十分重要而有兴趣的问题。Singer等人曾提出肽键可能是经酯键连于辅基的核糖     

单克隆抗体有望用于治疗朊蛋白病

朊蛋白病是一组致命的神经系统变性疾病 ,其特征之一是正常的细胞朊蛋白 (PrPC)转变为有感染性的疾病相关蛋白PrPSc。目前朊蛋白病尚无有效的治疗方法。最近White等的研究表明 :抗朊蛋白单克隆抗体ICSM 18能抑制朊病毒复制 ,延缓朊蛋白病的发展。动物实验表明 ,持续进行这种被动免疫治疗的小鼠健康生长长达 5 0 0天以上 ,且未出现自身免疫反应的副作用 ;而对照组未接受单克隆抗体治疗小鼠的平均存活期仅为 197天左右。该研究表明 ,ICSM 18几乎不与PrPSc结合 ,而与PrPC 有高亲和力 ,其抑制作用呈剂量依赖性。它通过识别PrP的抗原决…     

不同來源的核酸原肌球朊的比較研究

近年来,大家都已公认,肌肉收缩功能的蛋白质基础是肌球朊与肌动朊。1946年Bailey以有机溶刘处理肌原纖维,用克分子鹽液抽提出一种分子不对称的新的蛋白质——原朊球朊;其化学结构、物理化学性质及肽链摺疊构型,都和肌球朊极为類似,但分子量僅为53,000,较肌球朊小十余倍。据Bailey推测,原肌球朊可能是构成肌球朊巨分子的基本单位之一。1951年Hamoir     

肌動朊、肌球朊与腺嘌呤核苷三磷酸在溶液中的相互作用

绪言 1939年和发现“肌球朊”具有腺嘌吟核苷三磷酸酶活力,同时底物水解所产生的能量,又用来供应肌肉的伸缩。这种结构与功能统一的观点,奠定了肌肉伸缩的生理化学基础。其後Straub发现了肌动朊,证实旧时所谓“肌球朊”实是肌球朊与肌动朊的络合体。目前研究肌肉     

朊病毒中朊蛋白及朊蛋白现象

朊病毒病是一种由朊病毒侵染动物神经系统并引发神经退行性症状的传染性疾病。朊病毒是由正常朊蛋白PrP^C通过构象转化形成具蛋白酶抗性的异常朊蛋白PrP^Se的病原微生物。最新研究表明,朊蛋白通过构象转变形成新的功能分子的现象在生物界中普遍存在,并与正常生物功能密切相关。通过研究类朊蛋白现象可以有助于揭示朊病毒感染机制以及深化对生物遗传多样性的了解。     

蛋白质错误折叠循环扩增技术

目前发现有多种人类及动物疾病是由体内蛋白质的错误折叠引起的,其中朊毒粒病因具有传染性而备受关注.朊毒粒病研究的核心问题之一是正常细胞朊蛋白（PrPc）向异常致病朊毒粒（PrPsc）转变的机制.蛋白质错误折叠循环扩增技术（protein misfolding cyclic amplification,PMCA）就是最新发明的在体外诱导朊蛋白（PrPc）产生错误折叠生成朊毒粒（prpsc）的技术.该文将概要介绍此项技术的原理、技术要点及在诊断与基础研究方面的应用前景.     

固氮酶铁钼蛋白的氧敏感性

自然界中含有固氮酶的微生物和蓝绿藻,能够把大气中的N_2转变为可被植物利用的氮。这些固氮生物中,好气性自生固氮菌、豆科植物根瘤菌及某些藻类在有氧环境中能高效率固定N_2。而所有固氮生物体内的固氮酶对O_2都非常敏感,其敏感程度随分离、纯化程度的提高而提高。一些生物能在好气环境中固氮是因在他们的体内存在结构(膜、构象)保护、呼吸保护和保护蛋白、豆血红朊等的作用,所以,固氮酶可避免氧的损伤而完成固氮功能。     

中国普通菜豆种质资源朊蛋白变异及多样性分析

朊蛋白是研究普通菜豆遗传多样性的一种重要且有效的生化标记。本试验通过SDS-PAEG凝胶电泳检测中国普通菜豆种质资源的朊蛋白变异类型,分析中国普通菜豆种质资源的遗传多样性及组成特点。来自中国13个省(自治区)的445份供试材料共检测到S、Sb、Sd、B、C、CA、T、PA、To、H、H1、CH 12种朊蛋白类型,表明中国普通菜豆种质朊蛋白变异类型丰富,遗传多样性水平较高。其中,Sb型朊蛋白种质最多,占比29.0%;T型其次,占比28.1%。依据朊蛋白类型在不同基因库的特异性,将研究材料明显地区分为中美基因库和安第斯基因库两大类。研究还发现中国普通菜豆种质资源中地方种质朊蛋白类型变异丰富,多样性明显高于现代育成品种或品系。最后,对种质朊蛋白类型与百粒重、子粒颜色、粒型进行相关性分析,结果表明朊蛋白类型与百粒重呈极显著正相关,而朊蛋白类型与子粒颜色、粒型2个性状之间无明显相关性。本研究结果将为普通菜豆种质资源的保护及有效地挖掘优质种质资源提供理论依据。     

PrPc介导的细胞信号转导

朊病毒病的发生是由于细胞正常朊蛋白PrPc转变成了异常构象的PrPc形式。PrPc的生理学功能目前尚不完全明确,可能与铜离子代谢、脂质摄取以及细胞信号传递有关。PrPc可以与小窝蛋白相互作用而活化Fyn非受体酪氨酸激酶从而引起下游信号通路的转导;可以作为受体与PrPc键合多肽结合后激活cAMP／PKA信号通路;以及引起细胞内钙离子浓度变化而活化信号通路。     

硅胶层析法测定蚕丝丝朊分子量的探讨

早在四十年代国外已经对蚕丝丝朊分子量进行了研究。1947年Coleman与Howitt采用乙烯铜—氢氧化二胺为溶剂,以渗透压法测得丝朊的分子量为3.3×10~4;Holmes和Smith于1952年通过测定丝朊溶液的沉降系数计算出丝朊的分子量为8.4×10~4;Kratky和Pity用X射线小角衍射方法测得丝朊的分子量为27.8×10~4;Hyde和Wipplor以光散射法测得丝朊的分子量为32.6×10~4,而lizuka以同样方法得到的分子量却是27.8～37.0×10~4。可见,测定蚕丝丝朊的分子量有多种方法,所得结果也不尽相同。     

改性谷朊粉在新型水性涂料中的应用研究

研究了谷朊粉的酸法改性及其在新型水性涂料中的应用.改性谷朊粉除具有优良的粘结性、流动性和流平性外,还提高了与涂料乳液的相容性,解决了谷朊粉原胶在涂料使用过程中的开裂严重,使得涂料具有更优的流平性和涂膜外观.     

微管相关蛋白tau与朊蛋白的相互作用

微管相关蛋白tau参与了许多神经退行性疾病的发生, 其中包括一些人类可传播性海绵状脑病. 为了探讨tau与朊蛋白(PrP)之间可能存在的关系, 首先通过GST pull-down和免疫共沉淀等技术发现重组tau蛋白可通过微管结合区与来源于正常叙利亚仓鼠脑组织中的正常细胞膜朊蛋白(PrP^C)和羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织的异常朊蛋白(PrPSc)相结合. 利用免疫共沉淀实验发现在正常和羊瘙痒因子感染的仓鼠脑组织中存在tau蛋白与PrPC和PrPSc的相互作用, 并且利用激光共聚焦方法检测到PrP和tau蛋白在CHO细胞内具有共定位的关系. 为了确定PrP与tau蛋白相互作用的部位, 构建了不同区域的PrP片段, 从而证明PrP与tau蛋白相互作用的区域位于PrP的N端序列(23~91 aa). PrP与tau蛋白分子间相互作用的直接实验证据提示tau蛋白可能参与PrP的正常生理功能以及朊病毒病的病理过程.     

与朊毒体相关的鱼类朊蛋白研究概况

疯牛病(mad cow disease),即牛传染性海绵状脑病(bovine transmissible spongiform encephalopathy,BSE)的俗称,是一种慢性消耗性、致死性、中枢神经系统退行性疾病。疯牛病被认为与朊毒体(Prion)有关,朊毒体是由正常朊蛋白(Prion protein,或者PrPC)发生构象改变后形成的异常蛋白(PrPSc)。疯牛病的发生引起了世界各国政府和科学界的高度重视,PrP的起源及其功能研究已成为研究热点。鱼类PrP相关蛋白的研究正在展开中,由于鱼类PrP相关蛋白与朊蛋白的结构相似,鱼类感染TSE类似病存在理论上的风险。本文全面地综述了疯牛病的概况、朊毒体的特性、朊毒体与哺乳动物朊蛋白、鱼类PrP相关蛋白(PrP1、PrP2和PrP3)及鱼类其他PrP相关蛋白的研究情况,为国内水生动物PrP相关蛋白研究提供参考。     

酶稳定化研究进展

酶稳定性研究无论对阐明酶结构与功能关系,还是对酶在生物工程中的应用都 有重要意义。文章概述了迄今开发的酶稳定化方法,并比较了各种方法的优缺点,提出酶稳定化的标准,强调了最近在酶稳定化研究中所取得的进展。     

朊粒,生命与病原体

朊粒的本质是蛋白质。但能自我复制 ,与环境进行能量交换 ,是一种耗散结构 ,从分子生物学、生物物理学以及热力学的观点来看 ,都表明朊粒具有生命现象。同时朊粒具有传染性、致病性 ,因此它能作为一种独立的病原体存在。     

一株与血红铆钉菇相关的青霉属菌株的分离与鉴定

目的:鉴定一株从采自北京市房山区的野生血红铆钉菇中分离得到的丝状真菌,分析其遗传地位,为进一步研究该菌株与血红铆钉菇的关系奠定基础。方法:以血红铆钉菇为材料,进行了组织分离,获得1株丝状真菌菌株,编号为JZB2120006,对其进行了形态学鉴定,并提取了基因组DNA,进行了ITS片段的扩增、测序及系统发育分析。结果:分子生物学鉴定结果表明,该菌株与Penicillium sclerotiorum ZZ07-5菌株有99.3%的同源性。结论:结合形态学特征将该菌株鉴定为P.sclerotiorum,ITS基因序列GenBank登录号为KC594044。     

朊蛋白相关蛋白Shadoo与朊病毒病

朊病毒病,即传染性海绵状脑病（transmissible spongiform encephalopathies, TSEs）,是一类传染性、致死性神经退行性疾病。在朊病毒病的病理过程中,细胞正常朊蛋白PrP。转化为异常构象的PrP是至关重要的,但是PrP‘的正常生理功能仍不清楚。国外学者利用比较基因组学发现了-个新的朊蛋白相关蛋白-shadoo（Sho）。Sho与PrP。在氨基酸序列和细胞定位的相似性及主要在脑组织表达,使它成为-个非常值得研究的PrP相关蛋白。对Sho可能存在的与PrP。重叠的功能甚至直接相互作用的研究工作,将对今后揭示PrPc正常生理功能以及揭示Pfion病发病机制具有重要现实意义。     

原肌球朊分子的穩定性与其結構

最近从肌原纖维中发现的蛋白质——原肌球朊,具有非常特殊的性质与结构。例如:其侧链中63％是极性的,分子长短轴比值近於25,它兼具结晶与聚合成纖维的能力:所以它是极性最高,最不对称的蛋白质分子之一,又是球朊与線状朊间的桥樑。     

与转染Endostatin基因的角朊细胞共培养时内皮细胞增殖特性变化

构建含Endostatin基因的腺病毒载体,将Endostatin基因导入培养的角朊细胞,并采用套皿法共培养角朊细胞与内皮细胞,测定培养液中Endostatin含量、内皮细胞增殖周期各时相比例、内皮细胞凋亡及细胞抑制率。结果表明转染Endostatin基因的角朊细胞可有效表达并分泌Endostatin,连续培养3天后,培养液中Endostatin含量可达226ng/ml;与转基因角朊细胞共培养的内皮细胞凋亡百分数与抑制率分别为(32.7±7.1)%、(60.5±8.3)%,均显著高于对照组[(7.3±2.0)%,(13.8±1.6)%],且G0/G1期比例明显高于对照组,而S期、G2/M期比例及增殖指数显著低于对照组。因此,转染Endostatin基因角朊细胞与内皮细胞共培养时,角朊细胞可通过分泌Endostatin促进内皮细胞凋亡,并抑制其增殖。     

PrP的胞内运输与朊病毒病

朊病毒病,即传染性海绵状脑病（transmissible spongiform encephalopathies,TSEs）,是一类致死性的神经退行性疾病,存在散发性、感染性和遗传性3种形式。在朊病毒病的病理过程中,细胞正常朊蛋白PrPc（cellular PrP）转化为异常构象的PrP^Sc（scrapie PrP）是至关重要的,但是朊病毒的增殖如何导致神经元凋亡仍不清楚。PrPc的胞内运输在朊病毒病中发挥重要作用,朊病毒感染后PrP^C转化为PrP^Sc,及遗传性朊病毒病中PrP突变可能影响PrP的生物合成、亚细胞定位及转运过程,通过干扰PrP^C的正常功能或产生毒性中间体而导致神经系统病变。现对近年来关于PrP胞内运输在朊病毒病中的作用进行综述。