西藏虎头兰高效植株再生体系的研究

为建立西藏虎头兰(Cymbidium tracyanum)的高效快速繁殖体系,该研究以野生西藏虎头兰种子为外植体,通过分析不同基本培养基和植物激素配比对原球茎诱导、增殖和分化的影响,以及光照时间和培养温度对试管苗生长的影响,筛选出适宜西藏虎头兰植株高效再生的条件。结果表明:适宜西藏虎头兰生长的基本培养基为1/2 MS;种子萌发和原球茎诱导的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg·L^-16-BA+0. 5 mg·L^-1NAA,培养50 d后,有95.00%的种子发育成原球茎;原球茎增殖的最适培养基为1/2 MS+2.0 mg·L^-1NAA,培养30 d,增殖倍数为4.25;原球茎的最适分化培养基为1/2 MS+2.0 mg·L^-1NAA+60 g·L^-1土豆泥+0.5g·L^-1活性炭,培养10 d,不定芽发生率为98.33%,培养40 d,幼苗生根率为94.67%;试管苗在温度20℃、光照时间12 h·d^-1、光照强度2 000 lx的条件下培养,苗长势好,叶片生理性焦尖发生率仅为3.33%;以腐殖土作为栽培基质,试管苗的移栽成活率为97.78%。该研究结果为保护西藏虎头兰野生资源和工厂化育苗提供了科学依据和技术支持。     

金线莲原球茎的诱导与植株再生

金线莲原球茎的诱导与植株再生王建勤林兰英陈钢（福建省药材公司研究所,福州３５０００３）ＰＲＯＴＯＣＯＲＭＩＮＩＴＩＡＴＩＯＮＡＮＤＰＬＡＮＴＬＥＴＲＥＧＥＮＥ┐ＲＡＴＩＯＮＯＦＡＮＯＥＣＴＯＣＨＩＬＵＳＲＯＸＢＵＲＧＨＩＩＷａｎｇＪｉａｎ－ｑｉｎＬ...     

怀山药类原球茎的诱导形成与植株再生

为提高山药离体繁殖的速度, 缩短繁殖周期, 以铁棍山药(Dioscorea opposita cv. ‘Tiegun’)带腋芽茎段为材料, 对类原球茎的诱导、增殖、分化与植株再生进行了研究。结果表明, 铁棍山药类原球茎诱导的最适培养基为MS+1.0 mg·L^-1 TDZ+30 g·L^-1蔗糖, 增殖的最适培养基为MS+9 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖, 分化的最适培养基为MS+2 mg·L^-1 KT+0.02 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖, 最适生根培养基为1/4MS+0.05 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 PP333+15 g·L^-1蔗糖, 生根率达80%, 移栽成活率可达85%。类原球茎的诱导形成及植株再生体系的建立为怀山药种苗的快速繁殖提供了一条新途径。     

苣兰种子离体萌发与植株再生(简报)

苣兰种子在不加生长调节剂的改良KC培养基中培养30d离体萌发,40d肉眼可见细小原球茎：转入改良的KC NAA0．2mg／L培养基中,原球茎开始生长并分化成小苗;将小苗转入改良的KC NAA0．5mg／L 香蕉泥20g／L培养基中生根,并长成具有假鳞茎的健壮植株。     

鹤顶兰种子萌发及原球茎增殖培养研究

以鹤顶兰成熟蒴果的种子为实验材料,研究影响种子非共生萌发的因素和种胚发育途径,并采用正交设计研究了原球茎增殖的影响因素。结果表明:冷藏影响种子的活力且其萌发率随冷藏时间延长而降低;0.5%NaClO溶液浸泡种子可提高萌发率,缩短初始萌发时间;种胚发育途径为种胚转绿后从种子侧面突破种皮而形成原球茎,随后分化出具根芽结构的完整植株;6-BA对原球茎增殖作用显著,原球茎增殖的最适培养基为1/2MS+3.0mg/L6-BA+1.0mg/L KT+1.0mg/L NAA,增殖倍数为6.67。     

曼陀罗茎段愈伤组织诱导和再生植株的研究

本试验以曼陀罗茎段为外植体,在附加不同植物激素组合的培养基中对愈伤组织的诱导和植株再生进行研究。结果表明:采用修改的MS培养基(除去甘氨酸,维生素B1含量增加至0.5mg/L,pH5.5)附加2mg/L2,4-D可由曼陀罗茎段诱导大量胚性愈伤组织;愈伤组织继代选用0.5mg/L2,4-D为宜;不定芽的诱导采用MS培养基(20g蔗糖,8g琼脂,0.1g水解干酪素) 6-BA(0.5mg/L);幼苗进一步转接至1/2MS IBA(0.2mg/L)生根培养基中,可完成曼陀罗茎段愈伤组织诱导和再生植株的组织培养过程。     

墨兰原球茎生长的研究

以墨兰种子胚经培养诱导萌发形成的原球茎为材料,研究其生长的最适条件。结果表明：最佳基本培养基是ＭＳ培养基;ＮＡＡ０．５ｍｇＬ＋ＢＡ１．０ｍｇＬ－１有利于生长和分化;在培养基中加入１％蔗糖和０．１％活性炭最有利于原球茎生长;ｐＨ５．０偏酸环境适合于生长;每天给予１５．５ｕｍｏｌｍ－２Ｓ－１１６ｈ的光照最佳。如将上述单因子组合在一起,其原球茎鲜重增长率比对照（ＭＳ培养基）高４６％。在不同切割方式中,掰开法鲜重增长率比纵切法或横切法都高。     

金线兰种子萌发及其原球茎的增殖培养

研究了影响金线兰种子非共生萌发的因素,并应用正交试验研究基本培养基、6-BA、ZT、NAA四种因素对原球茎增殖的作用。结果表明:授粉类型对金线兰种子非共生萌发影响较大,异株异花、同株异花以及同株同花授粉所得的种子的萌发率分别为78.53%、69.62%、39.87%;蒴果成熟度以生长150d为宜,采收后萌发率可达78.59%;冷藏影响种子的活力,种子的萌发率随冷藏时间的延长而降低;使用次氯酸钠浸泡后的种子与对照相比,其萌发率无明显差异;NAA对原球茎增殖作用显著,适宜于原球茎增殖的培养基为1/2MS+ZT0.5mg/L+NAA1.0mg/L。     

康乃馨茎段愈伤组织诱导及植株再生(简报)

以康乃馨无菌苗茎段为外植体,在MS 6-BA 0.5mg/L NAA0.2mg/L培养基上诱导产生愈伤组织,愈伤组织在MS 6-BA 0.5mg/L NAA 0.2mg/L培养基上诱导芽效果较好,芽苗在1/2MS NAA 0.1mg/L培养基上可诱导生根。     

紫花苞舌兰类原球茎诱导及植株再生

为建立紫花苞舌兰类原球茎离体再生体系,本研究以其腋芽为外植体,研究了不同激素浓度配比、添加剂对其类原球茎诱导、分化及生根诱导的影响。结果表明,外植体在1/2 MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+AC(活性炭)0.2 g/L+CW(椰汁)10%培养基上培养35 d后,获得无菌苗,其成活率达80%以上;无菌苗的顶端分生组织在1/2 MS+10 mg/L Picloram培养基上的类原球茎的诱导率最高,达75%;类原球茎在1/2 MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L培养基上培养45 d后分化出小苗,分化率为54%;小苗在1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+AC 0.2 g/L培养基上生根培养35 d后,生根率达85%以上;小苗驯化移栽成活率达95%,长势良好。     

真菌诱导子对象牙白原球茎生长的影响

在1/2MS基本培养基中,分别加入由野生春兰和华石斛根部分离到的内生真菌所制成的4种菌丝提取物,对象牙白种子萌发形成的原球茎进行诱导培养。结果表明:4种菌株诱导子中3种可不同程度地促进象牙白的生长和分化。对象牙白原球茎的诱导作用依次为HF26>CF6>CF8,与对照相比,HF26菌株显著提高了象牙白的鲜重(P<0.05),鲜重增长率分别为96.13%、86.86%和61.18%;干物质重分别增加了130.70%、96.50%和124.30%,均达到极显著水平(P<0.01)。此外,CF8菌株能促进根条数的增加;HF26菌株最有利于原球茎的增殖;CF6菌株在促进成苗和根原基的分化上效果显著。结论:在象牙白原球茎生长的不同阶段,能够促进其达到最佳生长状态的菌株是不同的。     

文心兰类原球茎的愈伤组织诱导及其植株再生

该研究首次以文心兰的类原球茎( protocorm-like bodies, PLBs)为外植体进行愈伤组织诱导及其植株再生培养,并分析了不同浓度的TDZ和2,4-D配比对愈伤组织增殖的影响。结果表明：以1/2MS为基本培养基,添加1 mg.L-1 TDZ与3 mg.L-12,4-D,从接种的 PLBs上可以诱导出乳白色的、较疏松的愈伤组织,诱导频率达到100％。愈伤组织继代培养时,在2,4-D浓度为0.5~2.0 mg.L-1的范围内,其增殖主要受TDZ浓度的影响,TDZ浓度从1.0 mg.L-1降低到0.5 mg.L-1,愈伤组织鲜重增殖倍数显著增加,由最低的4.50倍增加到最高的6.04倍。愈伤组织增殖的最适培养基为1/2MS ＋0.5 mg.L-1 TDZ ＋1.0 mg.L-12,4-D。将在最适愈伤组织增殖培养基上继代培养约1个月的愈伤组织转移到T2培养基(3.5 g.L-1花宝1号＋20 g.L-1红薯＋25 g.L-1香蕉＋1 g.L-1 tryptone ＋20 g.L-1蔗糖＋3.5 g.L-1 phytagel)上,黑暗培养1个月后,每克鲜重的愈伤组织约诱导出1328.67个PLBs。将诱导出的PLBs转移到新鲜的T2培养基上光照培养1个月,萌发率为90.12％。而将小植株转移到添加1 g.L-1活性炭的1/2MS培养基上,成苗率达到100％。该研究结果成功建立了文心兰的高频愈伤组织诱导及其植株再生体系,为文心兰基因工程育种提供了一个高效、稳定的转化受体系统。     

软枣猕猴桃试管苗叶片和茎段的愈伤组织诱导及植株再生

从软枣猕猴桃试管苗茎段和叶片诱导出愈伤组织并得到再生植株。茎段外植体容易愈伤化,但其愈伤组织难以分化,叶片外植体不易愈伤化,但其愈伤组织容易分化。ＭＳ培养基分别附加ＢＡＰ、Ｋｉｎ、ＴＤＺ或ＣＰＰＵ都不能诱导芽的分化,而ＭＳ附加玉米素能有效地诱导芽分化,其中以２．０ｍｇ／Ｌ玉米素效果最好。     

艳丽齿唇兰的组织培养(简报)

以艳丽齿唇兰种子进行离体快速繁殖体系研究。结果表明：芽诱导最佳培养基为1/2MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+花宝1号1 g/L;增殖系数达6～8倍;生根壮苗培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AC(活性炭) 0.5g/L,生根率达95%。将生根苗移栽入湿润但拧不出水的水苔中,盖膜保湿,成活率达90%。     

不同红掌品种的叶片、叶柄和茎段愈伤组织的诱导及植株再生

红掌幼嫩叶片表面灭菌的最佳方法是：0．01％KMnO4 10min,0．05％链霉素、0．05％制菌霉素和0．05％头孢唑林钠各灭菌20min,然后用75％乙醇30s和HgCl2 2min,污染率为零。Anthurrium adraeanum “Rosetta“和A.adraeanum “Oilcloth-flower”愈伤组织诱导率和芽分化率显著高于A.adraeanum “Atlanta”.A.adraeanum “Fantasis”,A.adraeanum“Afrikanerin”。不同品种茎段、叶柄、叶片的愈伤组织诱导率和芽分化率有明显差异,大多数品种是幼茎段＞叶柄＞叶片。幼苗移栽在草煤或血竭渣基质中,成活率可达97％。     

杂交兰类原球茎增殖中芽分化的控制和快速繁殖

以‘玉女杂交兰’为材料,研究了培养时间、活性炭、切块大小和外源生长调节物质对类原球茎增殖和分化的影响。结果表明,培养时间、活性炭和切割处理对类原球茎增殖和分化影响显著,在培养基中添加活性炭或对类原球茎进行切割均能有效控制增殖过程中的芽分化。将类原球茎切成直径2~3 mm的小块接种到培养基MS＋1.0 mg.L-16-BA＋0.2 mg.L-1NAA＋0.3 g.L-1AC＋30 g.L-1蔗糖＋5.5 g.L-1琼脂中培养40 d,类原球茎增殖率为384.23%。将增殖后的类原球茎接种到培养基1/2MS＋1.5 mg.L-16-BA＋0.1 mg.L-1NAA＋20 g.L-1蔗糖＋5.5 g.L-1琼脂中培养40 d,芽分化率为463.06%。将分化的芽转入培养基1/2MS＋0.5 mg.L-1NAA＋0.5 g.L-1AC＋20 g.L-1蔗糖＋100 g.L-1土豆汁＋5.5 g.L-1琼脂中培养,生根率为100%,平均根分化数为2.80条.株-1。以泥炭土为基质,组培苗的移栽成活率可达97.78%。     

蝴蝶兰丛生芽、原球茎途径的组织培养研究

对蝴蝶兰丛生芽、原球茎途径的组织培养进行研究,结果表明,不经过愈伤组织直接诱导丛生芽的过程中,1/2MS 6-BA6.0mg/L和1/2MS 6-BA3.0mg/L NAA0.2mg/L两种培养基的诱导率可达100%,丛生芽增殖阶段采用1/2MS 6-BA5.0mg/L NAA 0.5mg/L效果最好;原球茎途径中,1/2MS 6-BA15.0mg,L NAA1.0mg/L诱导率达20.0%,接入1/2MS 6-BA3.0mg/L NAA0.5mg/L培养基中,增殖倍数达7.4,随后转入1/2MS 6-BA1.0mg/L NAA0.5mg/L中,可很快分化成芽.生根培养基以1/2MS IBA0.3mg/L较好,将生根的蝴蝶兰移栽至水苔中,两个月后成活率达100%.此外,蝴蝶兰移栽6个月后转至水培更有利于生长.     

绞股蓝茎尖组织培养和植株再生研究

以绞股蓝茎尖作为外植体,接种于ＭＳ＋１ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的培养基中,茎尖逐渐形成芽苗,芽苗分离后接种于ＭＳ＋１ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的培养基中进行增殖培养,同时从增殖的芽苗上不断地诱导出幼苗,将幼苗分离转入不含激素的ＭＳ培养基中,幼苗生根,形成完整的植株。