海水养殖真鲷弧菌病病原菌外毒素的理化特性

对最小弧菌Vm Pm毒素的分子量、分子结构及氨基酸组分进行了测定 ,同时还研究了温度、酸碱度及胰酶等因子对该毒素生物学活性的影响。研究结果表明 ,该毒素为单一的多肽 ,不具备典型的细菌毒素A、B亚基结构 ,分子量为 30 4 5 6kD ;毒素蛋白含天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸及半胱氨酸等 15种氨基酸 ,其中天冬氨酸的含量最多 ,半胱氨酸的含量最少 ,酸性氨基酸含量为 2 6 6 % ,碱性氨基酸含量为 14 4 % ,疏水性氨基酸含量为 33 4 % ;毒素活性的最适pH为 6— 8,对胰酶有抗性 ;不耐热 ,10 0℃下作用 1min ,其毒性完全消失 ,而在 5 6℃下 ,毒素完全失去活性需要 4 0min。     

云南会泽引种玛卡中氨基酸组成与含量对营养与风味的影响

采用柱前衍生-液相色谱法(RP-HPLC)对云南会泽引种玛卡中水解氨基酸与游离氨基酸的种类与含量进行了测定。通过对玛卡中水解氨基酸的分析,发现玛卡中含有全部18种氨基酸,人体所必需的8种氨基酸占总氨基酸比例为36.75%,表明玛卡是具有较高营养价值的农作物,人体所必需的氨基酸中苯丙氨酸、络氨酸、蛋氨酸和半胱氨酸含量不足,影响了其整体营养价值;对影响感官的游离氨基酸进行分类,研究了各类味觉氨基酸对玛卡风味的影响。     

高压液相荧光检测法检测血浆同型半胱氨酸

目的:建立高压液相荧光检测法测定血浆中同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)的方法.方法:应用Symmetry ShieldTMRP18色谱柱,0.08 mol/L醋酸钠1%甲醇为流动相,与巯基特异结合的荧光物质SBD-F衍生巯基来检测血浆中的同型半胱氨酸浓度.结果:该法的平均回收率为95.8～100.8%,相对标准差为1.2～2.0%.结论:本检测法方法准确,可用于实验室样品的测定.     

Xterra RP18柱高效液相色谱法快速分离测定氨基酸

建立了一种用XterraRP1 8色谱柱快速分离测定水解氨基酸的方法。所采用的色谱条件是 :WatersAlliance系统 ,柱温 5 6℃ ,流速 1 .8ml/min ,检测波长 2 4 8nm ,梯度分离 ,运行周期 2 5min,柱反压低于 2 0 0 0Psi。在 1 7.5min内分离了包括AMQ、NH3 和牛磺酸在内的 2 1种氨基化合物 ,适应于复合氨基酸注射液、含牛磺酸的氨基酸口服液及水解氨基酸样品的分析测定     

传统藏药材波棱瓜的氨基酸分析

采用FDBN柱前衍生高效液相色谱法测定了藏药材波棱瓜中氨基酸的含量。结果表明,波棱瓜中氨基酸总量为189.4g·kg-1,其中8种必需氨基酸含量占氨基酸总量的33.47%。     

硫化氢减轻同型半胱氨酸诱导大鼠海马CA1区神经元损伤

目的探讨硫化氢(H2S)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导大鼠海马CA1区神经元损伤的改善作用。方法以侧脑室注射同型半胱氨酸的SD大鼠为同型半胱氨酸神经毒性动物模型,采用Tunel染色法分析大鼠海马CA1区神经元的凋亡情况,采用Elisa法分析大鼠海马组织MDA含量。结果 0.6μmol和2.0μmol的同型半胱氨酸使大鼠海马CA1区神经元发生大量的凋亡(P0.01),而NaHS(100μmol/kg)显著抑制同型半胱氨酸(0.6μmol)诱导大鼠海马CA1区神经元的凋亡(P0.05);同型半胱氨酸(0.2,0.6μmol)可增加大鼠海马CA1区丙二醛含量(P0.001),而NaHS(100μmol/kg)可抑制同型半胱氨酸(0.6μmol/L)诱导大鼠海马CA1区丙二醛水平的增加(P0.001)。结论硫化氢可减轻同型半胱氨酸诱导大鼠海马CA1区神经元的损伤。     

高同型半胱氨酸对动脉粥样硬化形成的作用

同型半胱氨酸是甲硫氨酸的中间代谢产物,高同型半胱氨酸血症已成为动脉粥样硬化的一种独立危险因素,探讨高同型半胱氨酸血症形成的原因及同型芈胱氨酸致动脉粥样硬化的机制,有助于动脉粥样硬化的防治.     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定马尾松(Pinus massoniana )针叶中γ-氨基丁酸和17种游离氨基酸

建立了自动在线柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定γ-氨基丁酸(GABA)和17种游离氨基酸含量的方法.以邻苯二甲醛-9-芴基甲基氯甲酸酯(OPA-FMOC)为衍生试剂进行衍生,Agilent Hypersil AA-ODS-C18色谱柱分离,梯度洗脱,二极管阵列检测器检测,在19min内分离测定了马尾松苗木针叶中GABA 和17种游离氨基酸的含量.该方法测定氨基酸的回收率高于90.1%,精密度和重现性均较好(相对标准偏差为0.21%～2.81%),经测定,发现马尾松被马尾松毛虫取食后,所测18种氨基酸总量明显降低,从418.3μg · g-1降低到310.4μg · g-1鲜重.     

高同型半胱氨酸血症致动脉粥样硬化的细胞分子机制

同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy)是蛋氨酸代谢途径产生的含硫氨基酸,其代谢紊乱可以诱导高同型半胱氨酸血症的发生,已被临床及流行病学资料证实为动脉粥样硬化发病的独立危险因子。Hcy通过激活二酰甘油－蛋白激酶C－（DAG－PKC）及丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）途径,诱导相关基因的表达,促进细胞钙化,启动脂质过氧化应激,从而损伤心血管系统。金属硫蛋白,牛磺酸,L－精氨酸作为内源性小分子物质,成为继维生素B6,B12之后控制和治疗高同型半胱氨酸血症的新途径。     

同型半胱氨酸/半胱氨酸诱导血管平滑肌细胞中的新cDNA

同型半胱氨酸／半胱氨酸是体内的含硫氨基酸,近年来提出它们可以诱导血管平滑肌细胞的增殖,是心血管病的一个新的独立的危险因子．但其机制尚不了解,本研究目的在于克隆同型半胱氨酸／半胱氨酸诱导的新基因．应用差异显示即ＲＮＡｍａｐｐｉｎｇ的方法,从半胱氨酸诱导的大鼠血管平滑肌细胞中,寻找有差异的条带,克隆新的ｃＤＮＡ．结果分离出７种上调和４种下调ｃＤＮＡ,并且发现其中有４个是至今尚未发现的新的ｃＤＮＡ．应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析,这４个新的ｍＲＮＡ其长度分别为５．０、２．０、１．８和２．２ｋｂ．它们可能在血管平滑肌细胞增殖和心血管病的发病中具有重要意义．     

鸭毛梗制备复合氨基酸工艺条件的研究

采用正交试验方法 ,研究了鸭毛梗水解制备复合氨基酸的工艺条件 ,结果表明 :温度 /压力是影响氨基酸转化率最主要的因素。鸭毛梗水解制备的复合氨基酸转化率盐酸法最高 (82 .36 % ) ,氢氧化钠法最低 (5 8.4 6 % ) ,硫酸法与盐酸法接近(79.4 4 % )。硫酸法产率较高 ,操作方便 ,环境污染和设备腐蚀均小 ,适合大量生产 ,确定为水解制备复合氨基酸介质 ,其最佳工艺条件为 :水解时间 8.0h ,硫酸浓度 3.0mol·L-1,水解温度 12 5℃。氨基酸分析表明 ,水解液中均含有 18种以上氨基酸。     

利用液相色谱研究烘焙条件对白肋烟中游离氨基酸的影响

利用OPA、FMOC联合在线衍生反相高效液相色谱法测定白肋烟在110℃、120℃、130℃、140℃、150℃分别烘焙12m in和16 m in后游离氨基酸的含量,研究烘焙温度和烘焙时间对白肋烟中游离氨基酸的影响。结果显示整个烘焙过程是蛋白质的降解和M ailard反应相结合的动态过程,蛋白质的降解主要发生在110℃~120℃的低温区;而M ailard反应主要发生在130℃~150℃高温区。实验结果还表明烘焙时间对白肋烟在烘焙后游离氨基酸的含量有重要影响,烘焙时间的延长使烟叶中的游离氨基酸均有较大幅度降低,其中影响最明显的是Pro、Asp和Asn。     

温度对土壤中外源氨基酸、多肽的矿化及其吸收动力学的影响

研究了不同温度（1 ℃、15 ℃和25 ℃）对3种园艺生产系统（有机生产系统OS、转换期生产系统TS、常规生产系统CS）土壤中外源添加氨基酸、多肽的矿化及其吸收动力学特性的影响.结果表明：随着温度的升高,外源添加的氨基酸和多肽在土壤中的矿化速度加快.在1 ℃、15 ℃和25 ℃下,3种供试土壤中谷氨酸（Glu）的平均半衰期分别为13.3、6.8和5.5 h;而谷氨酰 苯丙氨酸（Glu-Phe）的平均半衰期则分别为29.7、7.5和4.4 h.土壤的氨基酸、多肽的吸收动力学试验表明,土壤对氨基酸、多肽的吸收速率随着外源添加氨基酸和多肽浓度及温度的增加而提高.土壤对氨基酸的最大吸收速率(V_max)和亲和力（K_m）及对多肽的吸收速率（V_h）均随温度的升高而增大.在0～2.5 mmol·L^-1浓度范围内,土壤对氨基酸的吸收动力学曲线遵循经典的米氏动力学曲线,而多肽则表现为线性模式.3种园艺生产系统土壤的氨基酸和多肽的周转速率、吸收动力学参数（V_max、K_m和V_h）均表现为OS>TS>CS.总之,温度显著影响了氨基酸、多肽在土壤中的矿化及其吸收动力学特性.     

尼罗罗非鱼TCP-1-beta和TCP-1-eta的分子特征及其低温诱导表达

为了研究尼罗罗非鱼耐寒性状的分子基础并为耐寒品种选育提供参考,研究从尼罗罗非鱼中克隆了HSP60家族TCP-1-beta和TCP-1-eta基因并对其在低温诱导下的表达特征进行了分析。尼罗罗非鱼TCP-1-beta cDNA长度为1755 bp,包括1605 bp的完整开放阅读框,编码534个氨基酸;尼罗罗非鱼TCP-1-eta cDNA长度1651 bp,包括1638 bp的完整开放阅读框,编码545个氨基酸。与其他物种同源基因的蛋白序列比对结果显示,TCP-1-beta和TCP-1-eta蛋白在物种间同源性很高,且都具有保守的ATP结合结构域等,预示其在物种间功能的保守性。实时荧光定量PCR结果表明:TCP-1-beta和TCP-1-eta在各组织中呈遍在表达,但在肌肉中表达量最高;诱导温度从22℃降至12℃,不同低温诱导48h后TCP-1-beta和TCP-1-eta均呈上调表达,在18℃时表达开始上调,随着低温胁迫程度加强,表达上调幅度增大,至12℃时表达量达到最高,TCP-1-beta和TCP-1-eta上调幅度分别达到常温的12.2倍和10.7倍。这些结果预示在尼罗罗非鱼中,TCP-1-beta和TCP-1-eta是潜在的耐寒相关基因。     

Hydrolysis technology of biomass waste to produce amino acids in sub-critical water

Hydrolysis of biomass waste (such as fish waste, chicken waste, hair and feather) to produce amino acids was studied in sub-critical water, with reaction temperatures from 180 to 320 degrees C and reaction pressures from 3 to 30 MPa. The product of amino acid was determined by Amino Acid Analyzer (BioLC), and 18 kinds of amino acid were obtained. The results show that the controlling of reaction atmosphere, pressure, temperature and time of hydrolysis is very important to obtain high yield of amino acid; most of amino acids reached maximum yield at reaction temperature range of 200-290 degrees C and reaction time range of 5-20 min. There are obvious changes of amino acids yield at reaction pressures of 6-16 MPa and reaction temperature around 260 degrees C, owing to the homogeneousness of the first two phases of water in the formation of vapor and liquid. There are different yields of the same amino acid in different reaction atmospheres (e.g. air, carbon dioxide and nitrogen).     

百合中氨基酸组成测定与营养功能分析

以3种不同的百合为原料,用水浸提法提取百合中游离氨基酸,对提取条件进行研究,通过正交试验确定最适宜提取条件(即:以7.5%乙酸为提取液,料液比1:35,70℃提取3 h).同时采用氨基酸分析仪测定3种百合的水提取液样品,共检出17种游离氨基酸(其中7种为必需氨基酸).结果表明,百合中的游离氨基酸以精氨酸为主体,占总游离...     

冬虫夏草口服液游离氨基酸和微量元素的分析比较

目的：为了研究冬虫夏草口服液的有效成分和药用价值,测定冬虫夏草口服液中的游离氨基酸和微量元素的不同种类和含量。方法：采用安捷伦1200高效液相色谱仪,C18反相柱梯度分离,邻苯二甲醛一芴甲酯柱前自动衍生化,利用已知浓度氨基酸标准品进行外标法定量,根据已知浓度氨基酸标准品的峰面积与样品峰面积之比计算游离氨基酸的含量。结果：冬虫夏草口服液中含有23种游离氨基酸和18种微量元素,氨基酸总量在口服液中占0．892％,必需氨基酸在游离氨基酸总量中占53．1％;含量最高的游离氨基酸依次是赖氨酸、亮氨酸、精氨酸。结论：游离氨基酸是冬虫夏草口服液中重要的生物有效成分,为冬虫夏草口服液的药效提供了基础数据。     

花脸香蘑菌丝体氨基酸分析

以花脸香蘑菌丝体为实验材料,用美国戴安AAA型氨基酸分析仪测定了18种氨基酸的组成及含量,得出花脸香蘑菌丝体18种氨基酸质量分数为259.7 g.kg-1干样,其中100 g干样中谷氨酸2.84 g,天冬氨酸2.56 g,亮氨酸2.24 g,赖氨酸1.79 g,苯丙氨酸1.76 g,蛋氨酸0.47 g,人体必需氨基酸质量分数为133.7 g.kg-1干样,占所测氨基酸的51.49%,因此花脸香蘑菌丝体具有很高的营养价值。     

温度胁迫下棉花粉蚧热激蛋白基因的表达分析

【目的】为了研究热激蛋白 Hsp70, Hsp70-4和Hsp90在棉花粉蚧Phenacoccus solenopsis抵抗逆温中的作用。【方法】在测序棉花粉蚧转录组的基础上,分析了该虫热激蛋白Hsp70基因家族的2个序列［Pshsp70（GenBank登录号为KJ909505）和Pshsp70-4（GenBank登录号为KJ909506）］和Hsp90基因家族的1个序列,［Pshsp90(GenBank登录号为KJ909507)］,采用实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）检测了在不同温度（18和32℃恒温, 37, 39, 41, 43和45℃热激1 h 后26℃恢复1 h)下棉花粉蚧不同发育阶段（2龄若虫、3龄若虫、雌成虫）3种热激蛋白基因的表达量。【结果】Pshsp70 cDNA序列包含1 923 bp的开放阅读框,编码641个氨基酸,理论分子量和等电点分别为70.9 kDa和5.65; Pshsp70-4 cDNA序列包含1 962 bp的开放阅读框,编码654个氨基酸,理论分子量和等电点分别为71.8 kDa和5.38;Pshsp90 cDNA序列包含2 172 bp的开放阅读框,编码724个氨基酸,理论分子量和等电点分别为83.5 kDa和4.93。Pshsp70 和Pshsp70-4均含有Hsp70基因家族高度保守的基序,Pshsp70编码的氨基酸序列与烟粉虱Bemisia tabaci和家蚕Bombyx mori等昆虫的Hsp70 的氨基酸序列一致性为 85%;Pshsp70-4编码的氨基酸序列与白蜡蚧Ericerus pela和点蜂缘蝽Riptortus pedestris等昆虫的Hsp70的氨基酸序列一致性高达95%;Pshsp90也含有Hsp90基因家族高度保守的基序,Pshsp90编码的氨基酸序列与赤拟谷盗Tribolium castaneum和东亚小花蝽Orius sauteri等昆虫的Hsp90 的氨基酸序列一致性为 87%。热激蛋白基因表达量分析结果表明,在18℃恒温条件下,粉蚧2龄若虫的3个PsHsps基因的mRNA相对表达量均比对照(26℃)低,在32℃恒温条件下,各龄期的Hsp70基因的相对表达量均显著高于对照。在37~45℃下热激1 h并在26℃下恢复1 h,棉花粉蚧3个龄期的3个热激蛋白PsHsps基因的相对表达量随温度的升高总体呈增加趋势,相关性分析表明,除Pshsp70-4在雌成虫中的表达量与热胁迫温度的相关系数为0.225外,各龄期中3个基因的表达量与温度的相关系数均大于0.6,显著相关;43℃和45℃胁迫下,各龄期的3个热激蛋白基因相对表达量均显著高于对照组（P<0.05）。【结论】棉花粉蚧热激蛋白基因的表达与温度呈正相关,在该虫应对高温中起着重要作用。