可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白诱导淋巴结细胞向CD4+CD25+ T细胞分化

直接用可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白(Jagged-1/Fc)在体外诱导小鼠淋巴结细胞向CD4 CD25 T细胞分化.通过荧光标记单克隆抗体染色结合流式细胞术,观察不同剂量Jagged-1/Fc在不同时间对淋巴结细胞向CD4 CD25 T细胞分化的影响,观察Jagged-1/Fc诱导T细胞内细胞因子的变化;藉ELISA法检测Jagged-1/Fc诱导分化的T细胞分泌TGF-β1、IL-4和IL-10的水平.结果显示,超过500.0μg/L剂量的Jagged-1/Fc使CD4 CD25 T细胞百分比明显增高,诱导时间需要4～6天,抗Jagged-1单抗能抵消Jagged-1/Fc的诱导作用,用DAPT阻断Notch信号通路的活化也能抑制Jagged-1/Fc的诱导作用,Jagged-1/Fc诱导分化的T细胞培养上清中IL-4和IL-10的水平明显增高,TGF-β1无明显变化,胞内IL-4,IL-10,IL-2和TNF-α的水平也呈增高趋势.上述结果表明,可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白在体外可诱导小鼠淋巴结细胞向CD4 CD25 调节性T细胞分化.     

喘息性支气管炎患儿外周血CD4+CD25+CD127low 调节性T细胞及淋巴细胞亚群的改变与临床意义

目的探讨喘息性支气管炎患儿外周血CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞及淋巴细胞亚群数量变化与临床意义。方法选取我院16例喘息性支气管炎患儿、同期住院的25例支气管肺炎患儿和18例患有肾结石等非感染性疾病患儿为研究对象,采用流式细胞术分别检测3组患儿外周血中CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞及淋巴细胞亚群百分比。结果喘息性支气管炎患儿外周血中CD4~+CD25~+CD127~(low)/CD4~+(Treg)比例(9.2%±2.1%)高于支气管肺炎组(6.9%±1.4%)和对照组(5.8%±2.2%),差异有统计学意义(F=16.5、17.7,均P0.01)。喘息性支气管炎患儿CD8~+百分比(19.7%±7.8%)低于支气管肺炎组(27.0%±8.8%)和对照组(30.7%±4.4%),差异有统计学意义(F=6.6、22.4,均P0.01)。喘息性支气管炎患儿B淋巴细胞百分比(33.4%±15.2%)高于支气管肺炎组(22.7%±6.9%)和对照组(17.7%±9.9%),差异有统计学意义(F=9.2、10.9,均P0.01)。结论喘息性支气管炎患儿外周血淋巴细胞亚群比例异常,体内存在免疫功能紊乱,CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞可能参与喘息性支气管炎的发生发展。     

CD4+CD25+Foxp3hi细胞在夏氏疟原虫感染DBA/2小鼠作用研究

利用调节性T细胞消除的致死型夏氏疟原虫(Plasmodium chabaudi chabaudi AS,P.c chabaudi AS)感染鼠疟模型,探讨DBA/2小鼠对P.c chabaudi AS感染易感性的原因。DBA/2小鼠对P.c chabaudi AS易感,伴随原虫血症增加CD4+CD25+Foxp3+细胞数量明显增加,且以CD4+CD25+Foxp3hi增加更为明显。原虫血症达峰值时CD4+CD25+Foxp3hi细胞数量亦达到峰值。相比,Treg消除鼠的原虫出现时间和疟血症峰值时间均明显延迟,且在疟血症达峰值前(5～8 d)原虫血症水平明显低于对照组。与之相应,CD4+CD25+Foxp3hi细胞数量明显处于低水平。同时,Treg消除鼠生存期明显延长。由此提示,P.c chabaudi AS感染导致Foxp3表达增加,扩增的CD4+CD25+Foxp3hi细胞有利于疟原虫复制和逃避宿主免疫应答,进而影响疟疾感染的进程和最终结局。     

抗VacA+CagA+幽门螺杆菌IgY的抗感染作用研究*

为研究抗VacA⁺CagA⁺幽门螺杆菌(Hp)IgY的抗感染作用,以VacA⁺CagA+Hp为抗原免疫蛋鸡,聚乙二醇法和水稀释法从鸡卵黄中提取抗-VacA⁺CagA⁺Hp-IgY,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定IgY抗体效价。建立胃腔感染VacA⁺CagAHp的昆明系小鼠模型,观察抗-VacA⁺CagA⁺     

大肠杆菌Na+/H+反向运输体A基因的克隆及序列分析*

为研究细菌的耐盐机理 ,根据细菌中存在的Na⁺/H⁺反向运输体 (nhaA)的基因序列 ,采用PCR扩增的方法 ,从大肠杆菌 (Escherichiacoli)DH5α中克隆获得了11kb的DNA片段 ,经过核酸序列分析 ,发现基因片段包含了nhaA基因完整的读码框架。采用序列同源性分析方法 ,结果显示nhaA基因在多种细菌中均存在 ,表明nhaA基因是细菌中普遍存在的一种能够反向运输Na^{+相似文献}   

酿酒酵母细胞增殖对Ca2+需求的新证据*

本文研究了酿酒酵母细胞增殖对Ca²⁺需求的证据。结果表明:SD-Ca培养基中外加1mmol/L的Ca²⁺明显促进酿酒酵母细胞增殖,外源Ca²⁺浓度在0~20mmol/L范围内变动时,随Ca²⁺浓度增加,细胞生长到达稳定期的终浓度也越大;5、10mmol/L的EGTA可明显延缓细胞生长的延滞期,但是最终不能抑制细胞增殖;酿酒酵母在SD-Ca培养基中继代培养4次,随增殖代数增加,细胞总钙含量没有明显变化,说明酵母能够在低钙介质中生长可能是因为具有捕捉和富集钙的功能;以Fluo-3作为胞质Ca²⁺指示剂,通过激光扫描共聚焦显微镜观察,发现随胞外Ca²⁺浓度增加,胞质中游离Ca²⁺浓度也相应增加。这些证据都揭示了Ca²⁺在酿酒酵母细胞增殖过程中是必需的。     

消疬膏对脾胃虚弱证颈部淋巴结核患者CD4+CD25highFoxP3+调节性T淋巴细胞和胃肠激素的影响

摘要 目的：研究消疬膏对脾胃虚弱证颈部淋巴结核患者CD4⁺CD25^highFoxP3⁺调节性T淋巴细胞和胃肠激素的影响。方法：选择南京市中西医结合医院于2020年3月~2022年1月期间收治的颈部淋巴结核患者120例。按照随机数字表法分为对照组（60例）和研究组（60例）。对照组接受常规抗结核方案，研究组接受消疬膏联合常规抗结核方案，两组疗程均为6个月。观察两组治疗前和治疗6个月后的中医证候积分、CD4⁺CD25^highFoxP3⁺调节性T淋巴细胞相关指标和胃肠激素的变化，记录两组治疗期间用药安全性。结果：两组治疗6个月后肿疡大小、肿疡皮色、面色、纳呆、倦怠乏力、便溏、舌质、脉象评分均下降，且研究组低于对照组（P<0.05）。研究组治疗6个月后CD4⁺CD25^highFoxP3⁺调节性T淋巴细胞、白介素-10（IL-10）水平低于对照组，γ-干扰素（IFN-γ）水平高于对照组（P<0.05）。研究组治疗6个月后胆囊收缩素（CCK）、胃泌素（GAS）水平低于对照组，胃动素（MTL）水平高于对照组（P<0.05）。研究组的不良反应总发生率低于对照组（P<0.05）。结论：消疬膏治疗脾胃虚弱证颈部淋巴结核患者，可有效改善患者临床症状，可能与调节CD4⁺CD25^highFoxP3⁺调节性T淋巴细胞和胃肠激素水平有关。     

CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞的流式分选及其肿瘤干细胞特性的初步鉴定

目的:通过表面标志分选法富集乳腺癌干细胞,并初步鉴定其肿瘤干细胞特性。方法:采用流式细胞分选术从人乳腺癌细胞系MCF-7中分选CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞,并进行干细胞比例分析;用免疫荧光法检测、比较分选获得的细胞和对照细胞的干性和分化标记物Oct-4、SOX-2、CK-18和α-SMA的表达状态。结果:分选获得的CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞阳性比例达90%以上;免疫荧光检测结果显示,CD44+CD24-/low细胞亚群比non-CD44+CD24-/low细胞亚群高表达干细胞转录因子Oct-4、SOX-2,低表达分化因子CK-18、α-SMA;体外实验表明,CD44+CD24-/low细胞亚群具有更强的成球生长能力,并具有双向分化潜能。结论:CD44+CD24-/low表面标记物分选的方法可以富集高纯度的乳腺癌干细胞,且呈现干性因子Oct-4和SOX-2高表达。     

荧光素酶研究进展*

荧光素酶 (Luciferase)可以分为萤火虫荧光素酶和细菌荧光素酶两大类。萤火虫荧光素酶是分子量为 60～ 64kD的多肽链 ,在Mg²⁺、ATP、O₂ 存在时 ,催化D 荧光素 (D Luciferin)氧化脱羧 ,发出光 (λ =550～580nm)。细菌荧光素酶是含α、β两个多肽亚基的加单氧酶 ,它催化长链脂肪醛、FMNH₂ 和O₂ 的氧化反应 ,发出绿蓝光 (λ =490nm)。萤火虫荧光素酶和细菌荧光素酶     

基因体外诱变*

综述了基因体外诱变的一般方法和技术,并将其分为不依赖于PCR体外诱变和依赖于PCR体外诱变两大类。着重介绍了基因体外诱变最新突破即DNA　Shuffling技术。     

Ca2+在粟酒裂殖酵母细胞周期时相中的作用*

以粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)为研究材料,研究了Ca²⁺在细胞周期时相中的作用。当外源Ca²⁺浓度在0.5-20 mmol/L范围内,随Ca²⁺浓度增加,细胞增殖速度加快,延滞期逐渐缩短。但SD-Ca（CaCl₂省略）并不能终止Sch. Pombe的细胞周期。采用缺氮对群体细胞进行同步化,并以EGTA 螯合培养介质中低浓度的Ca²⁺,Sch. Pombe 细胞增殖被完全抑制,细胞流式法测定结果表明：细胞周期被终止在G1期。分析认为Ca²⁺ 对Sch. Pombe 细胞增殖是必不可少的,外源Ca²⁺在G1期向S期转化过程中起着关键性的作用。     

细菌胞壁多糖对水体中低浓度Pb2+和Cd2+的吸附研究*

室内模拟研究了长春市伊通河天然水环境中优势细菌胞壁多糖对Pb²⁺ 和Cd²⁺ 吸附 ,结果发现 :胞壁多糖对Pb²⁺ 和Cd²⁺ 的吸附量分别在pH为 4 5、 5 0时最大 ;且均分为两个阶段 ,即当pH <4 5 ,对Pb²⁺ 的吸附量与pH呈正相关 ,当pH >4 5时 ,对Pb²⁺ 的吸附量与pH呈负相关 ;对Cd²⁺ 的吸附量在pH <5 0时     

人慢性胃炎粘膜内CD3+细胞,S-100+树突状细胞和nNOS表达的意义

采用免疫细胞化学方法探讨胃粘膜内CD3+细胞,S-100+树突状细胞和nNOS的表达与慢性胃炎的关系及意义.检测标本均取自胃窦部活检的胃粘膜组织.结果显示CD3+细胞主要分布于粘膜上皮、腺上皮和固有膜内,而S-100+树突状细胞则主要位于固有膜内,正常组与浅表性胃炎组和萎缩性胃炎组,浅表性胃炎组与萎缩性胃炎组细胞数量有显著性差异( P<0.01),nNOS阳性反应主要位于粘膜上皮和腺上皮的基底部,但各组之间nNOS的表达程度不同,特别是萎缩性胃炎与浅表性胃炎有显著性差异(P<0.01),我们认为,对CD3+ 细胞,S-100 +树突状细胞和nNOS的检测,不仅有助于判断胃炎的病变程度和临床疗效,而且也为胃炎的治疗提供新的启示.     

经阿托伐他汀治疗的急性冠脉综合征患者CD4+T、CD4+CD28+T水平变化及与预后的关系

目的:探讨经阿托伐他汀治疗的急性冠脉综合征(ACS)的CD4~+T、CD4~+CD28~+T水平变化及与预后的关系。方法:选择128例ACS患者,随机分为对照组(64例)和观察组两组(64例),其中对照组患者给予常规治疗,观察组患者在上述基础上外加阿托伐他汀治疗。比较两组患者的细胞因子、CD4~+T及CD4~+CD28~+T水平变化,随访6个月,观察两组患者预后终点事件发生情况。并将观察组患者根据预后是否并发终点事件,将其分为预后良组(未并发终点事件)和预后不良组(并发终点事件)两组,分析不同预后ACS患者CD4~+T、CD4~+CD28~+T水平变化及与预后发生终点事件的相关性。结果:治疗后两组的高敏C反应蛋白(hs-CRP)、干扰素-γ(IFN-γ)水平均明显降低,白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平均明显升高,且观察组改善更为明显,差异均有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后CD4~+T明显升高,CD8~+T、CD4~+CD28~+T明显降低,且观察组上述指标改善更为明显,差异均有统计学意义(P0.05)。随访6月中,对照组患者预后有23例终点事件发生,观察组患者预后有26例终点事件发生,差异无统计学意义(P0.05)。与预后良好组相比,预后不良组患者的CD4~+T降低,CD4~+CD28~+T升高,差异均有统计学意义(P0.05)。经阿托伐他汀治疗的ACS患者预后发生终点事件与CD4~+T水平呈现负相关(r=-0.682,P=0.000),与CD4~+CD28~+T水平呈现正相关(r=0.733,P=0.000)。结论:经阿托伐他汀治疗的ACS患者预后发生终点事件与CD4~+T水平呈现负相关,与CD4~+CD28~+T水平呈现正相关,可为临床ACS患者预后的预测提供参考。     

(Na+/K+)-ATPase研究概况

本文概述(Na⁺/K⁺)-ATPase的一般分子性质。介绍神经元和脂肪细胞中两种不同分子形式(Na⁺/K⁺)-ATPase的分离鉴定和功能性质,以及(Na⁺/K⁺)-ATPase主要功能亚基一级序列和高级结构研究所取得的一些进展。     

YKL-40、CD4+/CD8+比值与腺病毒肺炎患儿炎性因子和并发喘息的关系研究

摘要 目的：探讨血清壳多糖酶3样蛋白1（YKL-40）、外周血CD4⁺/CD8⁺比值与腺病毒肺炎（AP）患儿炎性因子和并发喘息的关系。方法：选取2019年10月～2022年10月湖北省妇幼保健院收治的97例AP患儿为AP组,根据是否并发喘息分别为喘息组和无喘息组,另选取同期50例体检健康儿童为对照组。收集AP患儿的临床资料,采用酶联免疫吸附法检测血清YKL-40和炎性因子[白细胞介素（IL）-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α（TNFα）]水平,流式细胞术检测外周血CD4⁺、CD8⁺比例并计算CD4⁺/CD8⁺比值。采用Spearman相关性分析AP患儿血清YKL-40、CD4⁺/CD8⁺比值与炎性因子水平的相关性,多因素Logistic回归分析AP患儿并发喘息的影响因素。结果：与对照组比较,AP组血清YKL-40、外周血CD8⁺比例升高,CD4⁺比例、CD4⁺/CD8⁺比值降低（P＜0.05）。AP组血清IL-6、IL-8、TNF-α水平高于对照组（P＜0.05）。Spearman相关性分析显示,AP患儿血清YKL-40与IL-6、IL-8、TNF-α水平呈正相关,外周血CD4⁺/CD8⁺比值与IL-6、IL-8、TNF-α水平呈负相关（P＜0.05）。97例AP患儿住院期间喘息发生率为50.52%（49/97）。多因素Logistic回归分析显示,呼吸衰竭、小气道病变、特应性体质和血清IL-6、IL-8、TNF-α、YKL-40升高为AP患儿并发喘息的独立危险因素,外周血CD4⁺/CD8⁺比值升高为独立保护因素（P＜0.05）。结论：AP患儿血清YKL-40水平升高和外周血CD4⁺/CD8⁺比值降低,与炎性因子水平升高和并发喘息密切相关。     

Na+/H+逆向转运蛋白和植物耐盐性

Na⁺H⁺逆向转运蛋白对植物耐盐起着重要作用 ,它利用质膜H⁺ATPase或液泡膜H⁺ATPase及Ppiase泵H+产生的驱动力把Na⁺排出细胞或在液泡中区隔化以消除Na⁺的毒害。主要讨论植物中Na⁺H⁺逆向转运蛋白研究在分子水平的最新进展.     

IL-7和胸腺基质细胞系(MTEC5)诱导胸腺CD3- CD4- CD8- 细胞分化

胸腺细胞发育是细胞因子及胸腺细胞与胸腺基质细胞相互作用的结果.观察了IL-7及小鼠胸腺基质上皮细胞系MTEC5对成年小鼠CD3^- CD4^- CD8^- 胸腺细胞发育的影响.IL-7能促进TN细胞增殖.TN细胞经在IL-7条件下培养后表达CD3-TCR分子,其中20％～40％为TCRγδ⁺,60％～80％为TCRαβ⁺,但保持CD4^- CD8^- .该细胞获得对 Con A、抗CD3mAb及抗TCRmAb进行增殖应答的能力,抗CD28mAb能促进这种增殖应答,证明表达的CD3-TCR分子功能成熟.当在该系统中加入MTEC5,部分TN细胞转变为CD3⁺TCRβ⁺CD4⁺CD8^- 和CD3⁺TCRβ⁺CD4^- CD8⁺SP细胞,表明MTEC5可诱导TN细胞分化为表现型成熟的胸腺细胞.     

拟南芥基因组研究进展*

拟南芥基因组全序列在2000年底已完全测定并公开发表,这是第一个经完全测序的开花植物。序列的获得为进行大规模高等植物基因的鉴定、基因结构与功能的分析、基因表达与调控的研究奠定了坚实物质基础,并将改进和发展一系列进行功能基因组研究的方法与技术。