水稻白叶枯病菌受寄主诱导启动子的克隆

用一个具链霉素（Ｓｍ）抗性,含无启动子ＣＡＴ基因的广宿主启动子探针质粒ｐＩＪ３１００．用鸟枪法克隆水稻白叶枯病菌染色体ＤＮＡ的ＢａｍＨ１酶切片段,重组质粒转化大肠杆菌ＥＤ＿（８７６７）,在含链霉素和氯霉素的ＬＢ平板上筛选含有水稻白叶枯病菌启动子活性片段的转化子。在帮助质粒ｐＲＫ２０１３的帮助下,通过三亲交配,将转化子中重组质粒转移进野生型的水稻白叶枯病菌中去,在分别含有链霉素和氯霉素的ＰＳＡ对照平板上筛选对热氯霉素敏感的接合子。随机挑取２００个该接合子,接种用氯霉素处理的水稻感病品种金南风,得到１５个比对     

番木瓜环斑病毒株系,分子生物学及其防治研究进展

番木瓜环斑病毒株系、分子生物学及其防治研究进展肖火根，范怀忠（华南农业大学植物病毒研究室，广州５１０６４２）ＡｄｖａｎｃｅｓｏｆＲｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅＳｔｒａｉｎｓ，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＣｏｎｔｒｏｌｏｆＰａｐａｙａＲｉｎｇｓｐ...     

黄瓜花叶病毒（CMV）运动蛋白基因介导的抗病性

利用Ｆｎｙ＿ＣＭＶ株系ＲＮＡ３ｃＤＮＡ克隆,构建了含有全长和编码区缺失５０１个核苷酸的运动蛋白（ＭＰ）基因植物表达载体ｐＢＭＰＲ和ｐＢＭＰＫ。在土壤农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（ＳｍｉｔｈｅｔＴｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）ＬＢＡ４４０４介导下转化烟草（ＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍＬ．）品种“ＮＣ８９”,分别经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ、ＲＴ＿ＰＣＲ或Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析,外源基因已整合到再生植株中并得到表达。抗病性分析表明,含有缺失型ＭＰ基因的Ｒ０代转基因植株抗性较好,接种５０ｄ后,１０株转化植株中仍有５株不表现症状。在自然发病条件下,这５个含有缺失型ＭＰ基因转基因株系在Ｒ１代都表现了一定的抗病性。抗性主要表现为症状出现推迟,严重度减轻。利用ＰＣＲ筛选、种子卡那霉素抗性试验和温室抗病性测定等方法,初步认为Ｒ２代转基因烟草Ｋ＿６＿５株系为转基因抗病纯合系。而含有全长ＭＰ基因的Ｒ０代转化植株,前期没有表现明显的抗病性,但在接种４０ｄ后部分发病植株有恢复健康的趋势。     

人乳铁蛋白基因在烟草中的表达及抗细菌与病毒的能力

从人血液中性白细胞中分离细胞总ＲＮＡ,用ｏｌｉｇｏ（ｄＴ） 为引物进行ｃＤＮＡ 第１ 条链合成,再用乳铁蛋白ｃＤＮＡ 的特异性引物进行聚合酶链反应（ＰＣＲ） ,分两段合成并拼成完整的乳铁蛋白ｃＤＮＡ。核苷酸序列测定证明,该ｃＤＮＡ 所编码的氨基酸与前人论证的人乳铁蛋白的氨基酸序列完全一致。将该ｃＤＮＡ 构建成植物表达载体ｐ３５ＳｈＬＦｃ,经根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４ 感染烟草叶盘,获得具有卡那霉素抗性的烟草植株,ＰＣＲ检测和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交表明,人乳铁蛋白基因已整合到烟草基因组中。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交与Ｗｅｓｔｅｒｎ 免疫印迹分析,检测到人乳铁蛋白基因在转化烟草中表达。体外实验证明,人乳铁蛋白基因在烟草中的表达产物对植物致病菌烟草火叶病菌、水稻白叶枯病菌有一定抑制作用     

东北地区蒿属植物比较形态学研究——II.叶表皮结构

本通过扫描电子显微镜,对东北地区蒿属（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ）植物,莳萝蒿组（Ａ．ｓｅｃｔ．Ａｂｓｉｎｔｈｉｕｍ ＤＣ）,艾蒿组（Ｓｅｃｔ．Ａｂｒｏｔａｎｕｍ Ｂｅｓｓ）,艾组（Ｓｅｃｔ．Ａｒｔｅｍｉｓｉａ）,龙蒿组（Ｓｅｃｔ．Ｄｒａｃｕｍｃｕｌｕｓ Ｂｅｓｓ）,牡蒿组（Ｓｅｃｔ．ｌａｔｉｏｂｕｓ Ｙ．Ｒ．Ｌｉｎｇ）３６种成熟代表植物叶表皮形态学特征进行了详尽的比较研究。其中表皮细胞大小、形状不等。     

生孢噬纤维粘菌基因文库的构建和纤维素酶基因的克隆

将生孢噬纤维粘菌（ＳｐｏｒｏｃｙｔｏｐｈａｇａＢ２９）染色体用ＰｓｔＩ部分酶切后,连接到大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）质粒载体ｐＵＣ８上,然后转化Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ８３,从而建立了Ｂ２９的基因文库,并筛选一个含有内切葡聚糖纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）的阳性克隆．从此阳性克隆中提取质粒再转化ＪＭ８３,发现所有的氨苄青霉素抗性（Ａｐｒ）转化子都具有ＣＭＣａｓｅ酶活性,证明在大肠杆菌中克隆到一个Ｂ２９的内切葡聚糖酶基因．     

芸苔属植物CAL基因的结构特征与花球的形态遗传

从花椰菜变种（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ Ｌ．ｖａｒ．ｂｏｔｒｙｔｉｓ）中分离出４种花球类型的纯合株系：光滑型花球ｃｕｒｄ－ｓ、毛状物花球ｃｕｒｄ－ｈ、颗粒状花球ｃｕｒｄ－ｃ和刺状物花球ｃｕｒｄ－ｔ。用ＰＣＲ方法分别扩增各株系的ＢｏｂＣＡＬ基因并分析其中的部分序列,发现４种株系的ＣＡＬ基因在第五个外显子中都有ＡＡＧ向ＴＡＧ的终止突变,而且该终止密码子上游６３８ｂｐ的ＤＮＡ序列完全一致,说明     

影响 培养基PH值变化的因素

植物组织培养基的ＰＨ值一旦外植体植入就开始发生改变,直到达到某一平衡点,不同种的植物有其各自的ＰＨ平衡点。用６种植物（ＰｉｌｏｔｕｓｅｘａｌｔａｔｕｓＤｅｓｓｅｘＬｅｈｍ,ＬｅｃｈｅｎｎｕｌｔｉａｆｏｍａｓｕｓＲ．ＢＲ．,ＲｏｓａｃａｎｉｎａＬ．,Ｍｅｌａｌｅｕｃａａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉａ（Ｍａｉｄｅｎ＆Ｅ．Ｂｅｔｃｈｅ）Ｃｈｅｅｌ,ＡｎｉｇｏｚａｎｔｈｏｓｆｌａｔｉｄｕｓＤＣ．,Ｚｉｅｒｉａｃｙ     

导入耐过氧化氢兰草基因促进植物生长

《日经生物技术》１９９９年４月１２日第１１页报道：近畿大学农学部教授重岗成等小组将耐过氧化氢兰草所具有的碳同化系基因导入烟草,促进植物生长获得成功。成果的详细情况于３月２８日在仙台市召开的日本植物生理学会１９９９年年会上发表。这次导入的基因是兰草ｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓＭＰＣＣ７９４２株的ｆｂｐ－１基因。其产物在Ｃａｌｖｉｎ途径中决定反应速度,该酶具有弱胁迫的ＦＢＰａｓｅ和ＳＢＰａｓｅ两方面酶活性。使用番茄ＲｕＢｉｓＣｏ小亚单位（ｒｂｃＳ）启动子和叶绿体抑制肽,导入烟草。不用担心基因沉默等问题,…     

抗菌肽的固相合成,分离纯化与构效关系的研究

应用手工固相ＤＣＣ／ＨＯＢｔ法合成ＣｅｃｒｏｐｉｎＢ、Ｓｈｉｖａｌ１、ＡＢＰ３、ＷＨＤ４种抗菌肽,各抗菌肽的Ｃ－端均为酰胺化,最终用ＨＰＬＣ分离纯化,这４种肽对大肠杆菌Ｋ１２Ｄ３１,野生型大肠杆菌,产气杆菌及４种植物病原菌青枯菌,临床致病理大肠杆菌,伤寒杆菌,硝酸盐杆菌均有明显的杀伤或抑制作用,对白血病细胞Ｋ５６０,肺癌细胞Ａ５４９也有杀伤作用,其中尤以ＷＨＤ杀伤作用最为明显,并用对其它３种肽不能     

产气肠杆菌α—乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆和表达及影响重组酶活性？…

用ＰＣＲ方法从产气肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）中克隆出０．９ｋｂ的ＤＮＡ片段,经ＤＮＡ测序证明是α－乙酰乳酸脱羧酶（α－ａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅ ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ,α－ＡＬＤＣ）基因。将α－ＡＬＤＣ基因重组到质粒,ｐＢＶ２２０后,转化大肠杆菌,经筛选获得的高效表达的重组子菌株。     

家蚕BmN细胞的微载体培养及HBeAg的高效表达

选择微载体Ｃｙｔｏｄｅｘ３对家蚕ＢｍＮ（从ＳｉｌｋｗｏｒｍＢｏｍｂｙｘｍｏｒｉ获得的细胞系）细胞进行高密度培养,并获得成功。观察了家蚕ＢｍＮ细胞在微载体Ｃｙｔｏｄｅｘ３上的贴壁分布,研究了不同接种浓度与微载体浓度时细胞的生长情况,并筛选出最佳的技术参数。在１０００ｍＬ滚瓶中用微载体Ｇｙｔｏｄｅｘ３培养家蚕细胞,在合适的培养条件下（细胞接种浓度３．６×１０５细胞／ｍＬ、微载体浓度５ｇ／Ｌ）,５ｄ后,细胞的终密度达到２．８×１０６细胞／ｍＬ,细胞增长指数为７．９。在细胞指数生长期（传代后４８～６０ｈ）用载有ＨＢｅＡｇ基因的重组病毒（ｒＢｍＨＢｅ）接种（感染量为０．４ＰＦＵ／细胞）,５ｄ后,培养上清中ＨＢｅＡｇ滴度为１∶９．６×１０４,是用方瓶静止培养的家蚕细胞表达量的３倍。     

利用转基因生物技术防御水稻东格鲁病毒

《ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｒｅｅｄｉｎｇ》１９９９年５卷２期１７７～１８５页报道：美国蒙大拿州立大学植物学与土壤和环境科学系的科学家Ｓｉｒａｍａｎｉ等利用粒子轰击法将水稻东格鲁球状病毒（ＲＴＳＶ）的衣壳蛋白（ＣＰ）基因ＣＰ１、ＣＰ２和ＣＰ３个别或共同引入籼稻和／或粳稻细胞。再通过ＲＴＳＶ的天然传播媒价二点黑尾叶蝉将ＲＴＳＶ接种于原始转化体的自交后代植株。ＲＮＡ印迹分析表明,在含有目标基因的１９个选育转基因水稻株系中的１６个株系及其Ｒ１、Ｒ２和／或Ｒ３后代中积累了嵌后ＣＰ基因的转录本。还发现,个别或共…     

五种栎属植物订正

五种栎属植物订正周浙昆（中国科学院昆明植物研究所，昆明６５０２０４）ＮｏｔｅｓｏｎＦｉｖｅＱｕｅｒｃｕｓｆｒｏｍＣｈｉｎａＺＨＯＵＺｈｅ－Ｋｕｎ（ＫｕｎｍｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ，ＴｈｅＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ...     

应用典汇聚地应分析探讨长白山金发藓科植物的生态位分化

应用对应分析（Ｃａｎｏｎｉｃａｌ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ,ＣＣＡ）对长白山主要生态系统３０个样点中的１３种金发藓科植物分布与环境因子间的关系进行了研究。发现在长白山地区,金发藓科植物在拔同度、土壤含砂量、含水量、酸度、光照条件等资源维上存在明显的生态分化现象。１３种金发藓科植物中,球蒴金发藓（Ｐｏｌｙｔｒｉｃｈｕｍ ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃｉｕｍ（Ｂｅｓｃｈ．）Ｃ．Ｍｕｌｌ、     

植物细胞质膜氧化还原系统

植物细胞质膜氧化还原系统陈珈（北京农业大学生物学院。北京１０００９４）ＲＥＤＯＸＳＹＳＴＥＭＩＮＴＨＥＰＬＡＳＭＡＭＥＭＢＲＡＮＥＯＦＰＬＡＮＴＣＥＬＬ￥ＣｈｅｎＪｉａ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａ！Ｓｃｉｅｎｃｅｓ,ＢｅｉｊｉｎｇＡｇｒｉｃ...     

生物固氮作用机理

生物固氮作用机理李佳格徐继（中国科学院植物研究所,北京１０００９３）ＭＥＣＨＡＮＩＳＭＯＦＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬＮＩＴＲＯＧＥＮＦＩＸＡＴＩＯＮＬｉＪｉａ－ｇｅＸｕＪｉ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ,ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ...     

雪花莲外源凝集素基因转化番茄

将含有雪花莲外源凝集素基因（ＧＮＡ）的质粒ｐＲＳＳＧＮＡ１通过冻融法转化到根癌土壤杆菌９Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）菌株ＬＢＡ４４０４中。采用叶盘法转化番茄（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ Ｍｉｌｌ．）栽培品种“Ｃ８”、“Ａ３９”和“Ａ５３”,获得了含ＧＮＡ基因的４３株转化植物株。通过卡那霉素抗性鉴定、ＮＰＴⅡ基     

黄瓜花叶病毒的株系鉴定研究进展

黄瓜花叶病毒的株系鉴定研究进展李华平,胡晋生,范怀忠（华南农业大学植保系,广州５１０６４２）（夏威夷大学植病系,美国夏威夷９６８２２）关键词黄瓜花叶病毒,株系种类,株系鉴定ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＣｕｃｕｍｂｅｒＭｏｓａｉ...     

拟南芥基因转移新方法—真空渗入法的研究

以拟南芥生态型Ｌａｎｄｓｂｅｎｇｅｒｅｃｔａ为试材,在含有所构建的ＣａＭＶＢａｒｉ－１株系基因ＶＩ的质粒（ＰＪ０５３０∷Ｂａｒｉ－１ＧＶＩ）的根癌农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）菌种ＧＶ３１０１的介导下,研究了基因转移的新方法－真空渗入法。