人肝癌细胞株QGY—7703的p53基因及其表达研究

本文利用等位基因分析,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ,ＲＴ－ＣＰＲ／序列分析,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹,免疫组织化学,Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹,免疫沉淀等方法对人肝癌细胞株ＱＧＹ－７７０３的Ｐ５３基因背景进行了研究,发现１７号染色体短臂可能存在等位基因缺失,在Ｐ５３基因的编码序列上没有发现任何突变,但发现其ｍＲＮＡ和蛋白表达水平很低,表明在ＱＧＹ－７７０３细胞中Ｐ５３基因的低水平表达可能同细胞的恶性程度有关。     

中国人群中微卫星位点DXYS156的多态研究

以中国２个汉族群体和８个少数民族群体的Ｓ２０名个体为研究,采用ＰＣＲ扩增后案丙烯酰胺凝胶电泳分离的方法,分析了Ｙ染色体上ＤＸＹＳ１５６Ｙ和Ｘ染色体上ＸＹＳ１５６Ｘ这两个微卫星位点的遗传多态性。结果表明,在所研究的１０个中国人群中,共观察到１０个不同长度片段的等位基因,在Ｘ染色体上的５个闰基因是：１３０ｂｐ、１３５ｂｐ、１４０ｂｐ、１４５ｂｐ、１５０ｂｐ,在Ｙ染色体上的五个等位基因晃：１６０ｂｐ、１     

哺乳动物性腺分化的分子子基础

哺乳动物性腺分化的分子子基础宋平,胡珈瑞（武汉大学生命科学院,武汉４３００７２）１性别决定和分化哺乳动物性别决定和分化始于建立染色体性别时卵细胞受精的那一瞬间。有一条正常Ｙ染色体的哺乳动物为雄性,缺少Ｙ染色体的则为雌性;Ｙ染色体上含有ＳＲＹ（Ｓｅｘｄ...     

中国无精症、严重寡精症患者的染色体异常和Y染色体微缺失

染色体异常和Y染色体微缺失被认为是两个白种人群中常见的生精障碍相关遗传因素。为了解中国无精症、严重寡精症患者中的染色体异常和Y染色体微缺失,运用染色体G显带技术,在358个原发无精症（256人）和严重寡精症（102人）不育患者中进行染色体核型分析;同时运用多重PCR技术,在核型正常的患者和100个正常生育男性中,对Y染色体AZF区微缺失进行筛查。在358个患者中,39人（10．9％）发现有染色体异常,Klinefelter（47,XYY）最为常见。无精症患者性染色体异常频率明显高于严重寡精症患者（12．1％VS1％）。在319个核型正常的患者中,46（14．4％）发现有AZF区微缺失,无精症和寡精症患者中Y染色体微缺失频率分别为15％和13．1％,AZFc区的微缺失最为常见,AZFa区的微缺失只见于无精症患者,正常生育男性中未发现AZF区的微缺失。结果显示,在中国无精症、严重寡精症患者中,大约25％的患者有染色体异常或Y染色体AZF区微缺失,提示这两种遗传异常是中国人群生精障碍的重要相关遗传病因,有必要在男性不育的诊断以及利用细胞浆内精子注射技术进行辅助生育时,对患者的这些遗传异常进行筛查。     

人乳头瘤病毒16型长控制区上YY1结合位点的破坏可增强病毒诱导细胞永生化能力

细胞转录调节因子 Ｙ Ｙ１ 可抑制人乳头瘤病毒１６ 型（ Ｈ Ｐ Ｖ １６） 癌基因启动子 Ｐ９７ 的活性, Ｙ Ｙ１ 位点的突变和缺失不仅可诱导 Ｐ９７ 活性增强而且可在全基因组内增强 Ｅ６ 癌基因转录,同时使病毒对啮齿类动物纤维细胞的转化能力增强。为了观测人乳头瘤病毒１６ 型长控制区（ Ｈ Ｐ Ｖ１６ Ｌ Ｃ Ｒ） 序列上 Ｙ Ｙ１ 蛋白特异性结合位点破坏在完整基因组范围内对人原代包皮角源细胞永生化能力的影响,将 Ｈ Ｐ Ｖ １６ Ｙ Ｙ１ 位点突变株和野毒株转染至人原代包皮角源细胞。筛选结果表明,突变株可诱导形成永生化细胞,永生化能力明显高于野毒株。对４ 株永生化细胞系 Ｄ Ｎ Ａ检测发现,均含有呈整合状态的 Ｈ Ｐ Ｖ １６ Ｄ Ｎ Ａ,其中３ 株的 Ｅ１／ Ｅ２ 区域有缺失。 Ｒ Ｎ Ａ 检测显示,４株细胞内均有 Ｅ６／ Ｅ７ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的转录。这表明, Ｈ Ｐ Ｖ １６ Ｌ Ｃ Ｒ 上 Ｙ Ｙ１ 蛋白特异性结合位点的破坏,可在完整基因组范围内增强病毒使人原代包皮角源细胞永生化的能力。     

应用染色体涂染法建立人和黑叶猴（Semnopithecus francoisi）的染？…

应用荧光原位杂交技术中的染色体涂染法,以生物素标记的除Ｙ染色体外的人全部整务染色ＤＮＡ特异性探针与黑叶猴的中期分裂相杂交,建立了人与黑叶猴之间的染色体同源性。除人的１,２,６,１６和１９号染色体特异探针分别与黑叶猴的２条非同源的染色体杂交外,其余人染色体特异探针与黑叶猴的１条染色体杂交,其中有两对人染色体特异探针分别杂交同一条黑叶猴染色体。     

Y染色质

Ｙ染色质的发现是萤光染色技术发明的结果,Ｙ染色质作为Ｙ染色体长臂的一部分,在人类男性各种间期细胞代表Ｙ染色体。Ｙ染色质观察在临床性别鉴定,Ｙ染色体数量异常诊断和遗传优生方面得到广泛的应用。     

利用染色体涂染方法建立人和白眉长臂猿的比较染色体图谱

除人Ｙ染色体外,本文采用生物素标记的人全部整条染色体特异探针与白眉长臂猿有丝分裂中期分裂相进行染色体原位杂交即染色体涂染法以研究人和白眉长臂猿染色体之间的同源性。在白眉长臂猿１８对常染色体上检测出了与人２２对常染色体同源的５９对染色体片段,确定了人和白眉长臂猿之间的精度较高的染色体连锁群。结果表明：自人与白眉长臂猿的祖长分歧以来,大量的染色体间重排（至少发生了３９次易位）和染色体内的重排导致了二者     

小鼠富集着丝粒DNA在小鼠减数分裂粗线期染色体上的原位杂交

本工作用Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８及着丝粒特异抗体间接免疫荧光法显示的小鼠粗线期染色体主缢痕区,与以小鼠富集着丝粒ＤＮＡ为探针在粗线期染色体上的原位杂交主缢痕区作了比较。发现ＳＦＡ ＤＮＡ探针不仅杂交于全部常染色体联会复合体上的着线粒区,并且杂交于着丝粒周围的异染色质区;而且,也杂交于Ｘ,Ｙ染色体的着丝粒区。由此结论：此富集ＳＦＡ ＤＮＡ中含有全套常染色体及Ｘ,Ｙ染色体的ＳＦＡ ＤＮＡ。     

人基因组百万碱基级巨型YAC的构建

人基因组百万碱基级巨型ＹＡＣ的构建戴长虹,柴建华（复旦大学遗传学研究所,上海２００４３３）关键词人基因组;酵母人工染色体（ＹＡＣ）;百万碱基;巨型ＹＡＣ人类的全部遗传信息包含在３ｘ１０＇核着酸对（ｈｐ）中,共编码５００００～１０００００个基因。人类基...     

YAC克隆的筛选及鉴定分析技术

人工酵母染色体（ＹＡＣ）技术是人类基因组分极及疾病相关基因的分离、克隆中的关键技术。在基因组ＹＡＣ文库基础上特定目的基因的分离克隆涉及ＹＡＣ克隆的筛选,嵌合体、缺失体和共转染克隆的检测与处理,插入片段的分离及及其结构特征的分析,亚克隆的快速构建等等。近年来,有关技术取得了重要进展,已趋于成熟,并正得到了广泛应用。     

女性高寿探因

据联合国人口年鉴近年的统计资料表明,女性平均寿命比男性长且女性寿星多。如苏联、美国、法国、英国、芬兰、匈牙利等女子寿命超过男子7-10岁;在我国女子平均寿命也高于男子4岁。那么,女子本身具有哪些因素促其高寿呢?本文拟作初浅的分析: 一、染色体是决定寿命的重要因素根据寿命与性别的分析,人的YO个体不能成活,以及跟人同属于XY型性别决定的果蝇中,YY个体和YO个体都是致死的,而人的XO个体、果蝇的XO个体以及蝗虫的XO个体都是成活等事实,寿命基因可能在X染色体上。众所周知,人的性状是受染色体控制的。男女的体细胞中,除含有相同的22对常     

YAC克隆的筛选及鉴定分析技术

人工酵母染色体（ＹＡＣ）技术是人类基因组分析及疾病相关基因的分离、克隆中的关键技术。在基因组ＹＡＣ文库基础上特定目的基因的分离克隆涉及ＹＡＣ克隆的筛选,嵌合体、缺失体和共转染克隆的检测与处理,插入片段的分离及其结构特征的分析,亚克隆的快速构建等等。近年来,有关技术取得了重要进展,已趋于成熟,并正得到广泛应用 。     

白颊长臂猿染色体的研究

本文对我国云南南部的白须长臂猿（Ｈ．ｌｅｕｃｏｇｅｎｙｓ）染色体的Ｇ带、Ｃ带、晚复制带及Ａｇ－ＮＯＲｓ进行了较为详细的研究。它的２ｎ＝５２,核型公式为４４（Ｍ或ＳＭ）＋６（Ａ）,ＸＹ（Ｍ,Ａ）。Ｃ带表明一些染色体着丝点Ｃ带弱化;有的染色体出现插入的和端位的Ｃ带;Ｘ染色体两臂有端位Ｃ带,Ｙ染色体是Ｃ带阳性和晚复制的。Ａｇ－ＮＯＲｓ的数目,雌体有４个,雄体有５个,Ｙ染色体上具ＮＯＲ。本文对白颊长臂猿与其它长臂猿间的亲缘关系、核型进化的可能途径进行了讨论。     

小鼠Sry基因和Sox基因的克隆分离与鉴定

为了深入探讨性分化分子机制,构建了小鼠基因库以ＳＲＹ探针筛选,分离到了两组阳性克隆,一组含ＥｃｏＲⅠ／３．５ｋｂ,此片段中载有小鼠Ｙ染色体上的Ｓｒｙ基因,另一组含ＥｃｏＲⅠ／３．０ｋｂ或ＳａｌⅠ／３．０ｋｂ,此片段有小鼠Ｙ染色体之外的Ｓｏｘ基因。     

小鼠Sry基因和Sox基因的克隆分离与鉴定

为了深入探讨性分化分子机制,构建了小鼠基因文库以ＳＲＹ探针筛选,分离到了两组阳性克隆,一组含ＥｃｏＲⅠ／３．５ｋｂ,此片段中载有小鼠Ｙ染色体上的Ｓｒｙ基因．另一组含ＥｃｏＲⅠ／３．０ｋｂ或ＳａｌⅠ／３．０ｋｂ,此片段有小鼠Ｙ染色体之外的Ｓｏｘ基因     

人X染色体35cMYAC重叠群的构建及物理图谱分析

人Ｘ染色体Ｘｐ１１．２－ｐ２１．３区域具有重要的基础遗传学和医学遗传学意义。为了对该区段编码的基因,尤其是疾病基因进行克隆与变异研究,对该区段染色体ＤＮＡ进行了ＹＡＣ克隆并将其依染色体排序,采用了一系列ＤＮＡ位标,尤其是多肽性微卫星序列位标筛选了３个ＹＡＣ方库,得到了１５１个ＹＡＣ克隆,对这些ＹＡＣ克隆进行了物理图谱分析,构建了这一区域的一系列ＹＡＣ重叠群,这些ＹＡＣ重叠群的总跨度约３５摩,基本覆     

一例性反转畸形SRY基因片段的扩增,克隆和核苷酸序列分析

在哺乳动物中,位于Ｙ染色体上的指导雄性性别分化的基因被命名为睾丸决定因子（Ｔｅｓｔｉｓ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ,ＴＤＦ）．１９９０年６月分离获得的ＳＲＹ基因（Ｓｅｘ－ｄｅｔｅｒ－ｍｉｎｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｙ）被认为是ＴＤＦ基因最好的侯选者「１－４」,ＳＲＹ基因为单拷贝,位于Ｙ染色体短臂末端１Ａ１Ａ区,靠近假常染色体配对区（ＰＡＰＲ）的交界处,其部分顺序编码８０个保守性     

人Xp11.2区4.3MbYAC重叠群：大尺度限制图与CpG岛分析

人Ｘｐ１１．２区域具有重要的医学遗传学和基础遗传学价值,它包含很多遗传疾病基因,且至少包含一个逃避Ｘ染色体失活的位点,非常规的基化多态也有发现。我们利用这一区域已知的一系列ＤＮＡ位标,从我们构建的ＹＡＣ库中筛选出一系列ＹＡＣ克隆。     

中国野生小鼠来源1号染色体替换系缺失突变的发掘及功能注释

目的基于野生小家鼠来源1号染色体替换系群体(population of specific chromosome 1 substitution strains,PCSSs)中18个品系的全基因组重测序结果,鉴定1号染色体上的缺失突变并对其进行功能注释。方法采用Illumina二代测序平台获取18个品系的全基因组序列信息,通过Speed Seq软件鉴定缺失突变,进一步利用Snp Eff软件完成功能注释。结果在18个品系的1号染色体上共检测到13 803个缺失突变。缺失长度从51 bp到70 kb不等,其中长度500 bp的缺失突变约占总数的50%。多数缺失突变位于内含子区(50.361%)和基因间隔区(28.745%)。发现31个蛋白编码基因含有功能性缺失,其中有3个基因和人类疾病相关,7个基因参与了11条KEGG通路。结论 PCSSs的1号染色体上含有丰富的缺失突变,是在研究复杂性状的重要遗传标记。